ISSN 0126-1754

Volume 9, Nomor 2, Agustus 2008

Terakreditasi Peringkat A
SK Kepala LIPI
Nomor 14/Akred-LIPI/P2MBI/9/2006
B erita Biologi merupakan Jurnal Ilmiah ilmu-ilmu hayati yang dikelola oleh Pusat Penelitian
Biologi - Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), untuk menerbitkan hasil karya-
penelitian (original research) dan karya-pengembangan, tinjauan kembali (review) dan ulasan
topik khusus dalam bidang biologi. Disediakan pula ruang untuk menguraikan seluk-beluk peralatan
laboratorium yang spesifik dan dipakai secara umum, standard dan secara internasional. Juga uraian
tentang metode-metode berstandar baku dalam bidang biologi, baik laboratorium, lapangan maupun
pengolahan koleksi biodiversitas. Kesempatan menulis terbuka untuk umum meliputi para peneliti
lembaga riset, pengajar perguruan tinggi maupun pekarya-tesis sarjana semua strata. Makalah harus
dipersiapkan dengan berpedoman pada ketentuan-ketentuan penulisan yang tercantum dalam setiap
nomor.
Diterbitkan 3 kali dalam setahun yakni bulan April, Agustus dan Desember. Setiap volume
terdiri dari 6 nomor.

Surat Keputusan Ketua LIPI

Nomor: 1326/E/2000, Tanggal 9 Juni 2000

Dewan Pengurus
Pemimpin Redaksi
B Paul Naiola

Anggota Redaksi
Andria Agusta, Dwi Astuti, Hari Sutrisno, Iwan Saskiawan
Kusumadewi Sri Yulita, Marlina Ardiyani, Tukirin Partomihardjo

Desain dan Komputerisasi

Muhamad Ruslan, Yosman

Sekretaris Redaksi/Korespondensi Umum

(berlangganan, surat-menyurat dan kearsipan)
Enok, Ruswenti, Budiarjo

Pusat Penelitian BiologiLIPI

Kompleks Cibinong Science Centre (CSC-LIPI)
Jin Raya Jakarta-Bogor Km 46,
Cibinong 16911, Bogor - Indonesia
Telepon (021) 8765066 - 8765067
Faksimili (021) 8765063
Email: herbogor@indo.net.id
ksama_p2biologi@yahoo.com

Cover depan: Keanekaragaman hayati TamanNasionalKelimutudi Pulau Flores, Nusa Tenggara Timur, seperti
direpresentasikan oleh jenis/spesies tumbuhan dan jamur; juga burung endemiknya, dan Danau
Kelimutu dengan tiga warnanya, sesuai makalah di halaman 185194. (Foto: Koleksi LDPI-Balai
Taman Nasional Kelimutu, Dcpartemen Kehutanan RI H Wiriadinata, Sudaryanti, AH Wawo dan
G Soebiantoro).
Biologi
Jurnal llmiah Nasional

Diterbitkan oleh
Pusat Penelitian Biologi - LIPI
 Berita Biologi 9 (2) - Agustus 2008

Ketentuan-ketentuan untuk Penulisan dalam Jurnal Berita Biologi

1. Karangan ilmiah asli, hasil penelitian dan belum pernah diterbitkan atau tidak sedang dikirim ke media lain.
2. Bahasa Indonesia. Bahasa Inggris dan asing lainnya, dipertimbangkan.
3. Masalah yang diliput, diharapkan aspek "baru" dalam bidang-bidang
Biologi dasar (pure biology), meliputi turunan-turunannya (mikrobiolgi, fisiologi, ekologi, genetika,
morfologi, sistematik dan sebagainya).
Ilmu serumpun dengan biologi: pertanian, kehutanan, petemakan, perikanan ait tawar dan biologi
kelautan, agrobiologi, limnologi, agro bioklimatologi, kesehatan, kimia, lingkungan, agroforestri.
Aspek/pendekatan biologi harus tampak jelas.
4. Deskripsi masalah: harus jelas adanya tantangan ilmiah (scientific challenge).
5. Metode pendekatan masalah: standar, sesuai bidang masing-masing.
6. Hasil: hasil temuan harus jelas dan terarah.
7. Kerangka karangan: standar.
Abstrak dalam bahasa Inggris, maksimum 200 kata, spasi tunggal, ditulis miring, isi singkat, padat yang
pada dasarnya menjelaskan masalah dan hasil temuan. Hasil dipisahkan dari Pembahasan.
8. Pola penyiapan makalah: spasi ganda (kecuali abstrak), pada kertas berukuran A4 (70 gram), maksimum IS
halaman termasuk gambar/foto; pencantuman Lampiran seperlunya.
Gambar dan foto: harus bermutu tinggi, gambar pada kertas kalkir (bila manual) dengan tinta cina,
berukuran kartu pos; foto berwarna, sebutkan programnya bila dibuat dengan komputer.
9. Kirimkan 2 (dua) eksemplar makalah ke Redaksi (alamat pada cover depan-dalam) yang ditulis dengan
program Microsoft Word 2000 ke atas. Satu eksemplar tanpa nama dan alamat penulis (-penulis)nya.
Sertakan juga copy file dalam CD (bukan disket), untuk kebutuhan Referee secara elektronik. Jika
memungkinkan, kirim juga filenya melalui alamat elektronik (E-mail) Berita Biologi: herbogor@indo.net.id
dan ksama p2biologi@vahoo.com
10. Cara penulisan sumber pustaka: tuliskan nama jurnal, buku, prosiding atau sumber lainnya secara lengkap,
jangan disingkat. Nama inisial pengarang tidak perlu diberi tanda titik pemisah.
a. Jurnal
Premachandra GS, H Saneko, K Fujita and S Ogata. 1992. Leaf Water Relations, Osmotic
Adjustment, Cell Membrane Stability, Epicutilar Wax Load and Growth as Affected by Increasing
Water Deficits in Sorghum. Journal of Experimental Botany 43,1559-1576.
b. Buku
Kramer PJ. 1983. Plant Water Relationship, 76. Academic, New York.
c. Prosiding atau hasil Simposium/Seminar/Lokakarya dan sebagainya
Hamzah MS dan SA Yusuf. 1995. Pengamatan Beberapa Aspek Biologi Sotong Buluh (Sepioteuthis
lessoniana) di Sekitar Perairan Pantai Wokam Bagian Barat, Kepulauan Aru, Maluku Tenggara.
Prosiding Seminar Nasional Biologi XI, Ujung Pandang 20-21 Juli 1993. M Hasan, A Mattimu, JG
Nelwan dan M Littay (Penyunting), 769-777. Perhimpunan Biologi Indonesia.
d. Makalah sebagai bagian dari buku
Leegood RC and DA Walker. 1993. Chloroplast and Protoplast. Dalam: Photosynthesis and
Production in a Changing Environment. DO Hall, JMO Scurlock, HR Bohlar Nordenkampf, RC
Leegood and SP Long (Eds), 268-282. Champman and Hall. London.
11. Kirimkan makalah serta copy file dalam CD (lihat butir 9) ke Redaksi. Sertakan alamat Penulis yang
jelas, juga meliputi nomor telepon (termasuk HP) yang mudah dan cepat dihubungi dan alamat
elektroniknya.
Berila Biologi 9 (2) - Agustus 2008
Anggota Referee / Mitra Bestari
Mikrobiologi
Dr Bambang Sunarko (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Prof Dr Feliatra (Universitas Riau)
Dr Heddy Julistiono (Pusat Penelitian Biologi-LlPI)
Dr I Nengah Sujaya (Universitas Udayana)
Dr Joko Sulistyo (Pusat Penelitian Biologi-LIPf)
Dr Joko Widodo (Universitas Gajah Mada)
Dr Lisdar I Sudirman (Institut Pertanian Bogor)
Dr Ocky Karna Radjasa (Universitas Diponegoro)
Mikologi
Dr Dono Wahyuno (BB Litbang Tanaman Rempah
dan Obat-Deptan)
Dr Kartini Kramadibrata (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Genetika
Prof Dr Alex Hartana (Institut Pertanian Bogor)
Dr Warid Ali Qosim (Universitas Padjadjaran)
Dr Yuyu Suryasari Poerba (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Taksonomi
Dr Ary P Keim (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Dr Daisy Wowor (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Prof (Ris) Dr Johanis P Mogea (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Dr Juniati Peggie (Pusat Penelitian Biologi- LIPI)
Dr Rosichon Ubaidillah (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Biologi Moiekuler
Dr Eni Sudarmonowati (Pusat Penelitian Bioteknologi-LIPI)
Dr Endang Gati Lestari (BB Litbang Bioteknologi dan
Sumberdaya Genetik Pertanian-Deptan)
Dr Hendig Sunarno (Badan Tenaga Atom Nasional)
Dr I Made Sudiana (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Dr Nurlina Bermawie (BB Litbang Tanaman Rempah
dan Obat-Deptan)
Dr Sudarmono (Pusat Konservasi Tumbuhan-LIPI)
Dr Yusnita Said (Universitas Lampung)
Bioteknologi
Dr Adi Santoso (Pusat Penelitian Bioteknologi-LIPI)
Dr Andi Utama (Pusat Penelitian Bioteknologi-LIPI)
Dr Nyoman Mantik Astawa (Universitas Udayana)
Veteriner
Prof Dr Fadjar Satrija (Institut Pertanian Bogor)
Biologi Peternakan
Prof (Ris) Dr Subandryo (Pusat Penelitian Ternak-Deptan)
11
Ekologi
Dr Didik Widyatmoko (Pusat Konservasi Tumbuhan-LIPI)
Dr Dewi Malia Prawiradilaga (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Dr Frans Wospakrik (Universitas Papua)
Dr Herman Daryono (Pusat Penelitian Hutan-Dephut)
Dr Istomo (Institut Pertanian Bogor)
Dr Michael L Riwu Kaho (Universitas Nusa Cendana)
Dr Sih Kahono (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Biokimia
Prof Dr Adek Zamrud Adrian (Universitas Andalas)
Dr Deasy Natalia (Institut Teknologi Bandung)
Dr Elfahmi (Institut Teknologi Bandung)
Dr Herto Dwi Ariesyadi (Institut Teknologi Bandung)
Dr Tri Murningsih (Pusat Penelitian Biologi -LIPI)
Fisiologi
Prof Dr Bambang Sapto Purwoko (Institut Pertanian Bogor)
Dr Gono Semiadi (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Dr Irawati (Pusat Konservasi Tumbuhan-LIPI)
Dr Wartika Rosa Farida (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Biostatistik
Ir Fahren Bukhari, MSc (Institut Pertanian Bogor)
Biologi Perairan Darat/Limnologi
Dr Cynthia Henny (Pusat Penelitian Limnologi-LIPI)
Dr Fauzan Ali (Pusat Penelitian Limnologi-LIPI)
Dr Rudhy Gustiano (Balai Rise! Perikanan Budidaya
Air Tawar-DKP)
Biologi Tanah
Dr Joeni Setijo Rahajoe (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Dr. Laode Alhamd (Pusat Penelitian Biologi-LIPI)
Dr Rasti Saraswati (BB Sumberdaya Lahan Pertanian-
Deptan)
Biodiversitas dan Iklim
Dr Rizaldi Boer (Institut Pertanian Bogor)
Dr Tania June (Institut Pertanian Bogor)
Biologi Kelautan
Prof Dr Chair Rani (Universitas Hasanuddin)
Dr Magdalena Litaay (Universitas (Hasanuddin)
Prof (Ris) Dr Ngurah Nyoman Wiadnyana (Pusat Riset
Perikanan Tangkap-DKP)
Dr Nyoto Santoso (Lembaga Pengkajian dan
Pengembangan Mangrove)
 Berita Biologi 9 (2) - Agustus 2008

Berita Biologi menyampaikan terima kasih

kepada para Mitra Bestari/Penilai (Referee) nomor ini
9(2) - Agustus 2008
Dr. Andria Agusta - Pusat Penelitian Biologi-LIPI
Dr. Bambang Sunarko - Pusat Penelitian Biologi-LIPI
Dr. B Paul Naiola - Pusat Penelitian Biologi-LIPI
Dwi Setyo Rini, SSi, MSi - Pusat Penelitian Biologi-LIPI
Dr. Endang Tri Margawati - Pusat Penelitian Bioteknologi-LIPI
Dr. Gayuh Rahayu - Jurusan Biologi-FMIPA IPB
Prof. (Ris.) Dr. Johanis P Mogea - Pusat Penelitian Biologi-LIPI
Dr. Kartini Kramadibrata - Pusat Penelitian Biologi-LIPI
Dr. Kusumadewi Sri Yulita - Pusat Penelitian Biologi-LIPI
Prof. Dr. Drh. Fachrijan H Pasaribu - Kedokteran Hewan-IPB
Drs. Haryono, MSi - Pusat Penelitian Biologi-LIPI
Dr. Iwan Saskiawan - Pusat Penelitian Biologi-LIPI
Dr. Sunaryo - Pusat Penelitian Biologi-LIPI
Dr. Usep Sutisna - Pusat Penelitian Bioteknologi-LIPI
Dr. Yuyu Suryasari Poerba - Pusat Penelitian Biologi-LIPI

iii
 Berita Biologi 9(2) - Agustus 2008

DAFTAR ISI

REKAMAN BARU (NEW RECORD)

A NEW RECORD OF Gunda ochracea Walker (LEPIDOPTERA: BOMBYCIDAE)
FROM GUNUNG HALIMUN-SALAK NATIONAL PARK
[Rekaman Baru Gunda ochracea Walker (Lepidoptera: Bombycidae)
dari Taman Nasional Gunung Halimun-Salak, Jawa Barat]
Hari Sutrisno 113

TINJAUAN ULANG (REVIEW)

KILAS BALIK PENELITIAN KROMOSOM PALEM INDONESIA
[Chromosome Research Flashback of Indonesian Palms]
JokoRidho Witono 115

MAKALAH HASIL RISET (ORIGINAL PAPERS)

PEMANFAATAN KONSORSIUM BAKTERI LOKAL UNTUK BIOREMEDIASI LIMBAH
TEKSTIL MENGGUNAKAN SISTEM KOMBINASI ANAEROBIK-AEROBIK
[The Utilizing of Local Bacteria Consortia for Bioremediation of Textile Wastewater
Under Combined Anaerobic-Aerobic System]
I Dewa K Sastrawidana, Bibiana W Lay, Anas Miftah Fauzi dan Dwi Andreas Santosa 123

SISTEM PENYERBUKAN ALTERNATIF Talinum triangulare Willd.: EFEK PERLAKUAN

PENYERBUKAN PADA AKTIFITAS BUNGA DAN PEMBENTUKAN BIJI
[Alternative Pollination System of Talinum triagulare Willd.: Effects of Pollination Treatments
on Flower Activities and Seed Setting]
Erlin Rachman 133

OPTIMASI PRODUKSI FRUCTOSYLTRANSFERASE OLEH Asperglllus sp. WN1C

[The Optimization of Fructosyltransferase Production by Aspergillus sp. WN1C]
Aris Toharisman, Triantarti dan Hendro Santoso Marantesa 139

DIVERSITAS DAN PROFIL METABOLIT SEKUNDER JAMUR ENDOFIT YANG DIISOLASI

DARI TUMBUHAN GAMBIR (Uncaria gambler) SERTA AKTIVITAS BIOLOGISNYA
SEBAGAI ANTIBAKTERI
[Diversity and Secondary Metabolites Profiles of Endophytic Fungi Isolated from Gambir
(Uncaria gambier) Plants and Their Biological Activities as Antibacteria]
Yuliasri Jamal, Muhamad Ilyas, Atit Kanti dan Andria Agusta 149

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIBAKTERI MINYAK ATSIRI DAUN

KEMBANG BULAN {Tithonla diversifolia (Hemsley) A. Gray}
[Isolation and Identification of Antibacterial Compounds from the Essential Oil of Japanese
Sunflower {Tithonla Dlverslfolla (Hemsley) A. Gray Leaves}]
Hartati Soetjipto, Lusiawati Dewi dan Sentot Adi Prayitno 155

KAJIAN FEKUNDITAS DAN DAYA TETAS TELUR IKAN BETUTU (Oxyeleotris marmorata)
PADA WADAH PEMIJAHAN YANG BERBEDA
[The Assessment of Fecundity and Hatching Rate of Sand Goby (Oxyeleotris marmorata) Eggs
on Different Spawning Ground]
Sri Karyaningsih 163

KEANEKARAGAMAN DAN DAYA DEGRADASI SELULOSA JAMUR TANAH DI HUT AN

BEKAS TERBAKAR WANARISET-SEMBOJA, KALIMANTAN TIMUR
[Soil Fungi Biodiversity of Postburning Forest in Wanariset-Semboja, East Kalimantan
and Their Capability in Cellulotic Degradation]
Suciatmih I69
Berita Biologi 9(2) - Agustus 2008

PERBANDEVGAN EKSPRESI mRNA STTOKIN ANTARA DOMBA EKOR-TTPIS DAN MERINO

YANG DIINFEKSI Fasciola gigantica
[Comparison of Cytokine mRNA Expression between Indonesian Thin-Tailed and Merino Sheep
during Infection with Fasciola gigantica]
Ening Wiedosari 177

FLORA GUNUNG KELIMUTU DAN GUNUNG KELIBARA TAMAN NASIONAL KELIMUTU,

PULAU FLORES, NUSA TENGGARA TIMUR
[Flora of Mt. Kelimutu and Mt. Kelibara Kelimutu National Park, Flores Island,
Lesser Sunda Islands]
Harry Wiriadinata. dan Albert H Wawo 185

KEANEKARAGAMAN JENIS BEGONIA (Begoniaceae) LIAR DIJAWA BARAT

[Biodiversity of Wild Begonia in West Java]
Deden Girmansyah 195

VAKSINASI DINI Bordetella bronchiseptica PADA ANAK BABI MENCEGAH KERUSAKAN

SEL-SEL EPITEL BERBULU GETAR PADA MUKOSA SALURAN NAFAS BAGIAN ATAS
[Early Vaccination of Bordetella bronchiseptica to Sucking Piglets in Protecting the Damage
of Ciliated Epithelium Cells of Upper Respiratory Tract Mucous]
Siti Chotiah 205

PERKECAMBAHAN DAN VIGOR SEMAI Plcrasma javantca Blume PADA BERBAGAI SUHU
[Germination and Seedling Vigour of Plcrasma javantca Blume at Various Temperatures]
Hadi Sutarno dan Ning Wikan Utami. 213

PENGARUH PERLAKUAN AWAL UMBI DAN APLIKASI MEDIA TANAM TERHADAP

PERTUMBUHAN DAN HASIL LEMPUYANG GAJAH {Ztngiber zerumbet (L.) J.E. Smith}
[Effect of Pretreatment and Growth Media on the Growth and yield of Lempuyang Gajah
{Ztngiber zerumbet (L.) J.E. Smith}]
Sri Budi Sulianti 219

KOMUNIKASI PENDEK (SHORT COMMUNICATION) MAKALAH HASIL RISET

PENGARUH MEDIA TUMBUH TERHADAP PERKECAMBAHAN BUI TANAMAN LO
[Filcus racemoca L. var. elongata (King) Barrer}
[The Effect of Gwoth Media on Seed Germination of Lo {Ficus racemoca L. var. elongata (King)
Barrer}
Solikin 225

VI
 Berita Biologi 9(2) - Agustus 200S

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIBAKTERI MINYAK ATSIRI

DAUN KEMBANG BULAN {Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray}1
[Isolation and Identification of Antibacterial Compounds from the Essential Oil
of Japanese Sunflower {Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray Leaves}]

Hartati Soetjipto E \ Lusiawati Dewi dan Sentot Adi Prayitno

Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Matematika
Universitas Kristen Satya Wacana
Jin Diponegoro 52-60, Salatiga 50711
*e-mail: hartatis2003@,vahooxom

ABSTRACT
Isolation and identification of chemical compounds and antibacterial compounds of the essential oil of Kembang bulan or Japanese
sunflower {Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray} leaves showed that the essential oil contain 29 components. The main
components were caryophyllene (27.76%), nerolidol (21.81%), caryophyllene oxide (7.06%), copaene (6.41%) and
bicylogermacrene (4.90%). The oil was screened for their antibacterial activity through bioautography method. Two antibacterial
spots which had Rf 0.49 and Rf 0.61were obtained. The spot with Rf 0.49 was a mixture of 21 compounds with main compounds
were heneicosane, nonacosane and tetratetracontane, while the spot with Rf 0.61 consisted of 22 compounds, which the main
compound was nerolidol.

Kata kunci: Aktivitas antibakteri, minyak atsiri, kembang bulan, Japanese sunflower, Tithonia diversifolia

PENDAHULUAN pangan sebagai flavour maupun pengawet, kosmetik

Selain Shigella sp. dan Campylobacter,
sebagian besar kasus diare di Indonesia disebabkan
oleh Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Vibrio
cholerae dan Salmonella sp. (Dzulkamain, 1996 -dalam:
Ajizah, 2004). Indonesia sebagai negara tropis memiliki
iklim yang sangat mendukung untuk berkembangnya
mikroba patogen penyebab penyakit infeksi. Dengan
beban masyarakat yang semakin berat, kemiskinan
meningkat nampaknya harga obat semakin tidak
terjangkau oleh sebagian masyarakat; maka dari itu tren
masyarakat untuk kembali menggunakan obat
tradisional yang diperoleh dari bahan alam menjadi
semakin marak.
Minyak atsiri merupakan salah satu senyawa
hasil metabolit sekunder yang akhir-akhir ini telah
menarik perhatian dunia, karena diketahui memiliki sifat
aktif biologis sebagai antibiotik sehingga dapat
dipergunakan sebagai antibakteri dan antijamur
(Yuharmen et al., 2002). Selain sifat antibakteri, minyak
atsiri atau komponen penyusunnya menunjukkan
kemampuan antivirus, antitoksigenik, antiparasitik dan
insektisida Dalam aplikasinya selain untuk pengobatan,
minyak atsiri juga banyak dimanfaatkan dalam bidang
dznfood additive pada ternak (Burt, 2004).
Indonesia yang memiliki sekitar 28.000 spesies
tumbuhan dan disinyalir lebih dari 7.000 di antaranya
berpotensi sebagai tumbuhan obat. Namun demikian
baru sekitar 283 spesies yang dapat dimanfaatkan dalam
industri obat tradisional, sedangkan sisanya masih
perlu pembuktian secara ilmiah (Pramono, 2002). Salah
satu jenis tumbuhan liar yang menghasilkan minyak
atsiri adalah kembang bulan/japanese sunflower {27-
thonia diversifolia (Hemsley) A. Gray} (Moronkola et
a/.,2007)(Gambarl).
Penelitian sebelumnya, yang dilakukan oleh
Lestari et al. (2003), melaporkan adanya efek larvisida
yang dimiliki oleh ekstrak kasar fraksi aseton bunga T.
diversifolia terhadap larva nyamuk Aedes aegypti.
Susilowati (2004), melaporkan adanya aktivitas
antibakteri pada ekstrak kasar fraksi petroleum eter,
kloroform dan etil asetat dari daun, bunga dan akar T.
diversifolia terhadap Bacillus subtilis, Staphylococ-
cus aureus, Eschericia coli dan Pseudomonas
aeruginosa. Untuk melengkapi informasi tentang
tumbuhan T. diversifolia, penelitian ini diarahkan pada
kandungan minyak atsiri daunnya, khususnya

l
Diterima: 10 Juni 2008 - Disetujui: 30 Juli 2008

155
Hartati Sutjipto, Dewi dan Prayitno - Senyawa Antibakteri Minyak Atsiri Kembang Bulan
Gambar 1. Kembang bulan/Japanese sunflower {Tithonia diversijolia (Hemsley) A. Gray}
terhadap komponen kimia yang terkandung dalam
minyak atsiri daun kembang bulan yang bertanggung
jawab terhadap sifat antibakteri. Penelitian ini bertujuan
untuk mengisolasi senyawa antibakteri minyak atsiri
daun kembang bulan (T. diversifoIia) dan menentukan
komponen kimianya melalui uji bioautografi langsung
dan Kromatografi Gas - Spektroskopi Massa (KG-SM).
BAHAN DAN METODE
Sampel daun T. diversifolia diperoleh dari
daerah Salatiga. Bahan kimia yang digunakan adalah
etanol (Merck), nurient agar (NA), nurient broth (NB),
toluen (Merck), etil asetat (Merck), eter (Merck), H2SO4
(Merck), Reagen Iodonitrotetrazolium (INT) dan
akuades. Sedangkan bakteri uji yang digunakan adalah
Staphylococcus aureus (FNCC 0047), Bacillus subtilis
(ATCC 6051), Escherichia coli (IFO 0091) dan
Pseudomonas aeruginosa (FNCC 0063).
Peralatan yang digunakan adalah satu set alat
destilasi uap (clavenger), spektrofotometer - uv (
Shimadzu UV Mini 1240 UV-Vis), mikropipet, inkas, satu
set alat kromatografi gas - spektroskopi massa (
Shimadzu QP201 OS).
Metode
Distilasi
Sampel berupa daun segar yang dipotong kecil-
kecil, diukur kadar airnya kemudian didistilasi dengan
metode destilasi uap menggunakan alat clavenger.
Minyak yang diperoleh dikeringkan dengan
156
menambahkan drying agent, kemudian disaring dan
dihitung rendemennya.
Rendemen minyak atsiri ditentukan dengan
perhitungan sbb.:
massa minyak vang diperoleh
massa sampel yang digunakan
Cam pengukuran kadar air
Satu gram daun yang sudah dipotong kecil-kecil,
dimasukkan dalam cawan petri yang telah ditimbang
dengan menggunakan neraca analitis Mettler H80
Kemudian cawan dioven pada suhu 105 C selama 2
jam dan didinginkan dalam desikator hingga mencapai
suhu ruang. Selanjutnya cawan ditimbang untuk
diketahui penyusutannya. Proses tersebut diulangi
berkali-kali hingga diperoleh hasil yang konstan. Kadar
air sampel diperoleh dengan rumus sbb.:
Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
KLT minyak atsiri dilakukan dengan
menggunakan fase diam silika gel 60 F254 pada lempeng
aluminium dan fase gerak berupa campuran pelarut
toluen: etil asetat (93 : 7). Untuk visualisasi spot yang
muncul dilakukan di bawah sinar UV254, UV350 dan
disemprot dengan larutan H2 SO4 50%

Kromatogrqfi Gas-Spektroskopi Massa (KGSM)
Identifikasi komponen kimia minyak atsiri daun
dilakukan dengan menggunakan alat kromatografi gas
- spektroskopi massa (SHIMADZU QP2010S) di
Laboratorium Kimia Organik, Fakultas MIPA-Univer-
sitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Jenis kolom yang
digunakan adalah Rtx-5MS, panjang 30 meter dan ID
sebesar 0,25 mm. Kondisi pengoperasian alat
menggunakan suhu pemanasan kolom: 80 C selama S
menit, suhu injeksi: 280 C selama 34 menit, mode injeksi
dengan split ratio sebesar 33:1 dan gas pembawa
berupa helium dengan tekanan 13,7 KPa, total aliran:
19,2 ml/menit, aliran kolom: 0,48 ml/menit serta kelajuan
linier: 25,4 cm/detik. Sedangkan untuk SM dengan
kondisi sbb: waktu awal (start time) 3 menit kemudian
berlangsung sampai 40 menit (end time), interval 0,50
detik dengan scan speed1250, awal m/v sebesar 33,00,
dan berakhir m/v 600. Penentuan jenis komponen
senyawa dilakukan dengan bantuan komputer
menggunakan perangkat data base Willey 7, NIST12
dan N1ST 62 Library.
Uji antibakteri dengan metode Bioautografi
Langsung (Hamburger dan Cordell, 1987)
Metode bioautografi langsung menggunakan
lempeng KLT yang dielusikan dalam pelarut toluen:
etil asetat (93 :7). Selanjutnya lempeng KLT disemprot
dengan suspensi bakteri dalam nutrient broth (NB)
cair dan diinkubasi pada suhu 37C selama 24 jam dalam
bejana kaca. Untuk visualisasi digunakan reagen
pewama iodonitrotetrazolium 5 mg/ml.
Isolasi senyawa antibakteri minyak atsiri daun
Isolasi komponen senyawa antibakteri
penyusun minyak atsiri daun dilakukan dengan
menggunakan metode kromatografi preparatif dengan
Gambar 2. Kromatogram minyakatsiri daun T. diversifolia
Berila Biologi 9(2) - Agustus 2008
fase diam silika gel 60 F254 dengan alas kaca yang telah
diaktifkan dalam oven dengan suhu 105 C selama 10
menit dan fase gerak toluen : etil asetat = 93 : 7. Hasil
pengerokan spot senyawa antibakteri dilarutkan dalam
pelarut yang sama secukupnya tetapi sesedikit
mungkin, kemudian disaring dan dipekatkan dengan
dialiri gas Nitrogen. Selanjutnya hasil pemekatan
disimpan dalam botol sampel siap untuk dianalisa lebih
lanjut dengan menggunakan kromatografi gas-
spektroskopi massa (KG-SM).
HASIL
Distilasi Minyak Atsiri Daun
Distilasi uap dengan alat clavenger terhadap
daun segar T. diversifolia dengan purata kadar air
86,10% menghasilkan minyak atsiri dengan purata
rendemen sebesar 0,054 %.
Identifikasi Komponen Kimia Minyak Atsiri Daun
Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Hasil pemisahan KLT dengan larutan pengembang
toluen: etil asetat = 93 :7, dan reagen visualisasi H2SO4
50% menghasilkan 7 buah spot masing-masing dengan
nilaiRfO,16,0,28,0,41,0,51,0,67,0,76dan0,95.
Kromatografi Gas - Spektroskopi Massa (KGSM)
Hasil analisa minyak atsiri T. diversifolia dengan
KG-SM menunjukkan adanya 26 puncak yang muncul
pada kromatogram (Gambar 2).
Sedangkan analisa data hasil spektroskopi massa
dilakukan dengan membandingan spektra senyawa
sampel minyak atsiri daun dengan data base Wiley
dan NIST, yang diperlihatkan pada Gambar 3.
Spektrum a, (sampel) merupakan spektrum dari
puncak bernomor 4 (Gambar 2), dan memiliki
fragmentasi yang serupa dengan spektrum a2(Wiley),
157
Hartati Sutjipto, Dewi dan Prayitno - Senyawa Antibakteri Minyak Atsiri Kembang Bulan
yang teridentifikasi sebagai senyawa kariofilen,
sehingga dapat disimpulkan bahwa puncak bernomor
4 (Gambar 2), merupakan puncak dari senyawa
karyofilene. Dengan cara yang sama spektra dari
puncak bernomor 14 (Gambar 2) jugamemiliki spektra
yang serupa dengan b2 (Wiley) (Gambar 4), yang
teridentifikasi sebagai senyawa nerolidol, sehingga
dapat disimpulkan bahwa puncak bernomor 14 (Gambar
2) adalah senyawa nerolidol.
Dengan cara yang sama pula dilakukan
pengidentifikasian terhadap tiap-tiap puncak dari
komponen penyusun minyak atsiri daun (Gambar 2).
Komponen penyusun minyak atsiri daun yang telah
teridentifikasi disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1 menunjukkan adanya 11 komponen
dengan kadar lebih besar dari 2%. Jika ditinjau dari
rumus molekulnya, 10 komponen yang ada termasuk
dalam golongan seskuiterpenoid, yaitu kariofilen
(nomor puncak 4) sebesar 27,76%, nerolidol (nomor
puncak 14) sebesar 21,81%, kariofilen oksida (nomor
puncak 17) sebesar 7,06%, kopaen (nomor puncak 1)
sebesar 6,41%, bisiklogermakren (nomor puncak 10)
sebesar 4,90%, juniper kamfor (nomor puncak 21)
sebesar 3,30%, aromadendren (nomor puncak 20)
sebesar 2,36%, a-humulen (nomor puncak 5) sebesar
2,34%, spatulenol (nomor puncak 16) sebesar 2,27%
dan P-maalien (nomor puncak 2) sebesar 2,25%.
Sedangkan satu komponen yang lain tidak
termasuk dalam golongan sesquiterpenoid, yaitu
Gambar 3. Perbandingan Spektra sampel dengan data base Wiley
(a,) kariofilen Sampel (a2) kariofilen Wiley
158
senyawa androstan-3-ol (nomor puncak 13) sebesar
2,46% di mana senyawa ini termasuk dalam golongan
diterpenoid. Selain ke 26 puncak di atas (97,51 % yang
berhasil teridentifikasi) masih terdapat sekitar 2,49 %
komponen yang tidak terdeteksi.
Isolasi Senyawa Antibakteri Minyak Atsiri Daun
Diperoleh dua fraksi senyawa antibakteri
masing-masing dengan kisaranRf 0,3 7-0,49 (fraksi 1)
dan 0,55-0,61 (fraksi 2). Selanjutnya, masing-masing
senyawa antibakteri tersebut diuji kembali aktivitasnya
dengan menggunakan metode yang sama (bioautografi
langsung). Hasil pengujian ulang menunjukan bahwa
kedua spot fraksi tersebut masing-masing merupakan
spot tunggal dan betul-betul bersifat antibakteri.
Identifikasi Fraksi Antibakteri Minyak Atsiri Daun
dengan KG-SM
Hasil analisa KGSM fraksi 1 (Rf 0,37 - 0,49) dan
fraksi 2 (Rf0,55- 0,6 l)ditampilkan pada Gambar 6
dan 7.
Hasil analisa menunjukkan bahwa fraksi 1
dengan Rf (0,37-0,49) tersusun dari 21 komponen kimia
dengan 5 senyawa dominan didalamnya yang memiliki
kadar diatas 7% yang ditunjukkan oleh masing- masing
puncak bernomor 1,2,3,4 dan 5 (Gambar 6, Tabel 2).
Bila dibandingkan dengan komponen penyusun
minyak atsiri yang berhasil teridentifikasi pada Tabel
1, terlihat bahwa komponen penyusun senyawa
antibakteri pada Tabel 2 tidak terdapat pada Tabel 1.
Hal ini diduga terkait dengan jumlahnya yang sangat
 Berita Biologi 9(2) Aguslus 2008

100-

Gam bar 4. Perbandingan Spektra sampel dengan data base Wiley

(b,) nerolidol Sampel (b2) nerolidol Wiley

Tabel 1. Komponen kimia penyusun minyak atsiri daun T. diversifolia

No Indeks Kandungan
Komponen kimia Rumus molekul BM
puncak retensi (%)
1 15,253 kopaene C 15 H 24 204 6,57
2 15,415 (3-maalien C15H24 204 230
3 15,869 azulen C15H24 204 0,67
4 16,018 kariofilen C I5 H 2 4 204 28,47
5 16,493 a-humulen C.JHM 204 2,40
6 16,654 1-heksadesena C16H32 224 1,46
7 16,756 farnesen C 15 H 2 4 204 1.15
8 16,869 germakren D Q5H24 204 2.01
9 16,966 |3-selinen C15H24 204 0,63
10 17,095 bisiklogermakren Q5H24 204 5.03
11 17,236 benzenasetaldehida C,,H M O 162 0,67
12 17,368 A-kadinen C15H24 204 1,61
13 17,580 androstan-3-ol C22H36O2 332 2,52
14 17,779 nerolidol CsH^O 222 22,37
15 17,914 4,8,12-tetradekatriena 1 CnHaO 248 0,60
16 18,257 spatulenol C15H24O 220 233
17 18,361 kariofilen oksida C I5 H 2 4O 220 7,24
18 18,689 naftalena CioH 18 138 0,90
19 18,828 neoklovenoksida alkohol Q5H24O 220 0,51
20 18,999 aromadendren C15H24 204 2,42
21 19,254 juniper kamfor C.5H26O 222 3,38
22 19,454 trisiclo 7.3.0.0(2,6)-8-dodesen-3-ol C I2 H 18 O 178 0,70
23 19,579 tetradekanal C 14 H28O 212 1,17
24 21,066 2-pentadekanon C18H36O 268 0,44
25 21,543 oksasikloheksadekan - 2 - o n C16H30O2 254 0,88
26 23.897 fitol C20H40O 296 1.54
Total teridentifikasi 99,97

159
Hartati Sutjipto, Dewi dan Prayitno - Senyawa Antibakteri Minyak Atsiri ICembang Bulan

Gambar 5. Profil bioautografi fraksi antibakteri minyak Gambar 6. Kromatogram fraksi 1 (Rf 0,37 - 0,49)
atsiri daun T. diversifolia terhadap bakteri
E. coli. A. fraksi 1, B. fraksi 2

Tabel 2. Komponen kimia penyusun fraksi 1

Indeks Rumus Kandungan

No Puncak Komponen Kimia BM
Retensi Molekul
1 25,054 Heneikosan tipe 1 C21H44 296 7,62
2 26,776 Heneikosan tipe 2 C21H44 296 15,69
3 28,765 Heneikosan tipe 3 C21H44 296 23,01
4 31,166 nonakosan C29H60 408 16,27
5 34,081 tetratetrakonian C44H90 619 9,40

Gambar 7. Kromatogram fraksi 2( Rf 0,55 - 0,61)

Tabel 3. Komponen kimia penyusun fraksi 2

No Indeks Komponen Kimia Rumus BM Kandungan

Puncak Retensi Molekul (%)
1 15,794 kariofilen C15H24 204 2,43
2 17,566 nerolidol C15H26O 222 67,71
3 18,155 kariofilen oksida C15H24O 220 11,36
4 18,325 delta - neokloven Q5H24 204 5,06
5 18,632 1-naftalenamin C15H24O 220 6,73
6 18,792 1-naftalenol C15H26O 222 2,93
7' 22,935 d - nerolidol C15H26O 222 3,77
Total teridentifikasi

160

kecil sehingga tidak terdeteksi (termasuk dalam 2,49%
yang tidak terdeteksi). Dugaan ini didukung pula oleh
kromatogram fraksi 1 (Gambar 6) yang menunjukan
garis dasar (base line) yang diperlebar.
Fraksi 2 Rf 0,55-0,61 juga merupakan campuran
dari 22 komponen penyusun, dengan komponen
utamanya adalah nerolidol (Gambar 7, Tabel 3).
Dari tujuh komponen yang dapat diidentifikasi
dalam fraksi 2, terlihat bahwa kadar senyawa nerolidol
sangat dominan, yaitu sebesar 20,32%, sedangkan
senyawa yang lain hanya memiliki kadar dibawah 3%.
Senyawa dengan nomer puncak 4 (delta-neokloven), 5
(1-naftalenamin) dan 6 (1-naftalenol) tidak terdeteksi
dalam Tabel 1, dengan alasan yang sama, hal ini diduga
karena kadarnya yang terlalu kecil.
PEMBAHASAN
Bila dibandingkan dengan penelitian Moronkola
et al. (2007), terdapat perbedaan susunan komponen
kimia penyusun minyak atsiri daun T. diversifolia. Hasil
penelitiannya dilaporkan, bahwa komponen utama
minyak atsiri daun T. diversifolia terdiri dari senyawa
a-pinen (32,9%), p-kariofilen (20,8 %), germakren D
(12,6%), |3-pinene (10,9%) dan 1,8-sineol (9,1%).
Sedangkan pada penelitian ini minyak atsiri daun T.
diversifolia didominasi oleh p-kariofilen sebesar
27,76% dan nerolidol 21,81%. Menurut Guenther (1987),
komposisi minyak atsiri suatu spesies tanaman yang
sama, jika tumbuh di tempat berbeda dimungkinkan
memiliki susunan yang berbeda pula. Karena faktor
lingkungan tempat tanaman tersebut tumbuh seperti
kondisi tanah dan iklim sangat menentukan komposisi
minyak atsiri yang dihasilkan. Meskipun demikian,
antara Moronkola et al. (2007) dan penelitian ini tetap
terdapat persamaan pada beberapa komponen
penyusunnya, yaitu sama-sama mengandung senyawa
P-kariofilen dan germakrene D.
Data pada Tabel 2, memperlihatkan bahwa fraksi
1 didominasi oleh sebuah komponen yang sama, yang
muncul pada 3 puncak yang berbeda yaitu senyawa
heneikosana, di mana senyawa ini muncul pada puncak
no. 1,2 dan 3 dengan indeks retensi 25,054,26,776 dan
28,765 serta kadar masing-masing puncak sebesar
7,62%, 15,69% dan 23,01%. Sedangkan senyawa
dominan yang lain adalah nonakosana sebesar 16,27%
Berita Biologi 9(2) - Agustus 2008
dan tetratetrakontana yang muncul pula dengan dua
indeks retensi yang berbeda, yaitu 31,166 dan 34,081
dengan kadar 9,40% dan 4,69%. Munculnya lebih dari
satu puncak untuk satu senyawa yang sama
dimungkinkan karena terjadinya proses isomerisasi
(Ristanti et al., 2006).
Data pada Tabel 3 menunjukkan bahwa
senyawa antibakteri kedua yang berhasil diisolasi
didominasi oleh nerolidol. Nerolidol merupakan
seskuiterpen yang sering dijumpai pada minyak atsiri
tumbuhan. Lee et al. (2007) melaporkan bahwa nerolidol
positif memiliki efek antijamur. Senyawa nerolidol selain
sering dimanfaatkan sebagai flavouring agent, juga
memiliki kemampuan sebagai antileishmania (Arruda
et al., 2005); bahkan Shaheen et al. (1998), melaporkan
bahwa senyawa nerolidol sangat efektif digunakan
sebagai agen antibakteri. Selain itu, Erindyah dan
Maryati (2002) juga melaporkan bahwa senyawa
kariofilen juga memiliki aktivitas sebagai senyawa
antibakteri. Meskipun ditemukan dalam jumlah yang
relatif kecil, diduga senyawa kariofilen masih memiliki
andil dalam menentukan efek antibakteri dari fraksi 2.
KESMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan
terhadap minyak atsiri daun Tithonia diversifolia maka
dapat disimpulkan bahwa minyak atsiri daun terdiri dari
29 komponen kimia; lima di antaranya adalah kariofilen
yang merupakan komponen utama sebesar 27,76%,
nerolidol 21,81%, kariofilen oksida 7,06%, kopaen 6,41 %,
bisiklogermakren 4,90%.
Dua fraksi antibakteri yang berhasil dipisahkan,
masing-masingmemiliki Rf antara 0,37-0,49 dan 0,55-
0,61, dimana fraksi 1 dengan Rf 0,37-0,49 didominasi
oleh senyawa heneikosana nonakosana dan
tetratetrakontana, sedangkan fraksi 2 dengan Rf 0,61
didominasi oleh nerolidol.
DAFTAR PUSTAKA
Arruda DC, FL D'Alexandri, AM Katzin and SRB
Uliana. 2005. Antileishmanial Activity of the Ter-
pcne Nerolidol. Antimicrobial Agents and Chemo-
therapy 49(5), 1679-1687.
Burt S. 2004. Essential oils : their antibacterial proper-
ties and potential applications in foods-a review.
International Journal of Food Microbiology 94,
223-253.
161
Hartati Sutjipto, Dewi dan Prayitno - Senyawa Antibakteri Minyak Atsiri Kembang Bulan
Dzulkarnain B dan DCA Sundari. 1996. Tanaman Obat
Bersifat Antibakteri di Indonesia. Dalam: A Ajizah.
2004. Sensitivitas Salmonella typimurium terhadap
ekstrak daun Psidium guajava L. Bioscientiae 1(1),
31-38.
Erindyah RW dan Maryati. 2002. Uji aktivitas antibakteri
minyak atsiri pinus (Pinus merkusii Jung de Vr.)
terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia
coli.Jurnal Ppenelitian Sains & Teknologi 3(2), 130-
139.
Guenther E. 1987. Minyak Atsiri. Jilid 1, Universitas In-
donesia, Jakarta.
Hamburger MO and GA Cordell. 1987. A direct bioauto-
graphic TLC assay for compounds possesing Anti-
bacterial Activity. Journal of Natural Products 50,
19-22.
Lee Sook-Jin, Han Je-Ik, Lee Geun-Shik, Park Mi-Jin,
Choi Ing-Gyu, Na Ki-Jeong and Jeung Eui-Bae.
2007. Antifungal effect of eugenol and nerolidol
against Microsporum gypseum in a guinea pig model
(medicinal chemistry). Biological and Pharmaceuti-
cal Bulletin 30(1), 184-188.
Lestari R, H Soetjipto and AI Kristijanto. 2003. Larvi-
cidal effect of Japanese sunflower (Tithonia
diversifolia (Hemsley) A. Gray) extract against
mosquitoes larvae Aedes aegypti Linnaeus. Asian
Symposium on Medicinal Plants, Spices and Other
Natural Products XI. Kunming, China, October 26-
30,2003.
Moronkola DO, IA Ogunwande, TM Walker, Setzer WN
and Oyewole IO. 2007. Identification of the main
volatile compounds in the leaf and flower of Titho-
162
nia diversifolia (Hemsl.) Gray. Journal of Natural
Medicines 61(1), 63-66. Springer, Japan.
Pramono E. 2002. Prospek dan potensi pengembangan
komoditas agromedicine di Indonesia. Prosiding
Simposium Nasional II Tumbuhan Obat dan
Aromatik APINMAP, Bogor 8-10 Agustus 2001
(I), 31 - 37. BP Naiola et al. (Editor). Pusat Penelitian
Biologi-LIPI, Bogor.
Ristanti FW, H Soetjipto dan KH Timotius. 2006.
Identifikasi citral dan aktivitas antibakteri minyak
atsiri daun kemangi (Ocimum basilicum Linn.).
Prosiding Seminar Nasional Kimia dan Pendidikan
Kimia, Semarang 11 November 2006,239 -246. WST
Astuti et al. (Editor). Jurusan Kimia, Fakultas
MIPA-Universitas Negeri Semarang.
Shahecn EA, Ikawa JY and Blum RL. 1998. US Patent
6361787, Enhanced antimicrobial composition,
March 26, 2002.
Susilowati IT. 2004. Pengujian aktivitas antibakteri ekstrak
kasar daun, bunga dan akar tumbuhan kembang bulan
[Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray] dalam
berbagai fraksi pelarut. Fakultas Sains dan
Matematika, Universitas Kristen Satya Wacana,
Salatiga.(belumdi dipublikasi).
Yuharmen, Y Eryanti dan Nurbalatif 2002. Uji aktivitas
antimikroba minyak atsiri dan ekstrak metanol
lengkuas (Alpinia galanga). Jurnal Natur Indonesia
4(2).
http://www.unri.ac.id/iurnal/iurnal natur/vol4(2)/
vuharmen.pdf