Produk fermentasi kedelai dan susu oleh kultur YC-381 aau kombinasi dengan 2
probiotik (Bifidobacterium animalis subsp. Lactis BB 12 dan Bifidobacterium bifidum
CCDM 94) disiapkan. Pertumbuhan bakteri, jumlah asam laktat, asam asetat, asetal
dehid dihitung setelah 16 jam fermentasi pada suhu 37 0C. pertumbuhan konsentrasi
Isoflavon juga dipantau pada produk kedelai. Pertumbuhan Streptococcus thermophilus
dan bifidobateria hampir sama dikedua media sedangkan lactobacillus delbruckii
menunjukkan pertumbuhan yang lebih baik pada susu. keasaman titratable dan
konsentrasi asam secara konsisten lebih tinggi dalam susu sapi dibandingkan susu
kedelai pada akhir fermentasi. Bifidobacteria, dibandingkan dengan kultur yoghurt,
hanya mampu mengasamkan media untuk setengah nilai saja. Perbandingan strain
Bifidobacteria, Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB 12 menunjukkan kemampuan
yang lebih baik dalam mengasamkan susu. Strain Bifidobacterium bifidum CCDM 94
mampu melepaskan 6.90 mg / 100 ml aglikon isoflavon dalam susu kedelai.
Kata kunci: asetaldehida; asam asetat; isoflavon; asam laktat
pertumbuhan dari budaya yoghurt dan dua strain yang berbeda dari bifidobacteria dalam
susu sapi dan susu kedelai, untuk mengevaluasi produksi asam lemak pendek dan
asetaldehida, dan untuk mengkonfirmasi biotransformation glikosida isoflavon untuk
aglycons selama proses fermentasi.
37 C pada M17 agar (Oxoid, Hampshire, UK), pH 6,8 dan jumlah Bifidobacterium sp
p. setelah 4 hari pada suhu 37 C dalam anaerobik dengan pembentuk AnaeroGen
anaerobik pada MRS agar (baik Oxoid, Hampshire, Inggris) dengan 0,5 g / l l-sistein
(Merck, Darmstadt, Jerman) dan 2 mg / l dicloxacilin (Sigma, St Louis, USA), pH 6,8.
analisis fisika-kimia. Total padatan ditentukan oleh Halogen Moisture Analyzer HR 73
(Mettler Toledo, Greifensee, Swiss). Kandungan lemak diukur menurut EN ISO 1211:
2010 (Milk - Penentuan kadar lemak - Metode Gravimetric (metode Referensi)
Kandungan total nitrogen dievaluasi menggunakan analisa Kjeltec (Kjeltec 8400
Analyzer; FOSS Analytical AB, Hgans, Swedia); kandungan protein dihitung sebagai
nitrogen total dikalikan dengan 6,38 untuk susu sapi dan 5.80 untuk susu kedelai.
konten Ash ditentukan dengan sampel insinerasi dalam tungku Ht40P (Lac, Rajhrad,
Republik Ceko) pada 525 C.
pH dan keasaman titrable. Nilai-nilai pH ditentukan dengan pH meter (Jenway,
Staffordshir UK) dilengkapi dengan elektroda gabungan. Keasaman titratable dievaluasi
dengan titrasi dari 25 g produk dengan 0,1 mol larutan NaOH / l untuk pH 8,3 dengan
indikator phenolphthalein dan dinyatakan sebagai mmol H + / kg. Semua eksperimen
diulang sebanyak dua kali.
Pengukuran produk metabolik. enzim (Megazyme, Bray, Co, Wicklow, Irlandia) yang
digunakan untuk penentuan kandungan isomer asam laktat (dalam uji asam l-laktat),
asam asetat dan asetaldehida sesuai dengan instruksi produsen. Semua eksperimen
diulang sebanyak dua kali.
Ekstraksi isoflavon dari susu kedelai. Susu kedelai atau produk fermentasi kedelai (1
ml) dengan chrysin 10 ng / ml (Sigma-Aldrich, Seelze, Jerman) sebagai standar
ekstraksi dilakukan dua kali dengan 6 ml etil asetat. larutan disentrifugasi pada 11 000
RCF (Rotina 35 R; Hettich Zentrifugen, Tuttlingen, Jerman) selama 5 menit dan
kemudian supernatan dikeringkan dalam evaporator (BUCHI Rotavapor R-114; Bchi,
Flawil, Swiss) di bawah nitrogen. Pelet dikeringkan disuspensi dalam 10 ml methanol
50% dan kemudian diencerkan 10 kali dengan methanol 50%. Ekstrak disaring melalui
mikrofilter dan dipindahkan ke botol untuk analisis UPLC-MS / MS.
analisis HPLC isoflavon. Pemisahan dilakukan menggunakan ACQUITY UltraKinerja sistem LC (UPLC) (Waters, Milford, USA) dengan kolom ACQUITY UPLC
BEH C18 yang terhubung ke spektrometer massa 5500 QTRAP tandem (AB SCIEX,
Toronto, Kanada), dilengkapi dengan sumber ion TurboIonTM electrospray (ESI) yang
beroperasi pada katoda positif dan negatif. Larutan asam asetat dan metanol (0,1% )
digunakan sebagai fase gerak dengan gradient elusi; temperaturnya adalah 35C.
Daidzein, glycitein, dan genistein (Sigma-Aldrich, Seelze, Jerman). Metanol digunakan
untuk mengidentifikasi produk di Buchi (Flawil, Swiss) sebagai sampel yang diuji.
Konsentrasi isoflavon dihitung dengan interpolasi dari kurva kalibrasi yang disiapkan
oleh fungsi rasio area standar dan dalam daerah standar (chrysin) dan rasio isoflavon
dan daerah standar batin dalam sampel. Semua eksperimen diulang dua kali.
jumlah dari 107 CFU / ml dalam susu dan 10 6 CFU / ml di susu kedelai. Perbedaannya
dapat dijelaskan oleh ketidakmampuan L. delbrueckii subsp. bulgaricus dalam
memanfaatkan sukrosa, gula utama dalam susu kedelai (Pinthong et al.1980). Hasil
yang sama ditemukan oleh Donkor et al. (2007) yang dikonfirmasi pertumbuhan yang
lebih baik dari S. thermophilus St 1342 dibandingkan L. delbrueckii subsp.bulgaricus
Lb 1466 di susu kedelai. jumlah bifidobacteria yang cukup dalam produk akhir adalah
hal yang penting dalam memastikan sifat probiotik. Pada kedua media, jumlah
bifidobacteria mencapai lebih dari 107 CFU / ml dengan tidak ada perbedaan antara
strain yang digunakan sebelumnya. Beberapa faktor yang mempengaruhi pertumbuhan
dan kelangsungan hidup Bifidobacterium spp. yang dicampur dengan yoghurt.
Keasaman, pH dan konsentrasi hydrogen peroksida telah diketahui memiliki efek pada
pembuatan dan penyimpanan yogurt. Di sisi lain menurut Farnworth (2007),
menemukan bahwa kehadiran bakteri probiotik tidak mempengaruhi pertumbuhan strain
yoghurt dalam susu kedelai dan susu sapi.
Kemampuan mengasamkan yang diperoleh dari perbedaan keasaman aktif dan
keasaman titratble yang dihitung setelah inokulasi dan pada hasil akhir dari fermentasi
Tabel 1. Jumlah sel (log CFU / ml) dalam susu sapi dan susu kedelai yang difermentasi
dengan kultur yoghurt YC-381 (YC-381), B. animalis subsp. lactis BB 12 (BB
12), B. bifidum CCDM 94 (CCDM 94), dan kultur campuran setelah 16 jam
fermentasi pada 37C
Kultur
YC-381
Spesies
S. thermophillus
L. delbrueckii subs. Bulgaricus
Susu sapi
8.20 0,12
7,45 0,18
Susu kedelai
8,08 0,11
6,46 0,57
YC-381 + BB 12
S. thermophillus
L. delbrueckii subs. Bulgaricus
B. animalis subs. Lactis
8,40 0,45
6,97 0,52
8,36 0,42
8,15 0,40
6,38 0,36
8,11 0,18
YC-381 + CCDM 94
S. thermophillus
L. delbrueckii subs. Bulgaricus
B. bifidum
7.28 0,11
7,54 0,19
8,15 0,21
8,15 0,12
6,73 0,29
7,00 0,32
BB 12
CCDM 94
8,34 0,43
8,15 0,41
7,08 0,19
7,08 0,64
Tabel 2. Perubahan pH dan keasaman titratable (mmol H + / kg) dari susu sapi
dan
Susu kedelai
pH 16*
TA 16*
Kultur
YC-381
2,25 0,06
74,0 0,8
2,20 0,14
39,0 0,9
YC-381 + BB 12
2,14 0,15
66,1 0,6
2,25 0,17
46,8 0,7
YC-381 + CCDM 94
2,25 0,10
71,8 0,9
2,27 0,16
46,3 0,7
BB 12
1,60 0,02
38,7 0,4
1,52 0,09
22,8 0,6
CCDM 94
1,05 0,10
17,0 1,2
1,21 0,17
17,5 1,0
* perbedaan pH dan titratable keasaman (TA) antara 0 dan 16 jam fermentasi pada 37 C
selama 16 jam pada suhu 37C dari semua pengukuran dirangkum dalam Tabel 2. Selain
dari bifidobacteria dengan budaya yoghurt lakukan tidak mempengaruhi pH maupun
media tapi sedikit meningkat keasaman titratable dari produk susu kedelai yang
difermentasi. Perbedaan pH antara susu sapi fermentasi dan susu kedelai tidak
signifikan (2,2-2,3 dalam kedua media). Diasumsikan bahwa susu sapi adalah media
lebih cocok untuk produksi asam. Hal ini dapat dipengaruhi oleh fakta bahwa pemula
budaya yang disesuaikan dengan susu sapi. Bifidobacteria hanya mampu mengasamkan
media dengan setengah nilai dengan budaya yoghurt.
Asetaldehida dan asetat dan asam laktat signifikan berkontribusi terhadap kualitas
produk organoleptik. Isi zat ini dalam susu sapi dan susu kedelai yang difermentasi oleh
semua kombinasi dari kultur yang diuji ditunjukkan pada Tabel 3. D (-) - Asam laktat
dimetabolisme ke tingkat lebih kecil dari l (+) - asam laktat dalam tubuh manusia dan
karena itu menyebabkan asidosis. Bifidobacteria tidak menghasilkan d (-) - asam laktat
baik media. Juga, Tsangalis dan Shah (2004) berusaha untuk mengukur d (-) asam laktat
dalam susu kedelai,, mereka menemukan, namun yang tak satu pun dari strain diselidiki
(Bifidobacterium pseudolongum CSCC 1944, B. Longum CSCC 5550 dan CSCC 1941)
diproduksi isomer ini selama fermentasi. Ishibashi dan Shimamura (1993) menyatakan
bahwa aspek unik dari bifidobacteria adalah produksi mereka dari L (+) bentuk saja.
Asam asetat bertanggung jawab untuk rasa cuka yang tidak diinginkan dalam produk.
Tabel 3. Konsentrasi isomer asam laktat, asam asetat, dan asetaldehida dalam susu sapi
dan susu kedelai yang difermentasi oleh kultur yoghurt YC-381 (YC-381), B.
animalis subsp. lactis BB 12 (BB 12), B. bifidum CCDM 94 (CCDM 94),
dan kultur campuran setelah 16 jam fermentasi pada 37 C
Culture
L(+)-Asam laktat
D(-) Asam
laktat
(g/100 g)
Aasam asetat
Asetaldehida
(mg/kg)
Cow milk
YC-381
YC-381 + BB12
0.43 0.01
0.41 0.03
0.25 0.00
0.18 0.01
N
0.15 0.03
5.63 0.36
5.25 0.44
YC-381 + CCDM 94
0.39 0.01
0.12 0.01
0,08 0,02
0.21 0.01
N
N
0.22 0.00
0.11 0.00
0.12 0.01
5.96 0.20
0.44 0.13
1.94 0.26
YC-381
0.29 0.01
0.11 0.01
traces
3.84 0.30
YC-381 + BB12
0.21 0.01
0.15 0.01
0.03 0.01
4.36 0.39
YC-381 + CCDM 94
0.25 0.01
0.01 0.00
0.12 0.00
6.25 0.33
BB 12
0.08 0.01
0.05 0.00
0.37 0.11
CCDM 94
0.12 0.01
0.09 0.02
3.59 0.04
Soy Milk
N - tidak terdeteksi
Kedua bifidobacteria menghasilkan sejumlah asam asetat. Secara umum, produksi asam
organik (jumlah laktat dan asam asetat) oleh semua organisme dalam susu sapi lebih
tinggi dibandingkan di susu kedelai. Donkor et al. (2007) mengamati bahwa organisme
yang dipilih (Bifidobacterium lactis B94 dan B. Longum Bl 536, L. Delbrueckii subsp.
isoflavononoid
yang merupakan
fermentasi. Dalam susu kedelai yang bukan fermentasi mengandung aglycone bioaktif
8-10 % isoflavon(Tsangalis et al. 2003). Berdasarkan penelitian ding dan shah (2010)
kandungan susu kedelai yang terbuat dari protein kedelai terdapat kandungan aglikon
0,402mg /100 ml aglikon dalam mengisolasi sementara.Chen et al. (2010) dan Rekha
dan Vijayalakshmi (2010) melakukan penelitian dimana susu kedelai yang berasal dari
kedelai terdeteksi 4,85 mg / 100 ml dan 2,91 mg / 100 ml masing- masing membentuk
aglycone.pada penelitian ini sampel yang diuji total jumlah isoflovon aglikon adalah
1,59 0,06 mg / 100 ml di nonfermented susu kedelai. Pada strain B.bifidium CCDM
94 mampu melepaskan aglycons daidzein dan genistein secara bebas, untuk
meningkatkan kosentrasi dari isoflovon aglikon maka didilakukan pada media kasar
dengan cara hidrolisis dari dari -glikosida oleh B. animalis subsp. lactis BB 12. Dari
penelitian yang dilakukan
aglycons yang dilepaskan baik diamati setelah fermentasi dengan kultur yoghurt.
Konversi glikosida ke aglikon berbeda dalam data yang dipublikasikan 0,9-13,9 mg /
100 ml di susu kedelai yang difermentasi oleh kultur probiotik bifidobacteria (Pyo et al.
Tabel 4. Konsentrasi isoflavone aglikon (mg / 100 ml) di susu kedelai dan susu kedelai
yang difermentasi dengan kultur yoghurt YC-381 (YC-381), B. animalis subsp.
lactis BB 12 (BB 12), B. bifidum CCDM 94 (CCDM 94), dan campuran setelah
16 jam fermentasi pada 37 C
Daidzein
Genistein
Glycitein
Rata - rata
Soymilk
0,61 0,02
0,95 0,04
0,03 0,00
1,59 0,06
YC-381
0,50 0,01
0,80 0,02
0,03 0,01
1,32 0,04
YC-381 + BB12
0,63 0,14
1,08 0,25
0,04 0,01
1,74 0,40
YC-381 + CCDM 94
2,23 0,17
4,02 0,23
0,09 0,01
6,33 0,41
BB12
0,69 0,04
1,09 0,15
0,02 0,01
1,80 0,21
CCDM 94
2,56 0,74
4,25 1,73
0,10 0,01
6,90 2,47
KESIMPULAN
Semua
bakteri,
yaitu
kultur
yoghurt
YC-381
dan
probiotik
biakan
https://www.academia.edu/3508688/PENGARUH_WAKTU_SIMPAN_TERHADAP_
KUALITAS_SOYGHURT_DENGAN_PENAMBAHAN_SUSU_BUBUK