Spektrofotometri merupakan suatu metoda analisa yang didasarkan pada pengukuran serapan

sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan berwarna pada panjang gelombamg spesifik
dengan menggunakan monokromator prisma atau kisi difraksi dengan detektor
vacum fototube atau tabung foton hampa.
A la t ya n g d ig un ak an ad a l ah s pe kt ro fo t o me t e r, ya i t u s ua tu al a t ya n g digunakan
untuk menentukan suatu senyawa baik kuantitatif maupun kualitatif, dengan mengukur
transmitan ataupun absorban dari suatu cuplikan sebagai fungsida ri ko ns en tr as i.
S pe kt ro fo to me tr i da pa t di an gg ap s e ba ga i pe rl ua s a n s ua tu pe me r ik s a a n v is ua l
d en ga n s tu di ya n g l eb i h me n d al a m da ri ab s o rbs i e ne rgi. Absorbsi radiasi oleh suatu
sampel diukur pada berbagai panjang gelombang dandialirkan oleh suatu perkam untuk
menghasilkan spektrum tertentu yang khas untuk komponen yang
berbeda.S pe kt ro fo to me tr i te rd i ri da r i b eb er ap a j en is b er da s a r s u mb er
c ah a ya yang digunakan, diantaranya adalah sebagai berikut :

Spektrofotometri UV-Vis
Spektrofotometri ini merupakan gabungan antara spektrofotometri UV dan Visible.
Menggunakan dua buah sumber cahaya berbeda, sumber cahaya UVdan sumber cahaya visible.
Untuk sistem spektrofotometri, UV-Vis paling banyak

t er s e d ia da n p al i ng po pu le r d ig un ak an . K e mud ah a n me t o de in i ad al a h
d ap a t digunakan baik untuk sample berwarna juga untuk sample tak berwarna.
.Absorbsi sinar oleh larutan mengikuti hukum Lambert-Beer, yaitu :
A = log ( Io / I1) = a b c
Keterangan :

Io = Intensitas sinar datang

I1= Intensitas sinar yang diteruskan
a = Absorptivitas
b = Panjang sel/kuvet
c = konsentrasi (g/l)
A = Absorban
Keterbatasan Hukum Lambert Beer
Beberapa pengecualian ditemukan untuk menyamaratakan absorbansi sebagai garis lurus. Di sisi
lain, penyimpangan dari perbandingan langsung diantara absorbansi dan konsentrasi ketika b
adalah konstan seringkali ditemukan. Beberapa penyimpangan ini adalah dasar dan menunjukkan
keterbatasan yang nyata dari hukum ini (Skoog, DA, 1996).