Resistensi intrinsik bakteri gram negatif

Bakteri gram negatif umumnya lebih tahan terhadap antiseptik dan desinfektan
daripada nonsporulasi, bakteri gram positif nonmycobacterial (Gambar 2). Contoh MICs
melawan organisme gram positif dan negatif disediakan di Tabel 6. Berdasarkan data ini, ada
perbedaan yang mencolok Sensitivitas S. aureus dan E. coli terhadap QACs (benzalkonium,
Benzethonium, dan cetrimide), hexachlorophene, diamidines, dan triclosan namun sedikit
perbedaan pada kerentanan chlorhexidine. P. aeruginosa jauh lebih tahan terhadap sebagian
besar agen ini, termasuk chlorhexidine, dan (tidak ditunjukkan) Proteus Spp. Memiliki
resistansi rata-rata di atas terhadap agen kationik seperti klorheksidin dan QAC (311, 440).
Membran luar bakteri gram negatif bertindak sebagai penghalang yang membatasi masuknya
macam macam jenis bahan kimia yang tidak terkait dari agen antibakteri. Kesimpulan ini
didasarkan pada sensitivitas relatif Stafilokokus dan bakteri gram negatif dan juga pada
penelitian dengan mutan membran luar E. coli, S. typhimurium, dan P. aeruginosa. Halus,
bakteri wild-type memiliki permukaan sel hidrofobik; Sebaliknya, karena Patch fosfolipid
pada permukaan sel, deep rough (heptose- Kurang) mutan bersifat hidrofobik. Mutan ini
cenderung hipersensitif terhadap antibiotik dan desinfektan hidrofobik. Molekul hidrofilik
rendah molekul (Mr, ca. 600) mudah lewat melalui porins ke sel gram negatif, tapi hidrofobik
Molekul menyebar di lapisan luar bilayer (Tabel 7). Pada bakteri gram negatif jenis liar,
molekul LPS utuh mencegah akses yang siap dari molekul hidrofobik ke fosfolipid dan dari
situ ke interior sel. Dalam strain kasar yang dalam, yang kekurangan rantai samping O-
spesifik dan sebagian besar intinya Polisakarida, patch fosfolipid pada permukaan sel
memiliki kelompok kepala yang berorientasi pada eksterior.

Selain jalur masuk hidrofilik dan hidrofobik ini, jalur ketiga telah diusulkan untuk
agen kationik seperti QAC, biguanidies, dan diamidines. Hal ini menyatakan bahwa Ini
merusak membran luar, sehingga mempromosikannya serapan sendiri. Polikasi merusak
bagian luar membran dari E. coli (520). Harus ditambahkan, bagaimanapun, bahwa QAC dan
diamidin jauh lebih tidak aktif melawan wildtype Strain daripada melawan deep rough strains
sedangkan chlorhexidine memiliki urutan aktivitas yang sama (MIC meningkat sekitar 2
sampai 3 kali lipat) terhadap kedua tipe strain E. Coli. Namun, S. Typhimurium mutan lebih
sensitif terhadap klorheksidin daripada wild-type strains .

Bakteri gram negatif yang menunjukkan tingkat resistensi tinggi pada banyak
antiseptik dan desinfektan termasuk P. aeruginosa, Burkholderia cepacia, Proteus spp., dan
Providencia stuartii . Membran luar dari P. aeruginosa bertanggung jawab atas resistensi yang
tinggi; dibandingkan dengan organisme lain, disana perbedaan komposisi LPS dan
kandungan kation dari membran luar . Alat bantu Mg21 yang tinggi dalam berproduksi link
LPS-LPS yang kuat; Selanjutnya, karena mereka ukuran kecil, porin mungkin tidak
mengizinkan difusi umum mereka. B. cepacia seringkali jauh lebih tahan dalam lingkungan
rumah sakit daripada media kultur buatan; Kandungan arabinosa terkait-fosfat tinggi dalam
LPS menurun afinitas membran luar untuk antibiotik polymyxin dan molekul kationik dan
polikasi lainnya. Pseudomonas stutzeri, sebaliknya, sangat sensitif terhadap banyak antibiotik
dan desinfektan , yang menyiratkan agen tersebut memiliki sedikit kesulitan dalam melintasi
lapisan luar sel-sel organisme ini.

Anggota genus Proteus selalu tidak sensitif terhadap klorheksidin. Beberapa strain
yang sangat resisten terhadap klorheksidin, QAC, EDTA, dan diamidin telah diisolasi dari
sumber klinis. Kehadiran tipe LPS membran yang kurang asam bisa menjadi faktor
pendukung resistensi intrinsik.

Anggota yang sangat menyulitkan dari genus Providencia adalah P. stuartii seperti
strain Proteus spp., P. Stuartii terisolasi dari infeksi saluran kencing pada pasien paraplegik
dan tahan terhadap berbagai jenis antiseptik dan desinfektan termasuk klorheksidin dan QAC.
Strain P. Stuartii yang menunjukkan resistensi tingkat rendah, menengah, dan tinggi
klorheksidin membentuk dasar serangkaian penelitian mekanisme resistensi. Perbedaan kotor
pada komposisi lapisan luar dari strain ini tidak terdeteksi, dan disimpulkan bahwa
perubahan halus pada susunan struktur amplop sel dari strain ini dikaitkan dengan resistensi
ini dan (ii) membran dalam tidak terlibat.

Beberapa penulis telah menganggap peptidoglikan dalam bakteri gram negatif sebagai
penghalang potensial masuknya zat inhibitor. Kandungan peptidoglikan dari organisme ini
jauh lebih rendah daripada stafilokokus, yang secara inheren lebih banyak sensitif terhadap
banyak antiseptik dan desinfektan. Namun, ada contoh (dibahas di referensi 422) di mana
organisme gram negatif tumbuh pada konsentrasi subinhibit dari penisilin memiliki hambatan
permeabilitas yang kurang. Selanjutnya, telah dikenal selama bertahun-tahun spheroplast
yang disebabkan penisilin dan lysozyme-EDTA-Tris "Protoplas" bakteri gram negatif dengan
cepat dilisiskan zat aktif membran seperti klorheksidin. Bisa dibayangkan bahwa sifat
terbentang baik dari luar maupun dalam membran pada organisme yang diobati dengan b-
laktam dapat berkontribusi kerentanan ini meningkat.

Kemungkinan ada adanya membran sitoplasma (dalam) menyediakan satu mekanisme

perlawanan intrinsik. Membran ini terdiri dari lipoprotein dan diharapkan mencegah difusi
pasif molekul hidrofilik. Itu juga diketahui bahwa perubahan komposisi membran
mempengaruhi sensitivitas untuk etanol. Lannigan dan Bryan, mengusulkan penurunan
kerentanan Serratia marcescens terhadap klorheksidin dikaitkan dengan membran dalam, tapi
Ismaeel et al. tidak dapat menemukan peran seperti itu dengan P. stuartii yang tahan
chlorhexidine.Saat ini, ada sedikit bukti yang menyiratkan membran dalam pada resistensi
biosida. Selain itu, degradasi klorheksidin dilaporkan untuk S. marcescens, P. aeruginosa, dan
Achromobacter / Alkaligenes xylosoxidans.
 Adaptasi fisiologis (fenotipik) sebagai mekanisme intrinsik. Asosiasi
mikroorganisme dengan permukaan padat mengarah pada generasi biofilm, yang
didefinisikan sebagai konsorsium organisme terorganisir dalam exopolysaccharide
exopolimer yang luas. Biofilm dapat terdiri dari monokultur, beberapa spesies yang beragam,
atau fenotip campuran dari spesies tertentu . Beberapa publikasi bagus yang dialaminya Sifat,
formasi, dan kandungan biofilm tersedia . Biofilm penting karena beberapa alasan, terutama
biocorrosion, mengurangi kualitas air, dan fokus pada kontaminasi produk higienis.
Kolonisasi juga terjadi pada biomaterial dan peralatan medis implan, yang dihasilkan pada
tingkat infeksi yang meningkat dan kemungkinan kambuhnya infeksi.

Bakteri di berbagai bagian pengalaman biofilm berbeda lingkungan hara, dan sifat
fisiologisnya terpengaruh. Dalam kedalaman biofilm, misalnya nutrisi keterbatasan
cenderung mengurangi tingkat pertumbuhan, yang bisa mempengaruhi kepekaan terhadap
agen antimikroba . Dengan demikian, fenotipe organisme sessile dalam biofilm berbeda jauh
dari sel plankton yang ditemukan di laboratorium budaya. Bakteri yang tumbuh lambat
sangat tidak dapat disembuhkan, sebuah titik diulangi baru-baru ini dalam konteks lain.

Beberapa alasan dapat menjelaskan sensitivitas yang dikurangi bakteri dalam biofilm
(Tabel 8). Mungkin (i) berkurang akses desinfektan (atau antibiotik) ke sel-sel di dalam
biofilm, (ii) interaksi kimia antara disinfektan dan Biofilm itu sendiri, (iii) modulasi
lingkungan mikro, (iv) produksi enzim degradatif (dan menetralkan bahan kimia), atau (v)
pertukaran genetik antar sel dalam biofilm. Namun, bakteri dikeluarkan dari biofilm dan
diterima kembali dalam kultur media pada umumnya tidak lebih tahan dari pada "biasa" sel
planktonik dari spesies tersebut.

Beberapa contoh diketahui kontaminasi antiseptik atau larutan disinfektan oleh

bakteri. Misalnya, Marrie dan Costerto, menggambarkan kelangsungan hidup yang
berkepanjangan S. marcescens dalam larutan klorheksidin 2%, yang dikaitkan ke embedding
organisme ini dalam matriks kental itu dipatuhi dinding wadah penyimpanan. Kesimpulan
serupa dicapai oleh Hugo et al. tentang kelangsungan hidup B. cepacia dalam klorheksidin
dan oleh Anderson et al. tentang kontaminasi antiseptik iodophor dengan Pseudomonas.
Dalam studi oleh Anderson et al., Pseudomonas biofilm ditemukan pada permukaan interior
polivinil klorida pipa yang digunakan selama pembuatan providone-iodine antiseptik Hal ini
menjadi bertanya-tanya apakah alasan serupa bisa dikemukakan untuk kontaminasi oleh S.
marcescens sebbuah larutan benzalkonium klorida terlibat dalam meningitis. Baru-baru ini,
sebuah strategi baru dijelaskan untuk pengendalian biofilm melalui pembentukan hidrogen
peroksida pada biofilm- Permukaan antarmuka daripada hanya menerapkan disinfektan
secara ekstrinsik. Dalam prosedur ini, permukaan terjajah tergabung katalis yang
menghasilkan senyawa aktif dari agen pengobatan.

Patogen gram negatif dapat tumbuh sebagai biofilm dalam kateterisasi kandung kemih
dan mampu bertahan konsentrasi klorheksidin yang efektif melawan organisme dalam
keadaan tidak terekam individu. Menariknya, permeabilitas agen EDTA hanya memiliki efek
potentiating sementara di kantung kemih, dengan pertumbuhan bakteri yang kemudian
berulang. B. cepacia baru saja diisolasi dari lingkungan rumah sakit seringkali jauh lebih
tahan terhadap klorheksidin daripada saat ditanam di media kultur tiruan, dan glikokaliks
dapat dikaitkan dengan resistensi intrinsik terhadap bisbiguanide . Legionella pneumophila
sering ditemukan di air rumah sakit sistem distribusi dan menara pendingin. Khlorinasi dalam
kombinasi dengan pemanasan terus menerus (60 C) dari air yang masuk biasanya ukuran
desinfeksi yang paling penting; Namun, karena produksi biofilm, organisme yang
terkontaminasi mungkin terjadi kurang rentan terhadap perawatan ini meningkatnya
ketahanan terhadap klorin telah dilaporkan untuk Vibrio cholerae, yang mengungkapkan
sexopolysaccharide amorf yang menyebabkan agregasi sel ("Rugose" morfologi tanpa
kehilangan patogenisitas.

Seseorang bisa mencapai kesimpulan tertentu tentang biofilm. Interaksi bakteri

dengan permukaan biasanya reversibel dan akhirnya ireversibel Adhesi ireversibel
diprakarsai oleh pengikatan bakteri ke permukaan melalui exopolysaccharide polimer
glikosidik. Sel saudari kemudian timbul oleh pembelahan sel dan terikat dalam matriks
glycocalyx. Perkembanganna dari microcolonies yang melekat dengan demikian dimulai,
sehingga pada akhirnya biofilm kontinyu diproduksi di permukaan terjajah. Bakteri dalam
biofilm ini berada di lingkungan mikro tertentu yang berbeda dari sel yang tumbuh di bawah
laboratorium normal kondisi dan dengan demikian menunjukkan variasi dalam respon
mereka untuk antiseptik dan desinfektan.

Wabah nosokomial baru-baru ini disebabkan oleh M. chelonae (dibahas di bawah

"resistensi intrinsik mycobacteria"), M. Tuberculosis (4, 323) dan HCV (53)
menggarisbawahi pentingnya pseudobiofilm pembentukan kontaminasi serat optik yang
fleksibel. Wabah ini terkait dengan pembersihan yang tidak memadai cakupan, yang
mengkompromikan sterilisasi berikutnya dengan glutaraldehida. Sementara organisme ini
tidak membentuk biofilm sejati, tindakan cross-linking glutaraldehida dapat menyebabkan
penumpukan residu yang tidak larut dan mikroorganisme terkait pada cakupan dan dalam
reprocessors otomatis.

Biofilm memberikan contoh paling penting tentang bagaimana fisiologis (Fenotipik)

adaptasi dapat memainkan peran dalam berunding resistensi intrinsik. Contoh lainnya juga
diketahui.Contoh, sel ganas S. aureus diproduksi berulang-ulang subkultur dalam media yang
mengandung gliserol lebih tahan terhadap alkil fenol dan benzilpenisilin daripada jenis liar.
Subkultur sel-sel ini dalam media kultur rutin dihasilkan dalam pemulihan sensitivitas .
Budaya plankton tumbuh dalam kondisi keterbatasan unsur hara atau berkurang tingkat
pertumbuhan memiliki sel dengan sensitivitas yang berubah terhadap desinfektan, mungkin
sebagai konsekuensi modifikasi di luar membran. Selain itu, banyak mikroorganisme aerobik
telah mengembangkan sistem pertahanan intrinsik yang memberi toleransi terhadap tekanan
peroksida (khususnya H2O2) secara in vivo. Itu yang disebut respons oksidatif atau respons
SOS telah dipelajari dengan baik di E. coli dan Salmonella dan termasuk produksi
menetralkan enzim untuk mencegah kerusakan sel (termasuk peroksidase, katalase,
glutathione reduktase) dan untuk memperbaiki lesi DNA (misalnya, eksonuklease III) . Di
keduanya organisme, toleransi yang meningkat dapat diperoleh dengan pretreatment dengan
dosis subinhibit hidrogen peroksida. Pretreatment menginduksi serangkaian protein, banyak
di antaranya berada di bawah kendali positif protein sensor / regulator (OxyR), termasuk
katalase dan glutathione reductase dan protein yang tidak penting yang menumpuk untuk
melindungi sel. Cross-resistance terhadap panas, etanol, dan hypochlorous asam juga telah
dilaporkan . Oksidatif respon stres pada bakteri gram positif kurang dipelajari dengan baik,
tapi toleransi Bacillus terhadap H2O2 telah dijelaskan bervariasi selama fase pertumbuhan
dan pada strain mutan. Mekanisme pertahanan inducible serupa dijelaskan untuk
campylobacter jejuni , Deinococcus , dan Haemophilus Influenzae . Namun, tingkat toleransi
meningkat H2O2 selama respons stres oksidatif mungkin tidak berpengaruh signifikan
perlindungan terhadap konsentrasi yang digunakan dalam antiseptik dan desinfektan
(umumnya 0,3%). Misalnya, mutan B. Subtilis telah dijelaskan untuk lebih tahan pada 0,5%
H2O2 dibandingkan adalah strain tipe liar; 0,34% H2O2 .

Mekanisme Perlawanan Resistensi Bakteri

Seperti antibiotik dan obat kemoterapi lainnya, didapat resistensi terhadap antiseptik
dan desinfektan dapat timbul baik oleh mutasi maupun perolehan materi genetik pada bentuk
plasmid atau transposon. Penting untuk dicatat itu "Resistensi" sebagai istilah sering bisa
digunakan secara longgar dan banyak kasus harus ditafsirkan dengan hati-hati. Ini terutama
benar dengan analisis MIC. Tidak seperti antibiotik, "resistensi," atau peningkatan MIC
biocide, belum tentu berkorelasi dengan kegagalan terapeutik. Peningkatan antibiotik MIC
mungkin memiliki konsekuensi signifikan, sering menunjukkan bahwa organisme sasaran
tidak terpengaruh oleh tindakan antimikrobanya. Peningkatan MIC biosida karena
mekanisme yang diakuisisi juga telah dilaporkan dan dalam beberapa kasus disalahartikan
sebagai resistensi. Adalah penting bahwa isu termasuk aksi pleiotropik sebagian besar
biosida, aktivitas bakterisida, konsentrasi digunakan dalam produk, aplikasi produk langsung,
efek formulasi, dll, dipertimbangkan dalam mengevaluasi Implikasi klinis dari laporan ini.

Plasmid dan resistensi bakteri terhadap antiseptik dan desinfektan. Chopra, meneliti
peran plasmid dalam pengkodean resistensi (atau peningkatan toleransi) terhadap antiseptik
dan desinfektan; Topik ini dianggap lebih jauh oleh Russell. Disimpulkan bahwa terlepas dari
beberapa contoh spesifik seperti itu seperti perak, logam lain, dan organomercurial, plasmid
ada biasanya tidak bertanggung jawab atas peningkatan kadar antiseptik atau resistensi
disinfektan terkait dengan spesies atau strain tertentu. Sejak saat itu, ada banyak laporan yang
terkait adanya plasmid pada bakteri dengan toleransi yang meningkat untuk klorheksidin,
QAC, dan triklosan, serta diamidin, akridin dan etidium bromida, dan topiknya
dipertimbangkan kembali (Tabel 9).
 Resistensi yang dikodekan plasmid terhadap antiseptik dan disinfektan pada suatu
waktu telah diselidiki secara luas dengan nada kasim. (Keduanya anorganik dan organik),
senyawa perak, dan kation dan anion lainnya. Mercurial tidak lagi digunakan sebagai
desinfektan, namun garam fenilkurik dan tiofili masih ada digunakan sebagai bahan pengawet
pada beberapa jenis produk farmasi. Ketahanan terhadap merkuri adalah plasmid yang
ditanggung, dapat diinduksi, dandapat ditransfer melalui konjugasi atau transduksi.
Anorganik Merkuri (Hg21) dan resistensi organomkury adalah hal yang biasa milik isolat
klinis S. aureus yang mengandung penisilinase Plasmid . Plasmid memberikan perlawanan
terhadap merkuri adalah spektrum sempit, menentukan ketahanan terhadap Hg21 dan ke
beberapa organomercuria, atau spektrum luas, dengan resistensi ke senyawa di atas dan untuk
tambahan organomercuria. Garam perak masih digunakan sebagai agen antimikroba topikal.
Resistensi yang dikodekan plasmid terhadap perak telah ditemukan di Pseudomonas stutzeri ,
anggota Enterobacteriaceae, dan Citrobacter spp. . Mekanismenya dari resistensi belum
dijelaskan secara lengkap tapi mungkin berhubungan dengan akumulasi perak.