Toksikologi Manusia & Eksperimental

10/24/2019 Toksikologi Manusia & Eksperimental
Halaman 1
Toksikologi Manusia & Eksperimental

http://het.sagepub.com/
Efek modulatory dari Kelor oleifera ekstrak terhadap sitotoksisitas yang diinduksi hidrogen peroksida dan
kerusakan oksidatif
S Sreelatha dan PR Padma
Hum Exp Toxicol 2011 30: 1359 awalnya diterbitkan online 9 Desember 2010
DOI: 10.1177 / 0960327110391385
Versi online dari artikel ini dapat ditemukan di:

http://het.sagepub.com/content/30/9/1359
Diterbitkan oleh:
http://www.sagepublications.com
Layanan dan informasi tambahan untuk Toksikologi Manusia & Eksperimental dapat dite mukan di:
Pe ringatan Email:
http://het.sagepub.com/cgi/alerts
Langganan: http://het.sagepub.com/subscription
Ce tak ulang:
http://www.sagepub.com/journalsReprints.nav
Iz in: http://www.sagepub.com/journalsPermissions.nav
Kutipan: http://het.sagepub.com/content/30/9/1359.refs.html
>> Versi Rekaman - 2 Sep 2011
Versi Rekam Online Pertama - 19 Jan 2011
Versi Rekam Online Pertama - 9 Des 2010
Apa ini?
https://translate.googleusercontent.com/translate_f 1/12
Diun d u h dari h et.sag ep u b .co m d i BROWN UNIVERSITY p ad a 22 No v emb er 2 01 2
Halaman 2
Toksikologi Manusia dan Eksperimental

30 (9) 1359–1368
Efek modulatory dari Moringa © Penulis (s) 2010

Cetak ulang dan izin:
ekstrak oleifera melawan hidrogen

sagepub.co.uk/journalsPermissions.nav
DOI: 10.1177 / 0960327110391385
het.sagepub.com
sitotoksisitas yang diinduksi peroksida dan

kerusakan oksidatif
1,2 2
S Sreelatha dan PR Padma
Abstrak
Penelitian telah menunjukkan bahwa induksi stres oksidatif mungkin terlibat dalam kerusakan DNA oksidatif.
Penelitian ini meneliti dan menilai kerusakan DNA yang dimediasi hidrogen peroksida (H 2 O 2 ) pada manusia
sel tumor KB dan juga menilai kemampuan ekstrak daun Moringa oleifera untuk menghambat kerusakan oksidatif.
H 2 O 2 memberi tekanan pada lipid membran yang dikuantifikasi oleh sejauh mana asam tiobarbiturat bereaksi.
zat tive (TBARS) terbentuk. Ekstrak daun menyebabkan penghambatan yang sangat signifikan sejauh
kation dan meningkatkan aktivitas enzim antioksidan seperti superoksida dismutase (SOD) dan katalase
(CAT) dalam sel KB. Uji komet digunakan untuk mempelajari kerusakan DNA dan penghambatannya oleh daun
ekstrak. H 2 O 2 menyebabkan peningkatan yang signifikan dalam jumlah sel bantalan komet, menghasilkan DNA yang signifikan
kerusakan. Ekstrak daun secara signifikan mengurangi kejadian komet dalam sel stres oksidan. Luasnya
dari sitotoksisitas H 2 O 2 di hadapan dan tidak adanya ekstrak daun dipelajari dalam sel tumor KB oleh MTT
uji menunjukkan bahwa H 2 O 2 menyebabkan penurunan nyata dalam kelangsungan hidup sel KB di mana sebagai ekstrak daun efektif
secara aktif meningkatkan viabilitas sel KB yang diserang. Aktivitas sitoprotektif yang diamati mungkin disebabkan oleh
sifat antioksidan dari konstituennya, terutama fenolat. Total fenolik menunjukkan korelasi yang lebih tinggi dengan
aktivitas antioksidan. Ekstrak daun menunjukkan aktivitas antioksidan lebih tinggi daripada senyawa referensi. Ini
hasil menunjukkan bahwa penghambatan oleh ekstrak daun pada kerusakan DNA oksidatif dapat dikaitkan dengan mereka
kegiatan pemulungan radikal bebas dan efek yang dibuktikan dalam sel KB sebagian dapat dikorelasikan dengan modulasi
mekanisme redoks yang sensitif.
Kata kunci
hidrogen peroksida, pengujian komet, kerusakan DNA, spesies oksigen reaktif
pengantar berkontribusi pada kematian sel. 2 Lipid membran hadir

dalam organel subseluler sangat rentan terhadap
Stres oksidatif telah terlibat dalam patho-
kerusakan akibat radikal bebas. Selama peroksidasi lipid
asal-usul dari berbagai gangguan klinis seperti
(LPO), sejumlah besar produk sampingan beracun juga
sebagai penyakit neurodegeneratif, kanker, kardiovaskular
terbentuk. PUT menghasilkan pembentukan beberapa
penyakit lar, aterosklerosis dan peradangan. DNA
produk sampingan toksik seperti 4-hidroksi nonenal dan
adalah molekul target penting dalam sel yang dihadapkan
malondialdehyde. Mereka membentuk aduk dengan DNA
dengan penghinaan spesies oksigen reaktif langsung (ROS).
Generasi ROS yang dekat dengan DNA
menyebabkan berbagai jenis kerusakan DNA seperti basa 1 Fakultas Sains, NUS, Singapura
dan kerusakan gula, istirahat untai dan DNA-protein 2 Departemen Biokimia & Bioteknologi, Avinashilingam
tautan silang. 1 Dalam beberapa tahun terakhir, telah meningkat Universitas, Coimbatore, India
SEBUAH
jelas bahwa ROS, seperti O 2 dan H 2 O 2 mungkin Penulis yang sesuai:
bertindak sebagai pembawa pesan kedua dan berperan dalam modu- S Sreelatha, Fakultas Sains, jalan punggungan Kent yang lebih rendah, NUS,
fungsi seluler lating. H 2 O 2 menghasilkan sangat beracun Singapura
radikal hidroksil, yang menyebabkan kerusakan DNA, dan Email: sree_latha04@yahoo.com
Halaman 3
1360 Toksikologi M anusia dan Eksperimental 30 (9)
dan menginduksi mutagenesis, karsinogenisitas dan oleifera meninggalkan dua tahap kedewasaan yang bertanggung jawab
apoptosis. 3 untuk mencegah efek buruk oksidatif
Kerusakan DNA dan perbaikan yang tidak efisien dapat dimulaistres diungkapkan dalam penelitian terbaru kami. 16 Meskipun
proses karsinogenesis 4 dan modulasi banyak manfaat dari Moringa oleifera telah diklaim,
parameter ini dapat memberikan potensi yang efektif hanya sedikit studi otentik yang tersedia. Tujuan dari
sarana pengendalian kanker. Tampaknya penting, untuk ini penelitian ini adalah untuk mengumpulkan pengetahuan lebih lanjut
alasannya, mengembangkan cara untuk menurunkan risiko dan menghambatmengenai efek ekstrak Moringa oleifera pada
efek kerusakan DNA yang diperantarai ROS. Banyak sel-sel KB yang dikultur (dikenal sebagai sub-garis ubi
pendirian berasal dari makanan atau tanaman obat KERATIN bebas - membentuk garis sel tumor HeLA)
dikenal sebagai chemopreventive yang efektif dan serbaguna untuk membangun kemungkinan farmakologis baru
dan agen antitumoral dalam sejumlah percobaan ikatan untuk penerapannya. Oleh karena itu,
model karsinogenesis. Ada bukti peningkatan gation dilakukan untuk mengevaluasi perlindungan
untuk hubungan antara konsumsi tinggi efek dari ekstrak daun makanan terhadap oksidatif
buah dan sayuran dan mengurangi risiko oral Kerusakan DNA yang disebabkan oleh H 2 O 2 dalam sel KB. Sitotoksin-
kanker 5 dan karsinoma prostat, yang paling umum kota ditentukan oleh uji MTT dan uji komet
tumor pada pria. 6 Oleh karena itu, tujuan dari penelitian ini digunakan untuk penilaian kerusakan DNA.
adalah untuk menyelidiki apakah ekstrak daun makanan
dapat menghambat kerusakan DNA dan mekanismenya
terhadap target biomolekul yang diserang oksidatif. material dan metode
Identifikasi antioksidan baru tetap a Bahan kimia
daerah penelitian yang sangat aktif, karena agen ini mungkin
TBA, H 2 O 2 , etidium bromida dan 3- (4, 5-dimet-
mengurangi risiko berbagai penyakit kronis yang disebabkan oleh
lythiazol-2-yl) -2, 5-di phenyl tetrazolium bromide
ROS. 7 Ada semakin banyak bukti yang menanam
(MTT) diperoleh dari Sigma-Aldrich (St. Louis,
ekstrak memiliki potensi untuk membersihkan ROS. 8 The
Missouri, AS). Agarose, agarose dengan leleh rendah,
meningkatnya minat substitusi makanan sintetis
Media esensial modifikasi Dulbecco (DMEM) dan
antioksidan oleh antioksidan alami dalam implikasi kesehatan
fetal calf serum (FCS) diperoleh dari Gibco /
kation telah mempercepat penelitian tentang sayuran
Teknologi kehidupan BRL (Jerman). Bahan kimia lainnya
sumber dan penyaringan bahan baku untuk identifikasi
dan pelarut dibeli dari Merck Chemicals,
antioksidan antioksidan. 9 Antioksidan bisa menipiskan
Mumbai, India.
kerusakan oksidatif dari jaringan ini secara tidak langsung oleh enhan-
cing pertahanan alami sel dan / atau langsung oleh
mencari spesies radikal bebas. Bahan tanaman dan persiapan ekstrak
Moringa oleifera adalah pohon biasa, asli dari India Daun kelor oleifera dikumpulkan dari Hor-
dan dibudidayakan di seluruh daerah subtropis dari Lembaga Penelitian ticulture, Periyakulam, Tamil
Afrika Barat ke Fiji. Juga dikenal dengan namanya Nadu, India, dan spesimen voucher disimpan
tanaman stik drum, pohon kelor dan pohon lobak kuda, dalam Survei Botani India, Coimbatore, India
itu adalah sumber makanan dan obat-obatan. Daun kering itu (BSI / SC / 5/25 / 05-06 / Tech-908). Daunnya ana
dilaporkan memiliki empat kali kalsium susu, tiga kali lipat berbaring di dua tahap pertumbuhan yang berbeda yaitu tender
potasium pisang dan tujuh kali lipat vitamin dan matang untuk mempelajari apakah perbedaan dalam
C jeruk. Mereka mengandung 17% protein, dan merupakan a aktivitasnya ada dalam berbagai tahap pertumbuhan. Itu
sumber vitamin B yang baik, dan mengandung dua hingga empat daun kering dari Moringa oleifera matang dan
kali b-karoten ditemukan dalam wortel. 10 Daun bisa jadi tender dibuat menjadi bubuk kasar. Lima ratus
dimakan segar, dimasak atau disimpan sebagai bubuk kering gram bubuk daun kering diaduk dengan
berbulan-bulan tanpa pendinginan dan tanpa kehilangan tujuh bagian air suling pada 80 C selama 2 jam September
dari nilai gizi. Moringa oleifera memiliki sejarah panjang dengan hati-hati dan didinginkan hingga suhu kamar. Setiap
dalam kedokteran. Dalam beberapa dekade terakhir, ekstrak supernatan pulih setelah penyaringan dan larutan
daun, biji, dan akar Moringa oleifera telah ventilasi benar-benar dihapus oleh rotary rotary eva
dipelajari secara ekstensif untuk banyak kegunaan potensial termasuk
porator. Ekstrak dibekukan kering dan disimpan dalam a
penyembuhan luka, 11 anti tumor, 12 antifertilitas, 13 hipo- desikator vakum untuk penggunaan lebih lanjut. Hasil dari
bersayap 14 dan aktivitas analgesik. 15 Antioksidan ekstrak adalah 32% dengan mengacu pada awal kering
aktivitas dan total konten fenolik Moringa bahan. Konsentrasi air kelor
Halaman 4
S Sreelatha dan PR Padma 1361
ekstrak daun oleifera yang dilindungi 50% terhadap perbaikan pada tingkat sel tunggal. Uji komet adalah
Kematian sel yang diinduksi H 2 O 2 ditentukan untuk dilakukan dalam sel KB. 19
membangun potensi sitoprotektif. Karena itu, daun Sel yang dirawat (sel KB dengan H 2 O 2 dalam
ekstrak, baik daun dewasa dan lembut, digunakan di a ence dan tidak adanya ekstrak daun [20 mL
konsentrasi 50 mg / mL untuk pengujian. 50 mg / mL]) diinkubasi pada suhu 37 C selama 1 jam. Pada
akhir periode inkubasi, slide ditutup dengan
0,5% normal melting point agarose (NMA) sebagai yang pertama
Komposisi fenolik dan antioksidan total lapisan, dengan campuran suspensi sel dan 0,5% dari
aktivitas agarose titik leleh rendah (LMA) sebagai lapisan kedua
Sebagai daun ketika mengalami skrining fitokimia- dan akhirnya dengan 0,5% LMA (tanpa sel) sebagai
ing mengungkapkan adanya berbagai phytoconstituents, lapisan ketiga. Setelah solidifikasi, 'minigels' adalah
ekstrak daun kemudian diperiksa untuk spesifik ditempatkan dalam larutan pengerjaan dingin dan diinkubasi
komposisi fenolik dengan metode HPTLC. 17 semalam pada 4 C. Sel-sel yang dilisiskan didenaturasi dalam
Quercetin, kaempferol dan daun kelor oleifera buffer elektroforesis alkali selama 20 menit dan
ekstrak diterapkan pada 10 Â ± 10 cm aluminium- dielektroforesis dalam buffer yang sama pada 25 volt untuk
piring HPTLC dikemas dilapisi dengan 0,2 mm lapisan 20 menit. Slide kemudian dinetralkan dalam 1 M
pelat silika gel G60 F254 (Merck). Fase seluler tris pH 7,5 dan diwarnai dengan etidium bromida. Mencetak gol
adalah asam toluena-dioksan-asetat 95: 25: 4. Senyawa slide untuk kehadiran ekor komet di bawah minyak
pencelupan menggunakan mikroskop fluorescent Nikon.
divisualisasikan dengan penyemprotan dengan reagen Naturstoff A.
Jumlah senyawa dalam sampel dihitung Sistem analisis komet diterapkan untuk menghitung
dihitung dengan membandingkan daerah puncak densitogram dari Kerusakan DNA. Sampel rangkap tiga disiapkan dan
sampel dengan standar yang sama diperiksa. Gambar 100 sel yang dipilih secara acak
piring. Aktivitas antioksidan total (AOA) daun dari setiap slide dianalisis. Tingkat DNA
ekstrak ditentukan dengan menggunakan autoksidasi kerusakan dinyatakan sebagai nilai momen ekor. Ekor
reaksi beta-karoten dan asam linoleat momen ¼ (Panjang ekor Â Ekor DNA%) / 100.
metode 18 dan dinyatakan sebagai persentase penghambatan,
relatif terhadap kontrol. Viabilitas sel
Secara singkat, sel KB (10.000 sel / baik) dikultur dalam
Budaya sel kolagen I (50 mg / mL) dilapisi pelat kultur 96-sumur,
dalam volume total 200 mL DMEM-F12 supplemen-
Garis sel tumor KB diperoleh dari National
ted dengan 1% FBS. Oksidasi diinduksi dengan mengekspos
Pusat Ilmu Sel (NCCS), Pune, India. Itu
sel-sel sampai 200 mM H 2 O 2 dalam PBS ditambah
sel dipertahankan dalam DMEM yang ditambah
1% L- glutamin dan 1% asam amino non-esensial.
10% serum janin sapi (FBS) dan antibiotik (100
Sel dikultur di hadapan dan tidak adanya
unit / mL penisilin G dan streptomi 100 mg / mL
ekstrak daun pada konsentrasi 50 mg / mL. Kedua
cin sulfate) dan dikultur pada suhu 37 C dalam 5% CO 2 . Conflu-
kelompok perlakuan dan kontrol dilakukan dalam 6-8
sel yang tumbuh dipanen dengan trypsinization
mereplikasi sumur. Jumlah relatif sel yang layak
(0,25%), dikumpulkan ke DMEM yang mengandung 10% FBS
kemudian ditentukan pada 72 jam setelah inkubasi, oleh
dan bertahan di es sampai pengujian. Sebelum pengujian, sel-sel
menambahkan 1 mg / mL 3- [4, 5-dimethylthiazol-2-yl] -2,
diputar pada 2000 rpm selama 5 menit pada 4 C dalam a
5-difenil tetrazolium bromida (MTT) dan inkubator
microfuge dan diresuspensi dalam Hank's Balanced Salt
lanjut sel selama 4 jam. Kristal formazan
Solusi (HBSS). Dosis H 2 O 2 200 mM adalah
yang terbentuk kemudian dilarutkan dengan asam isopropanol
dipilih berdasarkan efektivitasnya dalam menginduksi DNA
selama 1 jam. Nilai serapan larutan pada
kerusakan. H 2 O 2 dilarutkan dalam larutan salin fosfat
595 nm secara langsung mewakili nomor sel relatif. Itu
(PBS) digunakan sebagai kontrol positif.
persentase penurunan sel relatif terhadap kelompok kontrol
kemudian ditentukan. 20
Elektroforesis gel sel tunggal (uji komet)
menggunakan sel utuh Pembentukan lipid peroksida
Uji komet juga disebut sebagai 'sel tunggal Peroksidasi lipid (LPO) telah dianggap sebagai satu
assay 'adalah teknik untuk mendeteksi kerusakan DNA dan manifestasi yang paling dikenal dari oksidan diinduksi
Halaman 5
Tabel 1. Kandungan fenolik dan Total aktivitas antioksidan dalam ekstrak daun M oringa oleifera a
Ekstrak / isi standar (mg / g) Quercetin Kaempferol Total aktivitas antioksidan (%)
Ekstrak daun matang 795 + 0,02 216 + 0,03 84.56 + 0.51

Ekstrak daun lembut 436.2 + 0,01 115+ 0,02 63.64 +0.82
a-tokoferol - - 71.76 + 0.42
a Nilai-nilai adalah rata-rata + SD rangkap tiga.
cedera sel. Peroksidasi lipid diikuti oleh Analisis statistik

membentuk TBARS, 21 dengan modifikasi kecil
Semua parameter yang diteliti menjadi sasaran statistik
dan hasilnya dinyatakan sebagai nmole dari
pengobatan menggunakan paket statistik Sigma Stat (Ver-
malondialdehyde (MDA) / mg protein. Volume yang sama
sion 3.1). Data dinyatakan sebagai mean + SD
ekstrak daun dan 200 mM H 2 O 2 dalam DMEM bebas FBS
(n ¼ 6) di mana 'n' mewakili jumlah sampel.
ditambahkan ke masing-masing sumur dan pelat sel diinkubasi
ANOVA satu arah, diikuti dengan analisis post-hoc
tertahan selama 24 jam. Secara singkat, sel KB dilisis menggunakan
menggunakan Fischer LSD diadopsi untuk semua parameter
metode pembekuan beku. Setelah lisis, 0,2 mL sel
sedang dipelajari untuk menguji tingkat signifikansi statistik.
suspensi ditambahkan ke reagen TBA (1,5 mL
Perbedaannya dianggap signifikan jika p <0,05.
asam asetat 20%, 1,5 mL natrium dodecyl 8,1%
sulfat dan 1,5 mL TBA 0,8%). Campuran ini
diinkubasi pada suhu 90 C selama 1 jam dan kemudian didinginkan.Hasil
Empat
mililiter dari campuran n-butanol dan piridin Isi fenolik dan aktivitas antioksidan total
(15: 1, v / v) ditambahkan, dan seluruh campuran ditambahkan
Ekstrak daun diperiksa untuk mengetahui kandungan fenoliknya
disentrifugasi (15 menit pada 1.500 g). Absor-
mengungkapkan adanya quercetin dan kaempferol
bance dari fase atas diukur pada 532 nm.
seperti yang disajikan pada Tabel 1. Jumlah quercetin dan
kaempferol yang diamati pada ekstrak daun dewasa adalah
Uji enzim antioksidan ditemukan 795 mg / g dan 216 mg / g masing-masing.
Padahal jumlah quercetin dan kaempferol
Aktivitas Superoksida dismutase (SOD) diuji
diamati dalam ekstrak daun tender ditemukan
menurut metode yang dijelaskan oleh Crapo et al. 22
436,2 mg / g dan 115 mg / g. Di antara ekstrak daun, itu
dalam sel KB, dengan modifikasi. Secara singkat, 20 mL sampel
ekstrak daun dewasa ditemukan menjadi sumber terkaya
Ples dengan jumlah protein yang sama dicampur dengan
fenolik dari ekstrak daun tender. Anti- tertinggi
870 mL larutan A (50 mmol dapar fosfat [pH
Aktivitas oksidan diamati dalam ekstrak daun dewasa
7,8] dengan 0,1 mol asam etilendiamaminetetraasetat,
dari ekstrak daun tender. Pada memperkirakan tingkat
0,001 N NaOH dengan 5 mmol xanthine dan 2 mmol cyto-
senyawa polifenol di setiap fraksi menggunakan
chrome C) dan 20 mL larutan B (50 mmol fosfat
kuersetin standar, fraksi berair ditemukan
buffer phate [pH 7,8] dan 0,2 mmol xanthine
untuk memiliki konten polifenol yang lebih tinggi. Karena itu,
oksidase). Aktivitas enzim dalam sampel dihitung
ekstrak ini digunakan untuk penelitian sepanjang.
dari kurva standar dengan kisaran 0,05 hingga 12,5
unit / mg protein menggunakan enzim SOD (Sigma). Satu unit
aktivitas SOD didefinisikan sebagai konsentrasi enzim Penghambatan kerusakan DNA dalam sel KB
diperlukan untuk menghambat produksi kromogen sebesar 50% dalam Efek 5ekstrak daun terhadap kerusakan DNA
menit dalam kondisi uji. diinduksi dalam sel tumor KB oleh H 2 O 2 dipelajari menggunakan
Aktivitas Catalase (CAT) diuji dengan metode ini uji komet. Fragmentasi DNA dianalisis menggunakan
Aebi 23 dalam sel KB dengan modifikasi. Secara singkat, 50 Asset comet adalah metode sensitif untuk mendeteksi DNA
mL sampel dengan jumlah protein yang sama istirahat untai di sel individu dan sangat efisien dalam
dicampur dengan 1 mL 0,01 mol dapar fosfat (pH biomonitoring manusia dari senyawa alami. Kuantitatif-
7.0) dan H 2 O 2 . Campuran itu segera dibaca kation data komet dilaporkan sebagai TDNA (DNA dalam
pada 240 nm selama 1 menit menggunakan spektrofotometer. ekor sebagai% dari total DNA) dan TMOM (momen ekor)
Perubahan absorbansi dianggap proporsional pada Tabel 2. Hasilnya jelas menunjukkan DNA
untuk pemecahan H 2 O 2 . Aktivitas enzim adalah kerusakan sel yang terpapar H 2 O 2 . Setiap sel memiliki
dinyatakan sebagai satuan protein CAT / mg. penampilan komet, dengan kepala neon yang cerah
Halaman 6
Tabel 2. Uji komet DNA genom sel tumor KB Sel yang diinduksi H 2 O 2 berkurang secara signifikan
tidak diobati dan diobati dengan ekstrak daun M oringa oleifera dikupas ke grup kontrol. Namun, perawatan itu
Pengobatan TDNA TM OM
sel-sel dengan ekstrak daun meningkatkan kadar ini
enzim antioksidan secara signifikan.
Kontrol 11 +1 84 + 11
H2O2 32 + 2 a 320 + 23 a
M LE þ H 2 O 2 12 + 1 b, c 125 + 12 b, c Diskusi
TLE þ H 2 O 2 14 + 2 b, c 129 + 10 b, c
M LE 10 + 2
H 2 O 2 telah lama digunakan di apotek
83 + 11
TLE 9+2 industri kal sebagai agen sterilisasi kuat dan itu adalah
84 + 12
agen pemutihan terkenal. Namun, sudah
Singkatan: MLE: ekstrak daun dewasa, T LE: ekstrak daun lunak,
menemukan bahwa H 2 O 2 memainkan peran penting dalam
T DNA: DNA ekor, T MOM: momen ekor
Nilai-nilai adalah rata-rata + SD rangkap tiga. asi kerusakan DNA yang diinduksi radikal bebas, menginduksi
a Signifikan (p <0,05) vs kelompok kontrol yang tidak diobati. mutasi. 24 H 2 O 2 adalah salah satu ROS utama yang terkait
b Signifikan (p <0,05) vs untuk menanam kontrol.
dengan stres oksidatif. Mudah menembus ke dalam sel
c signifikan (p <0,05) vs ke H 2 O 2 kelompok perlakuan.
dan bereaksi dengan ion logam intraseluler, seperti besi
atau tembaga, untuk menghasilkan radio hidroksil yang sangat reaktif
dan ekor dengan intensitas yang terkait dengan Cals yang berturut-turut menyerang komponen seluler
jumlah kerusakan yang diderita oleh sel. Dalam termasuk lipid, protein dan DNA yang menyebabkan luas
Kelompok perlakuan ekstrak H 2 O 2 ,, ada kecenderungan berbagai penghinaan oksidatif. H 2 O 2 telah dikenal
pengurangan kerusakan DNA di ekor komet, yang menyebabkan kerusakan DNA dalam bentuk untai tunggal
signifikan bila dibandingkan dengan H 2 O 2 kelompok. Itu dan istirahat untai ganda. 25
ekstrak daun Moringa oleifera yang matang dan lembut Polifenol, askorbat dan flavonoid diketahui
secara signifikan mengurangi kejadian komet di bertanggung jawab atas antioksidan dan radikal bebas
sel-sel stres oksidan. memulung potensi. Total aktivitas antioksidan
dan konten fenolik membuktikan ekstrak menjadi
Viabilitas sel sess nilai phytochemical antioksidan yang lebih tinggi,
yang menunjukkan bahwa daun dapat dimanfaatkan sebagai
Uji MTT, uji non-radioaktif banyak digunakan
sumber penting antioksidan alami dengan kesehatan-
untuk mengukur viabilitas dan proliferasi sel. H 2 O 2
potensi perlindungan. Studi sebelumnya juga menunjukkan
menyebabkan penurunan viabilitas sel KB,
antioksidan yang kuat dan aktivitas pemulungan radikal bebas
sedangkan ekstrak daun dewasa dan lunak efektif
ikatan daun kelor oleifera. 26
meningkatkan kelangsungan hidup H 2 O 2 -assaulted sel KB.
Serangan oksidatif terhadap sistem biologis bermanifestasi di
Hasil yang dirangkum dalam Gambar 1 menunjukkan bahwa
tingkat seluler pada biomolekul penting di mana
ekstrak digunakan pada konsentrasi tidak beracun dalam normal
molekul lipid membentuk target utama dan
sel juga menunjukkan efek penghambatan yang signifikan pada
Molekul DNA adalah target akhir. Kerusakan oksidatif
proliferasi sel KB.
usia terhadap DNA dapat menghasilkan beberapa konsekuensi
termasuk mutagenesis, kanker, gangguan terkait usia
Efek ekstrak daun pada lipid per oksidasi dan patologi manusia lainnya. 27 Makanan yang berasal dari tumbuhan,
Efek penghambatan dari ekstrak daun pada H 2 O 2 imbas yang kaya akan antioksidan, diketahui membuat
peroksidasi lipid diamati melalui forma perlindungan terhadap penyakit semacam itu. 28 Dengan demikian,
dari MDA seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2. Tingkat kemungkinan bahwa ekstrak tumbuhan kaya antioksidan dapat melindungi
sel terhadap kerusakan DNA oksidatif.
Konsentrasi MDA dalam sel yang diinduksi H 2 O 2 adalah signifikansi
secara signifikan meningkat dibandingkan dengan sel kontrol. Itu Banyak penelitian telah melaporkan perlindungan terhadap
pengobatan sel dengan ekstrak daun secara signifikan kerusakan DNA oksidatif oleh ekstrak herbal dan formu
mengurangi produksi MDA. lations. Kerusakan oksidatif dimediasi sebagai untai tunggal
istirahat di DNA plasmid PTZ18U super melingkar miliki
telah dilaporkan ditekan oleh 6-gingerol (suatu
Efek ekstrak daun pada enzim antioksidan senyawa nolik pada jahe). 29 H 2 O 2 Kerusakan yang diinduksi
Efek perlindungan dari ekstrak daun pada tingkat untuk phiX174 super coiled DNA juga dilaporkan
dari enzim antioksidan seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3 dikurangi dengan ekstrak Ganoderma lucidum. 30
dan 4 mengungkapkan bahwa tingkat SOD dan CAT di Fenolik, genistein dan resveratrol, menghambat
Halaman 7
Efek daun kelor oleifera pada viabilitas sel KB

120
100
Sebuah
b, c
80 b, c
Sebuah
60 Sebuah
40
Viabilitas sel
20
kontrol H O 2 2 MLE + H O 2 2 TLE + H O 2 2 MLE TLE
Grup
Gambar 1. Pengaruh daun kelor oleifera pada viabilitas sel KB (nilai rata-rata + SD dari 3 percobaan terpisah). a p <
0,05 dibandingkan dengan kontrol, b p <0,05 dibandingkan dengan tanaman kontrol, c p <0,05 dibandingkan dengan sel terkena H 2 O 2 saja.
Efek daun kelor oleifera pada peroksidasi lipid

4
Sebuah
3.5
2.5
b, c b, c
2
1.5
1
MDA / nmoles / mg protein
0,5
0
Grup
Gambar 2. Pengaruh daun kelor oleifera pada peroksidasi lipid (nilai rata-rata + SD dari 3 percobaan terpisah). a p <
0,05 dibandingkan dengan kontrol, b p <0,05 dibandingkan dengan tanaman kontrol, c p <0,05 dibandingkan dengan sel terkena H 2 O 2 saja.
kerusakan yang disebabkan oleh H 2 O 2 dalam DNA plasmid fX-174.pengobatan.

31 33 H 2 O 2 kerusakan DNA yang diinduksi terwujud
Efek ini mungkin terkait dengan pemulungan sebagai komet telah dilaporkan secara signifikan
kegiatan ekstrak yang kaya akan Quercetin dan menurun oleh banyak phytochemical. 34,35 Level dasar
kaempferol. 32 Oleh karena itu, ekstrak Moringa kerusakan DNA oksidatif pada pengobatan dengan quer-
daun oleifera juga ditemukan menawarkan sangat signifikan cetin dan perlindungan asam caffeic didokumentasikan dalam
tidak bisa perlindungan terhadap kerusakan DNA oksidatif di bawah
uji komet. 36
kondisi fisiologis, dalam penelitian ini. Hasil penelitian ini juga sesuai
Elektroforesis gel tunggal (SCG) atau 'komet' dengan laporan di atas yang menunjukkan bahwa
uji adalah fluorescent mikro yang cepat dan sangat sensitif ekstrak daun sangat efektif dalam menangkal
metode scopic untuk memeriksa kerusakan dan perbaikan DNA dikerusakan DNA basal. Berdasarkan data yang diperoleh dari
tingkat sel individu. H 2 O 2 telah ditunjukkan Dalam penelitian ini, komponen-komponennya hadir di Moringa
mempengaruhi DNA secara langsung dalam hal untaian putus. ekstrak daun oleifera mungkin bertanggung jawab untuk mod
Fragmen-fragmen DNA dihasilkan oleh satu untai putus terlambat pembentukan radikal hidroksil dengan bertindak sebagai a
memanifestasikan diri mereka sebagai komet pada H 2 O 2 pemulung langsung. Temuan ini mendukung penggunaan
Halaman 8
Pengaruh daun kelor oleifera pada aktivitas SOD

8
b, c
7
b, c
6
3 Sebuah
Unit / mg protein
2
0
Grup
Gambar 3. Pengaruh daun kelor oleifera pada aktivitas SOD (nilai rata-rata + SD dari 3 percobaan terpisah). a p <0,05
dibandingkan dengan kontrol, b p <0,05 dibandingkan dengan tanaman kontrol, c p <0,05 dibandingkan dengan sel terkena H 2 O 2 saja.
Pengaruh daun kelor oleifera pada aktivitas CAT

90
80 b, c b, c
70
60
50 Sebuah
40
30
Unit / mg protein
20
10
0
Grup
Gambar 4. Pengaruh daun kelor oleifera pada aktivitas CAT (nilai rata-rata + SD dari 3 percobaan terpisah). a p <0,05
dibandingkan dengan kontrol, b p <0,05 dibandingkan dengan tanaman kontrol, c p <0,05 dibandingkan dengan sel terkena H 2 O 2 saja.
Daun kelor oleifera melindungi dari oksidatif daun Moringa oleifera yang matang dan lembut. Itu
Kerusakan DNA. Dengan demikian, dapat disimpulkan bahwa Uji MTT menyediakan metode yang cepat dan serbaguna untuk
Konsumsi daun kelor dapat dipertimbangkan. menilai kelayakan sel. 38 Banyak herbal dan phyto-
ered tidak hanya untuk memerangi kondisi patologis tetapi bahan kimia telah dilaporkan memiliki cytoprotective mereka
juga untuk mempromosikan kesejahteraan umum dan kebaikan efek menggunakan uji MTT. 39 Metanolik
kesehatan. ekstrak dari Areca catechu, Var dulcissima, Paennia
Stres oksidatif pada akhirnya dapat menyebabkan kematian sel suffruticosa, Alpinia officinarum, Glycyrrhiza uralen-
termasuk apoptosis. 37 Dalam penelitian ini, efeknya sis dan cassia Cinnamomum sangat ditingkatkan
ekstrak daun kelor oleifera pada tingkat sur- viabilitas terhadap kerusakan oksidatif yang diinduksi H 2 O 2
vival sel karsinoma KB ditantang dengan H 2 O 2 dalam sel V79-4. 40 Uji MTT dari Platycodon
diikuti menggunakan uji pengurangan MTT. Sel grandiflorum mengungkapkan bahwa itu mengandung polias yang kuat
kelangsungan hidup menurun secara signifikan dengan H 2 O 2 pengobatan
senyawa antikanker cetylenic, yang memamerkan sitoklas.
tetapi meningkat secara nyata pada pengobatan bersama dengan keduanya
toksisitas pada tiga jalur sel kanker manusia (HT-29, Hep
Halaman 9
G 2 dan HRT-18). 41 Tindakan sitotoksik lainnya kapasitas memulung ekstrak. Tes

antioksidan seperti epigallocatechin gallate pada tumor pada garis sel tumor manusia menunjukkan nya
garis sel juga telah dilaporkan. 42 Genistein, sebuah tanaman aktivitas antiproliferatif dan dengan demikian temuan ini
polifenol, menyebabkan sel kanker perut manusia menyarankan Moringa oleifera mungkin bermanfaat sebagai kanker
menjalani apoptosis. 43 agen kemopreventif dan kemoterapi dan
Daun kelor juga menyebabkan oleifera yang signifikan dapat membenarkan penyelidikan lebih lanjut dari kemungkinan lain
pengurangan kelangsungan hidup sel KB, tanpa adanya sifat biologis yang bermanfaat.
dari H 2 O 2 . Wang 44 telah melaporkan efisiensi
senyawa untuk menginduksi apoptosis dalam sel kanker indi Ucapan Terima Kasih
aktivitas antikanker. Mengingat semua hal di atas
Saya berterima kasih kepada M iss Jothipriya dan Inbavalli karena membantu saya dalam hal ini
melaporkan, dapat dibayangkan bahwa Moringa oleifera pergi pekerjaan penelitian dan saya menyatakan tidak ada konflik.
mungkin memiliki sifat antikanker. Oleh karena itu,
efek antioksidan dari herbal pada viabilitas sel bisa
Pendanaan
dijelaskan oleh dua mekanisme yaitu oleh anti-virus langsung
aksi langsung dengan memulung ROS dan anti-virus tidak langsung Penelitian ini tidak menerima hibah khusus dari pendanaan apa pun
agen di depan umum, komersial, atau dari nirlaba
aksi dant melalui induksi antioksidan
sektor.
enzim yang melindungi komunikasi antar sel.
PUT telah digunakan sebagai penanda oksida- yang andal
stres, baik in vitro dan in vivo. Beberapa tanaman Referensi
ekstrak telah terbukti menghambat PUT yang diukur 1. Bohr VA, Stevnsner T, dan DeSouza-Pinto NC. M ito-
oleh tingkat TBARS. ROS dan RNS (reaktif perbaikan DNA chondrial dari kerusakan oksidatif pada ibu-
spesies nitrogen) dapat memulai dan memperbanyak lipid per- sel lian. Gene 2002; 286: 127À134.
oksidasi, yang dimiliki oleh produk akhir MDA 2. Devasagayam TPA, Tilak PC, Bollor KK, Kotaki S,
sifat genotoksik dan mutagenik. 45 lipid peroksi- Saroj S, Ghaskadbi SS, et al. Radikal bebas dan antioksidan
dasi adalah proses kunci dalam banyak peristiwa patologis idants dalam kesehatan manusia, Status Saat Ini dan M asa Depan-
dan merupakan salah satu reaksi yang disebabkan oleh stres oksidatif. pect. J Assoc Physicians India 2004; 52: 794À804.
Peningkatan akumulasi MDA telah dicatat di 3. Saygili EI, Konukogu D, Papila C, dan Akcay T.
Menanggapi H 2 O 2 dan efek sitotoksik H 2 O 2 Kadar vitamin E plasma, vitamin C, dan TBARS
pada sel-sel KB ditunjukkan oleh penghambatan sel yang kuat kolesterol pada pasien pria dengan tumor kolorektal.
pertumbuhan dan pembentukan MDA. Hasil ini menunjukkan Biochem 2003; 68: 325À328.
bahwa ekstrak daun mampu mengurangi H 2 O 2 - 4. Hagen TM , Aw TY, dan Jones DP. Penyerapan Glutathione
menginduksi sitotoksisitas dan peroksidasi lipid. Jadi, itu dan perlindungan terhadap cedera oksidatif pada anak yang terisolasi
mencegah peroksidasi lipid dapat menjelaskan sitopro- sel-sel. Kidney International 1998; 34: 74À75.
properti efektif pada kerusakan membran sel yang disebabkan 5. LaVechhia C, Tavani A, Franceschi S, Levi F, Corrao
oleh kaum radikal. G, dan Negri E. Epidemiologi dan pencegahan oral
Superoksida dismutase dan katalase dapat bertindak sebagai antikanker. Onkologi Lisan 1997; 33: 302À306.
arcinogens dan inhibitor pada saat inisiasi dan promosi / 6. Thompson IM , Colt man Jr CA, Crowley J. Chemopre-
tahap transformasi dalam karsinogenesis dan memiliki a vention percobaan pencegahan kanker prostat. Prostat
peran antioksidan penting dalam kesehatan manusia, dianugerahkan oleh 1997; 33: 217À221.
mereka mencari radikal bebas. 46 Perawatan 7. Tieppo M , Porawski M , Salvados M , M oreira AJ,
dengan ekstrak daun secara signifikan meningkatkan level Collado PS, Gallego JG, dkk. Croton cajucara Benth
dari enzim antioksidan SOD dan CAT. Mereka ekstrak daun memulung DPPH radikal bebas dan stabil
mempertahankan mekanisme pertahanan dan seluler melindungi terhadap stres oksidatif yang disebabkan oleh paraquat.
fluiditas dibuktikan dengan peningkatan nilai-nilai ini Biol Pharm Bull 2006; 29: 161À165.
enzim antioksidan. Hasil penelitian ini menyatakan bahwa 8. Janisch KM , M ilde J, dan Eistner EF. Evaluasi dan
Ekstrak daun kelor dapat bertindak efektif standarisasi sifat antioksidan dua
modulator dalam mengurangi toksisitas dengan meningkatkan Obat India dengan uji uji biokimia. Arznei-
stimulasi enzim dalam sel di bawah tekanan. mittel Forschung 2005; 55: 30À37.
Kesimpulannya,
plasmid hasilnya
dan kerusakan DNAmenunjukkan bahwa keduanya
sel yang disebabkan oleh H 2 O 2 9. Kelawala NS dan Ananthanarayan L. Antioksidan
aktivitas bahan makanan yang dipilih. Int J Food Sci Nutr
dapat dikurangi dengan iterasi ekstrak kelor oleifera 2004; 55: 511À516.
Halaman 10
10. Johnson C. Perspektif klinis pada efek kesehatan 24. Ferrer M , Lamar AS, Ferentes JL, Barbe J, dan Ilagos-
dari M oringa oleifera: tambahan yang menjanjikan untuk keseimbangan tera M . mekanisme antimutagenik Phyllanthys
nutrisi dan kesehatan yang lebih baik. La Canada, California: orbicularsis ketika H 2 O 2 diuji menggunakan Salmonella
Publikasi Kesehatan KOS, 2005, p.910À911. pengujian kadar logam. M utat Res 2002; 517: 251À254.
11. Udupa SL dan Kulkarni PR. Studi banding pada 25. Terinduksi kerusakan Thibodeau PA dan Paquett B. DNA
efek beberapa obat asli pada normal dan oleh katekol estrogen di hadapan tembaga (II):
penyembuhan steroid-depresi. Fitot 1998; 69: 507À510. generasi spesies oksigen reaktif dan meningkatkan
12. Guevara AP, Vargas C, dan Uy M . Antiinflamasi ment oleh NADH. Radic Biol M ed 1999; 27:
dan aktivitas antitumor dari ekstrak biji M alung- 1367À1369.
geuy, M oringa oleifera L. (M oringaceae). Filipina 26. Chumark P, Khunawat P, Sanvarinda Y, Phornchira-
J Sci 1996; 125: 175À184. slip S, M orales NP, dkk. In vitro dan ex vivo anti-
13. Prakash AO, Pathak S, Shukla S, dan M athur R. Pre oksidan properti, hypolipideamic dan
dan memposting perubahan implantasi pada uterus tikus: aktivitas antiatherosclerotic dari ekstrak air kelor
M enanggapi M oringa oleifera Lam. Ekstrak. Sci Anc oleifera. Lam pergi. J Ethnopharmacol 2008; 116:
Kehidupan 1988; 8: 49À54. 439À446.
14. Faizi BS, Siddiqui R, Saleem S, Siddiqui K, Afttab 27. Aviram M . Tinjauan studi manusia tentang oksidatif
AH, dan Gilani AH. Karbamasi teretilasi penuh dan kerusakan dan perlindungan antioksidan yang terkait dengan kardio-
glikosida tiokarbamat hipotensif dari M oringa penyakit pembuluh darah. Radic Res 2000 Gratis; 33:
oleifera. Phytochem 1995; 58: 957À963. 385À397.
15. Rao CV, Ojha SK, dan efek M ehrotra S. Analgesik dari 28. Trichopoulou A dan Vasilopoulou E. M editerania
Ekstrak daun kelor oleifera pada tikus. Prosiding diet dan umur panjang. Br J Nutr 2000; 84: S205ÀS209.
Kongres Dunia Kedua tentang Pengembangan Bioteknologi 29. Ippoushi K, Azuma K, Ito H, Horic H, dan Higashio H.
KASIH DARI Jamu, NBRI, Lucknow, India, [6] -gingerol menghambat sistem oksida nitrat secara aktif
2003; hal.42À43. J774-1 makrofag tikus dan mencegah peroksi nitrit
16. Sreelatha S dan Padma PR. Aktivitas antioksidan dan reaksi oksidasi dan nitrasi yang diinduksi. Sci hidup
total kandungan fenolik daun kelor di Spanyol 2003; 73: 3427À3437.
dua tahap jatuh tempo. M akanan nabati Hum Nutr 2009; 30. Lee JM , Kwon H, Jeong H, Lee JW, Lihat SY, Kembali SJ,
64: 303À311. et al. Penghambatan peroksidasi lipid dan oksidatif
17. Nikolova M , Berkov S, dan Ivancheva S. A TLC cepat Kerusakan DNA oleh Ganoderma lucidum. Phytother Res
metode analisis aglikon flavonoid eksternal di Indonesia 2001; 15: 245À249.
eksudat tanaman. ACTA Chromo 2004; 14: 10À114. 31. M enangkan W, Cao Z, Peng X, Trush M A, dan Li Y. Berbeda
18. M istuda H, Yasumoto K, dan Iwami K. Antioksidan efek genistein dan resveratrol pada DNA oksidatif
aksi senyawa Indole selama autoksidasi kerusakan in vitro. M utat Res 2002; 513: 113À120.
asam linoleat. Nikon Elyo Shokurya Gakkai –si 32. Verma R, Vijayakumar M , Chandra S, dan Chandana
1996; 19: 210À214. V. Sifat antioksidan in vitro dan in vivo berbeda
19. Igarashi M dan M iyazawa T. Penghambat pertumbuhan fraksi daun M oringa oleifera. M akanan Chem
efek asam linoleat terkonjugasi pada hepatoma manusia Toxicol 2009; 47: 2196À2201.
garis sel Hep G2, diinduksi oleh perubahan asam lemak dalam 33. Grasso S, Scito C, Cardile V, Gulino R, dan Renir M .
sel. Biochem Biophys Acta 2001; 1530: 162À171. Respons adaptif terhadap stres yang disebabkan oleh hiper-
20. Singh NP, M cCoy M T, Tice RR, dan Schneider EC. mia atau hidrogen peroksida pada manusia dalam fibroblas. Exp
Teknik sederhana untuk kuantisasi level rendah Biol M ed 2003; 228: 491À498.
Kerusakan DNA dalam sel individu. Exp Cell Res 1988; 34. Johnson M K dan Loo G. Efek epigallocatechin
175: 184À196. gallate dan quercetin tentang kerusakan oksidatif pada seluler
21. Okhawa H, Ohishi N, dan Yagi K. Assay untuk lipid per- DNA. M utat Res 2000; 459: 211À218.
oksida dalam jaringan hewan oleh reaksi asam tiobarbiturat. 35. Heaton PR, Reed CF, M ann SJ, Ransley R, Stevenson
Anal Biochem 1979; 95: 351À358. J, Charlton CJ, dkk. Peran antioksidan terhadap diet
22. Crapo JD, M cCord JM , dan Fridovich I. Persiapan melindungi terhadap kerusakan DNA pada anjing dewasa. J Nutr
dan uji dismutase superoksida. M etode Enzymol 2002; 132: 1720SÀ1724S.
1978; 53: 382–393. 36. Szeto XT dan Benzie IF. Efek dari anti-diet
23. Aebi H. Catalase in vitro. M etode Enzymol 1984; 105: Dansa pada DNA manusia ex vivo. Radic Res 2002 Gratis;
121–126. 36: 113À118.
Halaman 11
37. M ishra NC dan Kumar S. Apoptosis: mitokondria 42. Ishino A, M ita S, Watanabes S, dan Sakagami H.
perspektif tentang kematian sel. Indian J Exp Biol 2005; Efek obat antikanker, logam dan antioksidan
43: 25À34. pada aktivitas sitotoksik dari epigallocatechin gallate.
38. Hansen HB, Nielson SE, dan Berg K. Pemeriksaan ulang Anticancer Res 1999; 19: 4343À4348.
dan pengembangan lebih lanjut dari pewarna yang tepat dan cepat 43. Zhou HB, Chen JJ, Wang WX, Cai JT, dan Du Q.
metode untuk mengukur pertumbuhan sel dan pembunuhan sel. Apoptosis sel karsinoma lambung primer manusia
J Immunol M eth 1989; 119: 203À210. diinduksi oleh genistein. World J Gastroenterol 2004;
39. M oongkarndi P, Kosem N, Luansatana O, Jongsomboo- 10: 1822À1825.
kusol S, dan Pongpan N. Aktivitas antiproliferatif dari 44. Wang X. Peran mitokondria yang berkembang dalam apop-
Thai obat menanam ekstrak di manusia tosis. Gen dan Perkembangan 2001; 15: 2922À2933.
garis sel adenokarsinoma payudara.Fitot2004; 75: 375À377. 45. Huang HX, Helzlsouer KJ, dan Appel LJ. Efek dari
40. Lee SE, Hwang HJ, Ha JS, Jeong HS, dan Kim JH. vitamin C dan vitamin E pada kerusakan DNA oksidatif.
Pemutaran ekstrak tanaman obat untuk antioksidan Kanker Epidemiol Biomarker Sebelumnya 2000; 9:
aktivitas. Life Sci 2003; 73: 167-179. 647À652.
41. Lee JY, Hwang WI, dan Lim ST. Antioksidan dan 46. Allen RG. Spesies reaktif oksigen dan antioksidan
kegiatan antikanker ekstrak organik dari Platyco- tanggapan selama perkembangan: paradoks metabolik
don grandiflorum A. M engurai akar. J Ethnophar- diferensiasi sel. Proc Soc Exp Biol M ed
macol 2004; 93: 409À415. 1991; 196: 117À118.

Toksikologi Manusia &amp; Eksperimental

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Toksikologi Manusia &amp; Eksperimental

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

10/24/2019 Toksikologi Manusia & Eksperimental