UJI KADAR SISA ETANOL DAN ABU TOTAL EKSTRAK ETANOL 80

% DAUN BUNGA MATAHARI (Helianthus annuus) DAN TANAMAN

ANTING-ANTING (Acalypha indica Linn)

Khoirul Ngibad1 ; Roihatul Muti’ah, M.Kes, Apt2 ;

Elok Kamilah Hayati, M.Si.3 ; Dr. Ahmad Barizi, M.A.4

1. Mahasiswa Kimia 2. Dosen Kimia 3. Dosen Kimia 4. Dosen Tarbiyah

Fakultas Sains dan Teknologi

Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang
2013

ABSTRAK
Telah dilakukan penelitian tentang uji kadar sisa etanol dan abu total
ekstrak etanol 80 % daun bunga Matahari (Helianthus annuus) dan tanaman
Anting-anting (Acalypha indica Linn). Tujuan penelitian ini adalah untuk
mengetahui kadar sisa etanol dengan variasi metode pemisahan pelarut dan abu
total ekstrak.
Penelitian ini meliputi ekstraksi daun bunga Matahari dan tanaman
Anting-anting secara terpisah menggunakan metode maserasi dengan pelarut
etanol 80 %. Masing-masing variasi metode pemisahan pelarut dari ekstrak
dianalisis kadar sisa etanol menggunakan metode berat jenis dan abu total
menggunakan metode pengabuan kering.
Hasil analisis kadar sisa etanol ektrak etanol 80 % daun bunga Matahari
dan tanaman Anting-anting dengan perlakuan pemisahan pelarut (2, 3, dan 4)
masih memenuhi persyaratan yang ditetapkan oleh FDA.
Sedangkan kadar abu total ekstrak etanol 80 % daun bunga Matahari dan
tanaman Anting-anting masing-masing sebesar 14,67 % ± 0,29 dan 6,41 % ±
0,39.

Kata Kunci : Bunga Matahari (Helianthus annuus), Anting-anting (Acalypha

indica Linn) , Etanol 80 %, Sisa Etanol, Abu Total

1
PENDAHULUAN
Standardisasi ekstrak
tumbuhan obat di Indonesia
merupakan salah satu tahapan
penting dalam pengembangan obat
asli Indonesia. Sesuai instruksi
Depkes-BPOM (2004), ketentuan
umum mutu ekstrak berdasarkan
aspek-aspek spesifik dan
nonspesifik. Aspek-aspek spesifik
adalah aspek profil KLT, penetapan
kadar marker, kadar total golongan
metabolit, dan aspek kelarutan
ekstrak dalam etanol dan air.
Sedangkan aspek-aspek nonspesifik
adalah aspek penetapan sisa air, sisa
pelarut, kadar abu, keberadaan
cemaran mikroba, Aspergillus flavus,
cemaran aflatoksin, residu peptisida
dan cemaran logam berat (Saifudin,
dkk., 2011).
Agar khasiat dan stabilitas
ekstrak dapat terjamin, maka perlu
dipenuhi suatu standar mutu
produk/bahan ekstrak (Depkes RI,
1995). Standarisasi ekstrak
tumbuhan obat di Indonesia
merupakan salah satu tahapan
penting dalam pengembangan obat
asli Indonesia. Sesuai instruksi
Depkes-BPOM (2004), salah satu
aspek nonspesifik dalam standarisasi
adalah penentuan sisa pelarut dan
abu total (Saifudin, dkk., 2011).
Menurut Food and Drug
Association (FDA), batasan sisa
pelarut dalam ekstrak adalah sebesar
1,046 % sedangkan menurut
KEPMENKES RI (1994), kadar
etanol yang ada dalam jamu tidak
boleh lebih dari 1 % v/v. Oleh
karenanya, harus ditentukan kadar
sisa etanol dalam ekstrak agar
standar mutu dari obat alam dapat
terpenuhi (Saifudin, dkk., 2011).
Kadar abu ada hubungannya
dengan mineral internal maupun
eksternal suatu bahan. Apabila akan
ditentukan jumlah mineralnya dalam
bentuk aslinya adalah sangat sulit.
Oleh karenanya, biasanya dilakukan
dengan menentukan sisa pembakaran
garam mineral tersebut yang dikenal
dengan pengabuan (Saifudin, dkk.,
2011).
Tujuan dari penelitian ini
adalah untuk mengetahui kadar sisa
etanol dan abu total pada masing-
masing ekstrak etanol 80 % daun
bunga Matahari (Helianthus annuus)
dan tanaman Anting-anting
(Acalypha indica Linn).
METODE PENELITIAN
Alat
Alat-alat yang digunakan
adalah seperangkat alat gelas,
blender, neraca analitik, kertas saring
whatman, shaker, penyaring
buchner, oven, vial, ayakan 60 mesh,
rotary evaporator, bejana untuk
proses pengaliran gas N2, krus
porselen, piknometer 25 mL, hair
dryer, tanur, desikator, dan
destilator.
Bahan
Bahan-bahan yang
digunakan adalah etanol 80 %, gas
N2, aseton, dan aquades.
Prosedur Penelitian
Preparasi Sampel
Seluruh bagian daun bunga
Matahari segar dicuci, dipotong
kecil-kecil, dipanaskan dengan terik
matahari secara tidak langsung
dengan cara ditutupi dengan kain
hitam selama 2 jam. Kemudian
dikeringkan dengan diangin-
anginkan (di udara terbuka
2
terlindung dari panas matahari)
selama 7 hari. Setelah itu, diblender
sampai berbentuk serbuk dan diayak
menggunakan ukuran ayakan 60
mesh.
Daun dan batang Anting-
anting segar dicuci, dipotong kecil-
kecil, dikeringkan dengan diangin-
anginkan (di udara terbuka
terlindung dari panas matahari)
selama 7 hari. Setelah itu, diblender
sampai berbentuk serbuk dan diayak
menggunakan ukuran ayakan 60
mesh.
Ekstraksi Maserasi
Serbuk kedua sampel
diperlukan secara terpisah. Masing-
masing ditimbang sebanyak 100 g
dan perlakuan dibagi menjadi dua
bagian masing-masing 50 g untuk
proses maserasi. Kemudian masing-
masing dimaserasi menggunakan 250
mL pelarut etanol 80 % selama 24
jam dengan pengocokan selama 3
jam menggunakan shaker dengan
kecepatan 120 rpm. Kemudian
disaring menjadi filtrat dan ampas.
Ampas direndam kembali
dengan 150 mL pelarut etanol 80 %
yang baru. Selanjutnya disaring dan
ampasnya direndam kembali dengan
100 mL pelarut etanol 80 % yang
baru. Kemudian disaring, kedua
ampas dijadikan satu dan direndam
kembali dengan 150 mL pelarut
etanol 80 % yang baru. Kemudian
disaring menjadi filtrat dan ampas.
Masing-masing filtrat digabung dan
dipekatkan dengan rotary evaporator
sampai diperoleh ekstrak pekat.
Uji Kadar Sisa Etanol Ekstrak
Uji kadar sisa etanol ekstrak,
dilakukan beberapa variasi perlakuan
antara lain:
1. Ekstrak pekat setelah dirotary
dengan tidak diperlakukan lebih
lanjut
2. Ekstrak pekat setelah dirotary
kemudian dikonstankan beratnya
3. Ekstrak pekat setelah dirotary
kemudian dikonstankan beratnya
dengan oven
4. Ekstrak pekat setelah dirotary dan
dialiri gas N2
Uji kadar sisa etanol
menggunakan metode destilasi.
Ekstrak pekat daun bunga Matahari
dan Anting-anting masing-masing
ditimbang sebanyak 2 g dan
dilarutkan dalam aquades sampai 25
mL. Kemudian dimasukkan ke dalam
labu destilasi, suhu destilat diatur
pada 78,5 OC. Proses destilasi selama
± 3 jam atau dihentikan apabila tidak
menetes lagi. Kemudian diukur
volume destilat dan ditandabataskan
dalam labu ukur 100 mL. Kadar sisa
etanol ditentukan dengan
menggunakan metode berat jenis.
Hasil yang diperoleh dibandingkan
dengan standar (Saifudin, dkk.,
2011).
Pembuatan Seri Larutan Baku
Etanol
Etanol p.a. diambil 1,0; 2,0;
3,0; dan 4,0 mL dengan mikropipet
dan dimasukkan ke dalam labu ukur
100 mL. Ditambahkan aquades
hingga volume 100 mL (Tjandrawati,
2006).
Pengukuran Larutan Baku Etanol
Piknometer 25 mL
dibersihkan secara hati-hati dengan
menggunakan aseton, kemudian
dikeringkan dan ditimbang.
Piknometer diisi dengan aquades
secara hati-hati hingga penuh.
Kelebihan aquades pada puncak pipa
3
kapiler dibersihkan. Piknometer yang
berisi aquades segera ditimbang dan
beratnya dicatat. Cara yang sama
dilakukan untuk larutan baku etanol.
Berat jenis dihitung dengan rumus
berikut (Tjandrawati, 2006):
Setelah ditentukan berat
jenis sampel kemudian dibuat
persamaan kurva liner hubungan
antara konsentrasi etanol dalam
bentuk persen (sumbu x) dengan
berat jenis (sumbu y). Konsentrasi
etanol ditentukan dengan persamaan:
Keterangan:
x: Konsentrasi etanol sampel (%)
y: Berat jenis etanol sampel (g/mL)
Uji Kadar Abu Total Ekstrak
Ekstrak pekat daun bunga
Matahari dan Anting-anting masing-
masing ditimbang sebanyak 2 g dan
dimasukkan ke dalam krus porselen.
Ekstrak pekat tersebut dipijarkan
perlahan-lahan dalam tanur dengan
menaikkan suhu secara bertahap
hingga ±600 °C selama ± 6 jam atau
sampai bebas karbon (arang habis).
Selanjutnya didinginkan dalam
desikator dan ditimbang hingga
didapat berat abu konstan (Depkes
RI, 1980).
Kadar abu total dihitung
dengan rumus sebagai berikut:
Keterangan:
A adalah berat cawan kosong, dinyatakan
dalam g
B adalah berat cawan + sampel ekstrak,
dinyatakan dalam g
C adalah berat cawan + abu, dinyatakan
dalam g.
Hasil yang diperoleh tidak
dibandingkan dengan standar. Hal ini
disebabkan standar kadar abu total
dari daun bunga Matahari dan
Anting-anting belum ada dalam
daftar tanaman obat herbal
terstandar.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Uji Kadar Sisa Etanol
Pada penelitian ini dilakukan
uji kadar sisa etanol ekstrak etanol
80 % dari sampel daun bunga
Matahari dan tanaman Anting-anting
dengan beberapa variasi perlakuan
untuk memaksimalkan pemisahan
pelarut. Tujuan adanya beberapa
variasi perlakuan tersebut adalah
untuk mengetahui perlakuan mana
yang menghasilkan kadar sisa etanol
dalam ekstrak yang paling sedikit
Nilai kadar etanol ekstrak
etanol 80 % daun bunga Matahari
dan tanaman Anting-anting
ditentukan dengan cara memasukkan
nilai berat jenis etanol dalam ekstrak
ke dalam persamaan linear y =-0,001
x + 0,992 dan didapatkan nilai x
sebagai nilai kadar etanaol masing-
masing ekstrak. Data yang diperoleh
ditunjukkan dalam Tabel 1, 2, 3, dan
4.
Tabel 1 Kadar etanol Ekstrak pekat setelah
dirotary dengan tidak diperlakukan
lebih lanjut
Perlakuan 1 menghasilkan
kadar sisa etanol yang paling besar
dibandingkan dengan perlakuan 2, 3
dan 4. Hal ini dikarenakan ekstrak
pekat setelah dirotary dengan tidak
diperlakukan lebih lanjut tersebut
4
masih mengandung sisa pelarut
etanol.
Tabel 2 Kadar etanol Ekstrak pekat setelah
dirotary kemudian dikonstankan
beratnya
Perlakuan 2 memberikan hasil
kadar etanol yang kecil dikarenakan
adanya perlakuan lebih lanjut yaitu
dengan cara mengkonstankan berat
ekstrak sampai 5 hari. Kelemahan
pada perlakuan nomer 2 ini adalah
dibutuhkannya waktu yang lama
untuk meminimalkan sisa pelarut
etanol tersebut sedangkan
kelebihannya adalah tidak
membutuhkan biaya tambahan.
Tabel 3 Kadar etanol Ekstrak pekat setelah
dirotary kemudian dikonstankan
beratnya dengan oven
Perlakuan 3 memberikan hasil
kadar etanol yang paling kecil
dibandingkan perlakuan 1, 2, dan 4.
Hal ini dikarenakan adanya bantuan
proses oven dengan suhu 30 – 37 OC
dalam meminimalkan sisa pelarut.
Perlakuan ini merupakan perlakuan
yang terbaik dalam memisahkan
pelarut etanol karena hanya
membutuhkan waktu sehari dan tidak
membutuhkan biaya tambahan.
Selain itu, dengan suhu oven 30 – 37
O
C tersebut tidak merusak senyawaan
aktif metabolit sekunder yang
digunakan untuk analisis bioassay
pada tahapan selanjutnya.
Tabel 4 Kadar etanol Ekstrak pekat setelah
dirotary dan dialiri gas N2
Perlakuan 4 memberikan
hasil kadar etanol yang kecil
dikarenakan adanya aliran gas N2
pada ekstrak. Kelebihan perlakuan
ini adalah ekstrak terhindar dari
pengaruh panas sehingga kerusakan
ekstrak bisa diminimalkan sedangkan
kelemahannya adalah dibutuhkan
biaya tambahan untuk melakukan
pemisahan pelarut dengan perlakuan
ini.
Batas sisa pelarut etanol yang
diperbolehkan oleh Food and Drug
Association (FDA) adalah sebesar
1,046 %. Jadi di antara perlakuan
tersebut perlakuan 2, 3, dan 4 masih
memenuhi persyaratan yang
ditetapkan oleh FDA.
Hasil Uji Kadar Abu Total
Pada penelitian ini dilakukan
penentuan kadar abu total ekstrak
etanol 80 % dari sampel daun bunga
Matahari dan tanaman Anting-
anting. Penentuan kadar abu total
bertujuan untuk memberikan
gambaran kandungan mineral
internal dan eksternal yang mana
tiap-tiap ekstrak simplisia
mempunyai kadar abu total yang
berbeda-beda. Ekstrak dipanaskan
hingga senyawa organik dan
turunannya terdestruksi dan menguap
sampai tinggal unsur mineral dan
anorganik saja.
Tabel 6 Kadar abu total ekstrak etanol 80 %
daun bunga Matahari dan Anting-
anting
Menurut Winarno (1991),
kadar abu yang yang terukur
merupakan bahan-bahan anorganik
atau gambaran mineral-mineral
internal maupun ekternal yang tidak
5
terbakar dalam proses pengabuan DAFTAR PUSTAKA
sedangkan bahan-bahan organik Departemen Kesehatan Republik
telah terbakar. Kadar abu total yang Indonesia. 1980. Materi
didapat masing-masing tidak Medika Jilid 1V. Direktoral
dibandingkan SNI yang ada. Hal ini Jenderal Pengawasan Obat
dikarenakan belum adanya standar dan Makanan. Jakarta.
kadar abu total untuk simplisia daun Depkes RI. 1995. Materia Medika,
bunga Matahari dan tanaman Anting- Jilid VI, Direktorat Jenderal
anting. Pengawan obat dan
makanan. Jakarta: 152.
KESIMPULAN Menteri Kesehatan Republik
1. Kadar sisa pelarut etanol ekstrak Inoonesia Keputusan Menteri
daun bunga Matahari (Helianthus Kesehatan Republik
annuus) dan Anting-anting Indonesia Nomor :
661/Menkes/SK/VII/ 1994
(Acalypha indica Linn) dengan
Tentang Persyaratan Obat
perlakuan pemisahan pelarut (2, 3, Tradisional.
dan 4) masih memenuhi Saifudin, A., Rahayu, V., dan
persyaratan yang ditetapkan oleh Teruna, H. Y. 2011.
FDA. Standardisasi Bahan Obat
2. Kadar abu total ekstrak etanol 80 Alam. Yogyakarta: Graha
% daun bunga Matahari Ilmu.
Tjandrawati, M. M. M.Y. 2006.
(Helianthus annuus) dan Anting-
Perbandingan Metode
anting (Acalypha indica Linn) Kromatografi Gas dan
masing-masing sebesar 14,67 % Beratjenis pada Penetapan
± 0,29 dan 6,41 % ± 0,39. Kadar Etanol dalam
Minuman Anggur. Fakultas
SARAN Farmasi USD.
1. Perlu dilakukan uji standardisasi Winarno, F.G. 1991. Kimia Pangan
parameter nonspesifik lainnya dan Gizi. Jakarta: Gramedia
seperti aspek penetapan sisa air, Pustaka Utama.
keberadaan cemaran mikroba,
Aspergillus flavus, cemaran
aflatoksin, residu peptisida dan
cemaran logam berat.
2. Perlu dilakukan uji standardisasi
parameter spesifik seperti aspek
profil KLT, penetapan kadar
marker, kadar total golongan
metabolit, dan aspek kelarutan
ekstrak dalam etanol dan air.