Soal Edmodo

Jelaskan bagaimana analisis Streptomicin menggunakan metode spektrofotometri

IR dan UV-Vis dan sebutkan nilai-nilai apa saja yang bisa diamati ?

Jawaban :

1) Metode Spektrofotometri IR (Infra Merah)

Prinsip kerja spektrofotometer IR yaitu radiasi dari sumber radiasi IR dipecah

oleh pencacah sinar menjadi dua bagian yang sama dengan arah yang saling tegak
lurus. Kemudian kedua radiasi tersebut dipantulkan kembali ke dua cermin sehingga
bertemu kembali di pencacah sinar untuk saling berinteraksi. Dari sinar dipancarkan
ke cuplikan yang dapat menyerap energy, setelah itu terjadilah transisi diantara
tingkat energy vibrasi dasar dan tingkat vibrasi tereksitasi berupa berkas radiasi IR
yang ditangkap oleh detector, kemudian signal yang dihasilkan dari detector direkam
sebagai spectrum IR yang berbentuk puncak-puncak absorpsi berupa grafik. Sebagian
sinar dari pencacah akan dibalikan ke sumber gerak. Maju mundur cermin akan
menyebabkan sinar mencapai ke detector berfluktuasi tetapi terkendali.

2) Metode Spektrofotometri UV-Vis

Ketika streptomisin dipanaskan dengan 0,1 N natrium hidroksida, ia

menghasilkan maltol (L9), yang menunjukkan penyerapan maksimum pada 322 nm
dalam larutan alkalin. Oleh karena itu streptomisin dapat diuji dengan mengukur
absorbansi pada 322 nm sebelum dan sesudah hidrolisis dalam larutan natrium
hidroksida (396). Katz (397) telah melaporkan metode spektroskopi ultraviolet untuk
penentuan streptomisin dalam pakan. Streptomisin dalam umpan diekstraksi dengan
asam sulfat encer, dipisahkan, dinetralkan, selanjutnya dipisahkan, dipekatkan dan
dimurnikan dengan pertukaran ion. Itu bagian streptose diubah menjadi maltol dan
ditentukan secara kuantitatif dengan mengukur absorbansi ultravioletnya.
3) Nilai-nilai yang diamati
a) Spektrum UV
Streptomisin Sulfat dalam air dihitung dari gelombang 200 nm - 400 nm
pada DMS 100 Varian AG Spectrophotometer. Tiga gelombang maksimal diamati
pada 241,6 nm, 270 nm, dan 328,2 nm. Streptomycin dalam 0,2 N asam sulfat,
menunjukkan maksimum pada 280 nm dengan 𝐸1%
1𝑐𝑚 = 0,2.

b) Spektrum inframerah
streptomisin sulfat sebagai disk KBr yang direkam pada spektrofotometer
inframerah Pye Unicam ditunjukkan pada Gambar.
Penugasan struktural telah dikorelasikan dengan frekuensi berikut:
Karakteristik IR Streptomycin Sulphate:
FREKUENSI cm-1 ASSIGNMENT
3100 – 3500 NH dan OH stretch (Sangat Luas)
1630 – 1710
dan stretch (Sangat Luas)
1480 (Sangat Luas)
1100 – 1200 stretch (Sangat Luas)
Data IR lain yang dilaporkan adalah 3330, 1670, 1470, 1390, 1110 dan 1040 cm-1.