PENANAMAN BAKTERI

Mau dicantumin apa

enggak terserah :D
Koloni tunggal bakteri
Siap diambil
untuk diinkubasi
E.coli
untuk
dibiakkan

Dimasukkan ke dalam
10 ml media LB
Dimasukkan ke dalam
inkubator goyang untuk
diinkubasi selama 18
jam pada suhu 37 0C
dengan kecepatan 150
rpm

PEMBUATAN GEL

Cetakan / tray gel

poliakrilamid
Separating buffer

TEMED

Stacking buffer

Sisir pencetak sumur

SDS 10%

Acrylamide 30%
Cetakan gel

Sarung tangan nitril

30% acrylamide

Mikropipet

Mikropipe
t

Kaca untuk
pencetak gel
Separating gel

Alat cetakan dites

kebocoran dengan
memasukkan aquadest
Campuran dihomogenkan
dengan cara memipet
naik-turun

diambil
aquadest
sebanyak
2935,5 l

Dipasang pada alat

cetakan

Ditambahkan juga
sebanyak 3 ml acrylamide
30%

Separating gel dimasukkan

dalam cetakan hingga
mencapai garis batas

Ditambahkan dengan
separating buffer
sebanyak 1407 mikroliter

Ditambahkan dengan SDS

10% sebanyak 75
mikroliter

Kemudian ditambahkan
TEMED sebanyak 75
mikroliter

Segera dimasukkan
aquadest di bagian atas
separating gel untuk
mengurangi gelembung

Ditambahkna komposisi
terakhir yaitu APS 10%
sebanyak 7,5 mikroliter

Didiamkan hingga
memadat (sekitar 30
menit)

Dihomogenkan dengan
cara memipet naik-turun

Stacking Gel

Ditambahkan acrylamide
30% sebanyak 502,5
mikroliter

Stacking gel dimasukkan

ke dalam cetakan hingga
penuh

Diambil aquadest
sebanyak 2070 mikroliter

Ditambahkan TEMED
sebanyak 3,75 mikroliter
Sisir pencetak sumur
diselipkan secara hati-hati
pada stacking gel
Ditambahkan stacking
buffer sebanyak 375
mikroliter

Kemudian ditambahkan
komposisi terakhir yaitu
APS 10% sebanyak 22,5
mikroliter

Didiamkan hingga
memadat ( 15 menit)

Ditambahkan SDS 10%

sebanyak 30 mikroliter

Sisir pencetak diambil

Cetakan dimasukkan ke
dalam wadah plastik dan
diisi dengan dapar
elektroforesis hingga
terbasahi

Gel poliakrilamid yang

sudah memadat