ABSTRAK

Metil Gallate merupakan penghambat yang efeknya sangat besar terhadap bakteri pathogen dari
tanaman Ralstonia solanacearum. Pengamatan menggunakan scan mikroskop electron
menunjukkan adanya kerusakan MG terhadap sturktur dinding sel patogen, perubahan morfologi,
plasmoptysis. Hasil akhir analisis biokimia menunjukkan bahwa MG memiliki efek penghambat
secara substansial terhadap sintesis protein dan suksinat dehidrogenase (SDH) pada pathogen.
Setelah perlakuan dengan MG 20 g / mL, R. solanacearum dapat melawan penghambatan MG
dan mendapatkan kembali pertumbuhannya melalui respons stres seperti peningkatan aktivitas
Na + K + -ATPase dan produksi sejumlah besar exopolisakarida. Namun, patogen kehilangan
patogenisitasnya, yang dapat dikaitkan dengan penekanan enzim ekstraselular seperti pektinase
dan selulase. Selain itu, MG pada konsentrasi yang lebih tinggi menunjukkan efek bakterinya
dengan menghambat respirasi bakteri yang pada gilirannya mengganggu metabolisme energi
mereka.

PENDAHULUAN

Luka bakteri tanaman, yang disebabkan oleh Ralstonia solanacearum, adalah satu dari
penyakit yang paling parah ditularkan melalui tanah didistribusikan di seluruh wilayah tropis,
subtropis dan beberapa daerah yang lebih hangat dunia, dan sering menghasilkan kerugian besar
kolosal dalam pertanian produksi (Hayward 1991). Saat ini, pengendalian penyakit dengan cara
yang aman dan efektif tetap menjadi masalah yang sulit. Tanaman merupakan sumber yang
melimpah untuk berbagai jenis antibakteri zat, yang mudah didekomposisi, berpolusi rendah
berpengaruh terhadap lingkungan, dan tidak mudah menginduksi resistansi dalam target bio-
organisme. Zat antibakteri ini memberikan inspirasi penting untuk mempelajari pestisida modern
(Cho et al 2007). Dalam pemutaran zat antibakteri Dengan menggunakan R. solanacearum
sebagai bakteri target, kami menemukan itu methyl gallate (MG) dari sylvestre Toxicodendron
dapat secara signifikan menghambat pertumbuhan patogen in vitro dan planta. Aktivitas
antibakteri senyawa alami dan sintetis terhadap R. solanacearum pada dasarnya identik, dan
Konsentrasi hambat minimal (MIC) dan konsentrasi bakterisida minimal (MBC) MG adalah 20
dan 30 g / mL, masing (Yuan et al., 2010, 2012). Investigasi lebih lanjut menunjukkan bahwa
senyawa tersebut bisa menghambat pertumbuhan yang melebar berbagai patogen tanaman. Itu
tahan panas dan tahan UV, dan stabil dalam kondisi asam dan basa. Ini Hasilnya memberi
dukungan pada potensi besar MG sebagai bakterisida.

MG adalah senyawa polifenol yang ada di banyak tanaman di alam. Telah dilaporkan
bahwa MG memiliki beragam Aktivitas biologis, seperti antioksidan, antitumor, antivirus,
aktivitas anti-inflamasi, antiasthmatik dan vasodilatif (Chaubal et al 2005). MG menekan
tanaman patogen jamur termasuk Magnaporthe grisea, Botrytis cinerea dan Puccinia recondita di
planta dan juga memiliki tanaman aktivitas regulasi pertumbuhan (Ahn et al 2005; Mndez dan
Mato 1997; Mndez dkk. 2004). Meski antivirus dan Aktivitas antibakteri telah banyak
dilaporkan, ada jarang melaporkan mekanisme terkait mereka. Dilaporkan itu Virus herpes
simpleks (HSV) sensitif terhadap MG, senyawa ini dapat bereaksi dengan protein virion HSV
dan mengubah sel kemampuan penetrasi virion (Kane et al 1988). MG bisa secara signifikan
menghambat pembentukan Streptococcus secara in vitro mutans biofilm (Kang et al 2008).

Banyak fenol dapat secara khusus mempengaruhi target molekuler dari mikroorganisme.
Mereka mengandung sejumlah besar hidroksil, oleh karena itu dapat membentuk ikatan protonik
dan ionik dan Campurkan dengan banyak protein dari beberapa bio-organisme seperti enzim,
pembawa, saluran ion dan reseptor, menonaktifkannya dan akibatnya menunjukkan
penghambatan pertumbuhan bakteri atau aktivitas bakterisida (Wang 2007).

Sampai saat ini belum ada laporan mengenai efek penghambatan pertumbuhan MG
terhadap bakteri patogen tanaman dan bakteri mekanisme terkait Studi tentang mekanisme
tindakan Senyawa antibakteri sering bisa mengidentifikasi bahan kimia tindakan yang mengarah
pada pengembangan bakteri dari senyawa antibakteri Dalam makalah ini, efek dari MG pada
morfologi, respirasi, exopolysaccharides konsentrasi, kandungan protein intraselular, dan
aktivitas enzim ekstraselular dan intraselular ditentukan dan mekanisme antibakteri MG terhadap
R. solanacearum diselidiki untuk memberikan dasar teoritis untuk aplikasi lebih lanjut dari MG.

METODE DAN BAHAN

Strain bakteri dan isolasi, media deteksi enzim, agen kimia dan alat deteksi enzim.
 R. solanacearum strain Rs-T02 (sekuel phylotype I 14) diisolasi dari batang tomat yang
terinfeksi pada tahun 2007 di Guangxi dan diawetkan oleh Plant Pathology Lembaga Penelitian
Universitas Guangxi, Nanning, China.

Strain tersebut disimpan dalam air suling pada suhu 20C dan terjadi awalnya dikultur
pada nutrient agar (NA: ekstrak daging sapi, 3 g; pepton, 5 g; dekstrosa, 10 g; agar, 17 g; air
suling, 1 000 mL; pH 7,0) pada suhu 30 C selama 2 hari, kemudian ditransfer ke dalam kaldu
ekstrak daging sapi dan dikocok pada 120 r / menit selama 24 jam di 30 C (pada fase
logaritmik).

Media deteksi pektinase: pepton, 5 g; ekstrak daging sapi, 5 g; pektin 5 g; K2HPO4 1 g;

MgSO4 0,2 g; agar, 17 g; suling air, 1 000 mL; pH 7.0-7.5. Media deteksi selulase: pepton, 10 g;
ekstrak ragi, 5 g; dekstrosa, 2 g; NaCl 1 g; CMC (Karboksimetil selulosa) 1 g; K2HPO4 1 g;
MgSO4 0,2 g; agar, 17 g; air suling, 1 000 mL; pH 7.0-7.5. Methyl gallate (MG), pektinase,
selulase, malat dehidrogenase (MDH), suksinat dehidrogenase (SDH) dan Na + K + - Kit
ATPase dibeli dari Sangon Biotech (Shanghai) Co, Ltd

1. Pengaruh MG terhadap morfologi R. solanacearum

Pengaruh MG pada morfologi sel R. solanacearum adalah diamati di bawah
mikroskop elektronik pemindaian. Patogen Bakteri pada fase pertumbuhan logaritmik
diencerkan menjadi a 108 CFU / mL suspensi ekstrak daging sapi. MG dibubarkan
dengan dimetil sulfoksida (DMSO) dan ditambahkan ke bakteri suspensi untuk mencapai
konsentrasi MG akhir 20 g / mL dan konsentrasi DMSO akhir 0,1%. Penangguhannya
saat itu terguncang pada 120 r / menit dan 30 C selama 2, 6, dan 12 jam. Suspensi
disentrifugasi dan supernatan telah dilepas. endapan dicuci tiga kali dengan PBS 0,2 M
(pH 7,4) sebelum sampel disiapkan untuk elektron pewarnaan negative mikroskopi.
Suspensi dengan 0,1% DMSO dan 12 h gemetar Waktu digunakan sebagai kontrol.
Sampel yang disiapkan adalah diperiksa dengan mikroskop elektron untuk mengamati
efeknya MG pada ultrastruktur bakteri (Nakajima et al., 2003).

2. Penentuan respirasi seluler R. solanacearum

Efek MG terhadap respirasi sel keseluruhan R. solanacearum diukur dengan
elektroda Klark oksigen polarografi (Chance dan Williams 1955). Sebuah bejana reaksi
 30 mL mengandung 16 mL PBS 0,1 M (pH 7,2), 2 Ml larutan glukosa 1% (W / V) dan
suspensi 2 mL R. solanacearum pada fase pertumbuhan logaritmik (bakteri suspensi
OD600nm = 1.0) terguncang pada 120 r / menit dan 30 C selama 30 menit. MG
kemudian ditambahkan ke dalam reaksi bejana dengan pengadukan elektro-magnetik
untuk mencapai konsentrasi akhir 10, 20, 30, 40 dan 50 g / mL. Oksigen terlarut
konsentrasi dalam suspensi diukur dengan a meteran oksigen terlarut sebelum dan
sesudah 2 menit reaksi antara MG dan bakteri. Menggunakan suspensi ditambah dengan
0,1% DMSO sebagai kontrol, laju pernafasan (mol O2 / g / menit) dari Bakteri dihitung
sesuai perubahan yang terlarut konsentrasi oksigen Setiap pengobatan memiliki tiga
ulangan. Selama percobaan suhu di laboratorium itu disimpan pada suhu 25 C.

3. Penentuan kadar polisakarida ekstraselular (EPS)

R. solanacearum pada fase logaritmik disesuaikan 108 CFU/mL suspensi dari ekstrak
daging kaldu.
MG dilarutkan dengan DMSO dan ditambahkan ke suspensi hingga mencapai
konsentrasi 10, 20 dan 40 g / mL. Suspensi bakteri yang mengandung volume yang
sesuai DMSO digunakan sebagai kontrol.
Setelah inkubasi selama 24 jam di 30C, shaker pada 120 r/menit, suspensi bakteri
diencerkan menjadi 107 CFU / mL dan disentrifugasi pada 3.500 xg.
5 mL Aliquot supernatan dicampur dengan pereaksi thag 1.67 mL (kloroform:
butanol 3: 1) lalu dikocok dengan kuat. untuk mengendapkan protein (Zhao et al.
2009a). Campuran itu kemudian diinkubasi pada suhu kamar selama beberapa menit
dan kemudian disentrifugasi pada 3.500 xg selama 10 menit. Supernatan
ditambahkan dengan reagen 1,76 mL sevag dan di atas prosedur diulang Endapan
telah dilepas, dan supernatan dicampur dengan etanol 95%, yaitu 3 kali volume
supernatan Campuran itu terguncang dan diinkubasi pada suhu 4 C selama 20 jam,
kemudian disentrifugasi pada 3.500 xg selama 10 menit Dalam sampel lain, endapan
dikumpulkan dan dikeringkan untuk menghasilkan EPS mentah. EPS dilarutkan pada
air suling dan diencerkan sampai 5 mL. Konsentrasi massa (g / mL) EPS ditentukan
dengan menggunakan uji asam anthronesulfuric (Spiro 1966).
CFU/mL = Colony Forming Unit per Mililiter.
4. Penentuan aktivitas enzim ekstraselular
Efek MG pada aktivitas pektinase dan selulase R. solanacearum diukur dengan uji
lempeng (Hadj-Taieb et al. 2011; Jo et al. 2009) dan test tube assay. Berdasarkan metode
uji lempeng, MG dilarutkan dengan DMSO ditambahkan ke media deteksi pektinase dan
selulase untuk mencapai konsentrasi akhir 5, 10, 20 dan 40 g / mL. Pelat yang
mengandung DMSO pada konsentrasi yang sama digunakan sebagai kontrol untuk
konsentrasi MG yang berbeda. Setiap Pengobatan memiliki tiga ulangan. Bagian tengah
masing-masing lempeng itu diinokulasi dengan aliquot 0,1 L bakteri pathogen suspensi
yang berada pada fase pertumbuhan logaritmik. Pelat diinkubasi pada suhu 30 C selama
48 jam. Koloni di Media deteksi pektinase terendam dalam 10% CTAB
(Cetyltrimethylammonium bromide) selama 15 menit. Koloni pada media deteksi
selulase diwarnai dengan 0,5% Kongo merah selama 5 menit, dan kemudian decolorized
dengan 5% NaCl selama 1 jam. Aktivitas enzim ekstraselular pada konsentrasi MG yang
berbeda ditentukan menurut dengan rasio diameter zona hidrolisis (D) terhadap koloni
diameter (d).
Dalam uji tabung reaksi, suspensi sel R. solanacearum pada ekstrak daging sapi
diinkubasi selama 24 jam pada suhu 30 C. dengan gemetar pada 120 r / menit, lalu
disentrifugasi pada 3.500 xg. Supernatan dipanen sebagai larutan enzim mentah dan
dicampur dengan MG untuk mencapai konsentrasi MG akhir 5, 10, 20 dan 40 g / mL.
Supernatan yang mengandung DMSO dengan konsentrasi yang sesuai digunakan sebagai
a kontrol. Supernatan ini terguncang pada kecepatan 120 r / menit untuk 2 jam dan 30
C, dan aktivitas pektinase dan selulase ditentukan dengan peralatan komersil sebagai
sesuai petunjuk pabrikan. Satu unit aktivitas pektinase didefinisikan sebagai jumlah dari
enzim yang mengkatalisis pembentukan 1 mol asam galakturonat per menit Satu unit
aktivitas selulase didefinisikan sebagai jumlah enzim dalam 1 mL enzim larutan yang
menghasilkan 1 mol gula per menit pada suhu 50 C dan pH 5,0.

5. Penentuan aktivitas enzim dan protein intraselular

Konten Suspensi R. solanacearum 5 mL pada logaritmik fase pertumbuhan
disentrifugasi pada 3.500 xg selama 10 menit. Itu supernatan dibuang. Endapan dicuci
 tiga kali dengan 0,2 M PBS (pH 7,4), dan diganti kembali pada kaldu ekstrak daging sapi
untuk membuat suspensi 1010 CFU / mL. Itu Suspensi kemudian dipindahkan ke botol
kaca steril. MG (dilarutkan dalam DMSO) ditambahkan ke setiap botol untuk mencapai
final konsentrasi 10, 20 dan 40 g / mL. Suspensi mengandung DMSO dengan
konsentrasi yang sesuai digunakan sebagai kontrol untuk berbagai konsentrasi MG.
Semua botol terguncang pada 120 r / menit selama 2 jam pada suhu 30 C. Dari
suspensi, 1,5 mL setiap perlakuan disentrifugasi pada 3,500 xg pada suhu 4 C selama 5
menit. Endapan dikumpulkan dan kembali ditangguhkan di PBS ke volume aslinya.
Bakteri di Suspensi PBS kemudian terganggu dalam penggunaan es sebuah disrupter sel
ultrasonik (kekuatan gangguan itu 60%). Durasi getarannya adalah 10 detik, dengan
waktu istirahat 10 detik untuk durasi 15 siklus. Suspensi disentrifugasi pada 4 C pada
19.830 xg selama 10 menit dan supernatan yang dihasilkan mewakili solusi protein total
atau larutan enzim kasar. Mereka dikumpulkan dan disimpan pada suhu -20 C, sampai
lebih jauh menggunakan. Total kandungan protein ditentukan oleh Bradford metode
(Bradford 1976). Kegiatan MDH, SDH dan Na + K + -ATPase ditentukan dengan
menggunakan peralatan komersial seperti yang telah dijelaskan sebelumnya. Satu unit
aktivitas SDH didefinisikan sebagai jumlah enzim dalam 1 mL suspensi bakteri dengan
waktu reaksi 1 menit yang memberikan reduksi sebesar 0,01 unit absorbansi
dibandingkan dengan reaksi kontrol. Satu unit Na+K+-ATP Aktivitas didefinisikan
sebagai jumlah enzim dalam reaksi 1 jam yang menghasilkan 1 mol fosfor anorganik di
ATP dekomposisi oleh ATPase per mg protein. Satu unit Aktivitas MDH didefinisikan
sebagai jumlah enzim dalam 1 menit reaksi yang mengubah 1 mol substrat menjadi
produk per mg protein.

6. Penentuan patogenisitas R. solanacearum

Setelah perawatan dengan MG Konsentrasi inokulum bakteri R. solanacearum
disesuaikan dengan 103 CFU / mL, dan 100 L kultur kaldu bakteri diterapkan secara
merata pada lempeng NA mengandung 20 g / mL MG. Koloni yang bertahan di pelat
yang diinkubasi pada suhu 30 C selama 72 jam dipilih, dikultur dalam kaldu ekstrak
daging sapi pada suhu 30 C dan dikocok pada 120 r / menit selama 12 jam. Tipe liar
strain Rs-T02 dibiakkan dan terguncang sebagai kontrol Uji patogenisitas dilakukan di
 rumah kaca Tomat tanaman pada 7-8 benar-daun panggung dari kultivar Jinkahong yang
digunakan. Bibit itu tumbuh di pot berdiameter 20 cm di rumah kaca pada suhu 30 5
C. Tanaman pot adalah akar yang basah kuyup dengan 100 mL suspensi R. solanacearum
(108 CFU / mL). Setiap Pengobatan terdiri dari 4 ulangan dan masing-masing ulangan
berisi 5 tanaman. Kejadian layu bakteri dinilai sebagai persentase tanaman yang benar-
benar layu 30 hari setelah inokulasi. Strain Rs-T02 setelah perawatan dengan MG
diinkubasi pada lempeng NA dan 10 transfer berturut-turut media yang sama dilakukan
pada kedalaman 3 hari. Kultur setelah 10 generasi digunakan untuk inokulasi seperti
dijelaskan di atas. Tipe liar strain Rs-T02 diinkubasi selama 10 generasi dan diinokulasi
sebagai kontrol.

HASIL

Pengaruh MG terhadap morfologi sel R. solanacearum

Pengamatan menggunakan pemindaian mikroskop elektronik menunjukkan bahwa R.

solanacearum berbudaya selama 12 jam di Perawatan kontrol memiliki sel berbentuk batang
pendek dengan pembulatan ujung, bentuk penuh, dan permukaan halus. Tidak ada sel rusak atau
kebocoran isi sel diamati (Gambar 1a). Sebaliknya, Perlakuan MG sebesar 20 g / mL MG
selama 2 jam menyebabkan distorsi dari morfologi patogen, mengubah sel dari sel berbentuk
batang simetris menjadi bentuk yang diperluas pada satu end atau sel memanjang. Namun, sel-
sel yang rusak tidak diamati (Gambar 1b). Perawatan MG untuk 6 jam menyebabkan perubahan
morfologi sel yang luar biasa. Sel masih berbentuk batang tapi lebih panjang 1,5-3,0 kali.
Beberapa juga diperluas di bagian tengah dan memiliki ujung yang lebih tipis. Kecil Jumlah
kebocoran isi sel juga diamati (Gambar 1c). Setelah terpapar MG selama 12 jam, R.
solanacearum Sel-sel itu bengkok dan layu, dengan permukaan kasar dan dinding sel yang sangat
rusak Ada juga kebocoran isi sel yang terlihat (Gambar 1d). Hasil ini menunjukkan bahwa MG
bisa merusak dinding sel R. solanacearum, dan Efek merusaknya lebih besar dengan waktu
perawatan meningkat.
Pengaruh MG terhadap respirasi R. solanacearum

Seperti ditunjukkan pada Gambar 2, MG pada konsentrasi yang berbeda efek berbeda pada laju
pernafasan R. solanacearum. MG pada 20 g / mL tidak mengubah laju pernafasan R.
solanacearum dibandingkan dengan kontrol. Pada 30 g / mL MG menyebabkan peningkatan
respirasi yang substansial, menunjukkan hal itu MG pada konsentrasi ini bisa merangsang
konsumsi oksigen bakteri. Pada 40 g / mL MG menunjukkan a Efek penghambatan nyata pada
metabolisme pernafasan R. solanacearum, dengan laju pernafasan menurun 5 kali dibandingkan
dengan kontrol. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara perlakuan MG pada 40 g / mL dan
50 g / mL.

Pengaruh MG terhadap produksi EPS pada R. solanacearum

Setelah diobati dengan 10, 20 dan 40 g / mL MG, hasil EPS sebesar R. solanacearum masing-
masing 0,43, 0,54 dan 0,54 g / mL, 14-18 kali lebih besar dari kontrol (0,03 g / mL). Namun,
Tidak ada perbedaan konsentrasi EPS yang signifikan di antara sel R. solanacearum yang
terpapar dengan konsentrasi MG yang berbeda. Hasil ini menunjukkan bahwa MG dapat
mempromosikan produksi EPS di R. solanacearum dalam dosis-independen cara. Menariknya,
efek stimulasi ini bisa dilihat pada a konsentrasi MG sangat rendah.

Efek MG pada aktivitas enzim ekstraselular dari R. solanacearum

Metode uji lempeng menunjukkan bahwa pektinase dan selulase Aktivitas di R. solanacearum
jelas terhambat dalam a MG tergantung dosisnya. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara
perlakuan MG pada 20 g / mL dan 40 g / mL, sedangkan perbedaan antara perlakuan 20 g /
mL dan 10 g / mL signifikan secara statistik, dan aktivitas enzim ekstraselular dalam
pengobatan 10 g / mL secara signifikan lebih rendah dari pada kontrol. Selain itu, tidak ada
zona penghambatan pada pelat deteksi pektinase pada 20 g / mL MG. Namun, berdasarkan uji
coba uji tabung, aktivitas pektinase dan selulase menunjukkan tidak berubah setelah perawatan
dengan konsentrasi yang berbeda MG selama 2 jam (Tabel 1). Hasilnya menunjukkan bahwa
MG bisa tidak secara langsung menghambat aktivitas pektinase dan selulase namun mampu
menekan produksi enzim ekstraselular pada bakteri R. solanacearum.

Efek MG pada aktivitas enzimatik intraseluler dan protein sintesis pada R. solanacearum

Ada penurunan substansial dalam sintesis protein total dan aktivitas SDH pada R. solanacearum
dalam dosis tergantung cara setelah terpapar MG selama 2 jam. Namun, di sana Tidak ada
perbedaan yang signifikan antara perlakuan MG di 10 g / mL dan kontrol, atau antara perlakuan
MG pada 20 g / mL dan 40 g / mL. Perubahan yang signifikan tidak diamati pada aktivitas
MDH R. solanacearum, bila terkena berbagai konsentrasi MG. Ini menyarankan itu MG tidak
meningkatkan aktivitas MDH R. solanacearum dalam waktu singkat. Sebaliknya, aktivitas Na +
K + - ATPase meningkat dengan konsentrasi MG (Tabel 2), menunjukkan bahwa bakteri
merespon positif terhadap MG, dan mungkin telah mengubah ion ekstraselular dan intraselular
konsentrasi untuk melawan efek MG, demikian mempertahankan aktivitas selulernya

Patogenitas R. solanacearum setelah diobati dengan MG

Bakteri dalam perlakuan MG 20 g / mL tidak menunjukkan Pertumbuhan terlihat setelah

inkubasi 48 jam namun pertumbuhannya kembali setelah inkubasi 72 jam. Dalam eksperimen
glasshouse, khas Gejala layu bakteri tomat pertama kali diamati di kontrol tanaman 5 hari setelah
inokulasi, dan bakteri layu Insidensi pada kontrol adalah 60%, 30 hari setelah inokulasi. Namun,
tidak ada tanaman tomat yang berpenyakit di R. solanacearum dengan 20 g / mL MG. Setelah
sub-kultur 10 generasi, bakteri layu kejadian pengobatan dan masing masing 0 dan 65%. Ini
menyarankan itu bakteri R. solanacearum bertindak oleh MG tidak bisa memulihkan
patogenisitasnya setelah 10 generasi.

DISKUSI

Penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa mekanisme zat antibakteri planter

terhadap mikroorganisme meliputi sintesis dinding sel yang menekan, mengubah permeabilitas
membrane sel, mengganggu respirasi atau aktivitas enzim, dan menghambat biosintesa protein
dan asam nukleat (Kim et al., 2002). Mirip dengan kerusakan sel struktur dinding dan gangguan
sel yang disebabkan oleh ekstrak dari Coriaria sinica dan Eupatorium adenophorum (Zhou et al.
2006; Li et al. 2010), MG juga menunjukkan efek buruk pada struktur dinding sel R.
solanacearum.

Sintesis protein berperan penting dalam metabolisme sel. Dalam penelitian ini, terlihat
bahwa MG bisa menghambat sintesis protein dalam R. solanacearum, yang Pada gilirannya
menurunkan aktivitas SDH, pektinase dan selulase. Ekstrak E. adenophorum juga telah
dilaporkan untuk mengurangi kandungan protein dan beberapa aktivitas enzimatik seperti seperti
SDH di R. solanacearum (Li et al., 2010). SDH adalah zat fungsional untuk siklus asam
tricarboxylic dan pernapasan aerobik. Aktivitasnya sangat erat kaitannya dengan sintesis
bioenergi dalam sel. MG pada konsentrasi rendah tidak memiliki efek nyata pada aktivitas SDH,
namun pada Konsentrasi yang lebih tinggi menghambat aktivitas SDH, yang menyebabkannya
penekanan pertumbuhan R. solanacearum. MDH juga satu dari enzim kritis dalam siklus asam
tricarboxylic, yaitu penting untuk pertumbuhan sel, metabolisme dan proliferasi. Efek MG pada
berbagai konsentrasi dalam pekerjaan ini memang tidak menunjukkan dampak yang nyata pada
aktivitas MDH. Oleh karena itu, MG tidak mempengaruhi jalur sintesis bioenergi R.
solanacearum melalui aktivitas MDH yang menghambat.

MG tidak memiliki pengaruh langsung terhadap aktivitas pektinase dan selulosa namun
secara substansial dapat menekan produksi enzim ekstraselular pada bakteri R. solanacearum.
Penghambatan itu terlihat bahkan pada konsentrasi MG yang lebih rendah dan tergantung dosis.
Meski enzim ekstraselular Bukan faktor penting untuk pertumbuhan R. solanacearum, mereka
terkait erat dengan patogenisitasnya (Schell 2000). Inokulasi sel R. solanacearum terpapar 20 g
/ mL MG menjadi bibit tomat mengakibatkan hilangnya patogenisitas, yang secara inheren stabil
bahkan setelah 10 kali berturut-turut generasi. Fenomena ini mungkin terkait dengan penurunan
aktivitas pektinase dan selulase.

Tidak semua respon R. solanacearum terhadap antibakteri Zat MG bersifat pasif. Patogen
tersebut menangkal efek MG dan mempertahankan aktivitas selnya dengan mengkonsumsi a
jumlah energi yang besar dan mensekresi zat tertentu. Respon positif ini ditunjukkan sebagai
peningkatan Na + K + - Aktivitas ATPase, laju pernafasan dan hasil EPS, mirip dengan respon
yang ditemukan pada patogen sari buah jeruk saat terpapar bakteri amicarthiazol (Huang et al.
2001). EPS adalah zat penting yang bisa member resistensi terhadap faktor lingkungan yang
tidak menguntungkan dan anti obat bakteri Mereka juga merupakan faktor patogenik yang
penting di beberapa patogen (Chou et al 1997). Zat antibakteri mungkin memiliki efek tertentu
pada gen yang terkait dengan EPS produksi atau ekspresinya, yang menyebabkan perubahan EPS
produksi (Prez-Giraldo et al 2003; Niu et al., 2008). Di Pekerjaan kami saat ini, terlepas dari
produksi EPS yang tinggi, R. solanacearum kehilangan patogenisitasnya. Hal tersebut
menunjukkan bahwa Faktor avirulen pada sel R. solanacearum dipengaruhi oleh MG bukan
karena EPS tapi beberapa faktor pathogen lainnya. Namun, pengaruh MG terhadap produksi EPS
bervariasi dengan spesies bakteri. Streptococcus mutans adalah a Bakteri oral berhubungan erat
dengan karies gigi. Percobaan telah membuktikan bahwa MG tidak menunjukkan apapun efek
inhibisi atau stimulasi yang jelas pada hasil EPS S. mutans (Zhao dkk., 2009b).

Berdasarkan beberapa pendekatan yang berbeda terhadap efek MG, diperkirakan MG

bisa memiliki banyak target di R. solanacearum. Pada konsentrasi yang lebih rendah, secara
bertahap Menghancurkan integritas dinding sel, mempengaruhi protein dan protein faktor
patogen dan akhirnya menghambat pertumbuhan bakteri. Dalam proses ini, sel R. solanacearum
menolak efek dari MG untuk bertahan hidup dengan menaikkan aktivitas Na + K + -ATPase ke
menjaga keseimbangan antara intraseluler dan ekstraselular Na + K + - gradien elektrokimia, dan
juga dengan merangsang konsumsi oksigen sel untuk menghasilkan lebih banyak energy
Menanggapi stres dengan meningkatkan produksi EPS. Namun, tanggapan ini menyebabkan
hilangnya patogenisitasnya. Bila sel R. solanacearum terpapar tinggi konsentrasi MG, respirasi
mereka terganggu dan metabolisme terhambat, yang mengakibatkan kematian akhirnya. Hasil
kerja ini menjelaskan mekanisme kerja MG terhadap bakteri R. solanacearum, namun mereka
layak melakukan penyelidikan lebih lanjut di tingkat molekuler.