PRAKTIKUM VI

A. Judul
Preparat Apus (Smear Preparation) Untuk Hewan
B. Tujuan
Mahasiswa terampil membuat preparat apusan darah yang dapat memberi
gambaran yang jelas mengenai bentuk-benutk sel darah.
C. Alat Dan Bahan
1. Darah Homo 6. Giemsa.
2. Alkohol 70% 7. Air panas
3. Kapas 8. Lampu spritus
4. Zat warna Methylen blue 9. Gelas kimia
5. May-grunwald 10. Lancet steril
D. Prosedur Kerja

Mengambil darah pada jari atau telinga dari Homo. Alat-alat

Darah Homo
penusuk harus steril
Menggosok dengan alkohol 70% pada jari tempat yang akan
ditusuk.
Menghapus tetesan darah pertama (2-3) dengan kertas hisap.
Meneteskan tetesan berikutnya di atas kaca benda, sedemikian
hingga merupakan lingkaran diameter 3-5 mm
Meletakkan kaca benda yang lain pada sisi/tepinya yang pendek di
muka tetesan darah tersebut, lalu menarik ke belakang sedikit
sampai kira-kira di tengah lingkaran darah, supaya timbul kapiler
yang menyebabkan darah dengan sendirinya merata ke kiri dan ke
kanan tepi kaca benda yang pertama. Sudut antara kedua kaca
benda tersebut sebaiknya 450c. Meneteskan tetesan darah
seharusya agak ke ujung kaca benda
Mendorong kaca benda yang kedua itu maju dengan kekuatan dan
kecepatan yang sama supaya mendapatkan film darah yang rata
dan tipis

1
 Mengeringkan di udara dan fixir dengan methyl alkohol 3-5 menit
bilamana akan diwarnai dengan Giemsa. Kalau akan memakai
metode pewarnaa May-Grunwald, tidak usah difixir.

Metode
Pewarnaan

I. Metode May-Grunwald
Sediaan apusan
kering
Meneteskan larutan A tak terencerkan di atas sediaan apusan yang
telah dikeringkan selama 3-5 menit. Misalnya sebanyak 10 tetes.
Kemudian menetesi dengan larutan B selama 5-10 menit.
Mencuci dengan aquades yang telah didihkan.
Meletakkan diantara kertas-kertas pengisap, menekan pelan-pelan
lalu mengeringkan di udara
Memeriksa sediaan apusan di bawah mikroskop dengan objektif
lemah, kemudian memeriksa dengan oil immersion menggunakan
objektif terkuat.

Gambar sel-sel darah

merah

2
 II. Metode Rovanovski (Giemsa)
Sediaan Apusan Kering
Memixir sediaan apusan yang telah dikeringkan denga methyl
alkohol selama 3-5 menit.
Mewarnai dengan zat warna selama 30-45 menit.
Melihat sediaan apusan di bawah mikroskop.

Gambar sel-sel
Darah

III. Metode Pappenhem

Sediaan Apusan Kering

Meneteskan larutan A metode May-Grunwald 10 tetes selama 3
menit, jangan terlalu lama.
Meneteskan larutan B 10 tetess, selama 5-10 menit.
Mencuci dengan aquades yang telah didihkan dan mengeringkan
diantara kertas pengisap
Memeriksa di bawah mikroskop
Mencatat perbedaan warna hasil metode ini, membandingkan
dengan metode terdahulu.

Gambar Sel-Sel
Darah

3
IV. Metode Methylen Blue
Sediaan Apusan Kering

Memijit ujung jari tengah/jari manis tangan kiri.

Membersihkan ujung jari tersebut dengan kapas yang telah
dibasahi dengan alkohol.
Menusuk jari yang telah dibersihkan dengan lancet yang steril
hingga keluar darah.
Mengapus tetesan darah pertama dengan kapas steril.
Meneteskan tetesan darah berikutnya pada salah satu ujung gelas
objek.
Membuat apusan darah dengan cara menyentuhkan kaca benda
kedua pada tetesan darah sehingga membentuk sudut 45 0.
Mendorong kaca benda tersebut ke ujung lain dengan cepat dan
merata. Mengeringkan lapisan darah tersebut di udara.
Menambahkan beberapa tetes alkohol 70% di atas apusan darah
dan membiarkan selama 3-5 menit.
Mengisap alkohol dengan kertas hisap dan biarkan kering di udara.
Menambahkan beberapa tetes Methylen blue yang telah
disediakan. Membiarkan selama 10 menit.
Dengan menggunakan pembakar spritus, menghangatkan kaca
objek pada permukaan yang tidak ada apusan darahnya, hingga air
menguap, jangan sampai kering.
Mencuci apusan darah dengan merendam dalam air suling selama
2 menit, kemudian mengeringkan di udara.
Mengamati di bawah mikroskop. Bila terlihat baik, merekatkan
dengan canada balsem.

E. Gambar
Hasil Pengamatan
sel-sel darah
1.Metode May-Grunwald
Keterangan :
1. Sel darah putih
2. Sel darah merah

4
 Gambar 1 : Metode May-Grunwald
Perbesaran 10 x 10
1.Metode May-Grunwald (gambar tangan)

Keterangan :
1. Sel darah putih
2. Sel darah merah

Gambar Tangan Metode May-Grunwald

Perbesaran 10 x 10

2.Metode Rovanovski (Giemsa)

Keterangan :
Metode May-Grunwald 1. Sel darah merah
2. Keping darah

Gambar Metode Rovan

ovski

5
 Perbesaran 10 x 10
2.Metode Rovanovski (Giemsa) gambar tangan
Keterangan :
1. Sel darah merah
2. Keping darah

Gambar Tangan Metode Rovanovski

Perbesaran 10 x 10

3.Metode Papenhem
Keterangan :
1. Sel darah putih
2. Sel darah merah

Gambar Metode Papenhem

Perbesaran 10 x 40

3.Metode Papenhem (gambar tangan)

Keterangan :
1. Sel darah putih
2. Sel darah merah

6
 Gambar Tangan Metode Papenhem
Perbesaran 10 x 40

4. Metode Pewarnaan Methylen blue

Keterangan :
1. Sel darah merah
2. Keping darah

Gambar Metode Methylen blue

Perbesaran 10 x 10
4. Metode Pewarnaan Methylen blue (gambar tangan)

Keterangan :
1. Sel darah merah
2. Keping darah

Gambar Tangan Metode Methylen blue

Perbesaran 10 x 10

7
Laporan Praktikum

Mikroteknik
Judul praktikum : Mikrometri

Kelas : Biologi B

Kelompok : 3 (Tiga)

Asisten : Mulyadi Maruni

Anggota kelompok : 1. Mohammad Irsyad

2. Ni Ketut Ayu Kartini

3. Noviana Dewi Lestari

4. Yulinda Pakaya

Nilai Paraf

LABORATORIUM JURUSAN BIOLOGI

FA K FAKULTAS MATEMATIKA DAN IPA
UNIV UNIVERSITAS NEGERI GORONTALO
2014

8
9