ABSTRAK
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi aktivitas antiinflamasi dan analgesik
infus dan ekstrak metanol dari biji alpukat. Aktivitas anti-inflamasi ditentukan menggunakan
edema kaki yang diinduksi karagenan pada tikus. Aktivitas analgesik dinilai menggunakan stimuli
asam asetat untuk menginduksi nyeri perifer pada tikus. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa
semua dosis infus dan ekstrak metanol dari biji alpukat memiliki tingkat pengurangan yang
signifikan pada edema kaki tikus. Semua dosis dosis ekstrak metanol biji alpukat memiliki
pengurangan yang signifikan pada jumlah perut menggeliat yang disebabkan oleh asam asetat,
tetapi hanya dosis infus terendah yang menunjukkan penurunan yang signifikan. Temuan kami
menunjukkan bahwa biji alpukat mengandung senyawa anti-inflamasi dan analgesik potensial
yang mendukung penggunaan tradisionalnya. Studi fitokimia lebih lanjut diperlukan untuk
menentukan senyawa aktif yang sebenarnya bertanggung jawab atas sifat-sifat tersebut.
Kata kunci: antiinflamasi, analgesik, infus, ekstrak metanol, biji alpukat
ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antiinflamasi dan analgesik pada infusa
dan ekstrak metanol biji alpukat. Aktivitas antiinflamasi ditentukan dengan menggunakan induksi
karagenin edema pada mencit. Aktivitas analgesik dievaluasi menggunakan rangsang asam asetat
yang menginduksi nyeri perifer pada mencit. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pada semua
peringkat dosis baik infusa dan ekstrak metanol biji alpukat menunjukkan penghambatan edema
yang bermakna pada edema mencit. Semua peringkat dosis ekstrak metanol biji alpukat
menunjukkan penurunan geliat akibat induksi asam asetat, namun hanya dosis terendah infusa
biji alpukat yang mampu menurunkan jumlah geliat. Berdasarkan hal tersebut, maka biji alpukat
mengandung senyawa yang berpotensi sebagai antiinflamasi dan analgesik. Penelitian fitokimia
lanjutan diperlukan untuk mengetahui kandungan senyawa biji alpukat yang bertanggung jawab
terhadap aktivitas antiinflamasi dan analgesik.
Kata kunci: antiinflamasi, analgesik, infusa, ekstrak metanol, biji alpukat
PENGANTAR
Peradangan adalah respons perlindungan yang bertujuan untuk menyingkirkan organisme
yang menyebabkan cedera (mis. Mikroba dan racun) dan konsekuensi dari cedera tersebut (mis.
Kerusakan sel dan jaringan). Tanpa peradangan, infeksi akan terus berkembang, luka tidak akan
sembuh, dan organ yang terluka akan terus bernanah. Dalam proses peradangan, ada proses di
mana senyawa radikal bebas dihasilkan (Ardhie, 2011). Radikal bebas dapat menyebabkan
pembusukan jaringan yang memicu biosintesis asam arakidonat menjadi prostaglandin sebagai
mediator peradangan (Sanchez et al., 2015). Respon inflamasi yang berlebihan atau pembusukan
jaringan yang parah harus segera ditangani, sehingga reaksi inflamasi harus ditangani untuk
mengurangi tanda dan gejala (Meliala dan Pinzon, 2007). Gejala umum peradangan seperti
pembengkakan, panas, nyeri, kemerahan, dan hilangnya fungsi dapat menyebabkan
ketidaknyamanan bagi pasien sehingga perlu ditangani (Supriyatna et al., 2015). Dalam hal ini,
senyawa antiinflamasi dan senyawa analgesik diperlukan.
Arukwe et al. (2012) melaporkan bahwa biji alpukat mengandung senyawa kimia seperti
alkaloid, glikosida, adas, steroid, tanin, flavonoid, dan saponin. Penelitian oleh Malangngi et al.
(2012) menunjukkan antioksidan ekstrak etanol biji alpukat dengan metode DPPH. Senyawa
antioksidan berperan dalam menahan peradangan dengan mekanisme menangkap radikal bebas
dan menahan enzim siklooksigenase untuk menahan terjadinya prostaglandin. Ini akan berdampak
pada penghambatan mediator inflamasi. Hal ini sesuai dengan penelitian yang menunjukkan
adanya aktivitas analgesik dari ekstrak etanol biji alpukat (Kyakulaga et al., 2012).
Josephine dan Ngozi (2013) melaporkan adanya aktivitas analgesik dari jus biji alpukat. Dari
penelitian oleh Hendra et al. (2014), infus dan decocta biji alpukat memiliki efek perlindungan
terhadap hati dan ginjal tikus yang diinduksi dengan karbon tetraklorida, yang ditunjukkan oleh
efek aktivitas antioksidan dalam biji alpukat. Infus adalah persiapan sederhana yang biasa
digunakan dalam pembuatan obat tradisional dan mudah diterapkan oleh masyarakat Indonesia.
Namun, penelitian aktivitas analgesik dan antiinflamasi infus biji alpukat tidak pernah dilaporkan,
meskipun ada kesamaan polar antara etanol dan metanol. Berdasarkan hal-hal tersebut, tujuan
penelitian adalah untuk mengetahui aktivitas anti-inflamasi dan analgesik pada infus dan ekstrak
metanol biji alpukat pada tikus.
METODE
Materi
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus Swiss, biji alpukat, air suling,
metanol, karaginan 1%, Cataflam Fast® 50 mg (Novartis Ltd.), aspirin (E. Merck), asam asetat
glasial (E. Merck), NaCl 0,9%, CMC-Na 1%. Protokol eksperimental disetujui oleh Komite Etika
Penelitian Medis dan Kesehatan (MHREC). Kedokteran Universitas Gadjah Mada dengan nomor
referensi KE / FK / 964 / EC / 2016.
Catatan :
AUC0-x = Area Di Bawah Kurva dari ketebalan edema pada kaki tikus pada menit 0 hingga menit 360.
Cn - Cn-1 = Ketebalan edema dari menit 0 hingga menit 360.
tn - tn-1 = Panjang waktu pengukuran dari
menit 0 hingga menit 360.
Aktivitas anti-inflamasi dapat dilihat dari persentase penghambatan inflamasi dan diukur menggunakan
rumus berikut:
Inhibition of inflammation (%) = × 100%
Catatan :
(AUC0-x) 0 = AUC0-x median dari ketebalan edema kaki tikus ke kelompok kontrol negatif (mm.minute).
(AUC0-x) n = AUC0-x total dari ketebalan edema kaki tikus AUC yang diberi larutan uji dengan dosis n
(mm.menit).
catatan:
P = Jumlah kumulatif menggeliat hewan uji setelah diberi senyawa uji.
K = Median jumlah kumulatif menggeliat hewan uji kontrol negatif setelah diberikan
senyawa uji.
Analisis statistik
Hasilnya dianalisis menggunakan uji Shapiro Wilk untuk mendapatkan jumlah distribusi
data. Menurut tes, terlihat bahwa setiap kelompok memiliki distribusi normal (p> 0,05).
Setelah itu dilakukan uji varian dan menghasilkan nilai probabilitas sebesar 0,405 (p>
0,05) yang menunjukkan bahwa varian data yang diuji adalah sama. Dilanjutkan dengan
uji ANOVA satu arah dengan tingkat kepercayaan 95%, yang memperoleh nilai
probabilitas sebesar 0,000 (p.0,05) yang menunjukkan bahwa setidaknya ada median
total AUC yang signifikan pada kedua kelompok. Setelah itu, analisis Post Hoc dilakukan
dengan menggunakan uji LSD.
Tabel I. Nilai AUC dan persentase penghambatan inflamasi terhadap tikus yang diobati
dengan biji alpukat (n = 5)
Total Grup AUC (mm.menit) PI (%)
Kontrol negatif air suling 422.22 ± 18.75b 0.00 ± 4.45
CMC-Na kontrol negatif 390,62 ± 22,03b
Kontrol positif diklofenak 4,48 mg / kg BB 206,90 ± 14,59a, c
Infus biji alpukat 0,67 g / kg BB 191,03 ± 14,02 a 54,76 ± 3,32
Infus biji alpukat 1,33 g / kg BB 281,86 ± 9,52 a, b 33,24 ± 2,25
Infus biji alpukat 2,67 g / kg BB 329,77 ± 6,86 a, b
Ekstrak metanol biji alpukat 0,83 g / kg BB 298,29 ± 16,14c, b
Ekstrak metanol biji alpukat 1,67 g / kg BB 258,35 ± 13,06c, b
Ekstrak metanol biji alpukat 3,33 g / kg BB 241,93 ± 13,72c
catatan:
Nilai AUC dan PI disajikan dalam bentuk median ± standar kesalahan a = perbedaan
yang signifikan terhadap kontrol negatif air suling (p <0,05) b = perbedaan yang signifikan
terhadap kontrol positif (p <0,05)
c = perbedaan yang signifikan terhadap kontrol negatif CMC-Na (p <0,05) PI = persentase
penghambatan peradangan
Tabel II. Persentase writhes dan perlindungan biji alpukat pada tikus (n = 5)
Ekstrak metanol biji tidak diikuti oleh peningkatan aktivitas anti-inflamasi. Ini mungkin
karena senyawa antioksidan yang diekstraksi relatif sama dengan dosis 3,33 g / kgBB
Hasil Uji Aktivitas Analgesik Benih Alpukat
Uji aktivitas analgesik dalam penelitian ini menggunakan metode stimulasi kimia
menggunakan asam asetat 1% sebagai senyawa induksi nyeri. Asam asetat memicu
pelepasan arachidonate dari jaringan fosfolipid. Enzim COX akan mengubah asam
arakidonat menjadi prostaglandin yang akan merangsang peradangan dan rasa sakit.
Tikus menunjukkan respon nyeri dengan menggeliat (Muhammad, 2014). Jumlah
persentase writhes dan proteksi serta ekstrak metanol biji alpukat disajikan pada Tabel
II.
Anonymous (1991) menyatakan bahwa ada aktivitas analgesik dengan metode stimulasi
kimia yang ditunjukkan oleh pengurangan menggeliat ≥ 50% dibandingkan dengan
kelompok kontrol negatif.
Rata-rata menggeliat asetosal kontrol positif (19,8) secara signifikan berbeda
dibandingkan dengan CMC-Na kontrol negatif. Hal ini menunjukkan bahwa asetosal
dapat memberikan aktivitas analgesik pada mencit yang diinduksi dengan asam asetat
dengan persentase penghambatan nyeri sebesar 73,2%.
Dalam pengobatan tiga dosis infus biji alpukat, hanya 0,67 g / kgBB yang memberikan
perbedaan signifikan pada writhes (p <0,05) dibandingkan dengan kontrol negatif. Ini
berarti hanya infus biji alpukat 0,67 g / kgBB yang memiliki kemampuan perlindungan
terhadap asam asetat. Ini menunjukkan infus biji alpukat 0,67 g / kgBB memiliki aktivitas
analgesik. Hasil penelitian ini sesuai dengan penelitian yang dilaporkan oleh Josephine
dan Ngozi (2013) yang menunjukkan aktivitas analgesik dalam jus biji alpukat.
Rata-rata menggeliat ekstrak metanol dari biji alpukat dosis 0,83; 1,67 dan 3,33 g / kgBB
secara signifikan berbeda (p <0,05) dibandingkan dengan kelompok negatif CMC-Na. Ini
menunjukkan bahwa tiga tingkat dosis ekstrak memiliki kemampuan dalam mengurangi
menggeliat pada tikus yang diinduksi dengan asam asetat. Menurut Anonymous (1991),
hanya ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 dan 3,33 g / kgBB yang menunjukkan
aktivitas analgesik karena mereka menunjukkan persentase penghambatan rasa sakit
hingga> 50%, masing-masing 73,2% dan 68,2%. Kedua tingkat dosis memiliki aktivitas
analgesik yang sebanding dengan kontrol asetosal. Hasil ini mirip dengan penelitian yang
dilaporkan oleh Kyakulaga et al. (2012) yang menunjukkan bahwa ekstrak etanol biji
alpukat memiliki aktivitas analgesik. Ini menunjukkan bahwa ekstrak organik, baik
metanol dan etanol, dapat menarik senyawa yang memberikan aktivitas analgesik
Peningkatan dosis pemberian biji alpukat tidak sesuai dengan peningkatan aktivitas, baik
antiinflamasi maupun analgesik. Ini ditunjukkan oleh fakta bahwa meskipun dosis
ditingkatkan, persentase penghambatan peradangan dan persentase penghambatan
rasa sakit berkurang. Hal ini diduga karena perubahan sifat antioksidan menjadi sifat pro-
oksidan dalam senyawa yang terkandung dalam biji alpukat. Dalam tes in vitro,
dilaporkan bahwa antioksidan seperti flavonoid dosis tinggi dapat merangsang Spesies
Oksigen Reaktif (ROS) melalui oksidasi otomatis (myricetin dan quercetagetin) dan siklus
redoks (quercetin)
(Bouayed dan Bohn, 2010). Dengan demikian, uji fitokimia harus dilakukan terhadap
senyawa yang terkandung dalam infus biji alpukat dosis tinggi. Peluang lain adalah
saturasi dalam reseptor rasa sakit, sehingga peningkatan dosis tidak diikuti oleh
peningkatan aktivitas.
Kedua karagenan menginduksi kemampuan tikus untuk menghambat peradangan dan
asam tikus yang diinduksi kemampuan tikus untuk melindungi dirinya dari rasa sakit yang
diperoleh dari Persea americana Mill. Infus biji dan ekstrak metanol terkait dengan
keberadaan senyawa flavonoid. Prochazkova et al. (2011) melaporkan bahwa flavonoid
adalah senyawa yang dapat menangkap radikal bebas yang menghasilkan peradangan
dan reaksi antioksidan. Biji alpukat memiliki aktivitas antioksidan yang relatif tinggi
sehingga dapat dianggap sebagai salah satu sumber antioksidan alami (Malangngi,
2012). Menurut Arukwe et al. (2012) dan Gomez et al. (2014), biji alpukat kaya akan
flavonoid, yang menunjukkan aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH (Konsinska
et al., 2012). Flavonoid berperan sebagai ROS melalui reaksinya terhadap senyawa
reaktif dan radikal bebas yang menyebabkan tidak aktifnya jaringan sel yang rusak.
KESIMPULAN
Infus 0,67 g / kgBB dan ekstrak metanol 3,33 g / kgBB dari Persea americana Mill.
(alpukat) biji memiliki aktivitas anti-inflamasi menuju tikus yang diinduksi karagenan. Infus
0,67 g / kgBB dan ekstrak metanol 1,67 dan 3,33 g / kgBB dari Persea americana Mill.
(alpukat) biji memiliki aktivitas analgesik terhadap tikus yang diinduksi asam asetat.
REFERENCES
Anonymous, 1991. Analgestika. In: Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto
MedikaPedoman Pengujian dan
Pengembangan Fitofarmaka, Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokimia dan Pengujian
Klinik. Departemen
Kesehatan RI. Jakarta, 3-5.
Ardhie, A. M., 2011. Radikal Bebas dan Peran Antioksidan dalam Mencegah Penuaan. Medicinus,
24(1), 4-9.
Arukwe, U., Amadi, B., Duru M., Agomuo, E., Adindu, E., Odika, P., Lele, K.C., Egejuru, L.,
Anudike, J., 2012. Chemical Composition of Persea americana Leaf, Fuit and Seed. IJRRAS,
11 (2), 346-349.
Bouayed, J., Bohn, T., 2010. Exogenous Antioxidants-Double Edged Swords in Cellular Redox
State. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 3(4), 228-237.
Chaulya NC, Haldar PK, Mukherjee A., 2012. Anti-inflammatory and Analgesic Activity of
Methanolic extracts of Cyperus tegetum Roxb. Rhizome.
Journal of PharmaSciTech, 1(2), 27-9.
Gomez, F.S., Sanchez, S.P., Iradi, M.G.G., Azman, N.A.M., Almajano, M.P., 2014. Avocado
Seeds: Extraction Optimization and Possible Use as Antioxidant in Food. Antioxidants, 3,
439-454.
Hendra, P., Krisnadi, G., Perwita, N.L.P.D., Kumalasari, I., Quraisyin, Y.A., 2014.
Efek Hepatoprotektif dan Nefroprotektif Biji Alpukat pada Tikus Terinduksi Karbon
Tetraklorida. Tradisional Medicine Journal, 19(3), 133-137.
Hendra, P., Fenty, Andreani, P.R., Pangestuti, B.M.E., Julianus, J., 2017. Evaluation of
Antihyperlipidemic, Anti-inflammatory,
and Analgesic Activities of Eurycoma longifolia in Animal Models. Int J Pharm Pharm
Sci., 9(3), 166-169.
Joshepine, O.O., Ngozi, A.O., 2013. Analgesic Effect of The Aqueous Extract of Persea
americana Mill (Lauraceae). Journal of Pharmaceutical and Allied Sciences, 10(3),
1887-1897.
Konsinska, A., Karamec, M., Estrella, I.,
Hernandez, T., Bartolome, B., Dykes, G.A., 2012. Phenolic Compound Profiles and
Antioxidant Capacity of Persea americana Mill. Peels and Seeds of Two Varieties. J. of
Agric. Food Chem., 60, 4613-4619.
Kyakulaga, AI.,H., Ogwang, P.E., Nannyonga, S., Nyafuono, J., Tumuslime, R., 2012.
Antipyretic and Analgesics Activities of Ethanolic Extract of Persea americana Mill.
Seeds in Wistar Albino Rats. Africa Journal of Animal and
Biomedical Sciences, 7(1), 19-23.
Malangngi, L.P., Sangi, M.S., Paendong J.J.E., 2012. Penentuan Kandungan Tanin dan Uji
Aktivitas Antioksidan Ekstrak Biji Buah Alpukat (Persea americana Mill.).
Jurnal Kimia FMIPA Unsrat, 1(1), 5-10.
Meliala, L., Pinzon, R., 2007. Breakthrough in Management of Acute Pain. Dexa Media Jurnal
Kedokteran dan Farmasi, 4(20), 151-155.
Morris, C.J., 2003. Carragenan Induced Paw
Edema in The Rat and Mouse Inflamation Protocols. Method in Molecular Biology, 2,
115-122.
Muhammad, N., 2014. In Vivo Models for Management of Pain. Scientific
Research, 5(1), 92-96.
Prochazkova, D., Bousova, I., Wilhelmova, N., 2011. Antioxidant and Prooxidant Properties
of Flavonoids. Fitoterapia, 82, 513-523.
Sanchez, A., Calpena, A.C., Clares, 2015. Evaluating the Oxidative Stress in Inflammation:
Role of Melatonin. International Journal of Molecular Sciences, 16, 16981-17004.
Supriyatna, Febriyanti, R., Dewanto, Wijaya,
I., Ferdiansyah, F., 2015. Fitoterapi Sistem Organ: Pandangan Dunia Barat terhadap Obat
Herbal Global.
Tjandrawinata R.R., Djunarko, I., Fenty,
Hendra P., 2015. Anti-inflammation Effects of Bioactive Fraction DLBS0533 Containing Phaleria
macrocarpa and Nigellia sativa on Animal Model. In J Pharm Pharm Sci., 7(1), 408-411