terbentuknya warna merah karena
0 g
penambahan H2SO4.
Uji Saponin. Sebanyak 0.1 gram ekstrak
jawer kotok ditambahkan 5 mL akuades lalu
dipanaskan selama 5 menit. Kemudian
dikocok selama 5 menit. Uji saponin
menunjukkan hasil positif jika terbentuk busa
setinggi kurang lebih 1 cm dan tetep stabil
setelah didiamkan selama 15 menit.
Uji Triterpenoid dan Steroid. Sebanyak
0.1 gram ekstrak jawer kotok ditambahkan 5
mL etanol 30% lalu selama 5 menit
dipanaskan dan disaring. Filtratnya diuapkan
kemudian ditambahkan dengan eter. Lapisan
eter ditambahkan dengan pereaksi Lieberman
Burchard (3 tetes asetat anhidrida dan 1 tetes
H2SO4 pekat). Warna merah atau ungu yang
terbentuk menunjukkan adanya triterpenoid
dan warna hijau menunujukkan adanya
steroid.
Uji Tanin. Ekstrak jawer kotok sebanyak
0.1 gram ditambahkan 5 mL akuades
kemudian dididihkan selama 5 menit. Larutan
ini disaring dan filtratnya ditambahkan
dengan 5 tetes FeCl3 1% (b/v). Warna biru tua
atau hitam kehijauan yang terbentuk
menunjukkan adanya tanin.
Uji Minyak Atsiri. Sampel ekstrak
jawer kotok dilarutkan dalam alkohol lalu
diuapkan hingga kering. Jika berbau aromatis
yang spesifik maka sampel mengandung
minyak atsiri.
Penentuan Konsentrasi Hambat Tumbuh
Minimum (KHTM)
Penentuan konsentrasi hambat tumbuh
minimum (KHTM) dilakukan setelah
diketahui filtrat daun jawer kotok memilliki
aktivitas antibakteri. KHTM adalah
konsentrasi terendah komponen antibakteri
yang menyebabkan tidak terjadinya
pertumbuhan bakteri sekitar lubang pada masa
inkubasi 24 jam. Metode analisis yang
digunakan dalam penentuan ini adalah metode
Bintang (1993) yang merupakan modifikasi
dari metode perforasi. Biakan bakteri uji
ditanam satu ose dalam 10 mL media cair
kemudian diinkubasi dalam inkubator
bergoyang selama 24 jam pada suhu 37 °C.
Sebanyak 100 μL biakan bakteri dengan OD ±
0,5 dicampurkan ke dalam 20 mL media agar
PYG pada suhu 45°C, lalu dibiarkan sampai
memadat. Kemudian pada media agar tersebut
dibuat lubang dengan diameter ± 5.5 mm
menggunakan ujung pipet tetes. Sampel yang
digunakan adalah ekstrak yang menunjukkan
aktivitas antibakteri paling besar. Ekstrak
jawer kotok ditimbang sebanyak 1.
kemudian dilarutkan dalam 2 mL akuades
steril. Campuran yang dihasilkan selanjutnya
diencerkan sehingga diperoleh konsentrasi
yang bervariasi yaitu 500, 125, 75, 30, 15, dan
10, 5, 2, 1, 0.8, 0.5, 0.3, 0.2, 0.1, 0.05 mg/mL.
Sampel dengan konsentrasi ini kemudian akan
diuji pada lubang media PYG yang telah
diinkubasi dengan bakteri uji. Masing-masing
sampel dengan konsentrasi di atas
dimasukkan ke dalam lubang sebanyak 50 µL.
Kemudian diinkubasi selama 24 jam pada
suhu 37 oC. Aktivitas antibakteri diperoleh
dengan mengukur zona hambat, yaitu zona
atau daerah bening yang menunjukkan bakteri
tidak tumbuh di sekitar filtrat tersebut. Zona
bening diukur dengan menggunakan jangka
sorong sebanyak empat kali pengukuran
diagonal dan nilainya dirata-ratakan.
Analisis Statistik
Analisis statistik yang digunakan adalah
rancangan percobaan dua faktor dalam
Rancangan Acak Lengkap (RAL). Model
rancangannya:
Yij = µ + τi + εij
Yij = Diameter zona hambat pada dosis ke-i
dan ulangan ke-j
µ = Pengaruh rataan umum
τ = Pengaruh dosis ke-i
ε =Pengaruh acak pada dosis ke-i ulangan
ke-j dengan
i: 1 = 500 mg/mL 2 = 250 mg/mL
3 = 125 mg/mL 4 = 75 mg/mL
5 = 30 mg/mL 6 = 15 mg/mL
7 = 10 mg/mL 8 = 5 mg/mL
9 = 2 mg/mL 10 = 1 mg/mL
11= 0.8 mg/mL 12= 0.5 mg/mL
13= 0.2 mg/mL 14= 0.1 mg/mL
15= 0.05 mg/mL
J: 1,2.
Rancangan ini digunakan pada uji
antibakteri penentuan KHTM menggunakan
cara perforasi metode Bintang. Data yang
diperoleh dianalisis dengan ANOVA (analysis
of variance) pada tingkat kepercayaan 95%
dan taraf α 0.05. Uji lanjut yang digunakan
adalah uji Tukey. Semua data dianalisis
dengan program SPSS 12.0.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisis Kadar Air dan Ekstraksi
Sampel yang akan digunakan dalam
penelitian ini sebelumnya diukur kadar airnya.
Menurut Harjadi (1993) penentuan kadar air
berguna untuk menyatakan kandungan zat
dalam tumbuhan sebagai % bahan kering, dan
juga untuk mengetahui ketahanan suatu bahan
dalam penyimpanan. Sampel yang baik untuk
disimpan dalam jangka waktu panjang adalah
sampel dengan kadar air kurang dari 10%.
Pada kadar ini kemungkinan rusak terkena
jamur saat penyimpanan sangat kecil
(Tiagarna 2004). Kadar air yang diperoleh
dari daun jawer kotok sebesar 89.30%. Karena
kadar airnya tinggi maka ekstraksi daun jawer
kotok menggunakan daun kering agar bisa
disimpan dalam jangka waktu yang lama.
Alasan lain dipilihnya daun kering untuk
proses ekstraksi adalah agar rendemen yang
diperoleh lebih banyak.
Sebelum ekstraksi dilakukan perlu
dilakukan beberapa perlakuan khusus. Daun
jawer kotok yang baru dipetik
dikeringudarakan terlebih dahulu. Hal ini
bertujuan untuk mematikan enzim guna
mencegah terjadinya oksidasi enzimatik atau
hidrolisis senyawaan yang akan diisolasi.
Proses penyeleksian dilakukan untuk
mendapatkan hanya bagian daun saja dari
tanaman jawer kotok yang selanjutnya akan
diolah. Selain itu, penyeleksian ini juga
bertujuan untuk menghindari pencemaran oleh
tanaman jawer kotok yang busuk (rusak) oleh
organisme atau tanaman lainnya. Hal ini harus
dilakukan dengan cermat untuk menghindari
terjadinya penyimpangan data analisis yang
disebabkan oleh terekstraknya senyawa dari
bahan pencemar tersebut (Harborne 1987).
Ekstraksi daun jawer kotok menggunakan
teknik maserasi. Maserasi digunakan untuk
mengekstrak sampel yang relatif tidak tahan
panas. Teknik ini digunakan karena relatif
sederhana tapi menghasilkan produk yang
baik (Meloan 1999). Maserasi ini dilakukan
dengan merendam daun kering jawer kotok
dengan pelarut selama 3x24 jam dengan
mengganti pelarut setiap 24 jam. Hal ini
dilakukan untuk memperoleh hasil ekstrak
yang maksimal. Perbandingan bahan dan
pelarut dapat mempengaruhi hasil ekstraksi.
Menurut Melawati (2006) perbandingan yang
baik antara pelarut dan bahan adalah 1:10.
Oleh karena itu, pada penelitian ini digunakan
perbandingan tersebut
Pelarut yang digunakan untuk maserasi
pada penelitian ini adalah heksana, air, dan
aseton. Pemilihan pelarut berdasarkan prinsip
kelarutan yaitu ”like disolve like” artinya
pelarut polar akan melarutkan senyawa polar,
demikian juga sebaliknya pelarut nonpolar
akan melarutkan senyawa nonpolar, pelarut
organik akan melarutkan senyawa organik
(Khopkar 1990). Penggunaan berbagai jenis
pelarut dengan tingkat kepolaran yang
berbeda-beda ini bertujuan agar senyawa yang
belum diketahui jenisnya dapat terekstrak
secara optimal, baik secara kualitatif maupun
kuantitatif pada salah satu jenis pelarut yang
digunakan (Murni 1998).
Ketiga ekstrak yang diperoleh kemudian
dipekatkan untuk mengetahui persen
rendeman. Pemekatan dilakukan dengan
menggunakan rotary evaporator pada suhu
40oC untuk mencegah kemungkinan
terjadinya kerusakan komponen yang
terkandung dalam ekstrak. Ekstrak yang
dihasilkan dihitung nilai rendemennya.
Rendemen paling tinggi diperoleh dari
ekstraksi dengan menggunakan air yaitu
sebesar 25.94%. Ekstraksi dengan
menggunakan aseton dan heksana
menghasilkan rendemen masing-masing
sebesar 11.19% dan 6.37%. Dari hasil ini
dapat disimpulkan bahwa senyawa yang
terdapat pada daun jawer kotok cenderung
bersifat polar berdasarkan jumlah ekstrak dari
jenis pelarut yang menghasilkan rendemen
terbesar. Nilai rendemen yang diperoleh
cukup tinggi untuk tanaman yang
mengandung air seperti jawer kotok. Tanaman
lain yang kandungan airnya cukup tinggi
adalah cocor bebek. Gani (2007) dalam
penelitiannya mendapatkan ekstrak heksana
dari cocor bebek sebesar 2.09%. Hasiul ini
lebih rendah dibandingkan hasil rendemen
yang diperoleh oleh peneliti.
Aktivitas Antibakteri Filtrat Daun Jawer
Kotok
Penelitian pendahuluan yang dilakukan
adalah pengujian aktivitas antibakteri filtrat
daun jawer kotok terhadap bakteri uji dengan
menggunakan metode Bintang. Filtrat yang
digunakan adalah filtrat daun muda dan daun
tua tanaman jawer kotok. Penelitian
pendahuluan ini bertujuan untuk
membandingkan aktivitas antibakteri daun
muda dan daun tua. Daun yang memiliki
aktivitas antibakteri lebih besar akan
digunakan untuk proses ekstraksi.
Gambar 2 menunjukkan bahwa daun muda
dan daun tua memiliki aktivitas antibakteri
terhadap bakteri uji. Ini ditunjukkan dengan
adanya zona bening disekitar lubang yang
telah diisi oleh filtrat daun jawer kotok. Zona
hambat bakteri yang dihasilkan oleh filtrat
daun muda dan daun tua berbeda-beda
terhadap keempat bakteri uji.
 Tabel 3 Aktivitas antibakteri menurut David
Stout
16
Aktivitas Diameter Zona
14
Antibakteri Hambat (mm)
12
10
Lemah <5
Sedang 5-10
zona hambat8
(mm) Kuat 10-20
6
Sangat kuat >20
4
2
Tabel 4 Aktivitas antibakteri filtrat daun tua
0
B. subtilis S.aureus E. coli P. aeruginosa tanaman jawer kotok
bakteri uji
Bakteri uji Diameter Aktivitas
zona hambat Antibakteri
(mm)
Gambar 2 Aktivitas antibakteri filtrat daun B. subtilis 9,8333 Sedang
muda ( ) dan daun tua ( ) S. aureus 14,4583 Kuat
tanaman jawer kotok. E .coli 14,5833 Kuat
P. aeruginosa 13,5000 Kuat
Aktivitas antibakteri daun muda dan daun
tua sama dalam menghambat bakteri S.
Tabel 5 Aktivitas antibakteri filtrat daun
aureus. Zona hambat yang dihasilkan daun
muda tanaman jawer kotok
muda dan daun tua terhadap bakteri ini
masing-masing sebesar 14.4583 mm. Daun Bakteri uji Diameter Aktivitas
muda memiliki aktivitas antibakteri yang zona hambat Antibakteri
lebih besar dibandingkan daun tua dalam (mm)
menghambat bakteri B. subtilis Zona hambat B. subtilis 10,3750 Sedang
yang dihasilkan oleh daun muda dan daun tua S. aureus 14,4583 Kuat
masing-masing sebesar 10.3750 mm dan E .coli 13,5833 Kuat
9.8333 mm. Berbeda halnya dengan bakteri E. P. aeruginosa 13,1250 Kuat
coli dan P. aeruginosa, aktivitas antibakteri
daun tua lebih besar dibandingkan daun muda.
Daun tua selanjutnya digunakan untuk
Zona hambat daun tua dan daun muda
proses ekstraksi karena secara umum aktivitas
terhadap E. coli masing-masing sebesar
antibakteri daun tua lebih besar dibandingkan
14.5833 mm dan 13.5833 mm sedangkan
daun muda terhadap bakteri uji terutama P.
terhadap P. aeruginosa masing-masing
aeruginosa. Bakteri ini merupakan bakteri
sebesar 13.5 mm dan 13.125 mm.
yang paling patogen dibandingkan bakteri uji
Pembagian aktivitas antibakteri
yang lain. Alasan lain dipilihnya daun tua
menggunakan metode David Stout
karena daun tua lebih banyak tersedia
berdasarkan atas ukuran diameter zona
daripada daun muda.
hambat (Suryawiria 1978). Pembagiannya
dapat dilihat pada Tabel 3. Berdasarkan
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kasar Daun
metode David Stout, aktivitas antibakteri
Jawer Kotok
filtrat daun jawer kotok terhadap bakteri uji
dapat dilihat pada Tabel 4 dan 5. Pada bakteri Ekstrak heksana, aseton, dan akuades daun
B. subtilis, filtrat daun tua tanaman jawer jawer kotok kering yang diperoleh dari proses
kotok menghasilkan zona hambat 5-10 mm maserasi diuji aktivitas antibakterinya
maka filtrat daun tua jawer kotok tersebut terhadap bakteri uji. Ekstrak yang memiliki
termasuk ke dalam antibakteri berkekuatan aktivitas antibakteri paling besar akan
sedang, sedangkan daun jawer kotok muda digunakan untuk uji selanjutnya yaitu uji
memiliki zona hambat 10-20 mm sehingga Konsentrasi Hambat Tumbuh Minimum
bersifat antibakteri dengan kekuatan kuat. (KHTM) dan analisis fitokimia. Gambar 3
Filtrat daun muda maupun daun tua pada menunjukkan bahwa ekstrak aseton memiliki
ketiga jenis bakter uji lainnya yaitu S. aureus, aktivitas antibakteri yang paling besar
E. coli, dan P. aeruginosa memiliki zona terhadap keempat jenis bakteri uji yang
hambat antara 10-20 mm sehingga termasuk digunakan.
ke dalam antibakteri kuat.
 20
18
16
14
12
zona hambat
(mm)
10
8
6 ditunjukkan dengan terbentuknya warna hijau.
4
2
0 senyawa antibakteri pada ekstrak aseton daun
B. subtilis S.aureus E. coli
bakteri uji
Gambar 3 Aktivitas antibakteri ekstrak aseton
( ), heksana ( ), dan akuades
( ) daun jawer kotok 0.2 g/mL.
Diameter zona hambat ekstrak aseton 0.2
g/mL terhadap bakteri B. subtilis, S. aureus,
E. coli, dan P. aeruginosa berturut-turut
adalah 20, 19.0833, 18.2083, dan 17.2333
mm. Diameter zona hambat ekstrak air 0.2
g/mL terhadap terhadap bakteri B. subtilis, S.
aureus, E. coli, dan P. aeruginosa berturut-
turut adalah 11.25, 10.8333, 10.5417, dan
10.2083 mm. Sedangkan zona hambat untuk
heksana paling kecil dibandingkan kedua
ekstrak lainnya. Diameter zona hambat
ekstrak heksana terhadap B. subtilis, S.
aureus, E. coli, dan P. aeruginosa masing-
masing adalah 9.5417, 10.1667, 9.9167, dan
7.2917 mm.
Ekstrak aseton dan akuades memiliki
kekuatan antibakteri yang kuat terhadap
bakteri B. subtilis, S. aureus, E. coli, dan P.
aeruginosa karena memiliki diameter zona
hambat antara 10-20 mm. Ekstrak heksana
memiliki kekuatan antibakteri sedang
terhadap bakteri B. subtilis karena memiliki
zona hambat antara 5-10 mm. Ekstrak ini
berkekuatan kuat terhadap bakteri S. aureus,
E. coli, dan P. aeruginosa.
Analisis Fitokimia Ekstrak Aseton Daun
Jawer Kotok
Analisis fitokimia dilakukan pada ekstrak
aseton daun jawer kotok kering. Analisis
fitokimia merupakan salah satu cara untuk
mengetahui kandungan metabolit pada suatu
tanaman secara kualitatif. Uji fitokimia
bertujuan untuk mengetahui adanya senyawa
metabolit yang diharapkan dapat berperan
sebagai antibakteri. Senyawa-senyawa yang
diuji antara lain alkaloid, saponin, flavonoid,
triterpenoid, steroid, tanin, dan minyak atsiri.
Hasil analisis fitokimia dapat dilihat pada
Tabel 5. Hasil analisis menunjukkan bahwa
ekstrak aseton daun jawer kotok mengandung
senyawa alkaloid dan steroid. Pada uji
alkaloid hasil positif ditunjukkan dengan
terbentuknya endapan coklat dengan pereaksi
Wagner, terbentuk endapan putih dengan
pereaksi Mayer, dan adanya endapan merah
dengan pereaksi Dragendorf. Adanya steroid
Kedua senyawa ini diduga sebagai
P. aeruginosa
jawer kotok.Hasil analisis fitokimia ini sesuai
dengan Asiamaya (2000) yang menyatakan
bahwa daun jawer kotok mengandung minyak
atsiri (karvakrol, eugenol, dan etil salisilat),
zat-zat alkaloida, mineral serta sedikit lendir.
Namun analisis fitokimia pada penelitian ini
tidak menunjukkan adanya minyak atsiri. Hal
ini kemungkinan disebabkan oleh sifat
minyak atsiri yang mudah menguap sehingga
senyawa ini kemungkinan menguap karena
pemanasan pada saat pengeringan daun.
Alkaloid merupakan golongan terbesar
dari senyawaan hasil metabolit sekunder pada
tumbuhan Alkaloid dapat ditemukan dalam
berbagai bagian tanaman seperti biji, daun,
ranting, dan kulit kayu. Alkaloid umumnya
dinyatakan sebagai senyawa basa yang
mengandung satu atau lebih atom nitrogen,
yang biasanya merupakan bagian dari sistem
siklik (Suradikusumah 1989)
Alkaloid adalah senyawa turunan asam
amino dan dibagi berdasarkan kerangka asam
amino yang menyusunnya. Alkaloid dianggap
turunan asam amino diindikasikan dengan
terdapatnya atom nitrogen di dalam kerangka
suatu senyawa. Atom nitrogen merupakan
donor elektron (kelebihan 1 pasang elektron)
dan bersifat basa atau alkali. Sehingga
senyawa-senyawa golongan ini disebut
alkaloid (Saefudin 2006).
Alkaloid dapat beracun bagi manusia dan
banyak mempunyai kegiatan fisiologis yang
menonjol sehingga dapat digunakan secara
luas dalam bidang pengobatan. Alkaloid
biasanya tidak berwarna, bersifat optis aktif,
berbentuk kristal dan hanya sedikit yang
berupa cairan pada suhu kamar (Harborne
1987).
Tabel 5 Hasil analisis fitokimia ekstrak
aseton daun jawer kotok
Senyawa Hasil
Alkaloid +
Saponin -
Flavonoid -
Triterpenoid -
Steroid +
Tanin -
Minyak Atsiri -
 Alkaloid diterpenoid yang diisolasi dari
tanaman memiliki sifat antimikrob (Naim
2004). Mekanisme penghambatan senyawa
alkaloid terhadap bakteri belum jelas. Namun
Robinson (1998) menyatakan bahwa alkaloid
dapat mengganggu terbentuknya jembatan
seberang silang komponen penyusun
peptidoglikan pada sel bakteri, sehingga
lapisan dinding sel tidak terbentuk secara utuh
dan menyebabkan kematian sel.
Sterol pada umumnya dianggap hanya ada
pada binatang sebagai hormon seks, asam
empedu dan sebagainya. Akhir-akhir ini
semakin bertambah jumlah senyawa sterol
yang terdapat dalam jaringan tumbuhan.
Sterol tersebut dinamakan sebagai fitosterol.
Tiga fitosterol yang banyak terdapat dalam
tumbuhan tingkat tinggi adalah sitosterol,
stigmasterol, dan kampesterol. Sterol adalah
triterpen yang bentuk dasarnya sistem cincin
siklopentana perhidrofenantren, fitosterol
berbeda secara struktural dengan sterol
binatang. Perbedaannya dengan kolesterol
terutama adalah adanya substitusi gugus metil,
etil, atau etiliden pada atom C24
(Suradikusumah 1989). Menurut Zhu et al.
(2000) dan Varricchio et.al (1967) steroid
dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram
positif.
Penentuan Konsentrasi Hambat Tumbuh
Minimum
Konsentrasi Hambat Tumbuh Minimum
(KHTM) adalah konsentrasi terendah suatu
antibiotik atau antimikrobial yang dapat
menghambat pertumbuhan bakteri tertentu.
Nilai KHTM akan spesifik untuk setiap
kombinasi dari antibiotik dan mikroba.
KHTM sebuah antibiotik terhadap mikroba
digunakan untuk mengetahui sensitivitas
mikroba terhadap antibiotik. Nilai KHTM
berlawanan dengan sensitivitas mikroba yang
diuji. Semakin rendah nilai KHTM dari
sebuah antibiotik, maka sensitivitas dari
bakteri akan semakin besar. Menurut
Wattimena (1991) suatu antibakteri dikatakan
mempunyai aktivitas yang tinggi bila KHTM
terjadi pada kadar antibiotik yang rendah tapi
mempunyai daya bunuh/daya hambat yang
besar.
Konsentrasi yang digunakan untuk uji
KHTM bervariasi antara 0.05 mg/mL sampai
500 mg/mL. Zona hambat yang dihasilkan
oleh ekstrak daun jawer kotok dengan
berbagai konsentrasi tersebut dapat dilihat
pada Gambar 4.
25
20
zona hambat 15
(mm) 10
5
0
B. subtilis S.aureus E. coli P.
aeruginosa
bakteri uji
Gambar 4 Daya hambat ekstrak aseton daun
jawer kotok pada berbagai
konsentrasi. 500 125 75 30
15 10 5 2 1 0.8 0.5
0.3 0.2 0.1 0.05
Variasi konsentrasi yang digunakan
menghasilkan aktivitas antibakteri yang
berbeda-beda terhadap keempat bakteri uji.
Konsentrasi 500 mg/mL memiliki zona
hambat yang paling besar. Konsentrasi ini
memiliki kekuatan aktivitas antibakteri yang
sangat kuat karena diameter zona hambatnya
lebih dari 20 mm. Zona hambat ekstrak ini
terhadap bakteri B. subtilis, S. aureus, E. coli,
dan P. aeruginosa berturut-turut adalah
21.2875, 23.1375, 20.8875, dan 20.7188 mm.
Konsentrasi 0.1 mg/mL merupakan
konsentrasi paling rendah yang dapat
menghambat pertumbuhan keempat bakteri
uji. Konsentrasi ini memiliki kekuatan
aktivitas antibakteri yang sedang karena
memiliki diameter zona hambat 5-10 mm.
Diameter zona hambat yang dihasilkan
terhadap bakteri B. subtilis, S. aureus, E. coli,
dan P. aeruginosa berturut-turut adalah
6.6438, 6.5, 6.8062, dan 6.6188 mm.
Diameter zona hambat bakteri P. aeruginosa
paling kecil dibandingkan ketiga bakteri uji
lainnya. Hal ini mungkin disebabkan karena
P. aeruginosa merupakan bakteri Gram
negatif yang lebih tahan terhadap berbagai
jenis antibakteri karena struktur dinding
selnya yang lebih kompleks. Menurut Lay &
Hastowo (1992) infeksi oleh bakteri ini tidak
selalu bisa disembuhkan dengan obat. Selain
memiliki enzim β-laktamase, bakteri ini juga
memiliki berbagai protein pada membran luar
yang berperan dalam pertahanan terhadap
molekul berbahaya termasuk antibakteri.
 Hasil uji statistik menunjukkan bahwa
pada keempat bakteri uji terdapat korelasi
positif antara konsentrasi ekstrak dengan
aktivitas antibakteri, yaitu semakin besar
konsentrasi ekstrak yang ditambahkan maka
aktivitas antibakteri semakin besar pula yang
ditunjukkan dengan semakin besarnya
diameter zona hambat
Hasil uji statistik juga menunjukkan
bahwa aktivitas antibibakteri ekstrak dengan
konsentrasi 500 mg/mL ternyata tidak berbeda
nyata dengan ekstrak 125 mg/mL terhadap
keempat bakteri uji. Sedangkan konsentrasi
lainnya memiliki diameter zona hambat yang
berbeda nyata.
Perbandingan Penghambatan Ekstrak
Daun Jawer Kotok Terhadap Ampisilin
Kontrol positif yang digunakan pada
penelitian ini adalah ampisilin 0.4 mg/mL.
Ampisilin digunakan sebagai kontrol positif
dalam penentuan aktivitas antibakteri daun
jawer kotok karena ampisilin merupakan
turunan dari penisilin yang mempunyai
spektrum antibakteri yang luas. Gambar 5
menunjukkan zona hambat ampisilin
konsentrasi 0.4 mg/mL terhadap bakteri uji.
Zona hambat ampisilin terhadap B. subtilis, S.
aureus, E. coli, dan P. aeruginosa masing-
masing sebesar 26.2, 25.6042, 24.7708, dan
25.5292 mm.
Diameter zona hambat yang dihasilkan
oleh ekstrak aseton daun jawer kotok pada
semua konsentrasi (0.05-500 mg/mL)
terhadap keempat bakteri uji belum sebanding
dengan dengan ampisilin 0.4 mg/mL. Zona
hambat dari ampisilin sebagai kontrol
mempunyai diameter zona hambat yang lebih
besar jika dibandingkan dengan ekstrak daun
jawer kotok walaupun konsentrasi kontrol
jauh lebih rendah dari konsentrasi ekstrak. Hal
ini dapat disebabkan ekstrak daun jawer kotok
merupakan ekstrak kasar yang masih
mengandung bahan organik lain selain
senyawa antibakteri Perbandingan diameter
zona bening ampisilin dan ekstrak daun jawer
kotok dapat dilihat pada Gambar 6.
26.5
26
25.5
zona hambat
(mm)
25
24.5
24
B. subtilis S.aureus
bakteru uji
Gambar 5 Daya hambat ampisilin 0.4
mg/mL.
30
25
20
zona hambat
15
10
5
0
500 30 5 0.8 0.2 Ampisilin
konsentrasi (mg/mL)
Gambar 6 Perbandingan daya hambat ekstrak
aseton daun jawer kotok terhadap
ampisilin 0.4 mg/mL. ( ) B.
subtilis,( ) S. aureus ( )E. coli
( ) P. aeruginosa
Hasil penelitian ini secara umum
menunjukkan bahwa bakteri Gram positif (B.
subtilis dan S. aureus) lebih mudah dihambat
oleh ekstrak daun jawer kotok. Hal ini
disebabkan oleh struktur dinding sel bakteri
Gram positif yang relatif sederhana sehingga
memudahkan senyawa antibakteri untuk
masuk ke dalam sel dan menemukan sasaran
untuk bekerja. Sedangkan struktur dinding sel
bakteri Gram negatif lebih kompleks, berlapis
tiga yaitu lapisan luar yang berupa
lipoprotein, lapisan tengah yang berupa
lipopolisakarida, dan lapisan dalam berupa
peptidoglikan (Pelczar & Chan 1986).
Membran terluar bakteri Gram negatif dapat
menghalangi penembusan senyawa antibakteri
(Siswandono & Soekardjo 1995)
SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Daun jawer kotok (Coleus scutellaroides
(L.) Benth. ) dapat menghambat pertumbuhan
bakteri Gram positif (Bacillus subtilis dan
Staphylococcus aureus) dan bakteri Gram
negatif (Escherichia coli dan Pseudomonas
aeruginosa). Aktivitas filtrat daun tua lebih
besar jika dibandingkan dengan filtrat daun
muda. Ekstrak aseton memiliki aktivitas
antibakteri yang paling besar dibandingkan
dengan ekstrak air dan heksana. Uji fitokimia
menunjukkan ekstrak aseton daun jawer kotok
mengandung alkaloid dan steroid.
Konsentrasi ekstrak berbanding lurus
E. coli P.
aeruginosa
dengan zona hambat yang dihasilkan.
Semakin tinggi konsentrasi maka zona hambat
yang dihasilkan lebih besar pula. Konsentrasi
Hambat Tumbuh Minimum (KHTM) bakteri