Biosorpsi uranium dan logam berat menggunakan beberapa jamur local

yang diisolasi dari pupuk fosfat

ABSTRAK

Sejumlah 26 kultur jamur diisolasi dari berbagai sumber fosfat, termasuk pupuk fosfat dan fosfat batu.
Jumlah dan persentase isolat tertinggi diperoleh dari sampel tri fosfat dan sampel fosfat batu (9 isolat
dengan 34,6% untuk setiap sampel) dan kemudian 8 isolat dengan 30,8% pupuk monofosfat. Isolat ini
diuji untuk logam berat biosorpsi pada media padat ditambah dengan ion logam yang berbeda pada
konsentrasi 50 ppm. Delapan belas dari 26 isolat mampu tumbuh pada medium padat yang
mengandung logam berat. Isolat terpilih juga diperiksa untuk menghilangkan logam berat dengan
konsentrasi yang berbeda (0-150 ppm) dalam medium cair. Di antara 18 kultur jamur, 5 isolat dipilih
karena kemampuannya yang tinggi terhadap toleransi terhadap kadar logam berat yang tinggi (150
ppm), dan ditemukan bahwa pertumbuhan jamur dipromosikan dengan adanya U, Cr5 + Cu ++ untuk
FR1 (0,026, 0.133 dan 0,18 g / 100 ml), Cr5 + untuk FR7 (0,246 g / 100 ml), Zn ++, Co ++ dan Pb ++ untuk
FR13 (0,219, 0,371 dan 0,303 g / 100 ml), U untuk FR15 (0.174 g / 100 ml) dan Zn ++ , Co ++ dan Pb ++
untuk FR16 (0. 203, 0.385 dan 0.312 g / 100 ml). Isolat ini FR1 & FR7, FR13, FR15 & FR16 termasuk dalam
genus Aspergillus yang diidentifikasi oleh sifat morfologi mereka.

PENDAHULUAN

Logam berat dianggap unsur kimia yang meliputi 69 elemen, 16 diantaranya sintetis. Beberapa elemen
ini sangat beracun bagi manusia, bahkan pada konsentrasi sangat rendah (Roane dan Pepper, 2000;
Wang dan Chen, 2006 dan Sahni, 2011). Logam berat utama yang terkait dengan pencemaran
lingkungan, dan yang menawarkan bahaya potensial bagi ekosistem, adalah tembaga (Cu), seng (Zn),
perak (Ag), timbal (Pb), merkuri (Hg), arsenik (As), kadmium (Cd), kromium (Cr), strontium (Sr), cesium
(Cs), kobalt (Co), nikel (Ni), thallium (Tl), timah (Sn) dan vanadium (V) (Wang dan Chen, 2006) . Secara
umum, ion logam dapat diklasifikasikan sebagai berikut: (1) penting dan penting untuk metabolisme (Na,
K, Mg, Ca, V, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn dan Mo); (2) logam berat beracun (Hg, Cr, Pb, Cd, As, Sr, Ag, Si, Al, Tl),
yang tidak memiliki fungsi biologis (dalam istilah ekotoksikologi, bentuk heksavalen
ion Hg, Cr, Pb dan Cd adalah yang paling berbahaya); (3)
radionuklida (U, Rn, Th, Ra, Am, Tc), yang bersifat radioaktif
isotop dan, meskipun beracun untuk sel, mereka tetap saja
penting dalam prosedur kedokteran nuklir; 4) semi-logam atau
metaloid (B, Si, Ge, As, Sb, Te, Po, At, Se), yang berbeda
efek biologis pada logam. Namun, logam sebagian besar
Hadir di lingkungan dalam kationik dan anionik
bentuk dalam semimetals, dan As sering diklasifikasikan sebagai heavy metal
(Ahluwalia dan Goyal, 2007).

Sampai saat ini, banyak metode fisikokimia telah digunakan untuk menghilangkan logam berat dari
lingkungan. Presipitasi kimiawi dan pertukaran ion adalah yang paling banyak digunakan, namun
oksidasi / reduksi, filtrasi, perlakuan elektrokimia, reverse osmosis, teknologi membran dan pemulihan
penguapan juga umum terjadi (Ahluwalia dan Goyal, 2007). Namun, jika konsentrasinya terlalu rendah,
teknik ini memiliki biaya yang berlebihan dan tidak efisien (Vullo et al., 2008). Untuk mengatasi masalah
ini, proses biologis telah dilakukan. Biosorpsi adalah proses di mana beberapa mikroorganisme, seperti
bakteri,
jamur atau alga, digunakan untuk menghilangkan kontaminan lingkungan. Beberapa mikroorganisme
mampu mengeluarkan logam berat dan polutan lainnya dari lingkungan. Ini berarti bahwa
mikroorganisme dapat digunakan sebagai alat bioremediasi yang murah dan efisien (Wang dan Chen,
2009). Proses yang terlibat dalam detoksifikasi logam berat meliputi penyerapan, adsorpsi, pertukaran
ion, kompleksitas permukaan dan pengendapan (Munz oz et al., 2012)

Mikroorganisme dapat bertahan di semua lingkungan karena kemampuan bawaan mereka untuk
mengambil polutan sebagai nutrisi seperti logam berat karena kemampuan absorptif / akumulatif.
Mikroorganisme tanah diketahui memainkan peran kunci dalam mobilisasi dan imobilisasi kation logam,
sehingga mengubah ketersediaannya pada tanaman (Birch dan Bachofen, 1990). Spesies seperti
Penicillium, Aspergillus, Pseudomonas, Sporophyticus, Bacillus dan Phanerochaete terbukti sangat
berguna untuk menghilangkan logam berat seperti kromium dan nikel (Congeevaram et al., 2006;
Abdelaty et al., 2008; Abdelaty et al. , 2011; Kumar et al., 2011 dan Nanda dkk., 2011).

Pekerjaan saat ini bertujuan untuk mengevaluasi kemampuan spesies jamur yang terisolasi dari
beberapa pupuk fosfat untuk menghilangkan uranium dan beberapa logam beracun berat.

Material dan Metode

Sampling

Tiga sampel representatif (pupuk monofosfat, pupuk trifosfat dan fosfat batu) dikumpulkan dari
berbagai sumber ekologis dalam kantong plastik steril. Sampel pupuk monofosfat dan tri-fosfat
dikumpulkan dari Pupuk Abu Zaabl & Chemical Industries Co, dan fosfat batu diperoleh dari Dataran
Tinggi Abu Tartur Sahara Barat.

Medium (1): Agar kentang-dekstrosa (PDA) (Difco Manual,

1984) digunakan untuk isolasi pemeliharaan dan pelestarian isolat jamur. Komposisinya adalah sebagai
berikut (g 1: kentang; 200; dekstrosa, 20; agar, 20 dan disesuaikan dengan pH 5.0.

Medium (2): medium agar Czapek Dox (Thom dan Church, 1926) digunakan untuk memperkirakan
kuantitatif dan kualitatif logam berat yang menghilangkan jamur. Komposisinya adalah sebagai berikut
(g 1: Sucrose, 30; NaNO3, 3; K2HPO4, 1; KCl, 0.5; FeSO4, 0,1; MgSO4? 7H2O, 0,5; agar, 20 dan
disesuaikan dengan pH 5.0. Komposisi medium di atas dimodifikasi dengan penambahan ion logam yang
berbeda terhadap logam berat biosorpsi. Kateter doap Czapek Dox sama dengan medium agar Czapek
Dox tanpa menambahkan agar-agar.

Isolasi logam berat menghilangkan jamur

Sepuluh gram sampel representatif dalam pupuk fosfat disuspensikan dalam 90 ml air keran steril dan
dikocok secara menyeluruh selama 10 menit. Logam berat yang menghilangkan jamur diisolasi dari
sampel yang dikumpulkan dengan teknik lempeng menyebar menggunakan media 1. Pelat diinkubasi
pada 28-30 C selama 24-48 jam. Dikembangkan
koloni diambil, dimurnikan dan diawetkan pada 5 C pada agar miring untuk penelitian lebih lanjut.

Screenings of the most efficient heavy metals removing fungi

Pemutaran isolat yang paling efisien dilakukan dengan menggunakan dua tahap. Pada tahap skrining
primer (perkiraan kualitatif), isolat jamur diinokulasi pada medium plate agar (medium 2) ditambah
dengan berbagai garam logam berat dan konsentrasi garam logam dipertahankan pada suhu 50 ppm
medium. Pelat diinkubasi pada suhu 28 C selama 48 jam. Metode yang sama dilakukan dengan pelat
kontrol (pelat tanpa logam). Setiap sampel dibuat rangkap tiga. Akhirnya, piring diinkubasi pada suhu 28
C selama 48 jam untuk mengamati pertumbuhan jamur pada media padat.

Pada tahap skrining sekunder, estimasi kuantitatif dilakukan di labu Erlenmeyer terpasang (250 ml) yang
mengandung 100 ml media kental Czapek Dox (medium 2) ditambah dengan kisaran konsentrasi logam
berat. (25-150 ppm). Jadi, 7 sumber logam berat seperti, NiCl2? 7H2O, ZnSO4? 6H2O, CdSO4? 7H2O, Pb
(NO3), K2Cr2O7, UO2 dan / atau CuSO4? 5H2O diaplikasikan secara terpisah untuk memberikan
konsentrasi Ni ++ yang berbeda, Zn ++, Cd ++, Ion Pb ++, Cr +++++, U atau / dan Cu ++. Theses fluks
diinokulasi dengan 2% isolat yang diuji dan diinkubasi pada 28-30 hari C 7 hari. Pada akhir periode
inkubasi, sampel kultur jamur disaring dengan menggunakan kertas saring no. 1 dicuci dua kali dan
dikeringkan pada suhu 70 C sampai berat konstan.

HASIL DAN DISKUSI

Isolasi jamur penghilang logam berat

Dalam penelitian ini, 26 kultur jamur diisolasi dari pupuk fosfat dan sampel bijih fosfat yang berbeda
pada medium 2. Jumlah isolat tertinggi diperoleh dari batuan fosfat (9 isolat) dan pupuk tri-fosfat (9
isolat) dan diikuti oleh mono fosfat pupuk (8 isolat jamur). Persentase distribusi isolat mikroba
diilustrasikan pada Gambar 1. Angka persentase isolat tertinggi ditunjukkan pada sampel yang
dikumpulkan dari pupuk fosfat dan triposfat, yang 34,6% diikuti isolat yang diperoleh dari isolat pupuk
mono fosfat (30,8%).

Pemutaran logam berat yang paling efisien mengeluarkan isolat

Perkiraan kualitatif
Pemilihan awal untuk menghilangkan isolat jamur didasarkan pada kemampuan mereka untuk tumbuh
pada medium padat 2 ditambah dengan ion logam yang berbeda pada 50 ppm. Setelah 48 jam masa
inkubasi, pertumbuhan isolat jamur dengan adanya ion logam seperti Co ++, Cd ++, Cu ++, Cr5 + Zn ++,
Pb ++ dan U terdeteksi dan dicatat pada Tabel 1. Data menunjukkan bahwa di antara 26 isolat jamur ini,
18 isolat memberi tanda pertumbuhan pada lapisan agar ditambah dengan ion logam dan menunjukkan
hasil positif (+). Data yang diilustrasikan pada Gambar 2 menunjukkan jumlah distribusi ion logam yang
mengeluarkan isolat. Ini jelas menunjukkan kemampuan semua 26 isolat jamur untuk tumbuh di
hadapan Zn ++ dan Cu ++ sementara hanya 18 dari 26 isolat jamur yang memberi hasil positif
(pertumbuhan) dengan adanya ion logam lainnya (Co ++, Cd ++, Cr5 +, Pb ++ dan U).
Hasil serupa diperoleh oleh Valix dan Loon (2003). Mereka menemukan bahwa pertumbuhan hifa
Aspergillus flavus dan A. niger yang terpapar logam berat dipetakan menggunakan indeks toleransi.
Spesies genus Fusarium dan lainnya telah diisolasi dari tanah yang terkontaminasi, dan kemampuan
mereka untuk mentolerir adanya logam berat yang berbeda telah diselidiki oleh Zafar et al. (2007).
Selain itu, Dwivedi dkk. (2012) jamur toleran logam berat terisolasi dari sampel limbah, lumpur dan
limbah industri yang terkontaminasi logam berat (Pb, Cr dan Ni) yang menemukan banyak strain toleran
terhadap Pb, beberapa toleran terhadap Cr dan beberapa toleran terhadap Ni pada 25 ppm. Semua
strain jamur menunjukkan pertumbuhan pada konsentrasi logam yang lebih rendah namun terjadi
penurunan dengan adanya konsentrasi yang lebih tinggi karena peningkatan panjang fase lag
dibandingkan dengan sampel kontrol (Iram et al., 2012). Juga, Dwivedi dkk. (2012) mengamati bahwa
penghambatan beberapa isolat jamur pada konsentrasi logam berat yang lebih tinggi terutama terkait
dengan berbagai faktor biologis. Efek toksik dari konsentrasi logam berat yang lebih tinggi terhadap
pertumbuhan jamur telah dikenali oleh Malik
(2004).

Estimasi kuantitatif logam berat mengeluarkan isolat

Delapan belas isolat jamur dibudidayakan dalam media cair ditambah dengan ion logam yang berbeda
(Co ++, Cd ++, Cu ++, Cr + 5, Zn ++, Pb ++ dan U) pada konsentrasi yang berbeda (0-150 ppm). Data yang
diilustrasikan oleh Gambar 3 menunjukkan adanya penurunan pertumbuhan isolat jamur yang diuji
dengan meningkatkan konsentrasi ion logam yang berbeda hingga 150 ppm. Studi serupa telah
dilaporkan oleh Congeevaram et al. (2006). Ozer dan Ozer (2003) menemukan bahwa biosorpsi logam
tinggi diperoleh pada konsentrasi logam awal berkisar antara 50 sampai 100 mg l? 1 pada suhu 30 C
dan pH 5,0. Ahmed et al. (2006) melihat bahwa biosorpsi logam berat dipengaruhi oleh konsentrasi
logam awal dan jenis jamur yang diuji.

Persentase distribusi ion logam yang menghilangkan isolat jamur pada 150 ppm diilustrasikan pada
Gambar 4. Persentase pertumbuhan jamur tertinggi dalam medium ditambah dengan ion logam yang
berbeda pada 150 ppm terdeteksi pada persen Co ++ mewakili 10% dan 11% oleh FR13 & FR16, Cu ++ &
Cr + 5 mewakili 12% dan 9% oleh FR1, Cd ++ dengan 11% dan 12% oleh FR11 & FR7, Zn ++ dengan 9%,
10% dan 8% oleh FR13, FR14 & FR16, Pb ++ dengan 9% oleh FR13 & FR16 dan U mewakili
Masing 11% dan 15% oleh FR1 & FR15.

Di antara 18 kultur jamur, 5 isolat dipilih karena kemampuannya yang tinggi terhadap toleransi terhadap
kadar logam berat yang tinggi (150 ppm), dan ditemukan bahwa pertumbuhan jamur dipromosikan
dengan adanya U, Cr5 +, Cu ++ untuk FR1
(0.026, 0.133 dan 0.128 g / 100 ml), Cr5 + untuk FR7 (0,246 g / 100 ml), Zn ++, Co ++ dan Pb ++ untuk
FR13 (0.219, kemampuan untuk toleransi konsentrasi tinggi berat
logam (150 ppm), dan ditemukan bahwa pertumbuhan jamur dipromosikan dengan adanya U, Cr5 +, Cu
++ untuk FR1 (0,026, 0.133 dan 0.128 g / 100 ml), Cr5 + untuk FR7 (0,246 g / 100 ml) Zn ++, Co ++ dan Pb
++ untuk FR13 (0,219, 0,371 dan 0,303 g / 100 ml), U untuk FR15 (0.174 g / 100 ml) dan Zn ++, Co ++ dan
Pb ++ untuk FR16 (0. 203, 0.385 dan 0.312 g / 100 ml) masing seperti ditunjukkan pada Gambar 5.
Analisis statistik menunjukkan koefisien korelasi negatif yang tinggi (r) antara pertumbuhan konsentrasi
jamur dan ion logam untuk semua isolat jamur berkisar antara 0,70 sampai 0,99, kecuali FR4 dengan
adanya Cr + 5 dan FFR6 dengan adanya Zn ++ (tinggi koefisien korelasi positif r = 1). Koefisien korelasi
negatif terendah dicatat pada medium ditambah dengan Cd ++ untuk FR8 (r =? 0.30), sedangkan dengan
adanya Pb ++ untuk FR9, koefisien korelasinya rendah positif (r = 0,45).

Dari semua data sebelumnya, dapat diringkas bahwa FR1, FR7, FR13, FR15 dan FR16 adalah isolat jamur
terbaik untuk pertumbuhan medium yang dilengkapi ion logam pada konsentrasi (150 ppm). Jadi, isolat
ini dipilih untuk penelitian selanjutnya.

Identifikasi isolat yang paling efisien

Menurut sifat morfologi (bentuk mikroskopis dan warna konidia) isolat jamur FR1, FR7, FR13, FR15 dan
FR16 dikenai klasifikasi awal untuk menjadi genus Aspergillus menurut Barnett dan
Hunter, (1998).

Dalam hal ini, spesies Aspergillus yang berbeda telah dilaporkan sebagai reducer logam berat yang
efisien (Congeevaram et al., 2006). Selain itu, Dwivedi dkk. (2012) menemukan bahwa banyak isolat
toleran logam berat diidentifikasi sebagai Aspergillus niger (Pb2, Cr10, Ni19, Ni27, Ni33), dan Aspergillus
flavus (Pb7, Pb8, Ni35, Ni36), masing-masing oleh kultur laboratorium.

KESIMPULAN

Dari penelitian di atas dapat disimpulkan bahwa, beberapa kultur jamur diisolasi dari pupuk fosfat dan
fosfat batu. Lima isolat jamur ditemukan sebagai isolat yang lebih efisien untuk pertumbuhan medium
cair ditambah dengan perbedaan
logam berat dengan konsentrasi tinggi (sampai 150 ppm). Isolat ini FR1, FR7, FR13, FR15 dan FR16
diidentifikasi sebagai Aspergillus sesuai dengan sifat morfologi.