Hasil Pengamatan :

NO BAHAN WARNA AWAL SETELAH PEMBERIAN NaOH

1. Gelatin Kuning kecoklatan Merah muda
2. Tripsin Bening Merah muda

Tabel banyaknya NaOH yang digunakan pada titik akhir titrasi

Waktu pengamatan Kelompok 1 Kelompok 2 Volume rata-rata
(menit)
0 13,80 ml 13,50 ml 13,65 ml
15 15,10 ml 15,10 ml 15,10 ml
30 15,95 ml 16,40 ml 16,18 ml

Pembahasan :
Pada percobaan titrasi formol asam amino yang prinsip percobaannya berdasarkantitrasi
asam basa ini dimaksudkan untuk menentukan seberapa banyak kadar nitrogen yangterdapat di
dalam gelatin. Gelatin yang merupakan protein dan diperoleh dari jaringan kolagen hewan ini
memiliki kemampuan dapat mencampur minyak dan air sehingga menjadicampuran yang merata
disebut sebagai pengemulsi dan dapat membuat suatu campuranmenjadi stabil atau tidak
pecah selama penyimpanan disebut sebagai penstabil.Tripsin adalah salah satu jenis enzim yang
merupakan protease serin prankeasdengan spesifikasi substrat yang didasarkan pada muatan
positif rantai samping lisin dan arginin. Pada percobaan, tripsin yang digunakan dinetralkan
terlebih dahulu, karena jikadilakukan dalam suasana lain, tentunya akan merubah struktur enzim
yang ada.Perlakuan pertama, yaitu adanya penambahan indikator phenolphthalein padalarutan
gelatin dan larutan tripsin. Penambahan indikator ini dimaksudkan untuk mengetahui titik akhir
titrasi, dalam hal ini larutan dititrasi menggunakan NaOH dimanapada saat penetesan NaOH
pada masing-masing larutan titik akhir titrasinya akanditunjukkan dengan munculnya warna pink
muda. Pentetesan NaOH ini bertujuan untukmembuat larutan agar bersifat basa. Kemudian
ditambahkan HCl pada masing-masinglarutan, dimaksudkan untuk menetralkan kembali larutan
gelatin dan tripsin ditandai denganmenghilangnya warna pink muda dan pH 7-8. Larutan
kemudian dicampurkan dan diambilper 10 ml dalam waktu yang telah ditentukan. Campuran
kemudian dipanaskan di dalamwaterbath selama 10 menit. Enzim akan rusak pada suhu di atas
50C, pemanasan selama 10menit akan menyebabkan suhu berada di atas 50C, hal ini
menyebabkan terhentinyaaktivitas enzim atau membuat enzim tidak bekerja dan mengalami
proses denaturasi.Sedangkan campuran sisa untuk 10 ml selanjutnya disimpan di dalam
inkubator 38C.Campuran di dalam waterbath kemudian di angkat dan di dinginkan di kucuran
air untukselanjutnya ditambahkan formalin netral dan phenolphthalein sebagai
indikator.Formalin yang digunakan harus dalam keadaan netral agar formalin yang bersifatasam
tidak bereaksi dengan NaOH yang bersifat basa, karena jika formalin yang digunakanmasih
bersifat basa maka NaOH yang digunakan akan lebih banyak dari seharusnya.
Adanyapenambahan formalin karena formalin dapat menunjukkan suatu proses
terjadinyapemecahan protein dan formalin pada campuran dapat membentuk dimethilol, ini
berartigugus aminanya sudah terikat dan tidak akan mempengaruhi reaksi antara asam
denganbasa NaOH, sehingga titik akhir titrasi dapat diakhiri dengan tepat. Campuran
kemudiandititrasi dengan meneteskan NaOH hingga warna campuran menjadi pink
muda,penambahan NaOH ini dimaksudkan untuk mengetahui banyak atau tidaknya amonium
yangada di dalam campuran. Dalam proses ini, berarti amonium diserap oleh NaOH, karena
dalam keadaan netral asam amino akan membentuk zwitterion sehingga asam amino
yangbersifat asam akan mencari pasangannya yang bersifat basa untuk membentuk zwitterion
Dalam percobaan selanjutnya (waktu kontrol 15 menit dan 30 menit) NaOH
yangdigunakan semakin banyak. Campuran sisa yang disimpan di dalam inkubator 38C
telahdisesuaikan dengan kondisi optimum aktivitas enzim untuk bereaksi dengan substrat
dalammenghasilkan asam amino. Hal ini menyebabkan produksi asam amino semakin
lamasemakin meningkat.
Kesimpulan :

1. Percobaan titrasi formol asam amino dilakukan untuk mengetahui seberapa banyakkadar
nitrogen di dalam protein (dalam hal ini adalah gelatin).2.

2. Enzim akan rusak pada suhu tinggi.3.

3. Semakin lama waktu inkubasi, NaOH yang digunakan akan semakin banyak.4.

4. Formalin ditambahkan agar pH buffer gugus amino menjadi lebih rendah