2 | EKSPERIMENTAL

Penyelidikan ini dilakukan oleh MedPharm Ltd (Guildford, UK) sesuai dengan
Konferensi Internasional tentang Harmonisasi Farmasi Kualitas Sistem Q10,
2008.

2.1 | HPLC Untuk Kuantisasi Flurbiprofen

Metodologi HPLC dikembangkan menggunakan sistem LC2030C HPLC
(Shimadzu UK Ltd, Milton Keynes, Inggris) dan Empower 3 Perangkat Lunak
Pengolah Data (Waters UK, Elstree, UK). Implementasi awal dari metode HPLC
dilakukan dengan flurbiprofen dalam sampel pengencer generik (metanol-air)
untuk memastikan bahwa metode itu cocok untuk analisis sampel pendahuluan
sebelum validasi, dan untuk memberikan informasi bahwa metode itu mungkin
cocok untuk validasi. Standar kalibrasi awal dianalisis tiga kali dan standar QC
dianalisis enam kali.
Mengikuti perkembangan penerima dan ekstraksi cairan, metode HPLC divalidasi
menggunakan kedua larutan sebagai sampel pengencer berdasarkan kriteria
penerimaan European Medicines Agency (EMA) pedoman pada metode
bioanalytical validasi (EMEA / CHMP / EWP / 192.217 / 2009 Rev. 1 Corr. 2) dan
US Bioanalytical Validasi Metode [Food and Drug Administration (FDA)
Pedoman Industri, September 2013 dan Mei 2001].

2.2 | Obat Uji

Standar kerja laboratorium flurbiprofen (Reckitt Benckiser, diproduksi di
Bangplee, Thailand) digunakan untuk penelitian ini.

2.3 | Kalibrasi / Standar QC

Standar untuk implementasi awal adalah 0,1-100 μg / mL (60:40 v / v metanol-
air). Mengikuti pemilihan penerima yang cocok dan ekstraksi cairan, kalibrasi
akhir dan kontrol kualitas (QC) standar untuk validasi disiapkan dari flurbiprofen
yang terpisah larutan stok (500 μg / mL). Standar kalibrasi berkisar dari 0,045
hingga 100,0 μg / mL (100, 85, 60, 40, 6, 0,15, 0,045 μg /mL) dalam cairan
penerima dan cairan ekstraksi dan standar QC berkisar dari 0,045 hingga 85,0 μg /
mL (85, 60, 40, 0,15, 0,045 μg / mL) pada penerima dan ekstraksi cairan.

2.4 | Jaringan Faring Manusia

Jaringan faring manusia yang secara etis bersumber dari mayat disediakan oleh
Ethical Tissue (University of Bradford, UK; Komite Etika Penelitian referensi
220367) dan disimpan pada suhu −20 ° C sebelum digunakan. Jaringan dipotong
menjadi ~ 0,5-1 cm2 sebelum digunakan dalam pengembangan penerima dan
ekstraksi cairan dan metode ekstraksi.