Lampiran 6

Pembuatan Media

Pembuatan Reagen KOH 10%

A. Alat dan bahan
1. Alat 2. Bahan
a. Beacker glass a. 10 gr Potassium Hydroxid (KOH)
b. Batang pengaduk b. Aquades 100 ml
c. Neraca analitik
B. Cara Kerja
1. Menimbang KOH sebanyak 10 gr di dalam beacker glass
2. Menambahkan aquadest sebanyak 100 ml
3. Mengaduk dengan batang pengaduk sampai homogeny

Pembuatan NaCl fisiologis (0,9%)

A. Alat dan bahan
1. Alat 2. Bahan
a. Beacker glass a. 0,9 gr NaCl
b. Batang pengaduk b. Aquades 100 ml
c. Erlenmeyer
d. Neraca analitik
e. Autoklaf

B. Cara Kerja
1. Menimbang NaCl sebanyak 0,9 gr di dalam beacker glass
 2. Menambahkan aquades sebanyak 100 ml
3. Mengaduk dengan batang pengaduk sampai homogen, pindahkan larutan ke
Erlenmeyer.
4. Disterilkan dengan menggunakan autoklaf pada suhu 121°C selama 20
menit.

Pembuatan Media Gula-Gula

A. Alat dan bahan
1. Alat 2. Bahan
a. Beacker glass a. 1 gr gula-gula (glukosa,
b. Gelas Ukur laktosa,maltosa, sakarosa)
c. Erlenmeyer b. Agar pepton 1 gr
d. Neraca analitik c. NaCl 0,5 gr
e. Autoklaf d. Aquades 100 ml
f. Tabung reaksi e. Phenol red 0,04%
g. Pipet tetes f. NaOH 1 N
h. Ph universal
i. Hot plate

B. Cara Kerja
1. Seluruh bahan ditimbang sesuai resep dengan menggunakan neraca analitik,
kemudia masing-masing dicampurkan.
2. Dilarutkan dengan aquades masing-masing 100 ml menggunakan hot plate.
Suhu ± 50°C,dinginkan sampai suhu ruang.
3. Ditambahkan masing-masing Phenol red 0,04% dan NaOH 1N sampai warna
merah muda dan Ph 7-8.
4. Dimasukkan ke dalam erlemeyer, ditutup dengan kapas berwarna.
 5. Disterilkan di dalam autoklaf suhu 121°C selama 15 menit.

Pembuatan Media Saboraud Dextrose Agar (SDA)

A. Alat dan bahan
1. Alat 2. Bahan
a. Beacker glass a. 65 gr Saboraud Dextrose Agar
b. Gelas Ukur b. Aquades 1000 ml
c. Erlenmeyer c. Chloramphenicol 0,05%
d. Neraca analitik
e. Autoklaf
f. Cawan petri
g. Batang pengaduk
h. Hot plate

B. Cara Kerja
1. Ditimbang media SDA sebanyak 29,25 gram
2. Dilarutkan bahan dengan aquadest 450 ml di beacker glass
3. Didihkan diatas hot plate sambil dihomogenkan
4. Dipindahkan ke dalam Erlenmeyer dan disterilkan menggunakan autoklaf
selama 15 menit pada suhu 121°C tekanan 1-2 atm.
5. Tunggu hingga sedikit dingin suhu sekitar 40-45 °C dan ditambahkan
Chloramphenicol 0,05%.
6. Tuang 10-20 ml medium ke dalam 30 cawan petri, dibiarkan diatas
permukaan yang datar sampai dingin dan membeku.
7. Inokulasi mikroorganisme ke dalam cawan petri dan inkubasi pada suhu 37°C
selama 3-7 hari.