Surat di Mikrobiologi Terapan 1998, 26, 118-122

sifat antimikroba dari tanaman minyak esensial dan esens terhadap lima patogen
yang dibawa makanan penting

A. Smith-Palmer 1, J. Stewart 2 dan L. Fyfe 1,3

1 Departemen Diet dan Nutrisi, Queen Margaret College, 2 Departemen Mikrobiologi Medis, Universitas Edinburgh Medical School, dan 3 Pusat Food

Research, Queen Margaret College, Edinburgh, UK

1617-1697: menerima 23 Juli 1997 dan diterima 19 Agustus 1997

A. SMITH-PALMER, J. STEWART DAN L. Fyfe. 1998. Sifat antimikroba dari 21 pabrik minyak esensial dan dua esensi diselidiki
terhadap lima patogen makanan-ditanggung penting,
Campylobacter jejuni, Salmonella enteritidis, Escherichia coli, Staphylococcus aureus dan
Listeria monocytogenes. Minyak Teluk, kayu manis, cengkeh dan thyme adalah yang paling penghambatan, masing-masing
memiliki konsentrasi bakteriostatik 0 · 075% atau kurang terhadap semua lima patogen. Secara umum, bakteri Gram-positif
lebih sensitif terhadap penghambatan oleh pabrik minyak esensial dari bakteri Gram-negatif. Campylobacter jejuni adalah
yang paling tahan bakteri diselidiki untuk menanam minyak esensial, dengan hanya minyak dari Teluk dan thyme memiliki
konsentrasi bacteriocidal kurang dari 1%. Pada 35 ° C, L. monocytogenes sangat sensitif terhadap minyak pala. Sebuah
konsentrasi kurang dari 0 · 01% adalah bakteriostatik dan 0 · 05% adalah bacteriocidal, tetapi ketika suhu dikurangi menjadi
4 ° C, konsentrasi bakteriostatik meningkat menjadi 0 · 5% dan konsentrasi bacteriocidal untuk lebih besar dari 1%.

PENGANTAR hanya teknik pemeriksaan dasar, sedangkan makalah ini mengambil pekerjaan tahap
lebih lanjut untuk membangun tepat bakteriostatik dan
Dalam beberapa tahun terakhir telah terjadi peningkatan dramatis dalam
konsentrasi bacteriocidal; juga menyelidiki efek
jumlah kasus yang dilaporkan dari penyakit karena makanan, dengan 82 041
suhu pendinginan pada konsentrasi ini untuk L.
melaporkan kasus pada tahun 1995 (Memantau 1996). Akibatnya, ada
monocytogenes. Ini adalah akun pertama dari minyak esensial tanaman
minat yang cukup besar dalam cara-cara untuk menghentikan tren ini dan
melawan Kamp. jejuni yang, meskipun relatif baru
mengurangi timbulnya keracunan makanan. Salah satu bidang penelitian
diakui sebagai patogen makanan, adalah penyebab paling umum dari
adalah pengembangan metode baru dan ditingkatkan makanan
penyakit usus menular (CDSC 1994).
kelestarian. Karena persepsi konsumen negatif dari arti fi pengawet buatan,
perhatian bergeser ke alternatif yang konsumen anggap sebagai alam dan
khususnya, tanaman
MATERIAL DAN METODE
ekstrak, termasuk minyak esensial dan esens. Hal ini juga ditetapkan
bahwa ekstrak tersebut memiliki sifat antimikroba
Pemeliharaan dan persiapan budaya
terhadap bakteri, jamur dan ragi (Farag et al. 1989; Paster
et al. 1990; Aureli et al. 1992; Pai dan Platt 1995). Namun, budaya Escherichia coli 8007, Staphylococcus aureus 10.657,
hanya relatif baru-baru bahwa banyak perhatian telah Listeria monocytogenes 11.994, Salmonella enteritidis 4444 dan
diberikan kepada aplikasi potensi mereka sebagai pengawet makanan. Campylobacter jejuni 11.626 dari National Collection UK
Penelitian ini menguji sifat antimikroba dari 21 Tipe Budaya (61 Colindale Avenue, London) yang utama-
tanaman minyak esensial dan dua esensi terhadap lima dominan dirawat dengan seksama pada Tryptone Soya Agar (TSA; Oxoid, Basingstoke,

patogen makanan-ditanggung; Campylobacter jejuni, Salmonella enteritidis, UK) pada suhu 4 ° C.

Listeriamonocytogenes, Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Sebagian besar

data yang diterbitkan pada antimikroba
Sifat-sifat dari minyak atsiri tanaman terfragmentasi dan mempekerjakan
teknik yang agar

Korespondensi: Dr Lorna Fyfe, Departemen Diet dan Nutrisi, Queen Margaret College, Teknik baik agar digunakan didasarkan pada sumur Kerja membentuk
Clerwood Terrace, Edinburgh EH12 8TS, UK. Metode likasikan dari Dekan dan Ritchie (1987). Dengan demikian, 20ml dari

© 1998 Masyarakat untuk Mikrobiologi Terapan


budaya bakteri 18 jam digunakan untuk benih 500 ml cair
TSA. Empat, sumur diameter 4mm yang menekan setiap piring TSA dan untuk masing-masing
juga telah ditambahkan 25 m l minyak esensial rapi atau
esensi. (Essences bawang merah dan bawang putih yang ramah disediakan oleh
Kabupaten Mowbray Perusahaan dan pabrik minyak esensial
oleh FD Copeland & Sons.) Pelat unggulan dengan Kamp. jejuni
diinkubasi pada 42 ° C di 2 · 5 botol l gas dengan CampyGen
mikroaerofilik paket gas pembangkit (Oxoid). Piring yang tersisa diinkubasi
pada 35 ° C dan zona inhibisi
diukur setelah 24 jam. set rangkap tiga piring disiapkan pada setiap
kesempatan dan setiap percobaan diulang tiga kali.
konsentrasi bakteriostatik dan bacteriocidal
konsentrasi bakteriostatik dan bacteriocidal ditentukan untuk 15 minyak
dan dua esensi menunjukkan terbesar
zona inhibisi. Volume yang tepat minyak ditambahkan ke 9 · 5 ml TSB untuk
memberikan konsentrasi fi nal 0 · 005-1% setelah
TSB diinokulasi dengan 0 · 5 ml dari kultur bakteri 18 jam. (1% dipilih
sebagai konsentrasi maksimum
karena tingkat yang lebih tinggi mungkin akan diterima dalam makanan.) Tabung
diinokulasi dengan Kamp. jejuni diinkubasi pada
42 ° C dalam kondisi mikroaerofilik dan tabung yang tersisa pada 35 ° C dengan
pengocokan biasa. Setelah 24 jam, pertumbuhan
dibandingkan dengan kontrol baik secara visual dan melalui pengukuran
absorbansi pada 630 nm menggunakan Dynatech MR
500 piring pembaca (Dynatech laboratorium, Billinghurst, UK). Sampel (100 m l) dari orang-orang
tabung yang menunjukkan tidak ada pertumbuhan yang
berlapis ke TSA dan diinkubasi selama 24 jam di bawah kondisi yang sama seperti yang
digunakan untuk TSB.
Konsentrasi bakteriostatik adalah konsentrasi terendah di mana bakteri
gagal untuk tumbuh di TSB, tetapi
berbudaya ketika 100 m sampel l berlapis pada TSA.
Konsentrasi bacteriocidal adalah con terendah
centration di mana bakteri gagal untuk tumbuh di TSB dan ketika bakteri tidak
dibudidayakan setelah 100 m l sampel berlapis
pada TSA (Colome et al. 1986.)
Konsentrasi bacteriocidal dan bakteriostatik yang
ditentukan pada 4 ° C untuk L. monocytogenes dengan fi ve minyak yang paling
penghambatan pada 35 ° C. Hal ini dicapai sebagai
dijelaskan sebelumnya, dengan spesifikasi-modi bahwa inoculumwas tumbuh pada 4
° C selama 10 d daripada menggunakan semalam
budaya, dan tabung tes diinokulasi juga diinkubasi selama 10 d pada suhu 4 ° C.
HASIL
Hasil penelitian menunjukkan variasi luas dalam sifat antimikroba dari
minyak atsiri tanaman. Minyak almond, adas manis,
bawang putih, jeruk, mandarin dan oranye menunjukkan tidak ada atau sangat sedikit
hambatan, bahkan ketika digunakan rapi di agar baik tech-
nique; Sebaliknya, minyak lainnya yang dihasilkan zona 10 dan 11mm.
data yang lebih tepat pada sifat antimikroba
© 1998 Masyarakat untuk Mikrobiologi Terapan, Surat di Mikrobiologi Terapan 26, 118-122
ANTIMIKROBA TANAMAN penting minyak 119
diperoleh melalui penentuan konsentrasi bakteriostatik dan bacteriocidal.
Konsentrasi bakteriostatik dan bacteriocidal menunjukkan minyak dari Teluk, kayu
manis, cengkeh dan thyme untuk menjadi yang paling
minyak penghambatan diperiksa. Tabel 2 menunjukkan bahwa empat minyak ini memiliki
konsentrasi bakteriostatik 0 · 075% atau kurang terhadap
semua lima patogen, dan Tabel 3 menunjukkan bahwa dengan pengecualian Kamp.
jejuni, konsentrasi bacteriocidal adalah 0 · 1%
atau kurang. Tabel 2 dan 3 juga menunjukkan bahwa secara umum, konsentrasi
bakteriostatik dan bacteriocidal lebih rendah untuk
bakteri gram positif daripada untuk Gram-negatif. Campylobacter jejuni tampaknya
yang paling tahan dari patogen untuk minyak esensial, dengan hanya
minyak dari Teluk dan
thyme memiliki efek cidal pada konsentrasi kurang dari 1%; Namun, ketika
minyak rapi yang digunakan (Tabel 1), itu sebagai
rentan terhadap penghambatan sebagai empat patogen lainnya.
Minyak pala terbukti sangat spesifik di penghambatan
sifat. Dengan demikian, itu sangat penghambatan terhadap L. monocytogenes pada
35 ° C, dengan konsentrasi bakteriostatik kurang
dari 0 · 01% dan konsentrasi bacteriocidal 0 · 05%. Sebaliknya, konsentrasi
lebih dari 1% akan diperlukan
untuk mencapai stasis atau kematian terhadap empat bakteri lain, meskipun
zona hingga 10mm diproduksi ketika digunakan
rapi dalam teknik baik agar.
Dari Tabel 4 dapat dilihat bahwa minyak pala kurang
terhadap penghambatan L. monocytogenes pada 4 ° C, dengan peningkatan dramatis
dalam konsentrasi bacteriocidal dari 0 · 05% pada
35 ° C lebih besar dari 1% pada suhu 4 ° C. Minyak dari Teluk juga terbukti kurang
penghambatan terhadap L. monocytogenes pada 4 ° C, dengan
peningkatan konsentrasi bacteriocidal ke 0 · 1% dibandingkan dengan 0 · 04% pada 35
° C. Untuk minyak cengkeh, kayu manis dan thyme,
hasil yang sebanding ditunjukkan untuk konsentrasi bakteriostatik dan
bacteriocidal pada dua suhu, dengan
perbedaan menjadi tidak lebih dari 0 · 01%.
DISKUSI
Penentuan konsentrasi bacteriocidal dan bakteriostatik adalah sebuah teknik
lebih sensitif dibandingkan agar-agar dengan baik
Teknik, yang digunakan murni sebagai alat skrining, untuk menghilangkan mereka
minyak tanpa atau proper- penghambatan sangat sedikit
ikatan terhadap fi ve patogen. Hasil konsentrasi statis dan cidal
menunjukkan bahwa bac- dua Gram-positif
teria, Staph. aureus dan L. monocytogenes, lebih sensitif terhadap
penghambatan oleh pabrik minyak esensial dari tiga bakteri Gramnegative, E.
coli, Salm. enteritidis dan Kamp. jejuni.
Dengan demikian, secara umum konsentrasi bakteriostatik dan bacteriocidal yang lebih rendah
diperlukan untuk empat minyak yang paling penghambatan,
salam, kayu manis, cengkeh dan thyme, terhadap Staph. aureus dan
L. monocytogenes. Hal ini juga digambarkan oleh sensitivitas
Staph. aureus dan L. monocytogenes dengan minyak kayu putih, marjoram,
peppermint, rosemary dan sage, dengan bac-
konsentrasi teriostatic 0 · 02-0 · 075% dan bacteriocidal
120 A. SMITH-PALMER ET AL.

Tabel 1 sifat antimikroba dari tanaman minyak esensial dan esens terhadap lima patogen makanan-ditanggung, menggunakan teknik yang agar. Nilai adalah jarak (mm) di zona
inhibisi dan juga agar (diameter 4 mm). Nilai adalah nilai rata-rata dari tiga percobaan terpisah

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Minyak Escherichia coli Staphylococcus aureus Listeria monocytogenes Salmonella enteritidis Campylobacter jejuni
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Badam 4 4 4 4 6·3

Adas manis 4·5 4 4 4·5 4·5

Kemangi 6·9 7·3 5·7 7·1 7·6

Teluk 10 · 1 10 · 9 9·2 11 · 0 10 · 1

Kayu manis 10 · 1 7·5 6·8 10 · 9 8·9

Cengkeh 9·7 8·0 8·4 11 · 1 9·0

Eucalyptus 10 · 3 8·5 5·4 7·5 8·3

Adas 4·9 4·1 4·8 5·5 4·9

Bawang putih 4 4 4 4 4·4

Jahe 4·3 4·5 4·3 4·3 5·1

Jeruk bali 4 4·5 4 4 4

lemon 4 6·0 5·3 4 4·6

jeruk nipis 6·7 5·3 4·2 7·2 5·2

Marjoram 6·5 5·8 4·8 5·0 7·1

jeruk keprok 4 4·1 4·2 4 4

Pala 6·9 6·5 7·7 7·6 10 · 1

Bawang 5·3 6·7 5·6 6·7 5·5

Jeruk 4 4 4 4 4
Permen 6·8 6·4 5·3 6·3 7·1

Rosemary 8·7 5·9 7·1 9·3 9·3

Sage 7·8 7·4 4·8 7·2 8·1

Tanaman permen 9·3 9·8 6·1 7·5 11 · 1

Timi 8·3 8·5 10 · 0 11 · 1 10 · 4

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Meja 2 konsentrasi bakteriostatik (%) untuk berbagai tanaman minyak esensial dan esens. Ini adalah konsentrasi terendah di mana bakteri gagal untuk tumbuh dalam
kaldu, tapi dikultur ketika 100 m l sampel berlapis ke agar-agar
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Minyak Escherichia coli Staphylococcus aureus Listeria monocytogenes Salmonella enteritidis Campylobacter jejuni
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Adas manis ×1 ×1 ×1 ×1 ×1
Kemangi 0 · 25 0·1 0 · 05 0·1 0 · 25

Teluk 0 · 05 0 · 05 0 · 02 0 · 05 0 · 075

Cengkeh 0 · 04 0 · 04 0 · 03 0 · 04 0 · 05

Kayu manis 0 · 05 0 · 04 0 · 03 0 · 05 0 · 05

Eucalyptus × 1 0·1 0 · 075 ×1 ×1

Adas ×1 ×1 ×1 ×1 ×1
Bawang putih ×1 ×1 ×1 ×1 ×1
Jahe ×1 ×1 ×1 ×1 ×1
Marjoram × 1 0 · 05 0 · 02 ×1 0 · 25

Pala ×1 ×1 ³ 0 · 01 ×1 ×1
Bawang ×1 ×1 ×1 ×1 ×1
Permen × 1 0 · 04 0 · 03 ×1 0·1

Rosemary × 1 0,04 0.02 ×1 0·5

Sage ×1 0 · 075 0 · 02 ×1 ×1
Tanaman permen 0 · 25 0 · 075 0 · 04 0 · 25 0 · 25

Timi 0 · 05 0 · 02 0 · 02 0 · 04 0 · 04

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------

© 1998 Masyarakat untuk Mikrobiologi Terapan, Surat di Mikrobiologi Terapan 26, 118-122
 ANTIMIKROBA TANAMAN penting minyak 121

tabel 3 konsentrasi bacteriocidal (%) untuk berbagai tanaman minyak esensial dan esens. Ini adalah konsentrasi terendah di mana bakteri gagal untuk tumbuh dalam kaldu
dan ketika bakteri tidak dibudidayakan setelah 100 m l sampel berlapis ke agar-agar
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Minyak Escherichia coli Staphylococcus aureus Listeria monocytogenes Salmonella enteritidis Campylobacter jejuni
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Adas manis ×1 ×1 ×1 ×1 ×1
Kemangi 0·5 0·5 0 · 25 0·5 ×1
Teluk 0·1 0 · 075 0 · 04 0 · 075 0·5

Cengkeh 0·1 0 · 04 0 · 04 0 · 075 1

Kayu manis 0·1 0 · 04 0 · 075 0·1 ×1
Eucalyptus × 1 0 · 25 0 · 25 ×1 ×1
Adas ×1 ×1 ×1 ×1 ×1
Bawang putih ×1 ×1 ×1 ×1 ×1
Jahe ×1 ×1 ×1 ×1 ×1
Marjoram × 1 0 · 25 0 · 25 ×1 ×1
Pala ×1 ×1 0 · 05 ×1 ×1
Bawang ×1 ×1 ×1 ×1 ×1
Permen × 1 0 · 25 0·5 ×1 ×1
Rosemary × 1 0·1 0·1 ×1 ×1
Sage ×1 1 0 · 25 ×1 ×1
Tanaman permen 0·5 ×1 0 · 25 0·5 ×1
Timi 0·1 0 · 03 0 · 03 0 · 04 0 · 05

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------

tabel 4 The bakteriostatik dan bacteriocidal konsentrasi (%) Listeria monocytogenes adalah patogen perhatian besar bagi
dari lima pabrik minyak esensial terhadap Listeria monocytogenes di industri makanan, terutama dalam makanan biasanya disimpan di bawah
4 ° C dan 35 ° C
kondisi pendinginan di mana, tidak seperti kebanyakan makanan-ditanggung
-- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
patogen, ia mampu berkembang biak (Junttila et al. 1988). quence
bakteriostatik bacteriocidal
quently, pendinginan tidak boleh diandalkan sebagai satu-satunya
-- - - - - - - - - - - - - - - - - - -- - - - - - - - - - - - - - - - - -
Metode untuk kontrol L. monocytogenes, tetapi harus
35 ° C 4°C 35 ° C 4°C

-- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - digabungkan dengan cara lain pelestarian. satu poss-

Teluk 0 · 02 0 · 03 0 · 04 0·1 Opsi ible adalah penggunaan minyak esensial tanaman. Dari Tabel 4,

Kayu manis 0 · 03 0 · 02 0 · 075 0 · 075 paling berlaku akan cengkeh, kayu manis dan thyme, sebagai
Cengkeh 0 · 03 0 · 02 0 · 04 0 · 05 ini mempertahankan con rendah bakteriostatik dan bacteriocidal mereka
Pala ³ 0 · 01 0·5 0 · 05 ×1 centrations pada 4 ° C, tidak seperti minyak Teluk, dan terutama pala,
Timi 0 · 02 0 · 02 0 · 03 0 · 03
yang kurang penghambatan pada 4 ° C dibandingkan pada 35 ° C. Ini mungkin
-- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
hasil dari perubahan ke lokasi aksi minyak ini pada suhu yang lebih
rendah, atau perubahan dalam membran bakteri, sehingga mengurangi
penetrasi minyak ke bagian dalam sel. Hal ini juga mungkin bahwa
efektivitas minyak pala terhadap L. monocytogenes pada 35 ° C adalah
konsentrasi sama atau kurang dari 1%. Sebaliknya, con- karena pelepasan
centrations minyak ini lebih dari 1% akan diperlukan volatil penghambatan pada suhu ini. The pengaruh dari tem-
untuk mencapai penghambatan terhadap bakteri Gram-negatif. Itu perature pada aktivitas minyak esensial tanaman juga telah
perbedaan sensitivitas antara Gram-negatif dan melaporkan byTing andDeibel (1991) yang menunjukkan bahwa refriger-

bakteri gram positif untuk penghambatan oleh minyak esensial tanaman Suhu asi bisa meningkatkan efek penghambatan sage,
didukung oleh peneliti lain termasuk Shelef (1983) dan tapi tidak cengkeh atau oregano, terhadap L. monocytogenes.

Farbood et al. ( 1976). Tidak diketahui persis mengapa Gram Hal ini diterima secara luas bahwa konsentrasi yang lebih tinggi dari tanaman

bakteri negatif harus kurang rentan, tapi mungkin minyak esensial yang diperlukan dalam makanan dari media laboratorium

terkait dengan membran luar bakteri gram negatif (Farbood et al. 1976). Karena perubahan organoleptik yang
yang endows permukaan bakteri dengan hidrofilisitas yang kuat Sifat makanan yang disebabkan oleh tingginya tingkat minyak esensial tanaman,

dan bertindak sebagai penghalang permeabilitas yang kuat (Nikaido dan Vaara hal itu mungkin tidak mungkin untuk menambah konsentrasi cukup tinggi untuk

1985). menyebabkan kematian sel bakteri. Namun, dalam banyak kasus, con- sebuah

© 1998 Masyarakat untuk Mikrobiologi Terapan, Surat di Mikrobiologi Terapan 26, 118-122
122 A. SMITH-PALMER ET AL.
centration mencukupi untuk menghasilkan stasis pertumbuhan mungkin
semua yang diperlukan untuk menghasilkan produk yang aman, asalkan
beban patogen awal rendah. Juga, seperti yang ditunjukkan oleh hasil
pada Tabel 2 dan 3, konsentrasi diperlukan untuk stasis bisa
jauh lebih rendah daripada mereka untuk membunuh.
Konsentrasi bakteriostatik dan bacteriocidal rendah
beberapa tanaman minyak esensial terhadap beberapa yang paling penting
penyebab keracunan makanan bakteri memberikan poten- menarik
Tial untuk masa depan, terutama dalam terang pergeseran jauh dari
arti fi pengawet buatan dan bergerak menuju lebih alami
alternatif.
UCAPAN TERIMA KASIH
Para penulis mengakui FD Copeland & Sons, Colanol
Rumah, 5 Barat lapangan Street, London, dan Kabupaten Mow-
bray Perusahaan, Regency House, Hixon Industrial Estate,
Hixon, Staffordshire, untuk penyediaan minyak esensial tanaman
dan esens.
REFERENSI
Aureli, P., Costantini, A. dan Zolea, S. (1992) aktivitas antimikroba
beberapa tanaman minyak atsiri terhadap Listeria monocytogenes. majalah
Perlindungan Food 55, 334-348.
CDSC (1994) Berkomunikasi Penyakit Surveillance Pusat Laporan. Makanan-
© 1998 Masyarakat untuk Mikrobiologi Terapan, Surat di Mikrobiologi Terapan 26, 118-122
ditanggung Penyakit Surveillance di Inggris dan Wales. Pemerintah
Layanan Statistik. London: Of fi ce Statistik Nasional.
Colome, JS, Cano, RJ, Kubinski, A. dan Grandy, DV (1986)
Latihan Laboratorium Mikrobiologi. pp. 95. Barat Publishing
Perusahaan.
Dekan, S. dan Ritchie, G. (1987) sifat antimikroba dari tanaman
minyak esensial. International Journal of Microbiology Food 5, 165-
180.
Farag, RS, Daw, ZY, Hewedi, FM dan Baroty, GSA (1989)
aktivitas antimikroba dari beberapa minyak esensial rempah-rempah Mesir. Jurnal Perlindungan
Pangan 52, 665-667.
Farbood, MI, MacNeil, JH dan Ostovar, K. (1976) Pengaruh
rosemary rempah-rempah ekstraktif pada pertumbuhan mikro-organisme dalam daging.
Jurnal Susu dan Teknologi Pangan 39, 675-679. Junttila, JR, Niemala, SI dan
Hirn, J. (1988) pertumbuhan Minimum
suhu Listeria monocytogenes dan non-hemolitik
Listeria. Journal of Applied Bacteriology 65, 321-327. Memantau (1996) Penduduk dan
Kesehatan. Statistik Nasional. Memerintah-
ment statistik Service. London: Of fi ce Statistik Nasional.
Nikaido, H. dan Vaara, M. (1985) secara molekuler dari luar bakteri
permeabilitas membran. Ulasan mikrobiologi 49, 1-32.
Pai, ST dan Platt, MW (1995) efek antijamur dari Allium sativum
(Bawang putih) ekstrak terhadap Aspergillus spesies yang terlibat dalam otomycosis. Surat
di Mikrobiologi Terapan 20, 14-18. Paster, N., Juven, BJ, Shaaya, E. et al. ( 1990) efek
hambat oregano dan thyme penting minyak pada cetakan dan bakteri makanan
ditanggung. Surat di Mikrobiologi Terapan 11, 33-37.
Shelef, LA (1983) efek antimikroba dari rempah-rempah. Journal of Food
Keamanan 6, 24-29.
Ting, WTE dan Deibel, KE (1991) Sensitivitas Listeria mono
cytogenes untuk rempah-rempah pada dua temperatur. Journal of Food Safety 12,
129-137.