PROPOSAL

EFEK APOPTOSIS, SITOTOKSIK DAN

ANTIPROLIFERASI FRAKSI KULIT KAYU MAHONI
(Swietenia mahagony Jacq.) TERHADAP SEL HeLa

Disusun Oleh :
YONA SARI
04112621519011

DOSEN : DR. MUTIARA BUDI AZHAR, SU, M. MED. SC

PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SRIWIJAYA

2015/2016
HALAMAN PENGESAHAN
PENGARUH FRAKSI JINTEN HITAM (Nigella sativa L.)
TERHADAP SITOTOKSIK, APOPTOSIS DAN
ANTIPROLIFERASI PADA SEL HELA
TESIS
Diajukan Sebagai Salah SatuSyarat Untuk Mendapatkan Gelar
Magister Kesehatan Pada Fakultas Kedokteran Universitas Sriwijaya

Oleh
SAGITA DARMA SARI
0411268131007

Palembang,

April 2015

Pembimbing I

Pembimbing II

Dr. Salni, Msi

NIP. 196608231993031002

Dra. Lusia Hayati, MSc

NIP. 19570630032001

Mengetahui
Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sriwijaya

Dr.dr. HM. Zulkarnain M.Med.Sc, PKK

NIP. 19610903 198903 1 002

HALAMAN PERSETUJUAN
Karya tulis ilmiah berupa Tesis dengan judul PENGARUH FRAKSI JINTEN
HITAM (Nigella sativa L.) TERHADAP SITOTOKSIK, APOPTOSIS DAN
PROLIFERASI PADA SEL HELA telah dipertahankan di hadapan tim penguji
seminar Hasil Fakultas Kedokteran/ program Pascasarjan Universitas Sriwijaya
pada tanggal 10 April 2015 dan dinyatakan
Palembang, April 2015
Tim Penguji Karya Tulis Ilmiah Berupa Tesis
Ketua:
1. Dr. Salni, MSi
NIP. 196608231993031002

......................................

Anggota
1. Dra. Lusia Hayati, MSc
NIP. 19570630032001

......................................

2. Dr. dr. H. Mgs. Irsan Saleh,M.Biomed

NIP. 196609291996011001
3. Dr. Arum Setiawan, SSi, MSi
NIP.197211221998031001
4. dr. Triwani, M.Kes
NIP.195403141983032002

......................................
......................................

......................................

Mengetahui,
Dekan Fakultas Kedokteran
Universitas Sriwijaya

Dr.dr. HM. Zulkarnain M.Med.Sc, PKK

NIP. 19610903 198903 1 002

Ketua Program Studi Ilmu Biomedik

Dr. dr. H. Mgs. Irsan Saleh,M.Biomed

NIP. 196609291996011001

HALAMAN PERNYATAAN INTEGRITAS

Yang bertanda tangan dibawah ini:
Nama

: Sagita Darma Sari

NIM

: 0411268131007

Judul

: Pengaruh Fraksi Jinten Hitam (Nigella sativa l.) Terhadap

Sitotoksik, Apoptosis dan Antiproliferasi pada sel HeLa.
Menyatakan bahwa tesis saya merupakan hasil karya sendiri didampingi

tim pembimbing dan bukan hasil penjiplakan/plagiat. Apabila ditemukan unsur

penjiplakan/plagiat dalam tesis ini, maka saya bersedia menerima sanksi
akademis dari Universitas Sriwijaya sesuai aturan yang berlaku.
Demikian, pernyataan ini saya buat dalam keadaan sadar dan tanpa ada
paksaan dari siapapun.

Indralaya, 10 April 2015

Sagita Darma Sari

DAFTAR RIWAYAT HIDUP

Nama

: Sagita Darma Sari

Tempat/ tanggal lahir

: Palembang/ 11 Desember 1990

Agama

: Islam

Alamat

: Jl. Urip sumoharjo No. 2452 RT. 24 RW. 09 2 Ilir

Pendidikan

: SDN 173 Palembang tahun 2002

SMPN 8 Palembang tahun 2005
SMAN 5 Palembang tahun 2008
AKBID Budi Mulia Palembang tahun 2011
DIV Bidan Klinik Poltekkes Kemenkes Yogyakarta
tahun 2013

Kupersembahkan kepada:
bapak yang selalu memberikan
dukungan moral, materiil dan
spiritual. almarhumah ibuku
Saudara-saudaraku yang telah
memberikan dukungan dan
semangat..
Kekasihku yang selalu
mendampingiku dengan penuh
kesabaran dan kasih sayang

........... Allah meninggikan orang-orang yang beriman diantara kamu

dan orang-orang yang diberi ilmu pengetahuan beberapa
derajat.........(QS. Al-Mujadalah, ayat 11

RINGKASAN

PENGARUH FRAKSI JINTEN HITAM (Nigella sativa L.) TERHADAP

SITOTOKSIK, APOPTOSIS DAN ANTIPROLIFERASI PADA SEL HELA,
FAKULTAS KEDOKTERAN, UNIVERSITAS SRIWIJAYA
Tesis, Maret 2015
Sagita Darma Sari; Dibimbing oleh Salni dan Lusia Hayati
The effect fraction of black cumin (Nigella sativa L.) on the cytotoxic, the
apoptosis and the antiproliferation in hela cells, Faculty of Medecine, Sriwijaya
University.
ix, 50 halaman, 24 gambar, 13 tabel, 9 lampiran
RINGKASAN
Penyakit kanker serviks merupakan urutan pertama kanker pada perempuan
diseluruh dunia. Jinten hitam (Nigella sativa L.) merupakan tanaman obat yang
memiliki aktivitas antikanker. Tanaman ini diketahui memiliki bahan aktif
tymoquinon dan alpha hederin yang memiliki aktivitas sebagai sitotoksik,
apoptosis dan antiproliferasi.
Peneletian ini menggunakan sel HeLa sebagai objek dan berbagai konsentrasi
ekstrak dan fraksi dari jinten hitam yang dilakukan secara invitro. Konsentrasi
ekstrak dan fraksi jinten hitam menggunakan konsentrasi 1000; 500; 250; 125;
62,5 g dan konsentrasi cisplatin 200; 100; 50; 25; 12,5; 6,26; 3,125; 1,5; 0,75;
0,39 g. Analisa data menggunakan uji statistik independent sampel t-test dan
Anova dengan spss 16.
Hasil penelitian didapatkan nilai IC50 pada ekstrak etanol 404,29 g, fraksi nheksan 376,13 g, fraksi etil asetat 419,12 g, fraksi etanol air 688 g, cisplatin
20,676 g. Hasil uji t-test p<0,05 yang berarti ada perbedaan yang bermakna
antara konsentrasi bahan uji yang diberikan terhadap viabilitas sel dan hasil uji
Annova p< 0,05 berarti ada perbedaan yang bermakna antar kelompok ekstrak
etanol dan fraksi terhadap nilai IC50. Hasil flowcytometry menunjukkan hasil
ekstrak etanol mengalami sel apoptosis sebesar 4,64%, fraksi n-heksan 2,93%,
fraksi etil asetat 4,17% dan fraksi etanol air 2,99%. Hasil doubling time pada
ekstrak etanol pada jam ke 52, fraksi n-heksan jam ke 21, fraksi etil asetat jam ke
7, fraksi etanol air jam ke 35.
Dapat disimpulkan bahwa fraksi aktif jinten hitam memiliki aktivitas sitotoksik,
dapat menginduksi apoptosis dan berperan sebagai antiproliferasi sel HeLa.
Kata kunci
: Sitotoksi jinten hitam, Apoptosis, Antiproliferasi
Kepustakaan : 60 (1996-2014)

SUMMARY
The Effect Fraction of Black Cumin (Nigella sativa L.) on The Apoptosis and the
Antiproliferation in HeLa Cells, Faculty of Medecine, Sriwijaya University.

SUMMARY

THE EFFECT OF BLACK CUMIN (Nigella sativa L.) ON THE CYTOTOXIC,

THE APOPTOSIS AND THE PROLIFERATION IN HeLa CELLS, MEDICAL
FACULTY OF SRIWIJAYA UNIVERSITY.
Thesis, March 2015
Sagita Darma Sari; Lecture on Guiding by Salni and Lusia Hayati.
Ix, 50 pages 24 images, 13 tables, 9 attachments
SUMMARY
Cervical cancer is the first order of cancer that women had in the wordlwide.
Black cumin (Nigela sativa L.) was medical plants that had anticancer activity.
This plants is know to have active ingredients thymoquinon and alpha hederin to
have activity on the cytotoxic, the apoptosis and the proliferative.
This study using HeLa cells as objects and various concentrations of extracts and
fractions of black cumin as treatment, also cisplatin as a positive control, all
process done in vitro. Concentration of extracts and fractions of black cumin
using concentration 1000; 500; 250; 125; 62,5 g and the concentration of
cisplatin are 200; 100; 50; 25; 12,5; 6,26; 3,125; 1,5; 0,75; 0,39 g. Analysis of
data using statistical test of independent sampel t-test and ANOVA (Analisis of
Variances) using tool SPSS 16.
The results showed that IC50 values in the ethanol extract was 404,29 g, while in
n-hexane fraction was 376,13 g, and 419,12 g of ethyl acetate fraction, the
fraction of ethanol-water 688 g, and in cisplatin 20,676 g. The results of t-test
was p<0,05, which means that there are significant differences between the
concentration of the test substance that given on to cell viability and test result
Annova p value was < 0,05 means that there are significant differences between
the groups of the ethanol extract and fraction against IC50 values. The results
show the results of the ethanol extract flowcytometry undergoes apoptotic cells
by 4,64%, while the fraction n-hexane 2,93%, ethyl acetate fraction 4,17% and of
2,99% through ethanol-water fraction. Result shows doubling time event in the
ethanol extract at the 52nd hour, the fraction of n-hexane at 21st hour, while ethyl
acetate fraction at 7th hour, the fraction of ethanol-water at 35th hour.
It can be concluded that the active fraction of black cumin have cytotoxic activity,
induces apoptosis and antiproliferative for HeLa cells.
Keyword
: Cytotoxycal black cumin, apoptosis, antiproliferating.
Bibliography : 60 (1996-2014)
Tesis, March 2015
Sagita Darma Sari; Mentored by Salni and Lusia Hayati
ix, 50 pages, 24 images, 13 tables, 9 attachments

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas limpahan rahmat
dan hidayah-Nya, sehingga penyusunan usulan tesis dengan judul Pengaruh
Fraksi Jinten Hitam (Nigella sativa L.) terhadap Sitotoksik, Apoptosis dan
Antiproliferasi pada Sel HeLa dapat terselesaikan tepat pada waktunya.
Usulan tesis ini diajukan sebagai kelengakapan penyusunan tesis. Usulan
tesis ini terwujud atas bimbingan, pengarahan serta bantuan dari berbagai pihak,
oleh karena itu pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih kepada :
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Dr. dr. Mgs. Irsan Saleh, M.Biomed, selaku ketua program studi Biomedik
Drs. Joko Marwoto, MS, selaku koordianator BKU
Dr. Salni, MSi, selaku pembimbing satu
Dra. Lusia Hayati, MSc selaku pembimbing dua
Dr. Arum Setiawan, SSi, MSi dan dr. Triwani, MKes selaku penguji
Prof. dr. Supargiono, DTM&H., SU., Ph.D., SpPark selaku supervisor

laboratorium bagian parasitologi UGM

7. Juana, Amd, selaku pendamping teknisi laboratorium bagian parasitologi
UGM.
8. Orangtua dan orang terdekat yang telah memberikan dukungan moral.
9. Teman-teman kelas biologi kedokteran tahun ajaran 2013/2015.
10. Pihak lain yang tidak dapat disebutkan satu per satu.
Penulis menyadari banyak kekurangan yang terdapat dalam penulisan tesis
ini. Oleh karena itu, penulis mengharapkan masukan dari berbagai pihak agar
tercapainya sebuah tulisan ilmiah yang bermanfaat. Akhir kata, penulis mohon
maaf atas segala kesalahan dan kekhilafan, sengaja maupun tidak sengaja baik itu
perkataan dan perbuatan yang kami lakukan selama kami menyelesaikan tesis ini.
Palembang, April 2015
Sagita Darma Sari

DAFTAR ISI
Halaman
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang.....................................................................................
1.2 Rumusan Masalah ...............................................................................
1.3 Tujuan Penelitian ................................................................................
1.4 Manfaat Penelitian ..............................................................................

1
3
4
4

1.5 Kerangka Fikir ....................................................................................

1.6 PremisPremis ....................................................................................
1.7 Hipotesis .............................................................................................

4
5
6

BAB II Tinjauan Pustaka

2.1 Kanker Serviks ....................................................................................
2.2 Temu Putih...........................................................................................
2.3 Sel HeLa .............................................................................................
2.4 Siklus Sel ............................................................................................
2.5 Apoptosis ............................................................................................
2.6 Ekstraksi, Fraksinasi dan Penentuan Golongan Senyawa ..................
2.7 Cisplatin ..............................................................................................

7
8
23
25
31
36
36

BAB III Metode Penelitian

3.1 Desain Penelitian ..............................................................................
3.2 Tempat dan waktu .............................................................................
3.3 Subyek Penelitian .............................................................................
3.4 Alat dan Bahan ..................................................................................
3.5 Cara Kerja .........................................................................................
3.6 Uji sitotoksik dengan MTT ...............................................................
3.7 Uji apoptosis dengan flowcytometry .................................................
3.8 Uji antiproliferasi dengan tehnik doubling time ...............................
3.9 Variabel Penelitian ............................................................................
3.10 Definisi Operasional ........................................................................
3.11 Analisa data ......................................................................................
3.12 Bagan penelitian ..............................................................................

38
38
38
38
40
42
44
45
46
46
46
47

BAB IV Justifikasi Etik

4.1 Landasan Scientific penelitian .........................................................
4.2 Resiko Dan Beban ............................................................................
4.3 Analisis dan Kelayakan Etik ............................................................
4,4 Kesimpulan..........................................................................................

48
49
49
50

DAFTAR PUSTAKA

DAFTAR GAMBAR
Gambar
2.1
2.2
2.3
2.4
2.5

Halaman

HPV (Human Papiloma Virus) ........................................................

Temu Putih ......................................................................................
struktur curcumin.............................................................................
biosintesiscurcumin dari fenialanin .................................................
mekanisme anti kanker curcumin.....................................................

7
8
17
18
19

2.6
2.7
2.8
2.9
2.10
2.11
2.12

Morfologi se hela ............................................................................

Siklus sel .........................................................................................
Ilustrasi Siklus sel ...........................................................................
Onkologi dan DNA damage agen mengaktifkan p53.......................
Regulasi P53.....................................................................................
Perbedaan Nekrosis dan Apoptosis .................................................
Struktur Kimia Cisplatin .................................................................

25
27
28
30
31
32
37

DAFTAR TABEL
Tabel
2.1
2.2
4.1
4.2
4.3
4.4

Halaman
Komposis senyawa kimia biji jinten hitam ..........................................
Komposisi asam lemak minyak jinten hitam .......................................
hasil ekstrak dan fraksi jinten hitam ....................................................
Hasil Uji KLT fraksi Jinten hitam ........................................................
Hasil absorbansi dan hasil persen viabilitas sel HeLa .........................
Hasil flowcytometry .............................................................................

8
9
37
38
39
43

4.5
4.6
4.7
4.8
4.9

Hasil doubling time ..............................................................................

Hasil uji normalitas data ......................................................................
Hasil uji t-test tidak berpasangan .........................................................
Hasil uji Anova ...................................................................................
Hasil uji post hoc .................................................................................

45
47
47
47
48

DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
1
2
3
4
5
6

Halaman

Sertifikat persetujuan etik ....................................................................

Keterangan selesai penelitian dari PPS UNSRI ...................................
Sertifikat kursus singkat kultur jaringan ..............................................
Ijin penelitian lab. Parasitologi UGM ..................................................
Keterangan selesai penelitian lab. Parasitologi UGM .........................
Foto proses ekstraksi, fraksi, kultur sel ................................................

56
57
58
59
60
61

7
8
9
10

Hasil uji sitotoksik................................................................................

Output Flowcytometry..........................................................................
Doubling time .......................................................................................
Output SPSS .........................................................................................

DAFTAR ISTILAH
DTQ
ECC
FBS
HPV
IC50
KCV
KLT

: Dithymquinone
: Ektraksi Cair-Cair
: Fetal Bouvin Serum
: Human Papiloma Virus
: Indeks Consentration 50
: Kromatografi Cair Vakum
: Kromatografi Lapis Tipis

63
64
70
71

LAF
MTT
Pt
SDS
THQ
THY
TQ

: Laminar air flow

: Mikro tetrazolium
: Platinum
: Sodium Dodecyl Sulphate
: Thymohydroquinone
: Timol
: Thymoquinone