IPTEKMA

Volume 2 No.1, 01-04. 2010

ISSN: 2086-1354 Bidang Kemahasiswaan UNUD

UJI KLINIS IN VIVO PENGARUH KONSUMSI DALUMAN (Cycllea barbata) TERHADAP

PENURUNAN KADAR GULA DARAH PADA TIKUS WISTAR JANTAN
DENGAN DIABETES MELLITUS TIPE 2

Putu Gina Astiyandani, Gd. Angga Permana A. W., Putu Diah Vedayanti, Cok. Istri Devi Larayanthi,
Made Prani Windasari dan I.A. Ika Wahyuniari

Fakultas Kedokteran, Universitas Udayana.

ABSTRAK

Angka insiden diabetes mellitus tipe 2 berada pada angka tertinggi di negara ekonomi berkem-
bang, khususnya di Indonesia. Mediator mayor terjadinya resistensi insulin diinduksi oleh stres oksi-
datif. Stres oksidatif mengakibatkan hambatan fosforilasi kaskade protein untuk pengambilan glukosa
dan mengurangi sensitifitas terhadap insulin sehingga terjadilah resistensi terhadap insulin. Penggu-
naan insulin sebagai terapi utama sering memberatkan pasien utamanya kelas menengah ke bawah,
karena harga sediaan yang tergolong mahal. Daluman yang memiliki tiga kandungan antioksidan alami
antara lain: asam askorbat (vitamin C), flavonoid, dan karoten yang merupakan antioksidan alami
potensial yang mampu membantu sistem antioksidan alami tubuh mengatasi stres oksidatif yang men-
dasari patogenesis diabetes mellitus tipe 2. Penelitian ini menggunakan model uji klinis paralel teran-
domisasi yang dilakukan secara in vivo pada 24 ekor tikus Wistar yang telah memenuhi kriteria inklusi
yang sebelumnya telah diinduksi Alloxan sehingga menderita Diabetes mellitus tipe 2 yang kemudian
dikelompokkan menjadi 4 jenis perlakuan, di mana masing-masing kelompok tersebut terdiri dari 6
ekor tikus Wistar jantan. Berdasarkan data kasar yang diperoleh dari penelitian menunjukkan bahwa
pemberian intervensi Daluman dengan ketiga dosis yang berbeda memberikan efek yang signifikan
terhadap penurunan gula darah, yakni dengan rata-rata di atas 10%. Berdasarkan hasil uji ANNOVA
dengan SPSS 16 menunjukkan terdapatnya perbedaan yang bermakna antara rata-rata kadar gula darah
pada minggu pertama (PPGD1) kelompok kontrol dengan kelompok kedua, dan ketiga. Di samping
itu, perbandingan rata-rata kadar gula darah pada minggu kedua (PPGD2) kelompok kontrol dengan
kelompok pertama, kedua, dan ketiga menunjukkan perbedaan yang bermakna.

PENDAHULUAN fik seperti jantung, ginjal dan otak (Evans, 2002;

Latar Belakang
Diabetes mellitus telah dikategorikan seba-
gai penyakit global oleh World Health Organiza-
tion (WHO) dengan jumlah penderita di dunia
mencapai 199 juta jiwa pada tahun 2009. Menu-
rut statistik dari studi Global Burden of Disease
WHO tahun 2004, Indonesia menempati pering-
kat pertama di Asia Tenggara, dengan prevalensi
penderita sebanyak 8,426,000 jiwa di tahun 2000
dan diproyeksi meningkat 2,5 kali lipat sebanyak
21,257,000 penderita pada tahun 2030 (WHO,
2009). Kematian akibat diabetes umumnya di
sebabkan oleh kerusakan organ terminal spesi-
01
Oprescu, 2007).
Terdapat dua tipe utama diabetes mellitus
yaitu diabetes mellitus tipe 1 dan diabetes mel-
litus tipe 2 (Baynes, 2003). Diabetes mellitus tipe
2 atau yang sering disebut dengan non-insulin de-
pendent diabetes mellitus (NIDDM), merupakan
jenis diabetes mellitus yang jumlahnya mening-
kat secara signifikan di dunia. Angka insiden dia-
betes mellitus tipe 2 berada pada angka tertinggi
di negara ekonomi berkembang. Di Indonesia,
khususnya, dari seluruh populasi penderita diabe-
tes mellitus, kurang lebih 90% pasien mengalami
diabetes mellitus tipe 2 yaitu tidak tergantung in-
sulin (Baynes, 2003). Mediator mayor terjadinya
IPTEKMA
resistensi insulin diinduksi oleh stres oksidatif.
Stres oksidatif adalah keadaan tidak seimbang
antara radikal bebas dan sistem antioksidan. Stres
oksidatif mengakibatkan hambatan fosforilasi
kaskade protein untuk pengambilan glukosa dan
mengurangi sensitifitas terhadap insulin sehing-
ga terjadilah resistensi terhadap insulin (Evans,
2002; Oprescu, 2007). Sejauh ini manajemen
pada pasien diabetes masih menggunakan insu-
lin sebagai terapi utama pengontrol gula darah.
Penggunaan insulin sebagai terapi utama sering
memberatkan pasien utamanya kelas menengah
ke bawah, karena harga sediaan yang tergolong
mahal. Namun perkembangan ilmu pengetahuan
mengarahkan pada penemuan berbagai intervensi
baru terhadap diabetes mellitus, salah satunya
adalah pemanfaatan antioksidan dalam manaje-
men diabetes mellitus tipe 2 (Baynes, 2003). An-
tioksidan merupakan molekul yang mampu mem-
perlambat atau mencegah oksidasi suatu molekul
(Robins, 2003).
Indonesia memiliki potensi untuk menemu-
kan suatu terapi baru sebagai alternatif terapi
insulin, dengan efektifitas yang sama dan biaya
yang terjangkau. Salah satu potensi tersebut
adalah Cyclea barbata, atau yang lebih dikenal
dengan sebutan Daluman. Daluman adalah tum-
buhan yang sering diolah oleh masyarakat Indo-
nesia, khususnya Bali. Daluman memiliki tiga
kandungan antioksidan alami antara lain: asam
askorbat (vitamin C), flavonoid, dan karoten
(Arifin, 2007). Ketiga senyawa tersebut adalah
antioksidan alami potensial yang mampu mem-
bantu sistem antioksidan alami tubuh mengatasi
stres oksidatif yang mendasari patogenesis diabe-
tes mellitus tipe 2 (Robins, 2003).
Oleh sebab itu, pengusul merancang suatu
penelitian dengan judul, Uji Klinis In Vivo Pen-
garuh Konsumsi Daluman (Cyclea barbata) ter-
hadap Penurunan Kadar Gula Darah pada Tikus
Wistar Jantan dengan Diabetes Mellitus Tipe 2.
Melalui penelitian ini, diharapkan pengaruh kon-
sumsi Daluman dalam menurunkan kadar gula
darah pada tikus Wistar jantan dengan diabetes
mellitus tipe 2 dapat diketahui secara jelas, seh-
ingga tidak menutup kemungkinan akan ditemu-
kannya suatu terapi alternatif yang efektif dan
terjangkau dalam penatalaksanaan diabetes mel-
litus tipe 2.
02
Volume 2 No.1, 2010
Tujuan
1. Untuk mengetahui pengaruh konsumsi Dalu
man (Cyclea barbata) terhadap penurunan ka-
dar gula darah pada tikus Wistar Jantan dengan
diabetes mellitus tipe 2.
2. Untuk mengetahui dosis konsumsi Daluman
(Cyclea barbata) yang dapat memberikan pen-
garuh terhadap penurunan kadar gula darah
pada tikus Wistar Jantan dengan Diabetes mel-
litus tipe 2.
METODE PENELITIAN
1. Besar dan Cara Penentuan Sampel
Sampel penelitian ini dikelompokkan men-
jadi 4 jenis perlakuan, yaitu:
D0= tanpa pemberian Daluman (kontrol)
D1= pemberian Daluman dengan dosis 100 mg
dalam takaran 0.1 cc
D2= pemberian Daluman dengan dosis 200 mg
dalam takaran 0.2 cc
D3= pemberian Daluman dengan dosis 300 mg
dalam takaran 0.3 cc
Sampel penelitian ini ditentukan dengan mem-
pergunakan rumus Frederer, dengan penjabaran
sebagai berikut:
n = jumlah sampel
k = kelompok sampel
Menilik penelitian ini mempergunakan 4 kel-
ompok sampel yang terdiri dari : kelompok D0,
kelompok D1, kelompok D2, dan kelompok D3,
maka jumlah sampel yang dipergunakan diper-
oleh dari perhitungan sebagai berikut:
Berdasarkan perhitungan tersebut diperoleh bah-
wa masing-masing kelompok sampel memper-
gunakan 6 ekor tikus Wistar Jantan. Jadi, jumlah
sampel secara keseluruhan yang dipergunakan
dalam penelitian ini adalah 24 ekor Tikus Wistar
Jantan. Mempertimbangkan terjadinya eksklusi
IPTEKMA
yang dilakukan setelah tikus Wistar Jantan di-
induksi, maka jumlah tikus Wistar jantan yang
dipergunakan adalah 40 ekor, sehingga jumlah
sampel yang dibutuhkan dapat dipenuhi.
2. Variabel Penelitian
Variabel Bebas : Konsumsi Daluman
Variabel Terikat : Kadar gula darah
Variabel Perancu : Jenis kelamin, berat ba
dan, dan pakan
Definisi Operasional:
1. Konsumsi Daluman : diberikan secara oral da-
lam bentuk ekstrak dengan pengelompokan do-
sis/takaran yang ditentukan dalam rancangan pe-
nelitian. Daluman diberikan dengan cara sonde.
2. Pengambilan darah : dilakukan dengan meng-
gunakan pipet kapiler hematokrit yang ditusuk-
kan di daerah plexus infraorbitalis.
3. Kadar gula darah : diukur dengan mempergu-
nakan alat GlucoDR dengan dilengkapi stik Glu-
coDR.
4. Jenis Kelamin : untuk mengontrol variabel
perancu jenis kelamin, dalam penelitian ini diper-
gunakan Tikus Wistar jantan, menilik lebih ting-
ginya angka diabetes mellitus pada laki-laki dan
tidak ada kemungkinan hamil.
5. Berat badan : untuk mengontrol variabel per-
ancu berat badan, dalam penelitian ini dipergu-
nakan Tikus Wistar jantan dengan kisaran berat
badan 150-220 gram.
6. Pakan : untuk mengontrol variabel perancu be-
rat badan, dalam penelitian ini Tikus Wistar jan-
tan diberikan pengaturan pakan yang disamakan
yaitu 10 gram pakan tikus/hari dan minum seban-
yak 20 ml yang ditempatkan dalam wadah yang
telah disediakan.
Kriteria Inklusi:
Tikus Wistar jantan dengan kadar gula darah
270 mg/dl setelah induksi dengan Alloxan se-
lama 7 hari.
Kriteria eksklusi:
Tikus Wistar jantan yang mati setelah in-
duksi Alloxan, atau diperkirakan tidak dapat ber-
tahan dalam tahap penelitian lebih lanjut.
03
Volume 2 No.1, 2010
4. Rancangan Penelitian
Penelitian diawali dengan persiapan alat
dan bahan penelitian yang dilakukan selama 5
hari, termasuk pemeliharaan awal tikus sebelum
induksi Alloxan dilakukan. Tikus Wistar dipeli-
hara berkelompok dalam 6 kandang berukuran
40 cm x 30 cm x 15 cm di mana masing-masing
kandang terdiri dari 4-6 ekor tikus dan diberikan
pakan sebanyak 15 gram/tikus/hari dan minum
yang diletakan dalam wadah khusus yang telah
disediakan untuk masing-masing kandang. Dalam
setiap kontak dengan tikus, para peneliti mem-
pergunakan handschoen (sarung tangan steril)
sebagai tindakan aseptik. Tahap pertama peneli-
tian dilakukan dengan menginduksi 34 ekor tikus
Wistar jantan dengan Alloxan. Dosis diberikan
sebanyak 120 mg/kg BB secara intraperitoneal
mempergunakan syringe selama 7 hari diikuti
dengan pemberian pakan 15 gram/tikus dan mi-
num larutan glukosa 10% sebanyak 100 ml untuk
masing-masing kandang dalam 3 hari terakhir
pada masa induksi (hari ke-5 hingga ke-7). Hari
ke-8 hingga ke-21, makanan diberikan dengan ta-
karan seperti hari sebelumnya, sedangkan larutan
glukosa 10% diganti dengan air suling. Hari per-
tama sebelum dilakukan induksi alloxan dilaku-
kan pengukuran kadar gula darah awal sebagai
tolak ukur peningkatan gula darah setelah induk-
si. Setelah dilakukan induksi alloxan, pada hari
ke-7 dilakukan pengukuran kadar gula darah. Ti-
kus Wistar jantan dengan kadar gula darah 270
mg/dl dimasukkan ke dalam kelompok sampel.
Dalam penelitian ini dipergunakan 24 ekor tikus
Wistar jantan yang telah diinduksi Alloxan seh-
ingga menjadi diabetes mellitus tipe 2. Sampel
penelitian ini selanjutnya dikelompokkan men-
jadi 4 jenis perlakuan, di mana masing-masing
kelompok tersebut terdiri dari 6 ekor tikus Wistar
jantan. yaitu:
D0= tanpa pemberian Daluman (kontrol)
D1= pemberian Daluman dengan dosis 100 mg
dalam takaran 0.1 cc
D2= pemberian Daluman dengan dosis 200 mg
dalam takaran 0.2 cc
D3= pemberian Daluman dengan dosis 300 mg
dalam takaran 0.3 cc
IPTEKMA
Tahap kedua penelitian dilakukan dengan
mempersiapkan Daluman. Daluman yang diberi-
kan dalam intervensi dipersiapkan dalam bentuk
ekstrak dengan proses ekstraksi sebagai berikut:
- Daun daluman dipotong dan dikering anginkan
selama 9 hari
- Daun daluman yang sudah kering tersebut
diblender hingga halus
- Rendam dalam etanol dengan perbandingan
1:10 ( berat : volume, misal: 100 gram kering
yang sudah diblender : 1000 ml etanol)
- Rendam atau meserasi selama 2 hari untuk
mengikat zat aktif tanaman
- Kemudian disaring mempergunakan kertas
whattman 1
- Pisahkan ekstrak dengan pelarut dengan mem
pergunakan vaccum rotary evaporator.
Tahap ketiga penelitian dilakukan dengan
menggunakan 24 ekor tikus Wistar jantan yang
telah diinduksi Alloxan sehingga menderita dia-
betes. Tikus-tikus yang memenuhi kriteria-kri-
teria inklusi dipilih secara acak sebagai sampel
dan dikelompokkan menjadi 4 kelompok seperti
yang telah disebutkan. Keempat kelompok terse-
but diberikan pakan dengan jumlah yang sama,
yaitu sebanyak 15 gram/tikus/hari. Tikus dipua-
sakan selama 8 jam setelah diberi pakan, kemu-
dian diberikan intervensi dengan dosis tertentu
sesuai kelompok. Pengukuran kadar gula darah
untuk mengetahui perubahan yang terjadi dilaku-
kan pada hari ke-15 dan hari ke-21.
5. Teknik Pengumpulan Data
Pengumpulan data dilakukan dengan men-
gukur kadar gula darah pada hari pertama sebagai
tolak ukur awal, pada hari ke-7 untuk memastikan
keberhasilan induksi alloxan dan inklusi sample,
serta pada hari ke-15 dan hari ke-21 untuk menge-
tahui efek dari intervensi terhadap gula darah.
6. Analisis Data
Analisis data dilaksanakan dengan uji AN-
NOVA mempergunakan software statistik SPSS
16.
7. Cara Penyimpulan Hasil Penelitian
Penelitian ini dikatakan berhasil apabila ter-
dapat penurunan kadar gula darah tikus 10%
04
Volume 2 No.1, 2010
dari kadar gula darah awal. Keseluruhan data
yang diperoleh dianggap signifikan, jika p value
0,05.
HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Pengaruh Konsumsi Daluman (Cyclea bar
bata) Terhadap Penurunan Kadar Gula Darah
pada Tikus Wistar Jantan dengan Diabetes
Mellitus Tipe 2.
Berdasarkan data kasar yang diperoleh dari
penelitian (Gbr. 1) menunjukkan bahwa pem-
berian intervensi Daluman dengan ketiga dosis
yang berbeda memberikan efek yang signifikan
terhadap penurunan gula darah, yakni dengan
rata-rata di atas 10%. Pada kelompok intervensi
Daluman pertama (D1) yakni dengan pemberian
dosis 100 mg pada takaran 0.1 cc menunjukkan
terjadinya penurunan kadar gula darah dengan
rata-rata 15.92% pada pemberian intervensi se-
lama satu minggu pertama (PPGD1) dan rata-
rata 37.98% pada pemberian intervensi selama
satu minggu kedua (PPGD2). Pada kelompok
intervensi Daluman kedua (D2) yakni dengan
pemberian dosis 200 mg pada takaran 0.2 cc
menunjukkan terjadinya penurunan kadar gula
darah dengan rata-rata 27.66% pada pemberian
intervensi selama satu minggu pertama (PPGD1)
dan rata-rata 64.28% pada pemberian intervensi
selama satu minggu kedua (PPGD2). Pada ke
lompok intervensi Daluman pertama (D3) yakni
dengan pemberian dosis 300 mg pada takaran 0.3
cc menunjukkan terjadinya penurunan kadar gula
darah dengan rata-rata 22.27% pada pemberian
intervensi selama satu minggu pertama (PPGD1)
dan rata-rata 50.73% pada pemberian intervensi
selama satu minggu kedua (PPGD2). Hal ini
menunjukkan bahwa pemberian intervensi Dalu-
man dengan dosis 200 mg memberikan penu-
runan yang paling tinggi terhadap kadar gula
darah, jika dibandingkan dengan intervensi pada
dosis 100 mg dan 300 mg. Pada kelompok kon-
trol (D0) yakni tanpa pemberian intervensi Dalu-
man menunjukkan terjadinya peningkatan kadar
gula darah dengan rata-rata 8.64% selama satu
minggu pertama (PPGD1) dan rata-rata 8.26%
selama satu minggu kedua (PPGD1).
IPTEKMA
Gambar 1. Grafik Data Kasar Penelitian
2. Dosis Konsumsi Daluman (Cyclea Barbata)
yang dapat Memberikan Pengaruh Terhadap
Penurunan Kadar Gula Darah pada Tikus
Wistar Jantan dengan Diabetes Mellitus Tipe
2.
Berdasarkan hasil uji ANNOVA dengan
SPSS 16 menunjukkan terdapatnya perbedaan
yang bermakna antara rata-rata kadar gula darah
pada minggu pertama (PPGD1) kelompok kon-
trol dengan rata-rata kadar gula darah pada mi
nggu pertama (PPGD1) kelompok kedua, dan ke-
tiga. Akan tetapi, tidak terdapat perbedaan yang
bermakna antara rata-rata kadar gula darah pada
minggu pertama (PPGD1) kelompok pertama
dengan rata-rata kadar gula darah pada minggu
pertama (PPGD1) kelompok kontrol, kedua, dan
ketiga. Perbandingan rata-rata kadar gula darah
pada minggu kedua (PPGD2) kelompok kontrol
dengan kelompok pertama, kedua, dan ketiga
menunjukkan perbedaan yang bermakna. Akan
tetapi, perbandingan rata-rata kadar gula darah
minggu kedua (PPGD2) kelompok ketiga dengan
kelompok pertama dan kedua tidak menunjuk-
kan perbedaan yang bermakna. Dari keseluruhan
hasil tersebut menunjukkan bahwa pemberian in-
tervensi Daluman pada dosis apapun dapat men-
gakibatkan penurunan kadar gula darah, tetapi in-
tervensi sebaiknya diberikan pada dosis 200 mg
sehingga terdapat penurunan yang signifikan dan
bermakna jika dibandingkan dengan tanpa pem-
berian intervensi.
05
Volume 2 No.1, 2010
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
1. Pemberian intervensi Daluman memberikan
pengaruh yang signifikan dan bermakna terhadap
penurunan kadar gula darah pada tikus Wistar
Jantan dengan diabetes mellitus tipe 2.
2. Pemberian intervensi Daluman dengan dosis
200 mg dalam takaran 0.2 cc (D2) memberi-
kan rata-rata penurunan kadar gula darah yang
ter tinggi, yakni penurunan kadar gula darah de
ngan rata-rata 27.66% pada pemberian intervensi
selama satu minggu pertama (PPGD1) dan rata-
rata 64.28% pada pemberian intervensi selama
satu minggu kedua (PPGD2). Setelah melalui uji
ANNOVA dengan SPSS 16 ditunjukkan bahwa
pemberian intervensi Daluman dengan dosis ini
memiliki beda yang signifikan dan bermakna jika
dibandingkan dengan kelompok kontrol (D0),
maupun kelompok intervensi pertama (D1) dan
ketiga (D3).
Saran
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut
terkait pengaruh konsumsi Daluman terhadap ka-
dar gula darah pada penderita diabetes mellitus
tipe 2, sehingga dapat diperoleh medikasi alter-
natif penurun kadar gula darah yang efektif dan
terjangkau bagi para penderita diabetes mellitus
tipe 2 dengan dasar keilmiahan yang dapat diper-
tanggungjawabkan.
2. Perlu dilakukan penyuluhan kepada
masyarakat terkait manfaat Daluman, sehingga
budidaya Daluman dapat ditingkatkan.
DAFTAR PUSTAKA
Arifin, Helmi, dkk. 2007. Pengaruh Pemberian
Vitamin C terhadap Fetus pada Mencit Dia-
betes. Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi;
12(01): 32-40.
Baynes, JW. 2003. Role of oxidative stress in dia
betic complications. A new perspective on
an old paradigm. Diabetes; 48:1-9.
Evans, Joseph, dkk. 2002. Oxidative Stress and
Stress-Activated Signaling Pathways: A
Unifying Hypothesis of Type 2 Diabetes.
IPTEKMA Volume 2 No.1, 2010

Endocrine Reviews 2002; 23(5):599622.

Oprescu, Andrei, dkk. 2007. Free Fatty Acid
Induced Reduction in Glucose-Stimulated
Insulin Secretion : Evidence for a Role of
Oxidative Stress In Vitro and In Vivo. Dia-
betes Journal 2007; 56: 29272937.
Robins S, Cotran R, Kumar V. 2003. Robbins Ba
sic Pathology 7th ed. New York
WHO Country and Regional Data: World. 2009.
http://www.who.int/diabetes/facts/world_
figures/en/index.html. [10 September 2009]

Lampiran

Gambar 2. Induksi alloxan

Gambar 3. Pemberian intervensi

06