a.

Kandungan apigenin dalam seledri

USDA
1.70 19.10 mg/100 g bahan kering

Sumber
http://www.usda.gov/nutrientdata

Jurnal 1 (16_395)
139.3 5.2 FW
134 mg/kg = 134 ppm
134 mg/kg x 0.005 kg = 0.67 mg (dalam 5 gram seledri segar) = 0.134 mg/g

2 mg/kg FW (berat segar)

Dalam 5 gram
Limit deteksi
2 mg/kg X 0.005 kg = 0.01 mg apigenin
2 mg/kg = 0.002 ml/L = 2 ppm

Pustaka:
Jie Cao, Wei Chen, Ying Zhang dan Xiujuan Zhao. 2010. Content of Selected Flavonoids in 100 Edible
Vegetables and Fruits. Food Sci. Technol. Res. 16(5): 395-402

Jurnal 3
Apigenin 0.94 mg/gram seledri

Dandan Han, Kyung Ho Row. 2011. Determination of luteolin and apigenin in celery using ustrasonic-
assisted extraction based on aqueous solution of ionic liquid coupled with HPLC quatification. Society of
Chemical Chemistry.

b. Optimasi Ekstraksi dan penyiapan sampel

No. Penelitian Pelarut Rendemen
Rahma Zuwita Zamri Esktraksi dan hidrolisis 32.85 %
(Skripsi) 5 gr simplisia serbuk
225 mL (metOH:air/5:4)
0.05 g BHT
25 mL HCl 2 M
Sonikasi 1 menit
Refluks 2 jam

Penyiapan sampel
- Ekstrak pekat yang dihasilkan dari
proses ekstraksi dialrutakan dalam
metanol
- Disaring dengan kertas Whatman
No.1
- Filtrat ditampung dalam labu,
ditepatkan sampai 25 ml
(pembuatan larutan sampel, ..
ppm)
- Sebayak 5 ml sampel dipiet ke
dalam labu ukur 10 ml dan
volumenya ditepatkan dengan
metanol
- Sebanyak 2 ml sampel diencerkan
diekstraksi fase padat
- Disaring dengan filter 0.45
mikrometer sebelum diinjeksikan

c. Kondisi Kromatografi

Kondisi Hasil
Zhang - pH 5.5
- Agilent 1200 HPLC
- C-18 RP Eclipse Plus and
Agilent ZORBAX StableBond
Semi-preparation column
- Fase gerak
ACN/air/asamfosfat
(10:69.7:0.3 v/v/v)
- Laju alir : 1 mL/min
- Kualitatif : 60 mikroliter
- 347 nm dan 30 derajat C

d. Rancangan validasi
VALIDASI
Pembuatan larutan stok standar apigenin 500 g/mL
Membuat 500 ppm sebanyak 100 mL
1) Menimbang 50 mg serbuk apigenin
2) Melarutkan dalam 100 mL fase gerak
LINEARITAS
Seri konsentrasi 1 2 3 4 5 6 7
Persentase 40% 60% 80% 100% 120% 140% 160%
Ppm 56 84 112 140 168 196 224
Ppm (adjusted) 50 80 110 140 170 200 230
Pengenceran dari
500 ppm, labu 10 1 ml 1.6 ml 2.2 ml 2.8 ml 3.4 ml 4 ml 4.6 ml
mL (1)
Labu 5 mL 0.5 ml 0.8 ml 1.1 ml 1.4 ml 1.7 ml 2 ml 2.3 ml
Total standar 29.4 mL
Masing-masing dibuat 3 kali replikasi (triplicate)
Ad fase gerak sampai tanda batas
PRESISI
Konsentrasi 140 g/ml 140 g/ml 140 g/ml 140 g/ml 140 g/ml 140 g/ml
Dari 500 ppm
ambil 1.4 ml 1.4 ml 1.4 ml 1.4 ml 1.4 ml 1.4 ml
Ad fase gerak 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml
Total standar 25.2 mL
Masing-masing dibuat 3 kali replikasi (triplicate)
AKURASI
Cstd adisi 80% 100% 120%
Konsentrasi 110 ppm 140 ppm 170 ppm
Volume 1 ml 1 ml 1 ml
Sampel 1 ml 1 ml 1 ml
Ad fase gerak 5 ml 5 ml 5 ml
Total standar 9 mL
Masing-masing dibuat 3 kali replikasi (triplicate)
STABILITAS
Konsentrasi 140 ppm
Masing-masing dibuat 3 kali replikasi (triplicate)
1.4 mL x 3 x 6 (25.2 ml)
Waktu 0 jam 1 jam 2 jam 4 jam 6 jam 12 jam 24 jam