Uji katalase dilakukan secara kualitatif dengan melihat adanya gelembung O2 yang

dihasilkan oleh aktifitas katalase. Uji Katalase dilakukan dengan meneteskan hidrogen peroksida
(H2O2) pada tabung reaksi yang bersih. Fraksi dimasukkan pada tabung reaksi yang sudah
ditetesi hidrogen peroksida. Hasil yang positif ditandai oleh terbentuknya gelembung-gelembung
udara (Anief. 2009).
Aktivitas katalase pada mikroba dapat diketahui dengan terbentuknya gelembung-
gelembung gas O2. Hasil uji kualitatif enzim katalase ekstraseluler yang telah dilakukan
menunjukkan hasil yang positif. Hal ini ditandai dengan adanya gelembung-gelembung gas pada
masing-masing tabung reaksi yang ditetesi H2O2 dimana mengindikasikan bahwa fraksi seluler
merupakan isolat penghasil katalase positif, yaitu fraksi yang dapat menghasilkan enzim
katalase. Adanya aktivitas katalase dapat diketahui dengan terbentuknya gelembung-gelembung
gas O2. Hidrogen peroksida (H2O2) dapat terdekomposisi oleh enzim katalase yang dapat
dihasilkan suatu mikroorganisme. (Austin. 2010). Pada percobaan isolasi fraksi mitokondria
hasil yang didapat tidak sesuai literatur, seharusnya pada isolasi fraksi mitokondria didapatkan
adanya gelembung gas setelah ditetesi H2O2, tetapi yang didapat pada percobaan tidak ada
gelembung gas, hal ini dikarenakan terjadinya kesalahan seperti kurang telitinya pada
penambahan sukrosa atau pada saat dimasukan ke dalam sentrifus, karena bersih tidaknya tabung
sentrifus berpengaruh terhadap hasil percobaan.
2H2O2 → 2H2O + O2
Pada mikroorganisme, H2O2 dapat didekomposisi oleh katalase dalam mitokondria sel
Katalase tersebut berfungsi untuk melindungi sel dari efek toksik hidrogen peroksida
(Austin. 2010).

SIMPULAN
Fraksi seluler hati ayam dapat diisolasi dengan menggunakan alat sentrifus. Cara isolasi
bergantung pada komponen yang akan diisolasi. Berdasarkan prinsip sentrifus yang dapat
mengendapkan fraksi yang diinginkan pada kecepatan dan waktu tertentu. Fraksi mitokondria
dapat diisolasi dari supernatant homogenat hati yang disentrifugasi pada 5000 g selama 15 menit.
Fraksi inti dapat diisolasi dari pelet yang disentrifugasi pada 1500 g selama 10 menit. Fraksi
mikrosom dapat diisolasi dari supernatant dari isolasi mitokondria yang disentrifugasi pada
25000 rpm selama 60 menit.
 Daftar pustaka
Anief, M. (2009) Biologi Molekuler . Gadjah Mada University Press, Yogyakarta

Austin, T.X. (2010) Manitol salt agar. Austin Community College District. http: //
www.austincc.edu/microbugz/html/mannitol_s alt_agar.html. [22-03-10].