Alat dan Bahan

Adapun alat dan bahan yang digunakan dalam praktikum uji kualitas air dengan menggunakan metode
MPN adalah :
3.2.1 Alat
1.

Pipet tetes

2.

Rak tabung

3.

Tabung reaksi

4.

Gelas ukur 10 ml

5.

Tabung durham

6.

Bunsen

7.

Inkubator

8.

Handsprayer

3.2.2 Bahan

3.3

1.

Sampel air (air sumur, air sungai dan air galon)

2.

Medium Brilliant Green Lactase Bilebroth (BGLB)

3.

Medium Laktose Broth (LB)

4.

Medium Escherichia coli (EC)

5.

Aquades steril

6.

Alkohol 70%

7.

Korek api

8.

Spiritus

9.

Label

Prosedur Kerja
3.3.1 Pengenceran
1.

Menyiapkan 9 tabung reaksi dan memberikan label pada masing-masing tabung

dengan tanda 10-1, 10-2 dan 10-3.

2.

Mengisi tabung reaksi masing-masing 9 ml aquadest steril yang telah di ukur dengan
menggunakan gelas ukur.

3.

Menambahkan sampel air sumur dan air sungai masing-masing 1 ml dengan

menggunakan pipet tetes ke dalam tabung yang telah berisi aquades steril pada tabung
pengenceran 10-1, kemudian mengocok agar tercampur secara homogen. Air galon tidak
dilakukan pengenceran karena telah melalui proses sterilisasi.

4.

Menambahkan 1 ml sampel dari pengenceran 10-1 ke dalam tabung pengenceran 10-2,

kemudian mengocok sehingga tercampur secara homogen.

5.

Menambahkan 1 ml sampel dari pengenceran 10-2 ke dalam tabung pengenceran 10-3,

kemudian mengocok sehingga tercampur secara homogen.

6.

Perlakuan pada poin 3-5 dilakukan sebanyak 3 kali pada tabung reaksi yang lain.

3.3.2 Uji Pendugaan

1.

Memfiksasi mulut tabung media LB (Lactose Broth) pada api Bunsen kemudian
menambahkan masing-masing 5 ml/100 tetes dari tabung pengenceran 10 -1 ke dalam 3
tabung media Lactose Broth (LB), dan kembali memfiksasi tabung reaksi dan menutup
dengan kapas.

2.

Memfiksasi mulut tabung media LB (Lactose Broth) kemudian menambahkan masingmasing 1 ml/20 tetes dari tabung pengenceran 10 -2 ke dalam 3 tabung media Lactose
Broth (LB), dan kembali memfiksasi tabung reaksi dan menutup dengan kapas.

3.

Memfiksasi mulut tabung media LB (Lactose Broth) kemudian menambahkan masingmasing 0.5 ml/10 tetes dari tabung pengenceran 10 -3 ke dalam 3 tabung media Lactose
Broth (LB), dan kembali memfiksasi tabung reaksi dan menutup dengan kapas.

4.

Menghomogenkan secara perlahan pada seluruh tabung agar sampel menyebar rata
keseluruh media.

5.

Menginkubasikan seluruh tabung pada suhu 340C selama 24 jam.

7.

Mengamati adanya gelembung udara di dalam tabung durham dan mencatat kode
tabung yang positif mengeluarkan gas.

3.3.3 Uji Penegasan

1.

Mengambil sampel air dari tabung LB yang positif yang ditandai adanya gelembung
pada tabung durham kemudian memasukkan sebanyak 2 tetes kedalam tabung BGLB
dan EC medium untuk pemeriksaan total Coliform.

2.

Menginkubasi media BGLB dan EC pada suhu 34oC selama 24 jam.

3.

Mencatat jumlah tabung yang menunjukkan tes penegasan positif.

4.

Menentukan nilai MPN Coliform berdasarkan tabel MPN yang terdapat pada
lampiran.