Teknik yang digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme pada media agar

memungkinkannya tumbuh dengan agak berjauhan dari sesamanya, juga memungkinkan

setiap selnya berhimpun membentuk koloni, yaitu sekelompok massa sel yang dapat

dilihat dengan mata telanjang. Bahan yang diinokulasikan pada medium disebut

inokulum, dengan menginokulasi medium agar nutrient dengan metode cawan gores

atau media cawan tuang, sel-sel mikroorganisme akan terpisah sendiri-sendiri. Setelah

inkubasi, sel-sel mikroba individu memperbanyak diri secara cepat sehingga dalam

waktu 18-24 jam terbentuklah massa sel yang dapat dilihat dan dinamakan koloni.

Koloni dapat terlihat oleh mata telanjang. Setiap koloni merupakan biakan murni satu

macam mikroorganisme.2

Mikroba yang hidup di alam terdapat sebagai populasi campuran dari bebagai jenis

mikrobia yang berbeda prinsip dari isolasi mikrobia dalam memisahkan satu jenis

mikroba dengan mikroba lainnya dari lingkungannya dialam dan ditumbuhkan dalam

medium buatan. Pertumbuhan mikroba dapat dilakukan dalam medium padat, karena

dalam medium padat sel-sel mikroba akan terbentuk suatu koloni sel yang tetap pada

tempatnya, ada beberapa teknik isolasi mikroba yakni :

1. Metode gores atau streak plate menggunakan loop ose dan menggoreskannya

ke permukaan medium agar dengan pola tertentu dengan harapan pada ujung

goresan, hanya sel-sel bakteri tunggal yang terlepas dari ose dan menempel ke

medium. Sel-sel bakteri tunggal ini akan membentuk koloni tunggal yang

kemudian dapat dipindahkan ke medium selanjutnya agar didapatkan biakan

murni.

4
2. Metode tuang atau pour plate dilakukan dengan 2 cara, yaitu dengan

mencampur suspensi bakteri dengan medium agar pada suhu 50ºC kemudian

menuangkannya pada petridisk atau dengan menyemprotkan suspensi pada

dasar petridisk, kemudian menuang medium agar keatasnya dan diaduk.

Setelah agar mengeras, bakteri akan berada pada tempatnya masing-masing

dan diharapkan bakteri tidak mengelompok sehingga terbentuk koloni tunggal.

3. Metode sebar atau spread plate dilakukan dengan menyemprotkan suspensi ke

atas medium agar kemudian menyebarkannya secara merata dengan trigalski.

Dengan ini diharapkan bakteri terpisah secara individual, kemudian dapat

tumbuh menjadi koloni tunggal.2