International Journal of Microbiology dan Mikologi | IJMM |

pISSN: 2309-4796
http://www.innspub.net
Vol. 7, No 1, p. 18-23, 2018

Akses terbuka PENELITIAN PAPER

Pengaruh karbon dan nitrogen sumber di hasil spora dari

Trichoderma harzianum di makan-batch budaya

Damilola O Seyi-Amole *, Abiodun A Onilude

Mikroba Fisiologi dan Laboratorium Biokimia, Departemen Mikrobiologi,

University of Ibadan, Ibadan, Nigeria

Kata kunci: Trichoderma harzianum, yield Spore, sumber karbon, sumber nitrogen

Tanggal publikasi: 28 Februari 2018

Abstrak
Pengaruh karbon dan nitrogen sumber di hasil spora T. harzianum dalam budaya makan-batch
diselidiki. T. harzianum dibudidayakan dalam media kultur cair di bawah pengaruh karbon dan nitrogen
sumber yang berbeda pada konsentrasi yang berbeda menggunakan proses makan-batch. Diamati
bahwa di antara berbagai sumber karbon dipelajari, glukosa (2,5 gl-1) Memberikan hasil spora tertinggi

2,81 ± 0,14 sedangkan pati (15,0 gl-1) Memberikan hasil spora terendah (0,22 ± 0,17). Pengaruh

sumber nitrogen mengungkapkan bahwa 1,0 gl-1 kasein ditingkatkan tertinggi spora hasil (2,88 ±
0,02) sedangkan spora yield terendah (0,23 ± 0,02) tercatat dalam medium yang mengandung kedelai
makan (9.0 gl-1) persiapan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa T. harzianum memiliki kemampuan
untuk memanfaatkan berbagai senyawa karbon dan nitrogen dan menghasilkan hasil spora tinggi pada
karbon rendah dan konsentrasi nitrogen. Hal ini dapat dipertimbangkan selama produksi industri T.
harzianum spora untuk biokontrol.

* Penulis yang sesuai: Damilola O. Seyi-Amole  doseyiamole@gmail.com

18 Amole dan Onilude

pengantar Secara umum, baik konidia dan miselia dapat
Kacang tunggak, toleran kekeringan dan tanaman diproduksi baik solid-state atau cairan fermentasi.
cuaca hangat adalah salah satu yang paling
makanan penting tanaman legum di daerah tropis
semi-kering yang mencakup Asia, Afrika, Eropa
Selatan dan Amerika Tengah dan Selatan. Ia
memiliki kemampuan yang berguna untuk
memperbaiki nitrogen atmosfer melalui bintil akar
(Singh, 2003). Hal ini dapat digunakan untuk
berbagai keperluan seperti tanaman pangan,
tanaman kas dan pakan ternak (Singh et al.,
1997). Cowpea rentan terhadap berbagai hama
dan patogen yang dapat menyebabkan kerusakan
pada tanaman pada semua tahap pertumbuhan
(Summerfield dan Roberts, 1985). Di negara-
negara seperti Nigeria, spesies Rhizoctonia,
spesies Phythium dan spesies Fusarium adalah
kepentingan ekonomi besar dan mereka
menyebabkan besar kehilangan karena busuk
benih dan bibit redaman off (Singh dan Rachie,
1985). Rhizoctonia solani, tanah-ditanggung
penyebab patogen busuk batang kanker,
penyimpanan, hawar udara dan bibit penyakit
damping-off di kacang tunggak (Carisse et al.,
2001). R. solani berpose ancaman serius
terhadap budidaya kacang tunggak dan
kerusakan terjadi setiap saat selama musim
tanam dan serangan patogen sebagian besar
bibit muda (Dorrance et al., 2001).

Trichoderma specie tersebar luas aplikasi telah

akhir-akhir ini dieksploitasi dan dilaporkan
terhadap beberapa tanah-ditanggung jamur
fitopatogenik (Baker dan Cook, 1974).
Trichoderma harzianum telah menunjukkan
potensi untuk penyakit kontrol yang disebabkan
oleh R. solani (Askew dan Laing, 1994).
Dibandingkan dengan kebanyakan jamur agen
kontrol biologis (BCA), Trichoderma spp. dapat
secara efektif digunakan sebagai spora (terutama
konidia), yang lebih aktif sebagai BCA, lebih
toleran terhadap kondisi lingkungan yang
merugikan selama formulasi produk dan
penggunaan lapangan dan diproduksi lebih cepat
dalam kelimpahan berbeda dengan miselium dan
chlamydospore bentuk sebagai propagul mikroba
(Amsellem et al ., 1999, Verma et al., 2005).
Namun, fermentasi cair tampaknya menjadi pengaruh karbon dan nitrogen sumber yang
metode yang lebih cocok lebih fermentasi solid berbeda di hasil spora T. harzianum dalam
state karena tenaga kerja, skala-up, proses budaya makan-batch.
kontrol, kompatibilitas produktivitas dengan
material dan metode
fasilitas skala besar yang sudah ada (Molla et al.,
isolat jamur dan inokulum
2004). Produksi komersial konidia biasanya
T. harzianum digunakan dalam penelitian ini
bergantung pada manipulasi nutrisi dan substrat
diperoleh dari The Culture Collection Pusat
untuk mempromosikan conidiation di
Departemen Mikrobiologi Universitas Ibadan,
Trichoderma spp. Karbon dan nitrogen status dan
Nigeria.inokulum konidia disiapkan menurut
C: N rasio selain pH ambien adalah faktor nutrisi
Nahar et al. (2008). konidia yang
utama yang mempengaruhi conidiation di
Konsentrasi diukur dengan menggunakan
Trichoderma spp. (Aube dan Gagnon, 1969,
haemositometer dan disesuaikan dengan
Monga, 2001, Gao et al., 2007).
5 -1
10 spora ml dan setelah itu digunakan untuk

Namun, ada sedikit laporan studi mengenai inokulasi.

kondisi budaya seperti budaya makan-batch

Fed-batch budaya `
dalam fermentor yang memungkinkan kontrol
budaya Fed-batch disiapkan seperti yang
konsentrasi substrat (karbon, nitrogen) dan hasil
dijelaskan oleh Cascino et al. (1990). makan-
spora T. harzianum, agen biokontrol. Jadi ada
batch yang terkandung (gl-1) Amonium klorida
kebutuhan untuk mempelajari parameter yang
(2,0), natrium kalium tartrat (2,0), MgSO4.7H2O
tercantum di atas untuk menginduksi sporulasi
(4,0), K2HPO4 (14,0), CaCl2 (0,2), KH2PO4 (4.0),
oleh T. harzianum untuk keperluan industri dan
ekstrak ragi (4.5), unsur jejak (2,0 mL),
bioteknologi sebagai agen biokontrol pada skala
[ZnSO4.7H2O (0,0014),
besar. Oleh karena itu Makalah ini melaporkan

19 Amole dan Onilude

FeSO4.7H2O (0,005), MnSO4 (0,0016), COCl2 pada akhir makan-kelelawarbudidaya ch.Untuk
(0,002)], glukosa (7,5), NaNO3 (6.0), dan jagung budidaya di pembuluh makan-batch spora
minuman keras curam (5.0) disesuaikan dengan dipanen dengan menyaring sampel melalui kain
pH 5,5 menggunakan penyangga sitrat. muslin double-layer disterilkan sehingga untuk
Komposisi media makan-batch telah dilaporkan memisahkan spora dipanen dari miselium dalam

olehAl-Taweil et al. (2009). Untuk budidaya di medium cair. Suspensi disaring disimpan pada

kapal makan-batch, 50 mL medium basal Rotary Flask Shaker (MAC, MSW-301) selama 2

diinokulasi dengan 1 ml suspensi spora dan menit, setelah itu 3 ml suspensi dituangkan ke

diinkubasi pada suhu ambien dalam kondisi kuvet a. peralatan itu dikalibrasi dengan 3 ml
larutan kosong (Waghunde et al., 2010).
statisselama 7 hari. Selama inkubasi, pada setiap

interval 12 jam, 4 ml ekstrak ragi (0,05 mg ml-1)

hasil
Yang merupakan pembatas nutrisi diumpankan Pengaruh sumber karbon pada hasil spora T.
ke dalam media basal. harzianum
Hasil (Gambar. 1.) Menunjukkan bahwa T.
Pengaruh sumber karbon pada hasil spora T.
harzianum dimanfaatkan semua sumber yang
harzianum
berbeda karbon dan mencapai nya spora hasil
Fivecarbonsourcesincluding tertinggi (2.81 ± 0.14) glukosa pada konsentrasi
monosakarida
2,5 gl-1 diikuti oleh pati (2.5gl-1) Dengan hasil
(Glukosa), Gula alkohol (Manitol), Polisakarida
(Pati, dedak gandum dan dedak) yang digunakan spora 2,42 ± 0,02. Hasil spora terendah (0,22 ±
untuk penelitian. Sumber karbon yang dilengkapi 0,17) diamati ketika 15,0 gl-1 pati merupakan

pada tingkat 2,5, 5,0, 7,5, 10,0 dan 15,0 gl-1, sumber karbon.

Yang menggantikan sumber karbon dalam media

2,5 g / l 5.0 g / l 7,5 g / l 10.0g / l 15,0 g /
basal. Setelah itu media cair disterilkan dan
l
3
diinokulasi dengan 1 mL spora suspensi T.
550nm

harzianum. Kultur diinkubasi pada suhu kamar 2,5

ambien selama 7 hari setelah hasil spora 2

serap

dikuantifikasi.
Daya

1,5

1
Pengaruh sumber nitrogen terhadap hasil spora
0,5
T. harzianum
0
Lima senyawa nitrogen termasuk asam amino
GlucoseMannitol Pati Gandum dedak dedak

anorganik (NaNO3, NH4BEGITU4) Dan sumber

sumber karbon
organik kompleks (Peptone, Kedelai makan
persiapan dan Casein) yang digunakan untuk Gambar. 1. Pengaruh sumber karbon yang
penelitian ini. Sumber nitrogen yang dilengkapi berbeda terhadap hasil sporaT. harzianum. Nilai
-1
pada tingkat 1,0, 3,0, 5,0, 7,0 dan 9,0 gl , Yang adalah sarana tiga ulangan; error bar mewakili
menggantikan sumber nitrogen dalam medium standar deviasi yang diperoleh selama budidaya
basal. Setelah itu, media cair disterilkan dan makan-batch.
diinokulasi dengan 1 mL spora suspensi T.
harzianum. Kultur diinkubasi pada suhu kamar Pengaruh sumber nitrogen terhadap hasil spora
ambien selama 7 hari setelah hasil spora T. harzianum
ditentukan. Hasil pengaruh sumber nitrogen yang berbeda
terhadap hasil spora T. harzianum di percobaan
Pengukuran hasil spora
fed-batch disajikan pada Gambar. 2. tertinggi
Hasil spora diukur dengan menggunakan
spora hasil (2,88 ± 0,02) diamati pada
spektrofotometer (Perkin Elmer Lambda 25 UV)

20 Amole dan Onilude

medium yang mengandung kasein (1,0 gl-1)
gl-1)
Diikuti oleh NH4BEGITU4
memberikan hasil spora dari 2,84 ± 0,05. Spora
(5.0 Yang
21 Amole dan Onilude
yield terendah (0,23 ± 0,02) direkam ketika soy
makan persiapan (9.0 gl-1) Adalah sumber
nitrogen.

3.0 g / 9.0g /
550nm

3,5 1.0g / l l 5.0g / l 7.0 g / l l

3
2,5
2
Daya serap

0,5
1,5

0
Kasein NaNO3 NH4SO4 SMP pepton

sumber nitrogen

Gambar. 2. Pengaruh sumber nitrogen yang

berbeda terhadap hasil sporaT. harzianum.Nilai
adalah sarana tiga ulangan; error bar mewakili
standar deviasi yang diperoleh selama budidaya
makan-batch.

Diskusi
Dalam studi ini, yield spora yang nyata antara
berbagai sumber karbon diselidiki dalam budaya
makan-batch. Temuan ini menegaskan sifat
kompetitif Trichoderma spp. seperti yang dijelaskan
oleh Eric (2005). Glukosa merupakan sumber karbon
yang paling cocok yang dirangsang hasil spora
tertinggi diikuti oleh pati dan dedak padi dalam
budaya makan-batch. Selanjutnya, glukosa menjadi
monosakarida dan metabolit sederhana menjelaskan
alasan untuk hasil spora maksimal dibandingkan
dengan sumber karbon lainnya dipelajari. Namun,
temuan ini sesuai dengan temuan Said (2007) yang
melaporkan bahwa spora yang dihasilkan oleh T.
harzianum secara signifikan dipengaruhi oleh
konsentrasi glukosa dan rasio CN dari media kultur.
Tambahan, Lewis dan Papavizas (1983) sebelumnya
telah melaporkan bahwa glukosa dan pati larut
mempromosikan sporulasi dari Trichoderma spp.
Dedak gandum dan dedak padi, sumber biaya
rendah karbon dan nitrogen ditunjukkan untuk juga
meningkatkan sporulasi. Bakri et al. (2003)
melaporkan bahwa dedak gandum mengandung
jumlah yang cukup nutrisi yang manfaat miselium
pertumbuhan dan spora hasil; terdahulu
studi (Ibrahim dan Rendah, 1993, Sharma et al.,
2002) mengungkapkan bahwa beras merupakan
media yang cocok untuk produksi massal
deuteromycete jamur. yield spora maksimum
tercatat sebesar 2.5gl-1konsentrasi dalam hampir
semua sumber karbon, meningkatkan
konsentrasi sumber karbon membawa penurunan
yang signifikan dalam hasil spora T. harzianum.
Hasil setuju dengan laporan sebelumnya bahwa
jamur menghasilkan lebih banyak spora dalam
kondisi nutrisi yang rendah (Xiao dan Sitton,
2004).

Dalam kasus efek sumber nitrogen, kasein,

NH4BEGITU4dan naNO3 memberikan hasil spora

optimal dalam budaya makan-batch pada 1,5 gl-

1
. Lebih rendah sebesar nitrogen disukai sporulasi
dan ini sesuai dengan penyelidikan sebelumnya
(Aube dan Gagnon, 1969; Gao et al, 2007.). yield
spora maksimum diamati pada T. harzianum
ketika kasein adalah sumber nitrogen tunggal
dalam budaya makan-batch, ini dapat dikaitkan
dengan peptida dan asam amino hadir dalam
kasein. Di antara sumber nitrogen diuji, amonium
sulfat merupakan sumber nitrogen anorganik
yang paling cocok dalam hal sporulasi dan itu
menegaskan bahwa sporulasi yang signifikan
mengakibatkan Trichoderma spp. ketika
dibudidayakan di media yang mengandung
amonium sulfat (Onilude et al., 2012;Shirsole
dan Mishra, 2014; Rai dan Tewari, 2016),
sebagai hasil dari kemampuannya untuk
mengubah pH dari medium cair untuk pH sedikit
asam. Itu menarik untuk dicatat bahwa bentuk-
bentuk amonium T. harzianum disukai nitrogen
untuk sporulasi yang tepat dalam memilih T.
harzianum sebagai agen biokontrol.

Kesimpulan
Trchoderma spp. diketahui memiliki aktivitas
biokontrol baik di lingkungan dan, produksi
industri jamur ini melibatkan produksi massal
spora. Kultur T. harzianum dalam budaya makan-
batch yang mengandung konsentrasi yang
berbeda dari karbon dan nitrogen sumber
menunjukkan bahwa produksi spora dapat
dirangsang pada konsentrasi rendah karbon dan
sumber nitrogen. Oleh karena itu, ini harus
dipertimbangkan dalam produksi industri T. spora
harzianum untuk digunakan biokontrol.
Referensi Dorrance AE, Lipps PE, Mills DR. 2001.
Al-Taweil HI, Osman MB, Aidil AH, Yussof Rhizoctina Damping-off dan Stem Rot dari
WMW. 2009. Optimalisasi Trichoderma viride Kedelai. Ekstensi Fakta-sheet. Patologi Tanaman,

Budidaya di Submerged Negara Fermentasi. Columbus, Ohio State University 1-2.

American Journal of Applied Sciences 6 (7),

Eric S. 2005. Jamur bulan: Trichoderma.
1277-1281.
Lingkungan Reporter 3, 6.

Amsellem Z, Zidack NK, Quimby Jr PC,

Gao L, Sun MH, Lui XZ, Che YS. 2007. Pengaruh
Gressel J. pelestarian kering jangka panjang
konsentrasi karbon dan rasio karbon terhadap
1999. miselia yang layak dari dua organisme
nitrogen terhadap pertumbuhan dan sporulasi
mycoherbicidal. Tanaman Perlindungan 18, 643- beberapa biocontrolfungi. Mikologi Penelitian 111,
649. 87-92.

Miring DJ, Laing MD. 1994. in vitro skrining dari Ibrahim YB, Low W. 1993. Potensi Produksi
118 Trichoderma isolat untuk antagonisme untuk Misa dan Lapangan Keampuhan Isolat dari
Rhizoctonia solani dan evaluasi situs lingkungan bassiana Entomopathoghenic Fungi Beauveria
yang berbeda dari Trichoderma sebagai sumber dan Paecilomyces fumosoroseus pada Plutella

strain agresif. Tanaman Tanah 159, 277-281. xylostella. Jurnal invertebrata Patholology 39,
222-232.
Aube C, Gagnon C. 1969. Pengaruh karbon dan
Lewis JA, Papavivaz GC. 1983. Produksi
nutrisi Nitrogen terhadap pertumbuhan dan
chlamydospores dan konidia oleh Trichoderma sp.
sporulasi dari Trichoderma viride pers Ex kentang
media pertumbuhan cair dan padat. Tanah
goreng. jurnal Kanada Mikrobiologi 15, 703-706.
BiolBiochem15, 351-357.

Baker KF, Masak RJ. 1974. Pengendalian hayati

Molla AH, Fakhru'l-Razia A, Hanafi MM, Alam
Tanaman Patogen. Freeman, San Francisco.
MZ. 2004. Optimasi proses faktor untuk
biokonversi solid-state lumpur air limbah rumah
Bakri Y, Jacques P, Thonart P. 2003. Xilanase
tangga. Int. Biodegrad. 53, 49-55.
produksi oleh Penicillium canescens 10-10c dalam
fermentasi solid-state. Biokimia Terapan dan Monga D. 2001. Pengaruh karbon dan nitrogen
Bioteknologi 108, 37-748. sumber di spora, produksi biomassa dan
metabolit anti-jamur oleh spesies Trichoderma
Carisse O, Bassam SE, Benhamou N. 2001. dan Gliocladium. India Fitopatologi 54, 435-437.
Pengaruh Microsphaeropsis sp. Saring P1 30A
pada perkecambahan dan produksi sclerotia dari Nahar S, Hossain F, Feroza B, Halim MA.

Rhizoctonia solani dan interaksi antara antagonis 2008. Produksi glukoamilase oleh Rhizopus sp.

dan patogen. Fitopatologi 91, 782-791. dalam budaya cair. Pak J Bot 40 (4), 1693- 1698.

Onilude AA, Adebayo-Tayo SM, Odeniyi AO,

Cascino JJ, Harris RF, Smith CS, Andrew JH.
Banjo D. Garuba EO. 2012. Perbandingan
1990. yield Spore dan Microcycle Conidiation dari
miselium dan spora hasil dengan Trichoderma
Colletotrichum gloeosporioides dalam Budaya
viride dalam batch dan budaya makan-batch. Ann
Liquid. dan Terapan Mikrobiologi Lingkungan 56
Microbiol 10, 10-12.
(8), 2303-2310.

22 Amole dan Onilude

Rai D, Tewari AK. 2016. Evaluasi karbon dan SR Singh, Rachie KO. 1985. Cowpea Penelitian,
nitrogen sumber yang berbeda untuk Produksi dan Pemanfaatan. John Wiley and Sons,
pertumbuhan yang lebih baik dan sporulasi dari
Chrichester, New York 1-7.
T. harzianum (Th14). Jurnal Bioteknologi
Pertanian dan Pembangunan Berkelanjutan 8 (8),
Summerfield RJ, Roberts EH. 1985. Grain
67-70.
tanaman legum. Collins, London 1-6.

Kata DD. 2007. Spore Produksi Biocontrol Agent

Trichoderma harzianum: Pengaruh rasio C / N Verma M, Satinder KB, Tyagi RD, Surampalli

dan Glukosa Konsentrasi. Jurnal Rekayasa Kimia RD, Valer JR. 2005. limbah sludge sebagai
danLingkungan 6 (1) 35-40. bahan baku potensial untuk jamur antagonis
(Trichoderma sp.): Peran pra-perawatan dan
Sharma S, Gupta RBL, Yadawa CPS. 2002.
konsentrasi padatan. Air Res 39, 3587-3596.
Pemilihan suatu media yang cocok untuk
perbanyakan massal patogen Entomofungal.
Waghunde RR, Priya J, Naik BM, Solanky KU,
India Journal of Entomology 64 (3), 254-261.
Sabalpara AN. 2010. density Optical - alat untuk
Shirsole SS, Mishra T. 2014. Pengaruh sumber estimasi hitungan spora Trichoderma viride.
gizi pada in vitro pertumbuhan dan sporulasi dari Jurnal Biopestisida 3 (3), 624-626.
Trichodermaviride. Bioinfolet 11 (3b), 940.

Xiao CL, Sitton JW. 2004. Pengaruh media

Singh B. 2003. Meningkatkan produksi dan
kultur dan faktor lingkungan terhadap
pemanfaatan kacang tunggak sebagai makanan
dan pakan ternak. Bidang Tanaman Penelitian 84, pertumbuhan miselium dan produksi membentuk

169-150. piknidia dari Potebniamyce Spyri. Mikologi

Penelitian 108, 926-932.
Singh BB, Raj DRM, Dashiel KE, Jackai LEN.
1997. Kemajuan dalam Cowpea Research. Co-
publikasi International Institute of Tropical
Agriculture (IITA) dan Japan International Pusat
Penelitian Ilmu Pertanian. IITA, Ibadan, Nigeria,
Devon 230-320.

23 Amole dan Onilude