Penanaman Dan Pembuatan Poliakrilamide Shift A&b
Penanaman Dan Pembuatan Poliakrilamide Shift A&b
Dimasukkan ke dalam
10 ml media LB
Dimasukkan ke dalam
inkubator goyang untuk
diinkubasi selama 18
jam pada suhu 37 0C
dengan kecepatan 150
rpm
PEMBUATAN GEL
TEMED
Stacking buffer
Acrylamide 30%
Cetakan gel
Mikropipet
Mikropipe
t
Kaca untuk
pencetak gel
Separating gel
diambil
aquadest
sebanyak
2935,5 l
Ditambahkan juga
sebanyak 3 ml acrylamide
30%
Ditambahkan dengan
separating buffer
sebanyak 1407 mikroliter
Kemudian ditambahkan
TEMED sebanyak 75
mikroliter
Segera dimasukkan
aquadest di bagian atas
separating gel untuk
mengurangi gelembung
Ditambahkna komposisi
terakhir yaitu APS 10%
sebanyak 7,5 mikroliter
Didiamkan hingga
memadat (sekitar 30
menit)
Dihomogenkan dengan
cara memipet naik-turun
Stacking Gel
Ditambahkan acrylamide
30% sebanyak 502,5
mikroliter
Diambil aquadest
sebanyak 2070 mikroliter
Ditambahkan TEMED
sebanyak 3,75 mikroliter
Sisir pencetak sumur
diselipkan secara hati-hati
pada stacking gel
Ditambahkan stacking
buffer sebanyak 375
mikroliter
Kemudian ditambahkan
komposisi terakhir yaitu
APS 10% sebanyak 22,5
mikroliter
Didiamkan hingga
memadat ( 15 menit)
Cetakan dimasukkan ke
dalam wadah plastik dan
diisi dengan dapar
elektroforesis hingga
terbasahi