Lampiran 1.

Bagan Kerja

A. Pembuatan Larutan Induk Glukosa 1 mg/mL

0,01 gram glukosa

- Dimasukkan ke dalam gelas kimia 250 mL

- Ditambahkan dengan akuades sebanyak 10 mL

- Dihomogenkan

Larutan induk glukosa 1 mg/mL

B. Pembuatan Larutan Standar

Larutan induk glukosa 1 mg/mL

- Dipipet masing-masing sebanyak 0,001 mL; 0,002 mL; 0,003 mL;

0,004 mL; 0,005 mL dan 0,006 mL ke dalam tabung reaksi.

- Ditambahkan akuades hingga volumenya masing-masing 5 mL

- Dihomogenkan

- Diberi label pada tiap tabung sesuai dengan konsentrasinya

Hasil

C. Pembuatan Pereaksi Nelson

9,4 mL Larutan Nelson A 0,6 mL Larutan Nelson B

- Dimasukkan ke dalam tabung reaksi.

- Dihomogenkan.

Pereaksi Nelson
D. Preparasi Sampel

Sampel

- Dipipet sebanyak 0,01 mL ke dalam tabung reaksi

- Ditambahkan akuades sebanyak 0,99 mL

- Dihomogenkan

Larutan Sampel
Pengenceran 100 kali

- Dipipet sebanyak 0,01 mL ke dalam tabung reaksi

- Ditambahkan akuades sebanyak 0,99 mL

- Dihomogenkan

Hasil

E. Penentuan Kadar Glukosa

Larutan Standar, Sampel, danBlanko

- Dipipet masing-masing sebanyak 1 mL.

- Ditambahkan pereaksi Nelson sebanyak 1 mL pada masing-masing

tabung reaksi

- Dihomogenkan.

- Dipanaskan selama 20 menit

- Didinginkan dalam air es.

- Ditambahkan larutan arsenomolibdat sebanyak 1 mL.

- Ditambahkan akuades sebanyak 7 mL

- Dihomogenkan.

- Diukur absorbansinya menggunakan spektrofotometri UV-Vis.

Hasil
Lampiran 2. Perhitungan

1. Pengenceran Larutan Standar

1.1 Larutan Standar 0,002 mg/mL

V1 × K1 = V2 × K2

V1 × 1 mg/mL = 5 × 0,002 mg/ mL

V1 = 0,01 mL

Volume akuades yang ditambahkan = 5 mL − 0,01 mL = 4,99 mL

1.2 Larutan Standar 0,004 mg/mL

V1 × K1 = V2 × K2

V1 × 1 mg/mL = 5 × 0,004 mg/ mL

V1 = 0,02 mL

Volume akuades yang ditambahkan = 5 mL − 0,02 mL = 4,98 mL

1.3 Larutan Standar 0,006 mg/mL

V1 × K1 = V2 × K2

V1 × 1 mg/mL = 5 × 0,006 mg/ mL

V1 = 0,03 mL

Volume akuades yang ditambahkan = 5 mL − 0,03 mL = 4,97 mL

1.4 Larutan Standar 0,008 mg/mL

V1 × K1 = V2 × K2

V1 × 1 mg/mL = 5 × 0,008 mg/ mL

V1 = 0,04 mL

Volume akuades yang ditambahkan= 5 mL − 0,04 mL = 4,96 mL

1.5 Larutan Standar 0,010 mg/mL

V1 × K1 = V2 × K2
 V1 × 1 mg/mL = 5 × 0,01 mg/ mL
V1 = 0,05 mL

Volume akuades yang ditambahkan = 5 mL − 0,05 mL = 4,95 mL

1.6 Larutan Standar 0,012 mg/mL

V1 × K1 = V2 × K2

V1 × 1 mg/mL = 5 × 0,012 mg/ mL

V1 = 0,06 mL

Volume akuades yang ditambahkan = 5 mL − 0,06 mL = 4,94 mL

2. Regresi Manual

No Konsentrasi (x) Absorbansi (y) xy x2 y2

1 0,002 0,778 0,001556 0,000004 0,605284

2 0,004 1,680 0,006720 0,000016 2,8224

3 0,006 - - - -

4 0,008 - - - -

5 0,010 - - - -

6 0,012 - - - -

 0,042 2,458 0,008276 0,00002 3,427684

Jika persamaan y = ax + b

a = Slope

n xy - x.y
a= 2
n(x ) – (x)2

(6 x 0,008276) - (0,042 x 2,458)

=
(6 x 0,00002) - (0,042)2

= 0,03
b = Intercept

y.(x2 ) - x.xy
b=
n(x2 ) - (x)2

(3,427684 x 0,00002) - (0,042 x 0,008276)

b=
(6 x 0,00002) - (0,042)2

= 0,4947

R2 = Tetapan Keluruhan Grafik

(n.xy - (x.y))2
R2 =
(n.x2 - (x)2 )(n.y2 - (y)2 )

2
((6 x 0,008276) - (0,042 x 2,458))2
R =
((6 x 0,00002) - (0,0422 )(6 x 3,427684 - (2,458)2 )

= -0,1202

Persamaan grafik y = ax + b

= -127,57x + 1,3027

R2 = 0,4706

Persamaan grafik = -127,57x + 1,3027

y1 = -127,57x + 1,3027

= -127,57(0,002) + 1,3027

= 1,04756

y2 = -127,57x + 1,3027

= -127,57(0,004) + 1,3027

= 0,79242

y3 = -127,57x + 1,3027
 = -127,57(0,006) + 1,3027

= 0,53728

y4 = -127,57x + 1,3027

= -127,57(0,008) + 1,3027

= 0,28214

y5 = -127,57x + 1,3027

= -127,57(0,010) + 1,3027

= 0,027

y6 = -127,57x + 1,3027

= -127,57(0,012) + 1,3027

= -0,22814

Kadar glukosa dalam sampel berdasarkan persamaan y = -127,57x + 1,3027

adalah:

y = -127,57x + 1,3027

0,306 = -127,57x + 1,3027

-127,57x = -0,9967

-0,99678
x =
-127,57

x = 0,007812 mg/mL

kadar glukosa = x . Fp

= 0,007812 mg/mL x 10000

= 78,12 mg/mL