Ind J Clin Biochem (Juli-September 2014) 29 (3): 269–278 DOI 10.

1007 / s12291-013-0408-y
TINJAUAN ARTIKEL
Alkaline Phosphatase: Tinjauan Umum
Pal Deeksha • Rajendra Prasad
Ujjawal Sharma •
Menerima: 21 Agustus 2013 / Diterima : 11 November 2013 / Diterbitkan online: 26 November 2013 Ó Asosiasi Ahli Biokimia Klinis India 2013
Abstrak Alkaline phosphatase (ALP; EC3.I.3.1.) Adalah glikoprotein yang terikat di mana-mana yang mengkatalisis
hidrolisis monoester fosfat pada nilai pH dasar. . Alkaline fosfatase dibagi menjadi empat isozim tergantung pada situs
ekspresi jaringan yang ALP intrasinal, ALP plasenta, ALP sel kuman dan jaringan alkali fosfatase non-spesifik atau hati /
tulang / ginjal (L / B / K) ALP. Lokus ALP usus dan plasenta terletak di dekat ujung lengan panjang kromosom 2 dan L / B
/ K ALP terletak di dekat ujung lengan pendek kromosom 1. Meskipun ALP hadir di banyak jaringan mamalia dan telah
dipelajari untuk beberapa tahun terakhir masih sedikit yang diketahui tentang mereka. Isoenzim tulang dapat terlibat dalam
kalsifikasi tulang mamalia dan isoenzim usus dianggap memainkan peran dalam pengangkutan fosfat ke dalam sel epitel
usus. Dalam ulasan ini, kami mencoba untuk memberikan gambaran tentang berbagai bentuk, struktur dan fungsi alkali
fosfatase dengan fokus khusus pada hati / tulang / ginjal alkali fosfatase.
Kata kunci Enzim Á isoenzim Á Alkaline fosfatase Á L / B / K alkali fosfatase Á Hati alkali fosfatase Á usus alkali
fosfatase Á plasenta alkali fosfatase
Pengantar
Alkaline fosfatase [ALP; orthophosphoric monoester phosphohydrolase (alkaline optimum) EC 3.1.3.1] adalahplasma
glikoprotein yang terikat membran[1, 2]. Enzim ini didistribusikan secara luas di alam, termasuk prokariota dan eukariota
yang lebih tinggi [3-6], dengan pengecualian beberapa tanaman yang lebih tinggi [7]. Alkaline phosphatase membentuk
keluarga besar enzim dimeric, biasanya terbatas pada permukaan sel [8, 9] menghidrolisis berbagai ester monofosfat pada
pH optik yang tinggi dengan melepaskan fosfat anorganik [10, 11].
Alkamid fosfatase mamalia (ALP) adalah metaloenzim yang mengandung seng yang dikodekan oleh keluarga multigene
dan berfungsi sebagai molekul dimer. Tiga ion logam termasuk dua Zn2+ dan satu Mg2+ di situs aktif sangat penting untuk
aktivitas enzimatik. Namun, ion-ion logam ini juga berkontribusi besar pada konformasi monomer ALP dan secara tidak
langsung mengatur interaksi subunit-subunit [12].
Isoform dari Alkaline Phosphatase dan Distribusi Mereka
ALP Manusia dapat diklasifikasikan ke dalam setidaknya empat bentuk jaringan spesifik atau isozim terutama sesuai dengan
spesifisitas jaringan yang akan diekspresikan, disebut sebagai alkaline phosphatase plasenta (PLALP atau isozim Regan),
nal alkaline phosphatase (IALP), hati / tulang / ginjal alka-line phosphatase (L / B / K ALP), ALP sel germinal (isozim
GCALP atau NAGAO) [13]. Produk-produk enzim dari setidaknya tiga lokus gen ALP (plasenta, usus dan L / B / K) [14-
16] dapat dibedakan pada manusia dengan berbagai metode struktural, biokimiawi dan imunologi [17-19].
U. Sharma Á D. Pal Á R. Prasad (&)
Alkaline Phosphatase
dari Departemen Biokimia, Institut Pendidikan dan Penelitian Medis Pascasarjana, Chandigarh, India
Gen ALP plasenta manusia dipetakan ke chromo -e-mail: fateh1977 @ yahoo. com
some 2 [20]. Homologi 87% ditemukan dengan IAP
123
270 Ind J Clin Biochem (Juli-September 2014) 29 (3): 269-278

123 gen. Namun, ada perbedaan dikarboksilnya

akhir fosfat alkali hati / tulang / ginjal / jaringan[21]. ALP plasenta adalah enzimstabil panas
phatase(TNSALP) yang dikodekan sebagai lokus genetik tunggal, hadir pada tingkat tinggi di plasenta. Jumlah jejak
dipetakan ke lengan pendek kromosom 1 [32, 33]. Ko-isoenzim ini dapat dideteksi dalam serum normal [22]. Bagian dari
moda dan Sakagishi [25] mendalilkan hipotesis mengenai aktivitas tipe plasenta serum yang berasal dari neutro-
peran fisiologis dari kelompok gula dalam ALPS: mereka phils. Gen ALP plasenta dapat diekspresikan kembali dengan
akan melindungi enzim dari penghapusan cepat dari sel-sel kanker sebagai isoenzim Regan. ALP plasenta adalah
sirkulasi melalui pengikatan oleh enzim polimorfik asialoglikoprotein, dengan hingga 18 allelozim yang menghasilkan
reseptor hati. dari mutasi titik, berbeda dengan isop ALP lainnya
. Evolusi keluarga gen ALP mungkin memiliki zim [23].
 melibatkan duplikasi gen ALP jaringan-nonspesifik untuk membuat gen TNSALP dan genAlkaline Phosphatase
intermediate
IAP, diikuti oleh duplikasi tambahan yang terakhir untuk membuat gen ALP usus, plasenta, dan sel kuman. Pengkodean
gen untuk ALP usus (IAP) adalah anggota
Hanya manusia dan kera besar memiliki ALP plasenta; semua keluarga pemetaan gen ke lengan panjang kromosom 2
mamalia memiliki IAP [34]. [24]. IAP adalah sebagian isozim yang stabil terhadap panas pada tingkat tinggi di jaringan
usus. Berbeda dengan isoenzim ALP lainnya, rantai samping karbohidrat IAP tidak diakhiri oleh asam sialic [25]. IALP
yang berbeda dapat berupa iso-
Struktur Gen yang dipasangkan dari jaringan janin dan dewasa, dengan janin yang membentuk isoenzim sialilasi berbeda
dengan orang dewasa. The
Alkaline fosfatase adalah bentuk janin dan dewasa metalloenzyme terikat membran berbeda tidak hanya dalam karbohidrat
yang terdiri dari kelompok isoenzim. Setiap isoenzim adalah konten tetapi juga dalam bagian protein itu sendiri,
menunjukkan bahwa
glikoprotein dikodekan oleh lokus gen yang berbeda [35]. Ini adalah lokus gen ALP terpisah yang mungkin ada pada
manusia selama
meyakini bahwa semua gen ALP manusia berevolusi dari perkembangan janin. Gen embrionik ini bisa menjadi ulang
gen leluhur. Gambar 1 menunjukkan garis kasar yang ditekan (dalam bentuk yang dimodifikasi) oleh sel-sel kanker dan
dirancang sebagai
pohon evolusi ALP [19]. disebut sebagai Kasahara isoenzim [26].
Tiga gen ALP pada kromosom 2q34-37 diekspresikan pada dasarnya dengan cara spesifik jaringan dan menghasilkan sel
alkali alkali fosfatase
plasenta, isoenzim ALP seperti plasenta dan usus (masing-masing PALP, PLALP dan IALP). ALP keempat Pengkodean
gen untuk ALP sel kuman (GCAP,plasenta
genyaitu L / B / K peta ALP ke lengan pendek distal seperti ALP) juga dipetakan ke kromosom 2 [27]. Ini adalah
kromosom manusia 1, pita p34-p36.1 mengkodekan isozim stabil-panas keluarga yang hadir pada level rendah dalam sel
germinal [2]
protein [9, 35, 36]. Glikosilasi diferensial embrional dan beberapa jaringan neoplastik [28, 29]. Ini mengkode
TNSALP menimbulkan isoform spesifik jaringan yang berbeda testis / timus ALP dan dapat diekspresikan dalam plasenta
satu sama lain hanya dengan modifikasi pasca-translasi; level rendah [30]. GCAP dalam testis tampaknya terlokalisasi
pada
isoenzim ALP sekunder ini yang ada di seluruh membran sel sel kuman yang belum matang dan, seperti
tubuh, tetapi secara individual paling berlimpah di hati, isoenzim ALP lainnya, melekat pada membran sel dengan
kerangka dan jaringan ginjal [37]. Oleh karena itu, mereka adalah kolom dari jangkar fosfatidil-inositol-glikus. Seperti
gen ALP plasenta hati / tulang / ginjal / jaringan atau nonspesifik, dapat diekspresikan kembali oleh sel-sel kanker
ALP (TNSALP) [4]. (atau isozim NAGAO) [31].
Jenis dan lokasi kromosom gen ALP dengan nomor aksesinya ditunjukkan pada Tabel 1.L / B / K Liver / Bone / Ginjal
Alkaline Phosphatase
Gentampaknya setidaknya lima kali lebih lama dari masing-masing dari tiga gen lainnya. Perbedaan keseluruhan
panjangnya adalah isozim labil panas mewakili hati / tulang / ginjal atau
karena intron yang jauh lebih lama dalam bentuk jaringan gen ALP L / B / K nonspesifik (TNSALP) [1, 2]. Ini dinyatakan
dalam
(Gbr. 2). Intron dalam jaringan usus, plasenta, dan plasenta di seluruh tubuh dan terutama
gen mirip abus semuanya cukup kecil (74-425 bp). Dansa di jaringan hati, tulang, dan ginjal. Sedikit perbedaan
urutan cDNA lengkap L / B / K ALP diketahui (Gbr. 3) dalam mobilitas elektroforesis dan stabilitas termo antara
dan gen terdiri dari 12 ekson, dibandingkan dengan 11 dalam L / B / K ALP dari berbagai jaringan yang dikaitkan untuk
masing-masing gen lainnya. Pengodean ekson adalah 2-12. Perbedaan dalam modifikasi pasca-translasi, meskipun
exon tambahan adalah pada ujung 50 di wilayah non-coding. kemungkinan bahwa bagian proteinnya dikodekan
olehterpisah
Exons 2-12 yangterkandung dalam 25 kb DNA. Gen yang terkait tetapi terkait [19].
tans antara ekson 1 dan 2 setidaknya merupakan tambahan 25 kb
Ind J Clin Biochem (Juli-September 2014) 29 (3): 269-278 271
 Gambar. 1 Ilustrasi yang menunjukkan hubungan evolusi yang dipostulatkan dari hati / tulang / ginjal manusia, gen usus, plasenta dan seperti
plasenta [18]
Tabel 1 Nomenklatur isozim dan gen ALP manusia termasuk lokasi kromosom, ukuran gen dan nomor aksesi
Gen Nama protein Nama umum Lokasi kromosom Aksesi no.
ALPL TNAP Alkaline phosphatase spesifik-jaringan; TNSALP;
Chr1: 21581174–21650208 NM_000478 tipe hati / tulang / ginjal AP ALPP PLAP Alkaline phosphatase plasenta; PLALP Chr2: 233068964–
233073097 NM_001632 ALPI IAP Alkaline phosphatase usus; IALP Chr2: 233146369–233150245 NM_001631 ALPP2 GCAP Alkaline
phosphatase sel kuman; GCALP Chr2: 233097057–233100922 NM_031313
Gambar. 2 Hubungan antara organisasi exon dan struktur polipeptida dari gen ALP L / B / K. L / B / K ekson gen ALP 1–12 ditampilkan sebagai
persegi panjang besar. Daerah yang tidak diterjemahkan ditandai dengan warna hijau. Sinyal peptida pada ujung amino dan regangan hidrofobik
asam amino pada ujung karboksil dalam ekson 2 dan 12, masing-masing, ditunjukkan dengan warna kuning. Daerah yang terdiri dari kantung aktif
yang dilestarikan dalam ALP usus, ALP plasenta,
dari DNA. Dengan demikian, seluruh gen terdiri dari setidaknya 50 kb DNA [38].
Urutan pada ujung 50 dan 30 masing-masing intron sesuai dengan urutan konsensus untuk batas intrononon gen eukariotik
lainnya. Semua intron dimulai dengan dinucleotide GT dan diakhiri dengan AG. Intron nomor 1, setidaknya panjang 25 kb,
menyela urutan 50 yang tidak diterjemahkan 105 bp di hulu kodon metionin inisiasi. Semua intron lain mengganggu gen
dalam daerah pengkode protein. Ekson 12, sekitar 1.025 bp, berisi 263 nukleotida coding urut, bangsa kodon termi-, dan
seluruh 30 diterjemahkan wilayah. Pada akhir ekson 12, ada3diduga 0-sinyal prosesmRNAyang biasanya ditemukan pada
gen eukariotik lainnya; situs pembelahan mRNA / polyadenylation
123
diapit oleh urutan AATAAA sekitar 12 bp hulu, dan daerah kaya G / T sekitar 12 bp hilir.
Karakterisasi dan Diskriminasi ALP
Banyak metode biokimia dan imunologis yang berbeda telah digunakan untuk membedakan antara dan secara selektif
menguji ALPS yang berbeda pada tingkat enzim dan protein. Tiga metode umum terbukti sangat berguna: studi
termostabilitas; penghambatan diferensial dengan berbagai asam amino, peptida kecil dan zat berat molekul rendah lainnya;
dan metode imunologis [39].
dan E. coli ALP diperlihatkan sebagai berikut: segi empat kecil di atas ekson menunjukkan unit kekekalan dari urutan asam amino yang ada sebagai
unit diskrit dari struktur sekunder dalam E. coli ALP (hitam untuk & lembaran, putih untuk heliks-a); lingkaran terbuka menunjukkan ligan logam,
dan lingkaran tertutup menunjukkan residu yang secara langsung berinteraksi dengan substrat yang masuk.
27 (3): 269-278
 K ALP cDNA. Angka yang diawali dengan + atau – mengacu pada posisi asam
amino. Semua angka lain mengacu pada posisi nukleotida. Tanda bintang terjadi
pada interval 10-basis. Asam amino -17 hingga -1 terdiri dari peptida sinyal
putatif. Garis vertikal mendahului asam amino +1, residu terminal amino yang
ditemukan dalam protein matang. Residu asam amino yang Dapat

Termostabilitas

ALP usus dan L / B / K dengan cepat tidak aktif pada suhu [65 ° C
(Tabel 2). Sebaliknya, ALPS plasenta dan seperti plasenta sangat
termostabil. Mereka mungkin dipanaskan pada 65 ° C selama satu
jam atau lebih tanpa kehilangan aktivitas. Namun, ALP usus agak
lebih termostabil daripada ALP L / B / K. Ini juga telah
menunjukkan

123
bahwa dalam serum, ALP hati sedikit, meskipun secara signifikan,
lebih termostabil dari ALP tulang[39].

Studi Penghambatan

Berbagai zat berbobot molekul rendah menunjukkan penghambatan

diferensial dari berbagai ALP. Tabel 3 merangkum efek dengan
lima inhibitor yang telah banyak
ditentukan oleh analisis sekuens protein ALP hati murni. Lima sinyal glikosilasi
N-linked, Asn-Xaa-Thr / Ser, kotak. Pengulangan langsung 12-bp pada daerah
30 yang tidak diterjemahkan dari cDNA dilabeli dengan panah. Sinyal tambahan
poli (A) AATAAA digarisbawahi dua kali [10]

Gambar. Urutan 3 DNA dan sekuens asam amino yang disimpulkan dari L / B /
Ind J Clin Biochem (Juli-September 2014) 29 (3): 269-278 273
Tabel 2 Termostabilitas relatif ALP manusia [39]
dan ALP seperti plasenta. Kombinasi dari berbagai
ALP Manusia ini 56 ° C (min) 65 ° C (min)
teknik biokimia dan imunologi telah digunakan untuk merancang metode yang memberikan informasi analitik yang aku
tentang jumlah masing-masing ALPs ketika mereka Intestinal [60,0 6.5
hadir bersama dalam ekstrak jaringan atau cairan tubuh sepertiseperti Plasenta danplasenta - [60,0
serum atau cairan ketuban].
Waktu dalam menit diperlukan untuk memberikan inaktivasi 50% dari ALP manusia yang berbeda pada 56 ° C dan 65 ° C
L-Fenilanyanyl-glikil-glisin(Pgg) memberikan penghambatan yang berbeda secara tajam antara plasenta, usus dan L / B / K ALPs. Leva khu
inhibitor poten L / B / K. Tabel 3 Efek berbagai inhibitor pada ALP
ALP, tetapi memiliki sedikit efek penghambatan pada ALP lain. Itu
 Inhibitor ALP
harus dicatat bahwa berbagai inhibitor ini adalah stereo-spesifik dan tidak komp
usus plasenta Plac- ALP
seperti
L-Plenylalanine (Phe) 31 0,8 1,1 0,8

Homologi berbeda isoform L-Homoarginine (Har) 2,7 40 [50 36 L-Phenylalanineglycylglycine

Urutan asam amino lengkap protein ALP adalah (PGG )
sekarang dikenal (Gbr. 4). Perbandingan yang dibantu komputer dari E. coli (471 asam amino) [40], plasenta manusia (535 asam amino) [41] da
L / B / K ALP manusia (524 asam amino) ditunjukkan pada Gambar. 4. Posisi asam amino yang identik dalam ketiga protein, atau dalam du
digambarkan dalam kotak (Gbr. 4). Kesenjangan telah dimasukkan ke dalam sekuens protein untuk memaksimalkan keselarasan daerah homol
Pada tingkat asam amino, Zymes ALP spesifik jaringan isoen- adalah 86-98% identik dengan satu sama lain[9, 42],namun 52-56% identik
dengan TNSALP[4, 35].IALP, PALP dan GCALP sangat homolog dengan urutan asam amino identik 90%, sedangkan TNSALP secara signifik
Pada tingkat DNA, L / B / K dan ALP plasenta adalah 60% homolog di daerah pengkodean tetapi tidak ada homologi yang terdeteksi antara c
daerah yang tidak diterjemahkan. Seperti yang diharapkan, ada sedikit homologi antara E. coli dan ALP mamalia. Dengan demikian, E. col
homolog terhadap ALP L / B / K dan 29% homolog terhadap ALP plasenta dibandingkan dengan 47% asam amino dari enzim E. coli [37].
Beberapa area sangat terkonservasi di ketiga polipeptida ALP. Ini adalah daerah yang sama yang dideteksi oleh Millan, 1986 [27] dan Kam et a
perbandingan ALP plasenta dan E. coli mereka. Daerah-daerah ini mewakili konservasi asam amino yang terdiri dari wilayah situs aktif di E. c
juga beberapa daerah yang dikonservasi hanya antara L / B / K manusia dan ALP plasenta, mungkin mewakili fungsi ALP mamalia yang tida
Dua sinyal glikosilasi N-linked di situs homolog terjadi di L / B / K dan ALP plasenta, meskipun enzim L / B / K mengandung tiga sinyal gl
yang tidak ada dalam ALP plasenta.
123 30.6 3.7 0.1 2.9
L-Leucine(Leu) 13.1 3.6 5.7 0.6 Levamisole (Leva) 0.03 6.8 1.7 2.7
Konsentrasi (nmol / l) dari berbagai inhibitor diperlukan untuk menghasilkan penghambatan 50% ALP manusia yang berbeda dalam kondisi standar yang
digunakan. ALP L / B / K lebih sensitif terhadap penghambatan dengan L-homoarginine (Har) daripada ALP plasenta, seperti plasenta atau
ALPS plasenta, seperti plasenta, dan usus sekitar 30 kali lebih sensitif terhadap penghambatan dengan L-phenylalanine (Phe) daripada A
Phenylalanyl-glycyl-glycine (Pgg) memberikan penghambatan diferensial yang tajam antara ALPs plasenta, usus, dan L / B / K. Ini juga membe
plasenta dan ALP seperti plasenta, yang dengan inhibitor ini lebih menyerupai ALP usus. L-Leucine (Leu) secara karakteristik memberikan p
jauh lebih kuat dengan ALP seperti plasenta dibandingkan dengan ALP lainnya. Levamisole (Leva) adalah inhibitor kuat L / B / K ALP, teta
efek penghambatan pada ALP lain [39].
Studi Imunologi
Antisera meningkat pada kelinci terhadap ALP plasenta murni yang dimurnikan bereaksi dengan ALP plasenta dan ALP usus, tetapi tidak deng
Hasil komplementer diperoleh dengan antera yang diangkat terhadap ALP usus atau L / B / K ALP. Temuan ini menunjukkan bahwa beberap
semua, penentu antigenik yang terdeteksi pada ALP plasenta juga ada pada ALP usus, tetapi plasenta dan plasenta seperti ALP secara imuno
Beberapa tetapi tidak monoklonal lain, yang dibesarkan melawan ALP plasenta dan usus bereaksi dengan ALP dan beberapa, meskipu
monoklonal membedakan plasenta
274 Ind J Clin Biokimia (Juli-September 2014) 29 (3): 269-278
 (P), dan protein prekursor ALP L / B / K (L) manusia. Kesenjangan yang telah
dimasukkan ke dalam urutan untuk memaksimalkan pasangan asam amino
homolog ditunjukkan oleh asam -Amino +1

Pemodelan Molekul ALP L / B / K Protein

Dua atom seng hadir di situs aktif dan satu atom kalsium hadir di
situs pengikat logam. Kalsium adalah ion alami yang berikatan
dengan domain pengikat logam. Efek kalsium pada aktivitas ALP
harus dipertimbangkan kembali termasuk dalam analisis
keberadaan situs kalsium. Peran biologis kalsium yang tepat dalam
TNSALP masih harus diatasi. Sangat menarik untuk mengamati

123
bahwa dengan evolusi dan spesialisasi fungsi enzim, fitur-fitur baru
telah ditambahkan: pada E. coli, di mana tidak ada kerangka untuk
mineralisasi, tidak ada situs kalsium dalam ALP-nya [9].
Model TNSALP menunjukkan bahwa lembah situs aktif
yang terletak di kedua sisi situs aktif mengandung sejumlah besar
residu kutub. Dengan demikian, residu hidrofobik, Trp168, Tyr169,
dan Tyr206 dikelilingi oleh residu ionik. Residu dasar, Arg433,
hadir dekat dengan
sesuai dengan residu pertama di masing-masing protein dewasa. Asam amino
yang identik dalam ketiga protein atau dalam dua protein manusia adalah kotak.
Asam amino ditampilkan dalam kode huruf tunggal [10]

Gambar. 4 Perbandingan dari sekuens asam amino E.coli (E), plasenta manusia
Ind J Clin Biochem (Juli-September 2014) 29 (3): 269-278 275
situs aktif.hidrofobik tidak dilestarikan dalam
Kantungkepentingan fisiologis tempat pengikatan kalsium TNSALP ini. Namun, tirosin, yang masuk dalamaktif
TNSALPtetap tidak jelas [46]. situs monomer lain (Tyr367 di PLALP), terdapat di TNSALP (Tyr371). Ini memperkuat gagasan bahwa Tyr37
berkontribusi pada sifat alosterik bersama
Fungsi Fisiologis ALP oleh dua enzim. Semua residu yang penting untuk aktivitas hidrolitik bakteri dan mamma lainnya-
Sejak deskripsi pertama oleh Suzuki dan rekan [47] dalam lian fosfatase disimpan dalam TNSALP, tetapi yang pada tahun
1907, alkaline phosphatase (ALP) telah diselidiki. spesifisitas substrat berbeda.
terus menerus dan ekstensif. Tetapi sedikit yang diketahui mengenai fitur struktural yang terdiri dari terminal N
fungsi fisiologis ALP di sebagian besar jaringan kecuali heliks yang terlibat dalam antarmuka dimer, 76 residu dari
 isoenzim tulang yang telah lama dianggap memiliki ikatan kalsium. residu domain 211-289), dan
peran dalam mineralisasi kerangka normal [48]. Facial 'alami' domain mahkota '' yang dibentuk oleh penyisipan
substrat untuk TNSALP tampaknya mencakup setidaknya tiga segmen 60-residu (371-431) dari setiap monomer terjadi
senyawa fosfor: phosphoethanolamine (PEA), in-in TNSALP . Dalam domain mahkota, permukaanunik
ganik pirofosfat (PPi) yang, danpiridoksal-50loop fosfattidak terdapat pada enzim E. coli yang memanjang dari
(PLP), sebagaimana dibuktikan dengan peningkatan plasma dan / atau asam amino urin 400- 430 Lingkaran ini telah terbukti memainkan
level masing-masing pada subjek dengan hipofosfatasia [49, 50], peran penting dalam menentukan konformasi dan stabilitas
tetapi ini tidak pasti. Memang, berbagai mekanisme memiliki molekul ALP. Loop ini juga sebagian bertanggung jawab
telah diusulkan untuk menjelaskan peran ALP dalam penambang tulang - untuk interaksi ALPs dengan pro- alisasi matriks ekstraselular
[51]. Namun, terlepas dari perannya dalam teh tulang normal, seperti kolagen. Model TNSALP menunjukkan bahwa
mineralisasi, fungsi lain L / B / K tetap loop ini sangat mudah diakses dan terletak di ujung paling
tidak jelas baik dalam kondisi fisiologis dan neoplastik. domain mahkota. Lingkaran ini bertanggung jawab atas sifat unik ALP mamalia yang
tidak kompetitif oleh sejumlah asam amino dan peptida kecil
Alkaline Phosphatase dalam Kesehatan dan Penyakit (Gbr. 5) [11].
Aktivitas fosfatase alkali hati dan tulang dalam serum telah diterapkan secara luas dalam diagnosis rutin. Kalsium Intraseluler
Nilai untuk setiap isoenzim pada individu sehat dari berbagai usia dilaporkan bersama-sama dengan hasil yang diperoleh dalam model stru
dari
berbagai penyakit. Data dari subjek normal menunjukkan bahwa diusulkan oleh Mornet pada tahun 2001 [9]. Menurut
tulang alkali fosfatase ini berkontribusi sekitar setengah dari total model, salah satu fitur yang membedakan ALP darimam-
aktivitasalkaline phosphatase pada orang dewasa. Serum serum normal dari E. coli adalah perolehankalsium
rentangalkali fosfatase adalah 20 hingga 140U / L. Situs pengikatan enzim selama evolusi selain dua seng dan
alkali fosfatase adalah analit serum yang penting dan satu situs pengikatan magnesium yang sangat diperlukan untukALP
peningkatandalam serum berkorelasi dengan keberadaan tulang, aktivitas. Alkaline phosphatase manusia memiliki empatlogam
hati, dan penyakit lainnya [52]. Kadar ALP yang tinggi dapat menunjukkan tempat pengikatan -dua untuk seng, satu untuk magnesium, dan sa
itu saluran empedu terhambat. Kadar ion kalsium secara signifikan. Kalsium membantu menstabilkan area luas yang
lebih tinggi pada anak-anak dan wanita hamil. Selain itu, peningkatan mencakup loop 210–228 dan 250–297 [45]. Kalsium
ALP menunjukkan bahwa mungkin ada atom pembentukan tulang aktif di TNSALP yang diasumsikan terkoordinasi oleh empat yang
terjadi karena ALP adalah produk sampingan dari residu asam amino aktivitas osteoblas (Glu218, Phe273, Glu274 dan Asp289)
(seperti kasus pada penyakit Paget) tulang) atau penyakit dan molekul air. Pengikatan kalsium sangat penting untuk
yang mempengaruhi tingkat kalsium darah (hiperparatiroidisme), pelipatan yang tepat dan perakitan yang benar daribaru disintesis
defisiensi vitamin D yang, atau sel-sel hati yang rusak [53]. Tingkat molekul TNSALP. Telah ditunjukkan bahwa kehilangan
juga meningkat pada orang dengan potensi pengikatan Celiac Disease yang tidak diobati memiliki efek buruk pada bio-
[54]. Alkaline phosphatase plasenta meningkat secara semi-sintesis dari molekul TNSALP. Mungkin menghasilkan
nomas [55]. Kadar ALP yang lebih rendah lebih jarang daripada molekul ALP yang gagal melipat. Ada semakin banyak bukti yang
meningkatkan level. Beberapa kondisi atau penyakit seperti banyak protein yang gagal melipatnya dipertahankan di UGD atau pindah
hipofosfataia, wanita pascamenopause menerima dari cis-golgi ke UGD sebagai bagian darikontrol kualitas
terapi estrogenkarena osteoporosis, pria dengan sistem baru-baru ini, sehingga hanya memungkinkan dilipat dengan benar dan
operasi jantung, kekurangan gizi, kekurangan magnesium, protein hipotetik untuk pindah ke tujuan akhir mereka. Namun,
tiroidisme, anemia berat, anak-anak dengan achondroplasia
123
276 Ind J Clin Biochem (Juli-September 2014) 29 (3): 269– 278

Gambar. 5 Diagram pita dari struktur protein ALP L / B / K. (http:

//biochem.dental.upenn. edu /)
 pertumbuhan sel, apoptosis dan migrasi seluler selama
perkembangan embrionik. Gen ALP diatur oleh sinyal yang
berbeda seperti yang ditunjukkan oleh perbedaan yang jelas dalam
profil ekspresi mereka [2]. Ekspresi ektopik dari ALP telah
dikaitkan dengan berbagai kanker pada manusia. Pola ekspresi
isozim ALP diubah dalam jaringan ganas,

123
misalnya, PALP dan GCALP diekspresikan lebih dalam sel yang
berasal dari kanker payudara dan koriokarsinoma, masing-masing.
PALP adalah penanda kanker ovarium, testis, paru-paru, dan
saluran pencernaan. Level TNALP plasma dapat mengindikasikan
adanya osteosarkoma, penyakit Paget dan metastat tulang
osteoblastik [36]. Peningkatan ekspresi IALP juga telah
dilaporkan pada karsinoma hepatoseluler [61]. Ekspresi
menyimpang dari gen ALP pada kanker [11, 62] telah
dan kretinisme, anak-anak setelah episode enteritis yang parah, menyebabkan saran bahwa isozim ALP mungkin terlibat dalam
anemia pernisiosa, anemia aplastik, leukemia myelogenous kronis, tumoresis [6]. ALPL sendiri merupakan gen penekan tumor baru
penyakit wilson dapat menyebabkan penurunan kadar alkali yang secara homozigot tidak aktif pada meningioma [63].
fosfatase. Selain itu, obat-obatan seperti kontrasepsi oral telah Aktivitas ALP yang lebih tinggi dilaporkan pada pasien kanker
terbukti mengurangi alkaline phosphatase [56]. payudara [64]. Akhirnya, penelitian terbaru mengusulkan peran
Kekurangan TNSALP menyebabkan hipofosfatia (HPP), baru untuk TNSALP dalam efek toksik dari protein tau
kesalahan metabolisme bawaan yang ditandai dengan kejang ekstraseluler. Tau ekstra seluler tetap dalam keadaan defosforilasi.
epilepsi pada kasus yang paling parah, yang disebabkan oleh Protein tau hiperfosforilasi, komponen utama kusut neurofibrillary
metabolisme abnormal pyridoxal-50-fosfat (bentuk vitamin B6 intraseluler yang ada di otak pasien penyakit Alzheimer (AD),
yang dominan) dan oleh hipomineralisasi dari kerangka dan gigi memainkan peran penting dalam perkembangan penyakit.
menampilkan rakhitis dan kehilangan gigi dini pada anak-anak atau Peningkatan aktivitas TNSALP bersama dengan peningkatan
osteomalacia dan masalah gigi pada orang dewasa yang disebabkan kadar protein dan transkrip terdeteksi pada pasien penyakit
oleh akumulasi pirofosfat anorganik (PPi) [57]. Subjek dengan Alzheimer dibandingkan dengan kontrol yang sehat [56].
hipofosfatasia memiliki defisiensi aktivitas TNSALP secara umum
dan menderita mineralisasi tulang yang cacat (rakhitis atau
osteomalacia), namun aktivitas isoenzim ALP plasenta dan
intestinal normal. Kasus yang paling parah adalah mematikan pada Referensi
masa bayi, dengan tidak adanya ALP L / B / K yang lengkap di
semua jaringan [58]. Bentuk penyakit yang parah ditransmisikan 1. McComb RB, Bowers GN, Posen S. Alkaline phosphatase. New
York: Plenum Publishing Corp; 1979. 2. Tsai LC, Hung MW, Chen
sebagai sifat resesif autosom. Identifikasi mutasi missens pada gen
YH, Su WC, Chang GG, Chang TC. Ekspresi dan regulasi alkali fosfatase
TNSALP dalam satu kasus tipikal dari bentuk hipofosfatia perinatal dalam sel kanker payudara manusia MCF-7. Eur J Biochem. 2000; 267:
yang parah membentuk hubungan antara TNSALP dan mineralisasi 1330–9. 3. Chang TC, Wang JK, Hung MW, Chiao CH, Tsai LC, Chang GG.
tulang [59, 60]. Regulasi ekspresi alkali fosfatase dalam garis sel kanker payudara manusia.
Beberapa penelitian telah menunjukkan keterlibatan ALP Biochem J. 1994; 303: 199–205.
dalam peristiwa seluler seperti regulasi fosforilasi protein,
Ind J Clin Biochem (Juli-September 2014) 29 (3): 269-278 277
4. MP Whyte, Landt M, Ryan LM, Mulivor RA, Henthorn PS,
23. Fishman WH, Inglis NR, Green S, et al. Imunologi dan bio-Fedde KN, Mahuren JD, Coburn SP. Alkaline fosfatase:
kimia isoenzim regan dari alkali fosfatase dalam isoenzim cental dan jaringan-spesifik-manusia menghidrolisis fosfonet-
kanker. Alam. 1968; 219: 697–9. anolamin, pirofosfat anorganik, dan piridoksal 50-fosfat
24. Griffin CA, Smith M, Henthorn PS, dkk. Akumulasi plasenta dan substrat manusia dalam pembawa hipofosfatasia mengoreksi
peta gen alkali fosfatase usus menjadi 2q34 – q37. Saya selama kehamilan. J Clin Invest. 1995; 95: 1440–5.
Gen Hum. 1987; 41: 1025–34. 5. Calhau C, Martel F, Hipolito-Reis C, Azevedo I. Pengaruh P-
25. Komoda T, Sakagishi Y. Fungsi modulator moiety glikoprotein karbohidrat pada fosfataseaktivitas basa dalam cul-
dan perubahan komposisi karbohidrat dalam alkali manusia hepatosit tikus tured. Cell Physiol Biochem. 2000; 10: 195–202.
isoenzim fosfatase. Biochim Biophys Acta. 6. Sadeghirishi A, Yazdanparast R. Homing membran plasma tahun
1978; 523: 395-406. jaringan alkali fosfatase nonspesifik di bawah pengaruh
26. Higashino K, Muratani K, Hade T, et al. Struktur gen 3-hidrogenkwadaphnin, agen anti-proliferasi dari Dend-
alkaline phosphatases: pemurnian dan beberapa sifat rostellera lessertii cepat. Acta Biochim Pol. 2007; 54: 323–9.
memigrasikan alkali fosfatase dalam sel FL-amnion (Kasahara 7. Shigenari A, Ando A, Baba R, Vaniamoti T, Katsuoka Y, Inoko
isoenzyme) dan kloning cDNA-nya. Clin Chim Acta. H. Karakterisasi gen alkali fosfatase diekspresikan pada tahun
1989; 186: 151-64. seminoma dengan kloning cDNA. Res Kanker 1998; 58: 5079–82.
27. Millan JL. Kloning molekuler dan analisis urutan manusia 8. Benham F, Cottell DC, Frank M, Wilson PD. Alkali fosfatase
alkali fosfat. J Biol Chem. 1986; 261: 3112-5. aktivitas phatase dalam garis sel tumor kandung kemih manusia. J Histochem
28. Millan JL, isozim nagao Manes R. Seminoma yang diturunkan adalah Cytochem. 1977; 25: 266-74.
dikodekan oleh gen alkali fosfatase sel germinal. Proc Natl 9. Mornet E, E Stura, Lia-Baldin AS, Stigbrand T, Menez A, Le Du
Acad Sci. 1988; 85: 3024–8. MH. Bukti struktural untuk peran fungsional jaringan manusia non
29. Hofmann MC, Jeltsch W, J Brecher, Walt H. Alkaline phosphatase alkaline phosphatase spesifik dalam mineralisasi tulang. J Biol
tase isozim pada tumor sel benih testis manusia, Chem prakanker. 2001; 276: 31171–8.
panggung, dan tiga garis sel terkait. Res Kanker 1989; 49: 4696-700. 10. Weiss MJ, Henthorn PS, Lafferty MA, Slaughter C, Raducha M,
30. Povinelli CM, Knoll BJ. Trace expression of the germ-cell Harris H. Isolation and characterization of a cDNA encoding a
alkaline phosphatase gene in human placenta. Plasenta. human liver/bone/kidney-type alkaline phosphatase. Proc Natl
1991;12(663):8. Acad Sci. 1986;83:7182–6.
31. Fishman WH. Clinical and biological significance of an isoen- 11. Sharma U, Singh SK, Pal D, Khajuria R, Mandal AK, Prasad R.
zyme tumor marker-PLAP. Clin Biochem. 1987;20:387–92. Implication of BBM lipid composition and fluidity in mitigated
32. Smith M, Weiss MJ, Griffin CA, et al. Regional assignment of the alkaline phosphatase activity in renal cell carcinoma. Mol Cell
gene for human liver/bone/kidney alkaline phosphatase to chro- Biochem. 2012;369:287–93.
mosome 1 p36.1–p34. Genomics. 1988;2:139–43. 12. Hoylaerts MF, Manes T, Millan JL. Mammalian alkaline phos-
33. Orimo H. The mechanism of mineralization and the role of phatases are allosteric enzymes. J Biol Chem. 1997;272:22781–7.
alkaline phosphatase in health and disease. J Nippon Med Sch. 13. Sligbrand T. Present status and future trends of human alkaline
2010;77:4–12. phosphatases. Prog Clin Biol Res. 1984;166:3–14.
34. Fishman WH. Alkaline phosphatase isozymes: recent progress. 14. Henthorn PS, Raducha M, Fedde KN, Lefferty MA, Whyte MP.
Clin Biochem. 1990;23:99–104. Different missense mutations at the tissue nonspecific alkaline
35. Weiss MJ, Ray K, Henthorn PS, Lamb B, Kadesch T, Harris H. phosphatase genes locus in autosomal recessively inherited forms
Structure of the human liver/bone/kidney alkaline phosphatase of mild and severe hypophosphatasia. Proc Natl Acad Sci.
gene. J Biol Chem. 1988;263:12002–10. 1992;89:9924–8.
36. Du MHL, Milla JL. Structural evidence of functional divergence 15. Millan JL, Fishman WH. Biology of human alkaline phosphatase
in human alkaline phosphatases. J Biol Chem. with special reference to cancer. Crit Rev Clin Lab Sci.
2002;277:49808–14. 1995;32:1–39.
37. Moss DW. Perspectives in alkaline phosphatase research. Clin 16. Muller H, Yamazaki M, Michigami T, Kageyama T, Chonau E,
Chem. 1992;38:2486–92. Schneider P, Ozono K. Asp361Val mutant of alkaline phospha-
38. Kiledjian M, Kadesch T. Post-transcriptional regulation of the tase found in patients with dominantly inherited hypophospha-
human liver/bone/kidney alkaline phosphatase gene. J Biol tasia inhibits the activity of the wild-type enzyme. J Clinical
Chem. 1991;266:4207–13. Endocrinol Metabolism. 2000;85:743–7.
39. Harris H. The human alkaline phosphatases: what we know and 17. Mulivor RA, Plotkin LI, Harris H. Developmental change in
what we don't know. Clin Chim Acta. 1990;186:133–50. human intestinal alkaline phosphatase. Ann Hum Genet.
40. Bradshaw RA, Cancedda F, Ericsson LH, Neumann PA, Piccoli 1978;42:1–13.
SP, Schlesinger MJ, Shriefer K, Walsh KA. Amino acid sequence 18. McKenna MJ, Hamilton TA, Sussman HH. Comparison of
of Escherichia coli alkaline phosphatase. Proc Natl Acad Sci. human alkaline phosphatase isoenzymes. structural evidence for
1981;78:3473–7. three protein classes. Biochem J. 1979;181:67–73.
41. Henthorn PS, Raducha M, Edwards YN, Weiss MJ, Slaughter C, 19. Harris H. The harvey lectures: series 76. New York: Academic;
Lafferty MA, Harris H. Nucleotide and amino acid sequences of 1986. p. 95–123.
human intestinal alkaline phosphatase: close homology to placental 20. Raimondi E, Talarico D, Moro L, et al. Regional mapping of the
alkaline phosphatase. Proc Natl Acad Sci. 1984;84:1234–8. human placental alkaline phosphatase gene (ALP) to 2q37 by
42. Weiss MJ, Cole DEC, Ray K, Whyte MP, Lafferty MA, Mulivor in situ hybridization. Cyrogenet Cell Genet. 1988;47:98–9.
RA, Harris H. A missense mutation in the human liver/bone/ 21. Henthom PS, Raducha M, Hadesch T, et al. Sequence and
kidney alkaline phosphatase gene causing a form of lethal characterization of the human intestinal alkaline phosphatase
hypophosphatasia. Proc Natl Acad Sci. 1988;85:7666–9. gene. J Biol Chem. 1988;263:12011–9.
43. Kam W, Clauser E, Kim YS, Kan YW, Rutter WJ. Cloning, 22. Vergote IB, Abeler VM, Bormer OP, et al. CA125 and placental
sequencing, and chromosomal localization of human term pla- alkaline phosphatase as serum tumor markers in epithelial ovar-
cental alkaline phosphatase cDNA. Proc Natl Acad Sci. ian carcinoma. Tumor Biol. 1992;13:168–74.
1985;82:8715–9.

123
278 Ind J Clin Biochem (July-Sept 2014) 29(3):269–278
123 44. Sowadski JM, Handschumacher MD, Murthy HMK, Foster BA,
56. Schiele F, Vincent-Viry M, Fournier B, Starck M, Siest G. Bio- Wyckoff HW. Refined structure of alkaline phosphatase from
logical effects of eleven combined oral contraceptives on serum Escherichia coli at 2.8 A resolution. J Mol Biol. 1985;186:417–33.
triglycerides, gamma-glutamyltransferase, alkaline phosphatase, 45. Llinas P, Masella M, Stigbrand T, Menez A, Stura EA, Le Du
bilirubin and other biochemical variables. Clin Chem Lab Med. MH. Structural studies of human alkaline phosphatase in complex
1998;36:871–8. with strontium: implication for its secondary effect in bones.
57. Buchet R, Milla ́n JL, Magne D. Multisystemic functions of Protein Sci. 2006;15:1691–700.
alkaline phosphatases. Metode Mol Biol. 2013;1053:27–51. 46. Yoko I, Keiichi K, Masahiro I, Yoshihiro A, Shoji K, Kimimitsu
58. Mueller HD, Stinson RA, Mohyuddin F, Milne JK. Isoenzymes of O. Tissue-nonspecific alkaline phosphatase with an Asp289 ? Val
alkaline phosphatase in infantile hypophosphatasia. J Lab Clin mutation fails to reach the cell surface and undergoes proteosome-
Med. 1983;102:24–30. mediated degradation. J Biochem. 2003;134:63–70.
59. Sultana S, Al-Shawafi HA, Makita S, Sohda M, Amizuka N, 47. Suzuki U, Yoshimura K, Takashi M. Uber ein enzyme p̄ hytasek
Takagi R, Oda K. An asparagine at position 417 of tissue-non- das anhydro-oxy-methylen-diphosphorsaure spaltet. Bull Coll
specific alkaline phosphatase is essential for its structure and Agri Tokyo Imp Univ. 1907;7:503–12.
function as revealed by analysis of the N417S mutation associated 48. Wuthier RE, Register T. Role of alkaline phosphatase, a poly-
with severe hypophosphatasia. Mol Genet Metab. 2013;109:282–8. functional enzyme, in mineralizing tissues. In: Butler WT, editor.
60. Chang KC, Lin PH, Su YN, Peng SS, Lee NC, Chou HC, Chen Chemistry and biology of mineralized tissues. Birmingham:
CY, Hsieh WS, Tsao PN. Novel heterozygous tissue-nonspecific EBSCO Media; 1985. hlm. 113–24.
alkaline phosphatase (TNAP) gene mutations causing lethal peri- 49. Whyte MP. Physiological role of alkaline phosphatase explored
natal hypophosphatasia. J Bone Miner Metab. 2012;30:109–13. in hypophosphatasia. Ann NY Acad Sci. 2010;1192:190–200.
61. Usoro NI, Omabbe MC, Usoro CAO, Nsonwu A. Calcium, 50. Zhu T, Gan YH, Liu H. Functional evaluation of mutations in the
inorganic phosphates, alkaline and acid phosphatase activities in tissue-nonspecific alkaline phosphatase gene. Chin J Dent Res.
breast cancer patients in Calabar, Nigeria. African Health Sci. 2012;15:99–104.
2010;10:9–13. 51. Moss DW. Aspects of the relationship between liver, kidney and
62. Prasad R, Lambe S, Kaler P, Pathania S, Kumar S, Attari S, Singh bone alkaline phosphatase. In: Stigbrand T, Fishman WH, editors.
SK. Ectopic expression of alkaline phosphatase in proximal Human alkaline phosphatases. New York: Alan R Liss; 1984.
tubular brush border membrane of human renal cell carcinoma. hal. 79–86.
Biochim et Biophy acta. 2005;1741:240–5. 52. Epstein E, Kiechle FL, Artiss JD, Zak B. The clinical use of
63. Niedermayer I, Feiden W, Henn W, Steilen-Gimbel H, Steudel alkaline phosphatase enzymes. Clin Lab Med. 1986;6:491–505.
WI, Zang KD. Loss of alkaline phosphatase activity in menin- 53. Rodan GA, Rodan SB. In: Peck WA, editor. Advances in bone
giomas: a rapid histochemical technique indicating progression- and mineral research annual II. Amsterdam: Excerpta Medica;
associated deletion of a putative tumor suppressor gene on the 1984. p. 244–85.
distal part of the short arm of chromosome 1. J Neuropathol Exp 54. Preussner HT. Detecting coeliac disease in your patients. Am
Neurol. 1997;56:879–86. Fam Physician. 1998;57:1023–34.
64. Kim JM, Kwon CH, Joh JW, Park JB, Ko JS, Lee JH, Kim SJ, 55. Lange PH, Millan JL, Stigbrand T, Vessella RL, Ruoslahti E,
Park CK. The effect of alkaline phosphatase and intrahepatic Fishman WH. Placental alkaline phosphatase as a tumor marker
metastases in large hepatocellular carcinoma. World J Surg for seminoma. Cancer Res. 1982;42:3244–7.
Oncol. 2013;11:40.