PERCOBAAN 2

PENENTAPAN ANION FOSFAT DALAM AIR

I. Tujuan
1. Menentukan panjang gelombang maksimum larutan yang mengandung anion fosfat
2. Menentukan kadar anion fosfat dalam cuplikan sampel
II. Teori Dasar
Dalam suasana asam, ion fosfat bereaksi dengan asam molibdat membentuk suatu
kompleks asam heteropoli yang biasanya dirumuskan sebagai H3[P(Mo3O10)4]. Asam
heteropoli ini berwarna kuning bila dilarutkan dalam air sehingga dapat digunakan sebagai
dasar penetapan fosfat secara kolorimetri. Asam heteropoli ini dapat pula direduksi
menghasilkan larutan biru heteropoli atau biru molibdat.

Kolorimetri adalah suatu metode analisa kimia yang berdasarkan pada perbandingan
intensitas warna larutan dengan warna larutan standarnya. Variasi warna suatu sistem
berubah dengan berubahnya konsentrasi suatu komponen, membentuk dasar apa yang
lazim disebut analisis kolorimetri. Metode ini merupakan bagian dari analisis fotometri.
(Khopkar, 1990).

Dalam percobaan ini, digunakan metode spektrofotometri yang didasarkan pada

pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan berwarna pada panjang
gelombang yang spesifik dengan menggunakan monokromator prisma atau kisi difraksi
dan detector vacuum phototube atau tabung foton hampa. Alat yang digunakan adalah
spektrofotometer, yaitu alat untuk menentukan suatu senyawa baik secara kuantitatif
maupun kualitatif dengan mengukur transmitansi maupun absorbansi suatu sampel sebagai
fungsi dari konsentrasi. Pada spektrofotometer, panjang gelombang yang benar-benar
terseleksi dapat diperoleh dengan bantuan alat pengurai cahaya seperti prisma. Suatu
spektrofotometer tersusun dari sumber spektrum tampak yang kontinu, monokromator, sel
pengabsorbsi untuk larutan sampel atau blanko dan suatu alat untuk mengukur perbedaan
absorbsi antara sampel dan blanko maupun pembanding.

Besarnya intensitas sinar yang diemisikan sebanding dengan banyaknya atom di dalam
nyala sehingga sebanding dengan konsentrasi unsur tersebut dalam cuplikan. Intensitas
sinar terukur dalam bentuk absorbansi larutan. Aluran nilai absorbansi dengan konsentrasi
 larutan standar dapat digunakan untuk menentukan konsentrasi unsur dalam larutan. Hal ini
sesuai dengan persamaan Lambert-Beer, yaitu:
𝐼
𝐴 = log ( ) =∈ 𝑏 𝑐
𝐼𝑜
Dengan A adalah absorbansi, I adalah intensitas sinar setelah melewati larutan, Io
adalah intensitas sinar awal, ∈ adalah absorptivitas molar yang bernilai berbeda tiap zat, b
adalah lebar kuvet, dan c adalah konsentrasi larutan.

III. Alat dan Bahan

Tabel 3.1 Data alat dan bahan
Bahan Alat
Larutan baku PO43-1000 ppm Buret 10 mL
Larutan ammonium molibdat Spectronic 20 B&L dengan kuvet
Larutan SnCl2.2H2O Labu takar 50 mL
Larutan sampel Pipet ukur
Labu takar 100 mL

IV. Cara Kerja

Dibuat larutan standar PO43- 100 ppm dari larutan baku PO43- 1000 ppm dalam
labu takar 100 mL. Kemudian dibuat 5 larutan standar PO43- dengan konsentrasi 2 ppm, 4
ppm. 6 ppm, 8 ppm, 10 ppm dalam labu takar 50 mL. Ditambahkan 1 mL ammonium
molibdat dengan pipet ukur ke masing-masing labu takar. Lalu ditambahkan 0,5 mL SnCl2
ke dalam salah satu labu takar, ditandabataskan dengan aqua bidest, dan didiamkan 10
menit. Pada menit ke 11 larutan dituang ke kuvet yang sudah dibilas dengan larutan
tersebut, kemudian diukur absorbansinya. Dilakukan hal yang sama kepada 5 labu takar
yang lain dengan interval penambahan SnCl2 dan pengukuran absorbansi selama 2 menit.
Setelah didapatkan panjang gelombang maksimum, diukur sampel yang telah disiapkan
oleh asisten, lalu didapatkan absorbansinya.

V. Data Pengamatan
Tabel 5.1 Data absorbansi larutan 2 ppm
λ (nm) Absorbansi λ (nm) Absorbansi

667,4 0,391548 699,2 0,405447

668,1 0,392784 699,9 0,404687
668,9 0,394258 700,7 0,404197
669,6 0,393864 701,4 0,403156
670,4 0,392645 702,2 0,404123
671,2 0,392842 703 0,404207
671,9 0,392725 703,7 0,405002
672,7 0,39457 704,5 0,404438
673,4 0,39421 705,2 0,403783
674,2 0,395071 706 0,403096
674,9 0,393935 706,8 0,403441
675,7 0,393939 707,5 0,403719
676,5 0,393943 708,3 0,405073
677,2 0,395536 709,1 0,4048
678 0,396338 709,8 0,404866
678,7 0,396505 710,6 0,403677
679,5 0,394939 711,4 0,403558
680,2 0,394461 712,1 0,403472
681 0,394353 712,9 0,403946
681,8 0,395186 713,7 0,403096
682,5 0,395309 714,4 0,402674
683,3 0,396552 715,2 0,401794
684 0,396682 716 0,401838
684,8 0,396701 716,7 0,400713
685,5 0,396099 717,5 0,400458
686,3 0,397013 718,3 0,399462
687,1 0,398861 719,1 0,398237
687,8 0,399983 719,8 0,396029
688,6 0,400877 720,6 0,394864
689,3 0,400295 721,4 0,394338
690,1 0,400217 722,1 0,393805
690,8 0,400071 722,9 0,393078
691,6 0,401411 723,7 0,392069
692,4 0,40236 724,4 0,390422
692,4 0,40236 725,2 0,388107
693,1 0,403492 726 0,386183
 693,9 0,40353 726,7 0,385158
694,6 0,403794 727,5 0,384945
695,4 0,403103 728,3 0,384171
696,1 0,403764 729,1 0,382608
696,9 0,404177 729,8 0,380909
697,7 0,405045 729,8 0,405447
698,4 0,40534

Tabel 5.2 Data absorbansi larutan 4 ppm

λ (nm) Absorbansi λ (nm) Absorbansi

667,4 0,751236 699,2 0,769782

668,1 0,752667 699,9 0,769281
668,9 0,755368 700,7 0,76916
669,6 0,755333 701,4 0,769116
670,4 0,755146 702,2 0,770523
671,2 0,755067 703 0,770158
671,9 0,756087 703,7 0,769863
672,7 0,757434 704,5 0,768241
673,4 0,758694 705,2 0,768391
674,2 0,759367 706 0,767689
674,9 0,76005 706,8 0,768235
675,7 0,760753 707,5 0,767887
676,5 0,760873 708,3 0,768857
677,2 0,761705 709,1 0,767975
678 0,761417 709,8 0,768304
678,7 0,761533 710,6 0,76762
679,5 0,760337 711,4 0,768025
680,2 0,760768 712,1 0,769316
681 0,759274 712,9 0,770685
681,8 0,760148 713,7 0,77087
682,5 0,759518 714,4 0,769539
683,3 0,762725 715,2 0,767312
 684 0,762994 716 0,765652
684,8 0,762602 716,7 0,764935
685,5 0,761538 717,5 0,765061
686,3 0,762745 718,3 0,766171
687,1 0,763964 719,1 0,764355
687,8 0,76554 719,8 0,761435
688,6 0,76611 720,6 0,758751
689,3 0,767818 721,4 0,75719
690,1 0,768143 722,1 0,755687
690,8 0,769094 722,9 0,754828
691,6 0,769954 723,7 0,753683
692,4 0,770396 724,4 0,752226
693,1 0,770141 725,2 0,748787
693,9 0,769875 726 0,745365
694,6 0,769919 726,7 0,74347
695,4 0,769075 727,5 0,741363
696,1 0,769904 728,3 0,739758
696,9 0,769922 729,1 0,736623
697,7 0,770817 729,8 0,734747
698,4 0,769482 729,8 0,77087

Tabel 5.3 Data absorbansi larutan 6 ppm

λ (nm) Absorbansi λ (nm) Absorbansi

667,4 1,25416 699,2 1,312881

668,1 1,258679 699,9 1,309786
668,9 1,262945 700,7 1,309734
669,6 1,262986 701,4 1,307804
670,4 1,262154 702,2 1,311055
671,2 1,264449 703 1,311334
671,9 1,267189 703,7 1,315555
672,7 1,272119 704,5 1,314571
673,4 1,273689 705,2 1,31175
674,2 1,276033 706 1,309411
674,9 1,275589 706,8 1,308831
675,7 1,277595 707,5 1,309541
676,5 1,280944 708,3 1,311581
677,2 1,283832 709,1 1,309344
678 1,285145 709,8 1,310825
678,7 1,284919 710,6 1,309756
679,5 1,285919 711,4 1,311289
680,2 1,288079 712,1 1,310775
681 1,290595 712,9 1,312012
681,8 1,293053 713,7 1,311444
682,5 1,294304 714,4 1,310413
683,3 1,296191 715,2 1,305547
684 1,296289 716 1,304501
684,8 1,297682 716,7 1,303283
685,5 1,297557 717,5 1,302495
686,3 1,301875 718,3 1,302999
687,1 1,303325 719,1 1,302471
687,8 1,30389 719,8 1,301185
688,6 1,301554 720,6 1,295299
689,3 1,300513 721,4 1,292105
690,1 1,300649 722,1 1,290618
690,8 1,299773 722,9 1,290944
691,6 1,304499 723,7 1,289757
692,4 1,307903 724,4 1,288498
693,1 1,311962 725,2 1,283473
693,9 1,311792 726 1,279846
694,6 1,31016 726,7 1,277588
695,4 1,30793 727,5 1,275239
696,1 1,307683 728,3 1,273874
696,9 1,31146 729,1 1,268753
697,7 1,316268 729,8 1,268318
698,4 1,31572 729,8 1,316268
Tabel 5.4 Data absorbansi larutan 8 ppm

λ (nm) Absorbansi λ (nm) Absorbansi

667,4 1,427663 699,2 1,491263

668,1 1,431003 699,9 1,4909
668,9 1,434359 700,7 1,492345
669,6 1,435422 701,4 1,489698
670,4 1,436766 702,2 1,490452
671,2 1,436267 703 1,493214
671,9 1,440117 703,7 1,495765
672,7 1,443432 704,5 1,494813
673,4 1,446406 705,2 1,489977
674,2 1,446669 706 1,490302
674,9 1,447386 706,8 1,488397
675,7 1,452036 707,5 1,486991
676,5 1,452005 708,3 1,486941
677,2 1,456875 709,1 1,486743
678 1,456205 709,8 1,486214
678,7 1,458594 710,6 1,483425
679,5 1,457837 711,4 1,480471
680,2 1,458701 712,1 1,481377
681 1,459908 712,9 1,481513
681,8 1,461989 713,7 1,482189
682,5 1,463374 714,4 1,481103
683,3 1,466662 715,2 1,476446
684 1,467797 716 1,474242
684,8 1,471356 716,7 1,472505
685,5 1,471819 717,5 1,472279
686,3 1,475757 718,3 1,465904
687,1 1,476091 719,1 1,465217
687,8 1,480028 719,8 1,460228
688,6 1,480479 720,6 1,460484
689,3 1,481643 721,4 1,45269
690,1 1,480745 722,1 1,450949
 690,8 1,483309 722,9 1,444411
691,6 1,485327 723,7 1,441616
692,4 1,486923 724,4 1,438084
693,1 1,489197 725,2 1,435804
693,9 1,492643 726 1,433122
694,6 1,494085 726,7 1,429926
695,4 1,491769 727,5 1,426271
696,1 1,49234 728,3 1,42191
696,9 1,494645 729,1 1,418252
697,7 1,496317 729,8 1,416364
698,4 1,493073 729,8 1,496317

Tabel 5.5 Data absorbansi larutan 10 ppm

λ (nm) Absorbansi λ (nm) Absorbansi

667,4 1,696168 699,2 1,784188

668,1 1,709327 699,9 1,785185
668,9 1,709021 700,7 1,788247
669,6 1,715643 701,4 1,785866
670,4 1,710785 702,2 1,790666
671,2 1,713373 703 1,802214
671,9 1,712348 703,7 1,801823
672,7 1,720656 704,5 1,799723
673,4 1,729001 705,2 1,792118
674,2 1,736946 706 1,794339
674,9 1,736136 706,8 1,793391
675,7 1,738409 707,5 1,790429
676,5 1,741794 708,3 1,790981
677,2 1,746761 709,1 1,791288
678 1,745105 709,8 1,788534
678,7 1,745655 710,6 1,785941
679,5 1,750987 711,4 1,776164
680,2 1,754104 712,1 1,776585
 681 1,757393 712,9 1,775739
681,8 1,757159 713,7 1,779935
682,5 1,761296 714,4 1,780905
683,3 1,767579 715,2 1,77306
684 1,768478 716 1,767988
684,8 1,772369 716,7 1,761369
685,5 1,764806 717,5 1,76189
686,3 1,773304 718,3 1,753851
687,1 1,772417 719,1 1,751945
687,8 1,779544 719,8 1,745953
688,6 1,771808 720,6 1,74729
689,3 1,778705 721,4 1,741626
690,1 1,782059 722,1 1,739478
690,8 1,786422 722,9 1,735857
691,6 1,781048 723,7 1,736769
692,4 1,780551 724,4 1,733832
693,1 1,78715 725,2 1,728216
693,9 1,794139 726 1,724212
694,6 1,797006 726,7 1,719229
695,4 1,791209 727,5 1,712742
696,1 1,783668 728,3 1,703668
696,9 1,782546 729,1 1,700356
697,7 1,78569 729,8 1,699729
698,4 1,783009 729,8 1,802214

Tabel 5.6 Data absorbansi pada larutan sampel

λ (nm) Absorbansi λ (nm) Absorbansi

667,4 0,524083 699,2 0,544075

668,1 0,524213 699,9 0,5441
668,9 0,525149 700,7 0,544883
669,6 0,525823 701,4 0,545409
670,4 0,525827 702,2 0,547217
671,2 0,526338 703 0,547071
671,9 0,525654 703,7 0,547658
672,7 0,526742 704,5 0,547837
673,4 0,527485 705,2 0,547508
674,2 0,527635 706 0,54749
674,9 0,52781 706,8 0,548368
675,7 0,528594 707,5 0,549288
676,5 0,529642 708,3 0,550353
677,2 0,529314 709,1 0,550677
678 0,52851 709,8 0,550698
678,7 0,527883 710,6 0,551122
679,5 0,527965 711,4 0,551477
680,2 0,528265 712,1 0,553138
681 0,52855 712,9 0,553892
681,8 0,529252 713,7 0,553873
682,5 0,528766 714,4 0,553735
683,3 0,52914 715,2 0,552784
684 0,529249 716 0,553524
684,8 0,529965 716,7 0,553049
685,5 0,530112 717,5 0,554435
686,3 0,530016 718,3 0,55423
687,1 0,531149 719,1 0,554077
687,8 0,531392 719,8 0,553151
688,6 0,532422 720,6 0,552409
689,3 0,532613 721,4 0,5524
690,1 0,534265 722,1 0,551582
690,8 0,535689 722,9 0,551142
691,6 0,537 723,7 0,55096
692,4 0,537369 724,4 0,54961
693,1 0,53901 725,2 0,548309
693,9 0,538986 726 0,546896
694,6 0,540182 726,7 0,547043
695,4 0,540038 727,5 0,546292
 696,1 0,541823 728,3 0,546303
696,9 0,542806 729,1 0,545481
697,7 0,542957 729,+A81:B908 0,544512
698,4 0,543767 0,554435

VI. Pengolahan Data

6.1. Pembuatan Kurva Kalibrasi
Diperoleh λmaks = 703 nm
Diperoleh kurva kalibrasi dengan absorbansi sebagai sumbu y dan konsentrasi larutan
standar sebagai sumbu x

Kurva Kalibrasi
2
A 1.8
b 1.6
s 1.4
o 1.2
r 1 y = 0.176x + 0.1005
0.8 R² = 0.9755
b
a 0.6
n 0.4
0.2
s
0
i
0 2 4 6 8 10 12
[PO43-]

Grafik 6.1 Kurva kalibrasi

6.2. Penentuan [PO43-] dalam Sampel

Dari kurva kalibrasi, diperoleh persamaan:

y = 0,176x + 0,1005

Dengan mensubstitusi nilai absorbansi sampel ke dalam persamaann maka konsentrasi

ion fosfat dalam sampel:

0,547071 = 0,176x + 0,1005

x = 2,5373 ppm
VII. Pembahasan
Pada percobaan kali ini, ditentukan kadar anion fosfat dalam sampel melalui
metoda kurva kalibrasi, pengukuran dilakukan menggunakan spektrofotometer spectronic-
20 B&L. Prinsip dari percobaan ini adalah kolorimetri yaitu teknik analisis kuantitatif
untuk sampel berwarna, yang digunakan untuk menentukan konsentrasi suatu zat
berdasarkan intensitas cahaya warna larutan. Jadi jika analit yang akan dianalisis tidak
berwarna, harus diberikan zat pewarna yang “stabil” yaitu tidak mengubah analit menjadi
sesuatu lain yang tidak diinginkan.
Ditentukan konsentrasi larutan standar PO43- dengan membuat lima larutan
standar dengan rentang 2 ppm – 10 ppm. Kemudian masing-masing larutan standar tersebut
ditambahkan dengan larutan ammonium molibdat yang bereaksi membentuk asam
heteropoli berwarna kuning.

Setelah itu ditambahkan larutan SnCl2 yang akan membentuk warna biru molibdat. Warna
biru ini muncul karena asam heteropoli direduksi oleh SnCl2 membentuk warna biru.
Namun reaksi ini berjalan lambat, untuk membentuk warna biru molibdat ini dibutuhkan
waktu 10-15 menit sejak ditambahkannya SnCl2. Akan tetapi warna biru tersebut tidak
stabil dan intensitasnya akan berkurang karena adanya reaksi tambahan. Maka dari itu
pengukuran absorbansi larutan dilakukan pada menit ke-11. Larutan biru molibdat hanya
peka terhadap ion-ion ortofosfat (PO43-) dan tidak peka terhadap ion-ion fosfat ganda
seperti P2O72- (pirofosfat). Pengukuran tidak dilakukan pada larutan warna kuning karena
intensitasnya kurang tinggi untuk metoda kolorimetri.
Setelah kedua reagen tersebut tercampur, larutan ditandabataskan dengan
aquabidest. Aquabidest adalah air yang telah didistilasi dua kali sehingga lebih murni. Jika
menggunakan air biasa maupun aquadest, akan terdapat ion tambahan pada larutan
termasuk ion fosfat sehingga kadar ion tersebut dalam larutan akan lebih dari yang
seharusnya. Lalu tidak dilakukan pengocokan larutan seperti membuat larutan hasil
pengenceran pada umumnya karena labu takar terbuat dari gelas yang tersusun atas ion-ion
SiO42- yang nantinya akan bereaksi positif dengan larutan membentuk biru molibdat.
Ammonium molibdat dapat diganti yaitu dengan ammonium tungstat.
Dilakukan perlakuan yang sama pada larutan sampel yaitu ditambahkan larutan
ammonium molibdat, SnCl2, dan ditandabataskan dengan aquabidest. Diukur pula
absorbansinya dengan spektrofotometer. Lalu didapatkan absorbansi maksimum dari
masing-masing konsentrasi larutan standar. Dicari kurva yang memiliki r2 paling
mendekati 1, didapatkan panjang gelombang maksimum pada 703 nm yang menghasilkan
 persamaan y = 0,176x + 0,1005. Kemudian disubstitusi absorbansi larutan sampel pada 703
nm ke dalam persamaan dan didapatkan konsentrasi anion fosfat dalam larutan sampel.

VIII. Kesimpulan
Dari hasil percobaan didapatkan panjang gelombang maksimum sebesar 703 nm dan
didapatkan pula persamaan kurva kalibrasi y = 0,176x + 0,1005 sehingga dapat ditentunkan
konsentrasi sampel yaitu sebesar 2,5373 ppm.

IX. Daftar Pustaka

9.1. Harvey, David. (2006). Modern Analytical Chemistry, 1st ed. New York: McGraw-
Hill. p. 563. Ninfa, J.; Alexander, P.; Ballou, David. (2004). Fundamental laboratory
approaches for biochemistry and biotechnology. Wiley. p. 66.
9.2. Skoog, D. A. (2004). Fundamentals of Analytical Chemistry, 8th ed. United States:
Thomson Learning Academic. p. 771.