Landasan Teori Dalam tubuh manusia sistem endokrin (selain sistem saraf) berkoordinasi dan

mengintegrasikan fungsi-fungsi sistem fisiologis yang berbeda (lihat Gambar 4.1). Dengan demikian,
sistem endokrin memainkan peran penting dalam mempertahankan homeostasis. Peran ini dimulai
dengan bahan kimia, yang disebut hormon, disekresikan dari kelenjar endokrin tanpa saluran, yang
merupakan jaringan yang memiliki asal epitel. Kelenjar endokrin mengeluarkan hormon ke dalam
kompartemen cairan ekstraseluler. Lebih khusus, darah biasanya membawa hormon (kadang-
kadang melekat pada protein plasma spesifik) ke sel target mereka. Sel target bisa sangat dekat,
atau sangat dari, sumber hormon. Hormon mengikat reseptor afinitas tinggi yang terletak di
permukaan sel target, dalam sitosolnya, atau dalam nukleusnya. Reseptor hormon ini memiliki
sensitivitas yang luar biasa karena konsentrasi hormon dalam darah dapat berkisar dari 109 hingga
1012 molar! Kompleks hormon-reseptor terbentuk dan kemudian dapat mengerahkan tindakan
biologis melalui kaskade transduksi sinyal dan perubahan transkripsi gen pada sel target. Respons
fisiologis terhadap hormon dapat bervariasi dari detik hingga jam hingga berhari-hari, bergantung
pada sifat kimiawi hormon dan lokasi reseptornya dalam sel target. Struktur kimia hormon ini
penting dalam menentukan bagaimana hormon itu akan berubah dengan sel target. Hormon
peptida dan katekolamin adalah hormon beraksi cepat yang menempel pada reseptor membran
plasma dan menyebabkan kaskade kedua di sitoplasma sel target. Misalnya, bahan kimia yang
disebut CAMP (eyclic adenosine monophosphate) disintesis dari molekul ATP.

Sejauh ini Sintesis bahan kimia ini membuat sel lebih aktif dan aktif secara metabolik. Oleh karena
itu, lebih mampu merespons rangsangan. Hormon steroid dan tiroksin (hormon tiroid) adalah
hormon kerja lambat yang memasuki sel target dan berinteraksi dengan nukleus untuk
mempengaruhi transkripsi berbagai protein yang dapat disintesis oleh sel. Hormon memasuki
nukleus dan menempel pada titik-titik tertentu pada DNA. Setiap lampiran menyebabkan produksi
MRNA tertentu, yang kemudian dipindahkan ke sitoplasma. di mana ribosom dapat menerjemahkan
MRNA menjadi protein. Perlu diingat bahwa organ-organ sistem endokrin tidak berfungsi secara
independen. Kegiatan satu kelenjar endokrin sering dikoordinasikan dengan kegiatan kelenjar lain.
Tidak ada sistem yang berfungsi secara independen dari sistem lain mana pun. Untuk alasan ini,
kami akan menekankan mekanisme umpan balik dan bagaimana kami dapat menggunakannya untuk
memprediksi, menjelaskan, dan memahami efek hormon. Mengingat pengaruh kuat yang dimiliki
hormon pada homeostasis, mekanisme umpan balik negatif penting dalam mengatur sekresi
hormon, sintesis, dan efektivitas pada sel target. Umpan balik negatif memastikan bahwa jika tubuh
membutuhkan hormon tertentu, hormon itu akan diproduksi sampai terlalu banyak. Ketika ada
terlalu banyak hormon, pelepasannya akan terhambat.

Jarang, tubuh mengatur hormon melalui mekanisme umpan balik positif. Pelepasan oksitosin dari
hipofisis posterior adalah salah satu contoh langka ini. Oksitosin adalah hormon yang menyebabkan
lapisan otot rahim, yang disebut miometrium, berkontraksi saat melahirkan. Kontraksi miometrium
ini menyebabkan oksitosin tambahan dilepaskan, memungkinkan kontraksi yang lebih kuat. Tidak
seperti apa yang terjadi dalam mekanisme umpan balik negatif, peningkatan level sirkulasi oksitosin
tidak menghambat sekresi oksitosin. Banyak metode eksperimental dapat digunakan untuk
mempelajari fungsi kelenjar endokrin. Metode-metode ini termasuk memindahkan kelenjar dari
hewan dan kemudian menyuntikkan, menanamkan, atau memberi makan ekstrak kelenjar menjadi
hewan normal atau hewan yang kekurangan kelenjar yang sedang dipelajari. Dalam latihan ini Anda
akan menggunakan metode ini untuk mendapatkan pemahaman yang lebih dalam tentang fungsi
dan regulasi beberapa kelenjar endokrin.

Aktifitas 1
Metabolisme dan Hormon Tiroid TUJUAN 1. Untuk memahami istilah laju metabolisme basal (BMR),
hormon perangsang tiroid (TSH), tiroksin, gondok, hipotiroidisme, hipertiroidisme, tiroidektomi, dan
hipofisektomi.

2. Untuk mengamati bagaimana mekanisme umpan balik negatif mengatur pelepasan hormon.

3. Untuk memahami peran tiroksin dalam mempertahankan laju metabolisme basal.

4. Untuk memahami efek TSH pada laju metabolisme basal.

5. Untuk memahami peran hipotalamus dalam mengatur sekresi tiroksin dan TSH.

Pendahuluan

Metabolisme adalah serangkaian luas reaksi biokimia yang terjadi dalam tubuh. Metabolisme
termasuk anabolisme dan katabolisme. Anabolisme adalah pembentukan molekul kecil menjadi
molekul yang lebih besar, lebih kompleks melalui reaksi enzimatik. Energi disimpan dalam ikatan
kimia yang terbentuk ketika lebih besar. molekul yang lebih kompleks terbentuk. Katabolisme
adalah pemecahan molekul besar yang kompleks menjadi molekul yang lebih kecil melalui reaksi
enzimatik. Pemutusan ikatan kimia dalam katabolisme melepaskan energi yang dapat digunakan sel
untuk melakukan berbagai aktivitas, seperti membentuk ATP. Sel tidak menggunakan semua energi
yang dilepaskan oleh pemecahan ikatan. Sebagian besar energi dilepaskan sebagai panas untuk
mempertahankan suhu tubuh yang tetap, terutama pada manusia. Manusia adalah organisme
homeothennic yang perlu mempertahankan suhu tubuh tetap untuk mempertahankan aktivitas
berbagai jalur metabolisme dalam tubuh. Hormon yang paling penting untuk mempertahankan
metabolisme dan panas tubuh adalah tiroksin (hormon tiroid), juga dikenal sebagai
tetraiodothyronine. atau T Tiroksin disekresikan oleh kelenjar tiroid, yang terletak di leher. Produksi
tiroksin dikendalikan oleh kelenjar hipofisis, atau hipofisis, yang mengeluarkan hormon perangsang
tiroid (TSH). Darah membawa TSH ke jaringan targetnya. kelenjar tiroid. TSH menyebabkan
kelenjar tiroid meningkat ukurannya dan mengeluarkan tiroksin ke dalam sirkulasi umum. Jika kadar
TSH terlalu tinggi, kelenjar tiroid membesar. Pembengkakan kelenjar yang terjadi di leher disebut
gondok. Hipotalamus di otak juga merupakan partisipan vital dalam tiroksin dan produksi TSH. Ini
adalah kelenjar endokrin primer yang mengeluarkan beberapa hormon yang mempengaruhi kelenjar
hipofisis, atau hipofisis, yang juga terletak di otak.

Thyrotropin-releasing hormone (TRH) secara langsung terkait untuk menstimulasi hipofisis anterior
untuk menghasilkan TSH, yang kemudian menjadi tiroksin dan sekresi TSH. TRH dari hipotalamu
menstimulasi tiroid untuk menghasilkan tiroksin. Peristiwa ini merupakan bagian dari mekanisme
umpan balik negatif klasik. Setelah tingkat sirkulasi tiroksin rendah, ia hipotalamus mengeluarkan
lebih banyak TRH untuk merangsang kelenjar hipofisis untuk mengeluarkan lebih banyak TSH.
Peningkatan TSH lebih lanjut merangsang sekresi tiroksin dari kelenjar tiroid. Peningkatan kadar
tiroksin kemudian akan mempengaruhi hipotamin untuk mengurangi produksi TRH. TRH melakukan
perjalanan dari hipotalamus ke kelenjar hipofisis melalui sistem portal hipotalamus-hipofisis.
Susunan pembuluh darah khusus ini terdiri dari vena portal tunggal yang menghubungkan dua
lapisan kapiler. Sistem portal hipofisis hipotalamus mengangkut banyak hormon lain dari
hipotalamus ke kelenjar hipofisis. Hipotalamus terutama mengeluarkan hormon tropik, yang
merangsang sekresi hormon lain. TRH adalah contoh dari hormon tropik karena merangsang
pelepasan TSH dari kelenjar hipofisis TSH sendiri juga merupakan contoh hormon tropik karena
merangsang produksi tiroksin. Dalam aktivitas ini, Anda akan menyelidiki efek tiroksin dan TSH pada
tingkat metabolisme tikus. Tingkat metabolisme akan ditunjukkan oleh jumlah oksigen yang
dikonsumsi tikus per waktu per massa tubuh. Anda akan melakukan empat percobaan pada tiga
tikus: tikus normal, tikus tiroidektomi (tikus yang giroid tiroidnya telah diangkat dengan
pembedahan), dan tikus tikus hipofisektomi yang kelenjar hipofisisnya telah diangkat dengan
pembedahan). Anda akan menentukan (1) laju metabolisme basal tikus, (2) tingkat metaboliknya
telah disuntikkan dengan tokoksin, (3) tingkat metaboliknya setelah diinjeksi dengan TSH, dan (4)
laju metaboliknya setelah itu telah disuntikkan dengan propylthiouracil, obat yang menghambat
produksi tiroksin.

Buka halaman beranda dalam perangkat lunak PhysioEx dan klik Latihan 4: Fisiologi Sistem Endokrin.
Klik Kegiatan 1: Metabolisme dan Hormon Tiroid, dan ambil Kuis Pra-lab online untuk Kegiatan 1.
Setelah Anda mengirim kuis Pra-lab online, klik tab Eksperimen dan mulai percobaan. Instruksi
percobaan dicetak ulang di sini untuk referensi Anda. Layar pembuka untuk percobaan ditunjukkan
di bawah ini. Instruksi Eksperimen

Bagian 1: Menentukan Tingkat Metabolisme Basal Pada bagian pertama dari kegiatan ini, Anda akan
menentukan tingkat metabolisme basal (BMR) untuk masing-masing dari tiga tikus. la. Seret tikus
normal ke dalam ruangan untuk menemukan BMR-nya. 1b. Klik Timbang untuk menentukan berat
tikus.

le. Klik penjepit pada tabung kiri (atas ruangan) untuk menutupnya. Ini akan mencegah udara luar
memasuki ruangan dan memastikan bahwa satu-satunya oksigen yang tikus hirup adalah oksigen di
dalam sistem tertutup. Id. Perhatikan bahwa timer diatur ke satu menit. Klik Mulai di bawah timer
untuk mengukur jumlah oksigen yang dikonsumsi oleh tikus dalam satu menit di ruang tertutup.
Perhatikan apa yang terjadi pada ketinggian air di manometer seiring berjalannya waktu. le. Klik
tombol T-connector untuk menghubungkan manometer dan spuit. Jika. Klik penjepit pada tabung
kiri (atas ruangan) untuk membukanya sehingga tikus dapat menghirup udara luar. IG. Amati
perbedaan antara level di lengan kiri dan kanan manometer. Perkirakan volume O2 yang perlu Anda
suntikkan untuk membuat level sama dengan menghitung divisi di kedua sisi. Volume ini setara
dengan jumlah oksigen yang dikonsumsi tikus selama menit di ruang tertutup. Klik tombol + di
bawah tampilan ml O2 hingga Anda mencapai perkiraan volume. Kemudian klik Suntikkan dan
perhatikan apa yang terjadi pada cairan di kedua lengan. Ketika level volume disamakan, kata
"Level" akan muncul dan tetap di layar. Jika Anda belum menyuntikkan cukup oksigen, kata "Level"
tidak akan muncul. Klik tanda + untuk menambah volume lalu klik Suntikkan lagi. Jika Anda
menyuntikkan terlalu banyak oksigen, kata "Level" akan berkedip dan kemudian menghilang. Klik
tombol untuk mengurangi volume dan kemudian klik Suntikkan lagi. Klik Rekam Data saat level
disamakan. Hitung konsumsi oksigen per jam untuk tikus ini menggunakan persamaan berikut: ml O,
dikonsumsi 60 menit X = ml O2 / jam 1 jam I menit Masukkan konsumsi oksigen per jam di bidang di
bawah ini lalu klik Kirim untuk mencatat hasil Anda di lab ml O / jam laporan. li. Sekarang Anda
telah menghitung konsumsi oksigen per jam untuk tikus ini, Anda dapat menghitung laju
metabolisme per kilogram berat badan dengan persamaan berikut (perhatikan bahwa Anda perlu
mengonversi data berat dari gram ke kilogram untuk menggunakan persamaan ini): Metabolik
tingkat (berat dalam kg) ml O / kg / jam. (ml O / jam) ml O2 / jam berat dalam kg Laju metabolisme
= ml O / kg / jam Masukkan laju metabolisme di bidang di bawah ini lalu klik Kirim untuk mencatat
hasil Anda dalam laporan laboratorium. ml O / kg / jam lj. Klik Palpasi Tiroid untuk secara manual
memeriksa ukuran tiroid dan, dengan demikian, apakah ada gondok. Setelah meninjau temuan, klik
Kirim untuk mencatat hasil Anda dalam laporan lab. Ik. Seret tikus dari ruang kembali ke sangkar
dan kemudian klik Pulihkan (di bawah Palpate Thyroid) untuk mengembalikan aplikasi ke keadaan
awal.

Bagian 2: Menentukan Pengaruh Tiroksin Pada tingkat metabolisme di bagian ini, Anda akan
menyelidiki dampak suntikan tiriksin pada tingkat metabolik ketiga tikusnya. 4A. Seret suntik yang
penuh dengan tiroksin ke punggung tikus normal. Lepaskan tombol tikus untuk menyuntikkan
tiloksin ke dalam tikus. (Dalam efek ini dari suntikan ini, efek dari laboratorium basah. Segera terjadi.
Dalam suntikan ini. Dibuat di labah basah, Anda harus menyuntikkan tikus setiap hari dengan tarikan
pada hari tarun... "Dalam jumlah ini.." 4c. Seret tikus dari bilik kembali ke sangkar dan kemudian klik
Bersihkan untuk menghapus semua jejak tiroksin dari tikus dan bersihkan jarum suntik. (Dalam
percobaan ini, tiroksin dihilangkan secara instan. Di lab basah, pembersihan akan memakan waktu
berminggu-minggu atau mengharuskan tikus yang berbeda digunakan.) 5a.-5c, Ulangi langkah 4a-4c
dengan tikus tiroidektomi (Tx) ( dan catat hasil Anda di Bagan 1). 6a.-6c. Ulangi langkah 4a-4c
dengan tikus hypophysectomized (Hypox) (dan catat hasil Anda di Bagan I).

Bagian 3: Menentukan Pengaruh TSH terhadap Laju Metabolisme Di bagian kegiatan ini, Anda akan
menyelidiki efek injeksi TSH pada laju metabolisme ketiga tikus. 7a. Seret jarum suntik diisi dengan
TSH ke bagian belakang tikus normal. Lepaskan tombol mouse untuk menyuntikkan TSH ke tikus.
(Dalam percobaan ini, efek injeksi langsung terjadi. Di lab basah, Anda harus menyuntikkan tikus
setiap hari dengan TSH selama 1-2 minggu.)

7b. Pada bagian kegiatan ini, berat tikus, jumlah oksigen yang dikonsumsi tikus dalam satu menit,
konsumsi tikus per jam, laju metabolisme tikus, dan palpasi tiroid akan dihasilkan secara otomatis
saat Anda menyeret tikus ke dalam ruang Seret tikus yang disuntikkan ke dalam ruang dan catat
hasilnya (dan catat hasil Anda pada Bagan 1). 7c. Seret tikus dari bilik kembali ke sangkar dan klik
Bersihkan untuk menghapus semua jejak TSH dari tikus dan clen jarum suntik. (Dalam percobaan ini,
TSH dihilangkan dengan stanting. Di lab basah, pembersihan akan memakan waktu berminggu-
minggu atau mengharuskan tikus yang berbeda digunakan.) Hasil oksigen 8a.-8c. Ulangi langkah 7a-
7c dengan tiroidektomi (Tx) n (dan catat hasil Anda pada Bagan 1) 9a.-9c. Ulangi langkah 7a-7c
dengan tikus hypophysectomiza (Hypox) (dan catat hasil Anda di Bagan 1).

BagianMenentukan Pengaruh Propyithiouracil pada Tingkat Metabolik Pada bagian kegiatan ini,
Anda akan menyelidiki efek dari suntikan gythiouracil pada laju metabolisme ketiga (10. Tarik jarum
suntik yang diisi dengan propylthiouracil ke bagian belakang tikus bernama. Lepaskan tombol mouse
untuk injec propylthiouracil ke dalam tikus. (Dalam percobaan ini, efek injeksi langsung terjadi. Di
lab basah, Anda harus menyuntikkan tikus setiap hari dengan propylthiouracil selama 1-2 minggu).
106. Di bagian kegiatan ini, berat tikus, jumlah exygen yang dikonsumsi oleh tikus dalam satu menit,
konsumsi oksigen per jam, laju metabolisme rar, dan garam dari palpasi tiroid akan dihasilkan secara
otomatis setelah Anda menyeret tikus ke dalam Seret tikus yang disuntikkan ke dalam ruang dan
catat hasilnya (dan catat hasil Anda dalam Bagan 1) .10c. Seret tikus dari ruang kembali ke
kandangnya dan kemudian klik Bersihkan untuk menghapus semua jejak propylthiouracil dari tikus
dan bersihkan jarum suntik. (Dalam percobaan ini, propylthio-racil dihilangkan secara instan. Di lab
basah, pembersihan akan memakan waktu berminggu-minggu atau mengharuskan tikus lain
digunakan.) Ila-lle. Ulangi langkah 10a-10c dengan tikus tiroidektomi (Tx) (dan catat hasil Anda pada
Bagan 1). 12a-12c. Ulangi langkah 10a-10c dengan tikus hypophysectomized (Hypox) (dan catat
hasil Anda di Bagan 1) Setelah Anda menyelesaikan percobaan, ikuti Kuis Post-lab online untuk
Aktivitas I.

Aktifitas 2

Kegiatan 2 glukosa plasma, insulin, dan diabetes mellitus

tujuan

1. Untuk memahami penggunaan istilah insulin, diabetes melitus tipe 1, diabetes tipe 2, dan kurva
standar glukosa.
2. Untuk memahami bagaimana kadar glukosa plasma puasa digunakan untuk mendiagnosis
diabetes mellitus.

3. Untuk memahami uji yang digunakan untuk mengukur glukosa plasma.

Pendahuluan Insulin adalah hormon yang diproduksi oleh sel beta dari bagian endokrin pankreas.
Hormon ini sangat penting untuk pengaturan kadar glukosa plasma, atau "gula darah," karena
hormon memungkinkan sel kita untuk menyerap glukosa dari aliran darah. Glukosa yang diserap
dari darah dapat digunakan sebagai bahan bakar untuk metabolisme atau disimpan sebagai glikogen
(juga dikenal sebagai pati hewan), yang paling terkenal di sel hati dan otot. Sekitar 75% glukosa yang
dikonsumsi selama makan disimpan sebagai glikogen. Karena manusia tidak memberi makan terus
menerus (kita dianggap sebagai "pengumpan yang terputus-putus"), produksi glikogen dari makanan
memastikan bahwa pasokan glukosa akan tersedia selama beberapa jam setelah makan. Selain itu,
tubuh harus mempertahankan kadar glukosa plasma tertentu untuk terus melayani sel-sel saraf
karena jenis sel ini hanya menggunakan glukosa untuk bahan bakar metabolisme. Ketika kadar
glukosa dalam plasma turun di bawah nilai tertentu, sel-sel alfa pankreas dirangsang untuk
melepaskan hormon glukagon. Glukagon menstimulasi pemecahan glikogen yang disimpan menjadi
glukosa, yang kemudian dilepaskan kembali ke dalam darah. Ketika pankreas tidak memproduksi
cukup insulin, diabetes mellitus tipe 1 terjadi. Ketika pankreas memproduksi insulin yang cukup
tetapi tubuh gagal menanggapinya, diabetes mellitus tipe 2 terjadi. Dalam kedua kasus tersebut,
glukosa tetap berada dalam aliran darah, dan sel-sel tubuh tidak dapat mengambilnya untuk
berfungsi sebagai bahan bakar utama untuk metabolisme. Ginjal kemudian menyaring kelebihan
glukosa dari plasma. Karena reabsorpsi glukosa yang disaring melibatkan sejumlah transporter yang
terbatas dalam sel tubulus ginjal, beberapa kelebihan glukosa tidak diserap kembali ke dalam
sirkulasi. Alih-alih, ia keluar dari tubuh dalam urin (karena itu urin manis, seperti namanya diabetes
mellitus). Ketidakmampuan sel-sel tubuh untuk mengambil glukosa dari darah juga menghasilkan
sel-sel otot rangka yang menjalani katabolisme protein untuk membebaskan asam amino yang akan
digunakan dalam membentuk glukosa di hati. Tindakan ini menempatkan tubuh dalam
keseimbangan nitrogen negatif dari penipisan protein dan pemborosan jaringan. Masalah terkait
lainnya termasuk penyembuhan luka yang buruk dan resistensi yang buruk terhadap infeksi.

Kegiatan ini dibagi menjadi dua bagian. Di Bagian 1, Anda akan menghasilkan kurva standar glukosa,
yang akan dijelaskan dalam percobaan. Pada Bagian 2, Anda akan menggunakan kurva standar
glukosa untuk mengukur kadar glukosa plasma puasa dari beberapa pasien untuk mendiagnosis ada
atau tidaknya diabetes mellitus. Seorang pasien dengan nilai FPG lebih besar dari atau sama dengan
126 mg / dl dalam dua tes FPG didiagnosis dengan diabetes. Nilai-nilai FPG antara 110 dan 126 mg /
dl mengindikasikan peningkatan atau penurunan ambang batas penyerapan glukosa yang dimediasi
oleh insulin oleh sel. Nilai FPG kurang dari 110 mg / dl dianggap normal.

Instruksi Eksperimen Buka beranda dalam perangkat lunak PhysioEx dan klik Latihan 4: Fisiologi
Sistem Endokrin. Klik Aktivitas 2: Glukosa Plasma, Insulin, dan Diabetes Mellitus, dan ambil Kuis Pra-
lab daring untuk Aktivitas 2 Setelah Anda mengikuti Kuis Pra-lab online, klik tab Eksperimen dan
mulai percobaan. Instruksi percobaan dicetak ulang di sini untuk referensi Anda. Layar pembuka
untuk percobaan ditunjukkan di bawah ini,

I. Seret tabung reaksi ke penahan pertama (1) di unit inkubasi. Empat tabung reaksi lagi
akan secara otomatis ditempatkan di unit inkubasi 2. Seret pipet dropper boctle standar
glukosa ke tabung pertama di unit inkubasi untuk mengeluarkan satu tetes larutan
standar glukosa ke dalam tabung. Dropper akan secara otomatis bergerak dan
mengeluarkan standar glukosa ke tabung yang tersisa. Perhatikan bahwa tabung cach
 menerima satu tetes tambahan standar glukosa (tabung 2 menerima 2 tetes, tabung 3
menerima 3 tetes, tabung 4 menerima 4 tetes, dan tabung 5 menerima 5 tetes). 3. Seret
tutup penetes botol air deionisasi ke tabung pertama di unit inkubasi untuk
mengeluarkan empat tetes air deionisasi ke dalam tabung. Dropper secara otomatis
akan bergerak melintasi dan mengeluarkan air deionisasi ke tabung yang tersisa.
Perhatikan bahwa setiap tabung menerima satu tetes air deionisasi lebih sedikit (tabung
2 menerima 3 tetes, tabung 3 menerima 2 tetes, tabung 4 menerima penurunan I, dan
tabung 5 tidak menerima tetes apa pun). 4. Klik Mlx untuk mencampur isi tabung. 5.
Klik Centrifuge untuk memusatkan isi tabung. Setelah proses sentrifugasi, tabung akan
secara otomatis naik. 6. Klik Remove Pellet untuk menghapus semua pellet yang
terbentuk selama proses cenirifugation. Pelet dapat mengandung reagen Decipitates
dan puing-puing dari lingkungan laboratorium. 7, Seret tutup penetes dari pereaksi
warna enzim ke dalam tabung pertama dalam unit inkubasi untuk mengeluarkan lima
tetes reagen warna enzim ke dalam setiap tabung. 8. Klik Incubate untuk menetaskan isi
tabung. Unit inkubasi akan perlahan mengaduk rak tabung reaksi, secara merata
mencampur isi semua tabung reaksi selama inkubasi. 9. Klik Setel pada
spektrofotometer untuk menghangatkan instrumen dan siapkan untuk pembacaan
sampel Anda. 10. Tarik tabung I ke spektrofotometer. 11. Klik Analisis untuk
menganalisis sampel. Titik data akan muncul pada monitor untuk menunjukkan
kepadatan optik dan konsentrasi glukosa sampel. Nilai-nilai ini juga akan muncul pada
tampilan kepadatan optik dan glukosa. 12. Klik Rekam Data untuk menampilkan hasil
Anda di kotak (dan catat hasil Anda di Bagan 2.1). Tabung akan secara otomatis
ditempatkan di mesin cuci tabung reaksi. 13 Sekarang Anda akan menganalisis sampel
dalam sisa wbes. Seret tabung berikutnya ke dalam spektrofotometer. . Klik Analisis
untuk menganalisis sampel. Titik data akan muncul pada monitor untuk menunjukkan
kepadatan optik dan konsentrasi glukosa sampel. Nilai-nilai ini juga akan muncul di layar
kepadatan optik dan glukosa. Klik Rekam Data untuk menampilkan hasil Anda di kisi
(dan catat hasil Anda di Bagan 2.1). Tabung secara otomatis akan ditempatkan di mesin
cuci tabung reaksi. Ulangi langkah ini sampai Anda menganalisis kelima tabung. 14, Klik
Grafik Glukosa Standar untuk menghasilkan kurva standar glukosa pada monitor. Anda
akan menggunakan grafik ini di Part2

Bagian 2: Mengukur Puasa Plasma Głucose Levols Pada bagian aktuivitas ini, Anda akan
menggunakan kurva glukosa dan tegak yang dihasilkan pada Bagian I untuk mengukur kadar
glukosa plasma puasa dari lima pasien untuk mendiagnosis ada atau tidaknya diabetes mellitus.
Catat penambahan dua reagen bortle (barum idroxide dan heparin) dan sampel darah dari lima
pasien. Untuk menjalani tes tasting plasma glocose (FPG), pasien harus berpuasa minimal 8 jam
sebelum pengambilan darah. Seorang pasien dengan nilai FPG lebih besar dari atau sama
dengan 126 mpldl dalam dua tes FPG didiagnosis menderita diabetes. Nilai FPG antara 110 dan
126 mg / dl menunjukkan penurunan atau penurunan batas penyerapan glukosa yang dimediasi
insulin oleh sel. Nilai FPG kurang dari 110 mg / dl dianggap normal. 15. Seret tabung reaksi ke
penahan pertama (1) di unit inkubasi. Empat tabung reaksi lagi akan secara otomatis
ditempatkan di unit inkubasi. 16. Seret tutup penetes sampel darah pasien pertama ke tabung
pertama dalam unit inkubasi untuk mengeluarkan tiga tetes sampel. Tiga tetes dari masing-
masing sampel akan secara otomatis dikeluarkan tabung terpisah. 17. Seret penutup pipet botol
penyembuh deionisasi ke tabung pertama dalam unit inkubasi untuk mengeluarkan lima tetes
air deionisasi ke dalam setiap tabung. 18. Barium bydroxide larut dan dengan demikian
membersihkan proieias dan membran sel (sehingga pembacaan glukosa yang jelas dapat
 diabaikan). Seret penutup pipet botol barium hidraksida ke tabung pertama di unit inkubasi
untuk mengeluarkan lima tetes barium bydroxide ke dalam tabung cach. 19. Seret penutup
pipet dari botol heparin ke tabung pertama. Tidak ada unit inkubasi untuk mengeluarkan setetes
heparin ke setiap tabung. Heparia mencegah pembekuan darah, yang akan mengganggu
pembacaan glukosa yang jelas. 20. Klik Mix untuk mencampur oontents tabung. 21. Klik
Centrifuge untuk centrifuge isi nubes. Setelah proses sentrifugasi, tabung akan secara otomatis
naik. 22. Klik Hapus Pelet untuk menghapus pelet yang terbentuk selama proses sentrifugasi.
Pelet dapat mengandung endapan reagen dan puing-puing dari lingkungan laboratorium. 23.
Seret tutup penetes botol reagen warna enzim ke tabung pertama dalam unit inkubasi untuk
mengeluarkan lima tetes reagen warna enzim ke dalam setiap tabung. 24. Klik Incubate untuk
menetaskan isi tabung. Unit inkubasi akan perlahan mengaduk rak tabung reaksi, secara merata
mencampur isi semua tabung reaksi sepanjang inkubasi. 25. Klik Setel pada spektrofotometer
untuk menghangatkan instrumen dan siapkan untuk pembacaan sampel Anda. 26. Klik Graph
Glucose Standard untuk menampilkan kurva standar glukosa yang Anda hasilkan di Bagian I pada
monitor. 27. Tarik tabung I ke spektrofotometer. 28. Klik Analisis untuk menganalisis sampel.
Garis horizontal akan muncul pada monitor untuk menunjukkan kepadatan optik sampel.
Kepadatan optik juga akan muncul di layar kepadatan optik. 29. Seret penggaris bergerak (garis
merah vertikal di sisi kanan monitor) ke persimpangan garis kuning horisontal (kepadatan optik
sampel) dan kurva standar glukosa. Perhatikan perubahan tampilan glukosa saat Anda
memindahkan garis. Konsentrasi glukosa di mana garis menunjukkan glukosa plasma puasa
untuk pasien ini. Klik Rekam Data untuk menampilkan hasil Anda di kisi (dan catat hasil Anda di
Bagan 2.2). Tabung akan secara otomatis ditempatkan di mesin cuci tabung reaksi, dan monitor
akan dibersihkan (kecuali untuk kurva standar glukosa). 30. Sekarang Anda akan menganalisis
sampel dalam tabung yang tersisa. Seret tabung berikutnya ke dalam spektrofotometer. Klik
Analisis untuk menganalisis sampel. Titik data akan muncul pada monitor untuk menunjukkan
kepadatan optik dan konsentrasi glukosa sampel. Nilai-nilai ini juga akan muncul di layar
kepadatan optik dan glukosa.

ACTIVITY 3

Terapi Pengganti Hormon

TUJUAN 1. Untuk memahami istilah terapi penggantian hormon, hormon perangsang folikel (FSH),
estrogen, kalsitonin, osteoporosis, ovariektornized, dan skor T. 2. Untuk memahami bagaimana
kadar estrogen memengaruhi kepadatan tulang. 3. Untuk memahami potensi manfaat terapi
penggantian hormon.

Pendahuluan

Hormon perangsang folikel (FSH) adalah hormon peptida hipofisis anterior yang merangsang
pertumbuhan folikel ovarium. Mengembangkan folikel ovarium kemudian menghasilkan dan
mengeluarkan hormon steroid disebut estrogen ke dalam plasma. Estrogen memiliki banyak efek
pada tubuh wanita dan homeostasis termasuk stimulasi pertumbuhan tulang dan perlindungan
terhadap osteoporosis (pengurangan jumlah tulang yang ditandai dengan penurunan massa tulang
dan peningkatan kerentanan terhadap fraktur).
 Setelah menopause, ovarium berhenti memproduksi dan mengeluarkan estrogen. Salah satu efek
dan masalah kesehatan potensial menopause adalah hilangnya kepadatan tulang yang dapat
menyebabkan osteoporosis dan patah tulang. Untuk alasan ini, perawatan pascamenopause untuk
mencegah osteoporosis seringkali termasuk terapi penggantian hormon. Estrogen dapat diberikan
untuk meningkatkan kepadatan tulang. Kalsitonin (disekresikan oleh sel C di kelenjar tiroid) adalah
hormon peptida lain yang dapat diberikan untuk menangkal perkembangan osteoporosis. Kalsitonin
meningkatkan aktivitas osteoklas dan menstimulasi penyerapan dan penumpukan kalsium pada
tulang panjang.

Dalam aktivitas ini, Anda akan menggunakan tiga tikus yang diovariektomi yang tidak lagi
memproduksi estrogen karena indung telurnya telah diangkat dengan operasi. Skor T adalah
pengukuran kuantitatif dari kandungan mineral tulang, digunakan sebagai indikator untuk
osteoporosis. Tiga tikus dipilih karena masing-masing memiliki skor T awal 2,61, menunjukkan
osteoporosis. Skor T diinterpretasikan sebagai berikut: normal = +1 hingga-0,99; osteopenia
(penipisan tulang) dan di bawah Anda akan memberikan terapi estrogen atau terapi kalsitonin pada
tikus-tikus ini, mewakili dua jenis terapi penggantian hormon. Tikus ketiga akan berfungsi sebagai
kontrol yang tidak diobati dan menerima suntikan saline setiap hari. Densitas tulang verbal (VBD)
dari masing-masing tikus akan diukur dengan dual X-ray absorptiometry (DXA) untuk mendapatkan
skor T setelah perawatan. kekuatan struktural tulang dan sebagai layar = - 1,0 hingga -2,49;
osteoporosis -2.5 ke bawah.

Anda akan memberikan terapi estrogen atau terapi kalsitonin pada tikus-tikus ini, mewakili dua
jenis terapi penggantian hormon. Tikus ketiga akan berfungsi sebagai kontrol yang tidak diobati dan
menerima suntikan saline setiap hari. Densitas tulang verbal (VBD) dari masing-masing tikus akan
diukur dengan dual X-ray absorptiometry (DXA) untuk mendapatkan skor T setelah perawatan.

1 Seret jarum suntik ke botol salin untuk mengisi jarum suntik dengan 1 ml saline. 2. Seret jarum
suntik ke tikus kontrol, letakkan ujung jarum di daerah perut bagian bawah tikus. Suntikan ke
daerah ini dianggap intraperitoneal dan akan dengan cepat diedarkan oleh pembuluh darah perut.
3. Klik Bersihkan di bawah tempat jarum suntik untuk membersihkan jarum suntik dari semua residu.
4. Seret jarum suntik ke botol estrogen untuk mengisi jarum suntik dengan 1 ml estrogen. 5. Seret
jarum suntik ke tikus estrogen-ireated. menempatkan ujung jarum di daerah perut bagian bawah
tikus. 6. Klik Bersihkan di bawah tempat jarum suntik untuk membersihkan cincin dari semua residu.
7. Seret jarum suntik ke botol kalsitonin untuk mengisi syringe dengan 1 ml kalsitonin. 3. Seret
jarum suntik ke tikus yang diobati dengan kalsitonin, letakkan ujung jarum di daerah perut bagian
bawah tikus. 9. Klik Bersihkan di bawah tempat jarum suntik untuk membersihkan cincin dari semua
residu. 10, Klik tampilan jam untuk naik satu hari (24 jam). 11. Setiap tikus harus menerima tujuh
suntikan selama bn hari (satu injeksi per hari). Suntikan yang tersisa akan otomatis. Klik tampilan
jam untuk mengulangi rangkaian injeksi hingga Anda menyuntikkan masing-masing tikus tujuh kali.
12. Klik Anestesi di atas sangkar tikus kontrol untuk melumpuhkan tikus kontrol dengan anestesi gas
untuk pelapisan sinar-X. 13. Seret tikus yang dianestesi ke meja ujian untuk pemindaian sinar-X. 14.
Klik Scan untuk mengaktifkan pemindai. Skor T akan muncul di tampilan skor T. Klik Rekam Data
untuk merekam hasil Anda di kisi (dan catat hasil Anda di Bagan 3). Tikus kontrol akan secara
otomatis dikembalikan ke kandangnya. 15. Sekarang Anda akan mendapatkan skor T untuk tikus
yang tersisa. Lakukan langkah-langkah ini untuk mendapatkan skor T untuk tikus yang diobati
dengan estrogen, kemudian ulangi langkah-langkah ini untuk mendapatkan skor T untuk tikus yang
diperlakukan dengan kalsitonin. Klik Anesthesla di atas sangkar tikus untuk melumpuhkan tikus
dengan anestesi gas untuk pemindaian sinar-X. Seret tikus yang dianestesi ke meja ujian untuk
pemindaian sinar-X. Klik Pindai untuk mengaktifkan pemindai. Skor T akan muncul di tampilan skor
T. Klik Rekam Data untuk merekam hasil Anda di kisi (dan catat hasil Anda di Bagan 3). Tikus akan
secara otomatis dikembalikan ke kandangnya. Setelah Anda menyelesaikan percobaan, ikuti Kuis
Post-lab online untuk Kegiatan 3.

ACTIVITY 4.

Mengukur Hormon Kortisol dan Adrenokortikotropik

TUJUAN 1 Untuk memahami istilah kortisol, hormon adrenokortikotropik (ACTH), hormon pelepas
kortikotropin (CRH), sindrom Cushing, iatrogenik, penyakit Cushing, dan penyakit Addison. 2.Untuk
memahami bagaimana CRH mengontrol sekresi ACTH dan ACTH mengontrol sekresi kortisol. 3.
Untuk memahami bagaimana mekanisme umpan balik negatif mempengaruhi tingkat CRH tropis dan
ACTH. 4. Untuk mengukur kadar kortisol dan ACTH dalam darah pada lima pasien dan
menghubungkan pembacaan ini dengan gejala dan diagnosis. 5. Untuk membedakan antara
sindrom Cushing dan penyakit Cushing.

Pendahuluan

Kortisol, hormon yang dikeluarkan oleh korteks adrenal, penting dalam respons tubuh terhadap
berbagai jenis stres. Pelepasan kortisol dirangsang oleh hormon adrenokortikotropik (ACTH),
hormon tropik yang dilepaskan oleh hipofisis anterior. Hormon tropik merangsang sekresi hormon
lain. Pelepasan ACTH, pada gilirannya, dirangsang oleh hormon pelepas kortikotropin (CRH),
hormon tropik dari hipotalamus. Peningkatan kadar kortisol memberi umpan balik negatif untuk
menghambat pelepasan ACTH dan CRH.

Peningkatan kortisol dalam darah, atau hiperkortisolisme, disebut sebagai sindrom Cushing jika
peningkatan ini disebabkan oleh tumor kelenjar adrenal. Sindrom Cushing juga bisa bersifat
iatrogenik (yaitu, dokter diinduksi). Misalnya, sindrom Cushing yang dipicu oleh dokter dapat terjadi
ketika hormon glukokortikoid, seperti prednison, diberikan untuk mengobati radang sendi, asma,
atau lupus. Sindrom Cushing sering disebut sebagai "diabetes steroid" karena mengakibatkan
hiperglikemia. Sebaliknya, penyakit Cushing adalah hiperkortisolisme yang disebabkan oleh tumor
hipofisis atrium. Orang dengan penyakit Cushing menunjukkan peningkatan kadar ACTH dan
kortisol.

Penurunan kortisol dalam blod, atau hipokortisolisme dapat terjadi karena insufisiensi adrenal.
Dalam kecukupan adrenal primer, juga dikenal sebagai penyakit Addison, sol korti yang rendah
secara langsung disebabkan oleh penghancuran bertahap dari adrenal conex dan tingkat ACTH
biasanya meningkat sebagai efek kompensitorik. Insufisiensi adrenal sekunder juga menghasilkan
kadar kortisol yang rendah, biasanya disebabkan oleh kerusakan pada hipofisis anterior. Oleh
karena itu, tingkat ACTH juga rendah dalam insufisiensi adrenal sekunder. Seperti yang Anda lihat,
berbagai gangguan endokrin dapat dikaitkan dengan tingkat kortisol yang tinggi dan rendah dan
ACTH Tabel 4.1 merangkum gangguan endokrin ini.

Intruksi eksperimen

2. Seret jarum suntik ke tabung pertama untuk mengisi jarum suntik dengan plasmid yang diisolasi
dari pasien pertama. 1 Klik Kortisol untuk menyiapkan kolom pemisahan dan pengukuran kortisol. 3.
Seret jarum suntik ke injektor HPLC. Sampel akan memasuki tabung dan mengalir melalui kolom.
Konsentrasi kortisol dalam sampel pasien akan muncul pada layar detektor HPLC. 4. Klik Rekam Data
untuk menampilkan hasil Anda di kisi (dan catat hasil Anda di Bagan 4). 5. Klik Bersihkan di bawah
jarum suntik untuk mempersiapkannya untuk sampel berikutnya. Klik Bersihkan Kolom untuk
menghapus kortisol residual dari kolom. 6. Seret jarum suntik ke tabung kedua untuk mengisi jarum
suntik dengan plasma yang diisolasi dari pasien kedua. 7. Seret jarum suntik ke injektor HPLC.
Sampel akan memasuki tabung dan mengalir melalui kolom. Konsentrasi kortisol dalam sampel
pasien akan muncul di layar detektor HPLC. 8. Klik Rekam Data untuk menampilkan hasil Anda di kisi
(dan catat hasil Anda di Bagan 4). 9. Klik Bersihkan di bawah jarum suntik untuk mempersiapkannya
untuk sampel berikutnya. Klik Bersihkan Kolom untuk menghapus kortisol residual dari kolom. 10.
Prosedur untuk sampel yang tersisa akan selesai secara otomatis. Seret jarum suntik ke tabung
ketiga untuk mengisi jarum suntik dengan plasma yang diisolasi dari pasien ketiga. Ketika
konsentrasi kortisol untuk pasien ketiga dicatat dalam kisi, seret jarum suntik ke tabung keempat
untuk mengisi jarum suntik dengan plasma yang diisolasi dari pasien keempat. Ketika konsentrasi
kortisol untuk pasien keempat dicatat dalam kisi, seret jarum suntik ke tabung kelima untuk mengisi
jarum suntik dengan plasma yang diisolasi dari pasien kelima. 11. Klik ACTH untuk menyiapkan
kolom pemisahan dan pengukuran ACTH. 12. Seret jarum suntik ke tabung pertama untuk mengisi
jarum suntik dengan plasma yang diisolasi dari pasien pertama. 13. Seret jarum suntik ke injektor
HPLC. Sampel akan memasuki tabung dan mengalir melalui kolom. Konsentrasi ACTH dalam sampel
pasien akan muncul pada layar delektor HPLC. 14. Klik Rekam Data untuk menampilkan hasil Anda di
kisi. I5. Klik Bersihkan di bawah jarum suntik untuk mempersiapkannya untuk sampel berikutnya.
Klik Bersihkan Kolom untuk menghapus ACTH residual dari kolom. 16. Seret jarum suntik ke tabung
kedua untuk mengisi jarum suntik dengan plasma yang diisolasi dari pasien kedua. 17. Seret jarum
suntik ke injektor HPLC. Sampel akan memasuki tabung dan mengalir melalui kolom. Konsentrasi
ACTH dalam sampel pasien akan muncul di layar detektor HPLC, 18. Klik Rekam Data untuk
menampilkan hasil Anda di kisi (dan catat hasil Anda di Bagan 4). 19. Klik Bersihkan di bawah jarum
suntik untuk mempersiapkannya untuk sampel berikutnya. Klik Bersihkan Kolom untuk menghapus
ACTH residual dari kolom. 20. Prosedur untuk sampel yang tersisa akan selesai secara otomatis.
Seret jarum suntik ke tabung ketiga untuk mengisi jarum suntik dengan plasma yang diisolasi dari
pasien ketiga. Ketika konsentrasi ACTH untuk pasien ketiga dicatat dalam kisi, seret jarum suntik ke
tabung keempat untuk mengisi jarum suntik dengan plasma yang diisolasi dari pasien keempat.
Ketika konsentrasi ACTH untuk pasien keempat dicatat dalam grid, seret jarum suntik ke tabung
kelima untuk mengisi jarum suntik dengan plasma yang diisolasi dari pasien kelima. 21. Tunjukkan
apakah konsentrasi kortisol dan ACTH (level) untuk setiap pasien tinggi atau rendah menggunakan
breakpoint yang ditunjukkan pada Tabel 4.2. Klik baris pasien dan kemudian klik Tinggi atau Rendah
di sebelah kortisol dan ACTH.4.2.