ALKALOID

Diah Lia Aulifa

Diki P wibowo
Definisi
Alkaloid adalah sekelompok senyawa kimia yang terbentuk secara alami yang
sebagian besar mengandung atom nitrogen

Istilah alkaloid pertama kali disebutkan pada tahun 1819 oleh W. Meissner,
apoteker dari Halle. Dia mengamati bahwa senyawa ini muncul "seperti alkali"
dan menamakannya alkaloid.

Alkaloid adalah senyawa organik siklik yang menghasilkan nitrogen dalam

keadaan oksidasi negatif dengan distribusi terbatas di antara organisme hidup
Properties
Sebagian besar alkaloid mengandung oksigen dalam struktur molekulnya;
senyawa-senyawa tersebut biasanya kristal tidak berwarna pada kondisi
sekitar.
Beberapa alkaloid berwarna, seperti berberin (kuning) dan sanguinarine
(oranye).
Sebagian besar alkaloid adalah basa lemah, tetapi beberapa, seperti
theobromine dan theophilin, bersifat amfoter.

Banyak alkaloid larut dalam air tetapi mudah larut dalam pelarut organik.

Sebagian besar alkaloid memiliki rasa pahit atau beracun ketika tertelan
Klasifikasi Alkaloid
aktivitas biologis dan ekologisnya

Klasifikasi chemotechnology dari alkaloid

Sebagai sumber nitrogen
yang penting dan sangat
besar, mempunyai sifat Klasifikasi bentuk-biosintetik dari alkaloid
farmakologis yang sangat
spesifik dan beragam :
Klasifikasi Biosintetik

Klasifikasi Kimia

Klasifikasi Farmakologis
Klasifikasi lanjutan…

Dari sudut pandang aktivitas biologis, dimungkinkan untuk membagi

alkaloid menjadi (1) molekul netral atau basa lemah (misalnya, laktam
seperti risinin, N-oksida tertentu seperti indekindine), (2) alkaloid yang
berasal dari hewan (misalnya , alkaloid anuran, mamalia dan arthropoda),
(3) alkaloid laut, (4) alkaloid lumut, (5) alkaloid jamur dan bakteri,
dan (6) alkaloid non alami (dimodifikasi secara struktural atau analog).
Klasifikasi lanjutan…

Alkaloid dapat dibagi menjadi tiga kelompok besar berdasarkan

hubungannya dengan Inovasi di bidang kimia dan teknologi: (1)
alkaloid alami, (2) alkaloid biomimik dan bionik, dan (3) alkaloid
sintetis. Divisi ini melayani kebutuhan ilmiah dan praktis dengan baik.
Klasifikasi lanjutan…

Dari sudut pandang struktural, alkaloid dibagi sesuai dengan bentuk,

struktur, dan prekursor. Ada tiga jenis utama alkaloid: (1) alkaloid sejati,
(2) protoalkaloid, dan (3) pseudoalkaloid. Alkaloid dan protoalkaloid
sejati berasal dari asam amino, sedangkan pseudoalkaloid tidak berasal
dari senyawa ini
Klasifikasi lanjutan…
Alkaloid sejati berasal dari asam amino dan berbagi cincin heterosiklik dengan nitrogen.
Alkaloid ini adalah zat yang sangat reaktif dengan aktivitas biologis bahkan dalam dosis
rendah. Semua alkaloid sejati memiliki rasa pahit dan muncul sebagai padatan putih, dengan
pengecualian nikotin, yang merupakan cairan cokelat. Alkaloid sejati membentuk garam yang
larut dalam air. Selain itu, kebanyakan dari mereka adalah zat kristal yang terdefinisi dengan
baik yang menyatu dengan asam untuk membentuk garam.

Alkaloid sejati dapat terjadi pada tanaman (1) dalam keadaan bebas, (2) sebagai garam,
dan (3) sebagai N-oksida. Prekursor utama alkaloid sejati adalah asam amino seperti L-
ornithine, L-lysine, L phenylalanine / L-tyrosine, L-tryptophan, dan L-histidine. dopamin,
morfin dan usambarensin
Protoalkaloid adalah senyawa, di mana atom N yang berasal dari asam
amino bukan bagian dari ikatan heterosiklik. Alkaloid tersebut
termasuk senyawa yang berasal dari L-tirosin dan L-tryptophan.

Protoalkaloid adalah mereka yang memiliki cincin tertutup, menjadi

sempurna tetapi secara struktural alkaloid. Mereka membentuk
sebagian kecil dari semua alkaloid. Hordenine, mescaline, dan
yohimbine adalah contoh yang baik dari jenis alkaloid ini.
Pseudoalkaloid adalah senyawa, kerangka karbon dasar yang
tidak berasal dari asam amino. Mereka berasal dari prekursor
atau postcursors (turunan dari proses degradasi) asam amino.
Mereka juga dapat dihasilkan dari reaksi aminasi dan
transaminasi dari jalur berbeda yang terhubung dengan prekursor
atau postcursors dari asam amino.
Klasifikasi lanjutan…

Berbasis Bio Sintetis: Menurut alkaloid ini diklasifikasikan

berdasarkan jenis prekursor atau senyawa pembangun yang
digunakan oleh tanaman untuk mensintesis struktur
kompleks. mis. Morphine, papaverine, narcotine,
tubocurarine & calchicine dalam basa turunan fenilalanin
tirosin.
Klasifikasi lanjutan…

Berbasis farmakologis: Aktivitas atau respons farmakologisnya.

Sebagai contoh:
Alkaloid analgesik misalnya Morfin Antimalaria misalnya Kina
Klasifikasi lanjutan…
Klasifikasi Kimia:
1. Alkaloid Pyrrolidine misalnya, Hygrine
2. Alkaloid Piperidin misalnya, Lobeline
3. Alkaloid Pyrrolizidine misalnya, Senecionine
4. Alkaloid tropane misalnya, Atropin
5. Alkalinoid quinolin misalnya, Kina
6. Alkalioid Isoquinolin misalnya, Morfin
7. Alkaloid indol misal, Ergometrine
8. Alkaloid imidazol misalnya, Pilocarpine
9. Alkaloid purin misalnya, Kafein
10.Alkaloid steroid misalnya, Solanidine
11.Alkinoid amino misalnya, Ephedrine
12.Alkaloid Diterpene misalnya, Aconitine
Klasifikasi lanjutan…
1. Pyrrole dan Pyrrolidines

Hygrine
Stachydrine
2. Pyridine dan Piperidines: Pyridines Piperidines

Piridin

Piperin Nikotin Arekolin

Piperidin

Konin Lobelin Ricinin

3. Alkaloid tropana

Atropin Hyoscine

Hyoscyamine Cocaine
4. Kuinolin dan

Quinidine
Quinine

Cinchonidine
Cinchonine
5. Isoquinolines

Cephaline

Berberine
Papaverin
Noscapin

Emetine
Galanthamine
(+)- Tubocurarine
6. Alkaloid indol

Vincristine
Yohimbine

Ergotamine

Strychnine

Physostigmine
7. Imidazole

Pilocarpine
8. Purin

Theobromine

Caffein

Theophylline
9. Alkaloid terpenoid: (alkaloid Diterpene)

Aconitine
10. Alkaloid steroid

Solanidine
Conessine
11. Phenanthren:

Thebaine
Morphine

Codein
ISOLASI
Dalam tumbuhan biasanya mengandung campuran alkaloid yang kompleks.
Langkah-langkah yang terlibat dalam isolasi alkaloid dapat diringkas sebagai berikut:

1. Kehadiran alkaloid dalam tanaman dipastikan dengan menggunakan

berbagai reagen alkaloid.

2. Langkah selanjutnya adalah pemisahan jumlah alkaloid yang relatif

kecil dari sejumlah besar bahan tanaman asing.

3. Langkah terakhir adalah pemisahan dan pemurnian alkaloid

individu dari campuran mentah.
Ekstraksi dan Isolasi merupakan langkah yang panjang dalam suatu penelitian.
Kemungkinan penyimpangan dari hasil penelitian dapat bersumber dari metode ekstaksi.

Sejumlah metode ekstraksi alkaloid dapat ditemukan dalam literatur dengan prosedur yang
berbeda-beda, sesuai dengan pengetahuan, waktu dan tingkat perkebangan teknoologi.

Para peneliti telah melakukan dan mengembangkan prosedur isolasi yang terbaik,
sayangnya tidak semua prosedur yang dikembangkan dapat diterima.

Untuk analisis alkaloid, ekstraksi dan isolasi senyawa alkaloid murni sangat diperlukan.
Oleh karena itu dalam proses ekstraksi perlu diperhatikan beberapa hal:
a. Pengetahuan tenteng pelarut pengelusi yang dapat menarik alkaloid secara signifikan
b. Manipulasi campuran pelarut sedemikain rupa agar alkaloid tidak rusak
c. Penghilangan senyawa-senyawa lain yang tidak diinginkan secara bertahap dari
campuran (Lipid, Protein, Karbohidrat, hormon, dll)
 Serbuk Bahan
Metode Staas otto: Penghilangan lemak
dengan pelarut non polar
Bahan Tanaman Bebas Lemak

Lembabkan dengan NH3 (Alkaloid bebas)

Ekstraksi menggunakan pelarut
organic (Kloroform, eter dll)
Ekstrak, Dipekatkan

Dilarutkan dalam Larutan Asam (Alkaloid garam)

Fasa Air Fasa Organik Pengotor

Basakan dengan Ammonia atau

Na Bi-karbonat atau larutan KOH

Fasa Air Fasa organik (Alkaloid bebas)

Uapkan sampai kering

Alkaloid Mentah
Prosedur Ekstraksi Alkaloid

Alkaloids :Chemistry, Biology, Ecology, and ApplicationsSecond edition By Dr. Tadeusz Aniszewski Helsinki, Finland
1. Prosedur Eksraksi Alkaloid Quinolizidine
Wysocka dan Przybil menyajikan metode ekstraksi alkaloid Quinolizidine yang cukup efisien,
mereka mengamati dan mengembangkan metode ini, yang mencakup langkah-langkah
ekstraksi sebagai berikut :
 Maserasi biji Lupin yang berada di tanah menggunakan 25% aq.KOH selama sekita 36
jam, dimaksudkan untuk menghancurkan jaringan dan melepaskan alkaloid yang berbentuk
garamnya
 Penambahan tanah diatom untuk menyerap kelabihan air pada bubur alkali
 Masa bubur alkali yang telah di tambahkan pasir diatom dituangkan ke dalam karung linen
dan di tempatkan dalam ekstraktor diikuti oleh elusi dengan etil asetat, kemudian metilen
klorida.
 Ektrak yang terkondensasi dengan volume sekitar 100 cm3, dan alkaloid dielusi dengan
asam hidroklorida 2N.
 Untuk menghilangkan lemak, larutan asam alkaloid di ekstraksi menggunakan
petroleumeter (Titik didih 40-60 C) sampai lemak-lemak telah hilang dari lapisan organik
 Setelah penghilangan lemak, larutan berair alkaloid di buat basa dengan penambahan
50%.KOH kemudian di elusi dengan eter dan metilen klorida.
2. Prosedur Ekstraksi Alkaloid Quinolizidine

Wink, Meissner, dan Witte menggunakan protokol berikut untuk ekstraksi alkaloid
quinolizidine dan untuk anlisi dan deteksinya GLC-MS. Adapun prosedur nya adalah sebagai
berikut:
 Penghancuran bahan tanaman.
 Homogenisasi bahan tanaman dengan HCl 0,5 selama 30 menit pada suhu kamar.
 Sentrifugasi selama 10 menit pada 10.000 g.
 Alkalisasi supernatan dengan menambahkan amonia atau NaOH 2 M.
 Klarifikasi campuran dengan memindahkannya ke kolom extrelut (millipore).
 Elusi dengan CH2Cl2 di kolom extrelut.
 Penguapan pelarut dan penggunaan untuk analisis alkaloid oleh GLC-MS.
3. Prosedur Ekstraksi Alkaloid Quaterner

Metode ekstraksi dengan kloroform-metanol yang digunakan oleh Hou, Wu, Liu, Wang,
Chen, Chen , dan Sun dapat dibagi menjadi langkah-langkah berikut:
 Bahan alkaloid (mis, bagian tanaman) dihaluskan.
 Persiapan larutan standar alkaloid, standar dibuat dengan metanol (konsentrasi 1 mg
mL-1).
 Larutan kloroform-etanol disiapkan (perbandingan 1: 1).
 Bahan tanaman berupa bubuk, dan 1 g bahan alkaloid bubuk (tanaman) diekstraksi
dengan 50 mL kloroform-etanol dengan cara merendam semalaman.
 Ekstrak diuraikan selama 30 menit dalam rendaman ultrasonik untuk ekstraksi.
 Larutan yang diekstraksi dipekatkan menjadi 2 mL dalam evaporator rotasi vakum.
 Aliquot 2 mL siap untuk deteksi alkaloid dengan peralatan yang akan disiapkan.
4. Prosedur Ekstraksi Alkaloid Oksindol

Untuk tujuan deteksi alkaloid menggunakan HPLC, prosedur ekstraksi berikut telah
digunakan oleh LopezAvila, Benedicto, dan Robaugh.

Ekstraksi dilakukan dengan menggunakan karbon dioksida superkritis dan dengan karbon
dioksida superkritis dimodifikasi dengan 10% metanol. Metanol persis sama dengan yang
digunakan dalam HPLC. Langkah-langkah berikut ini dilakukan:
 Sampel dihancurkan.
 0,75 g sampel bubuk direndam dalam 5 mL metanol.
 Waktu perendaman adalah 72 jam pada suhu kamar.
 Pemisahan supernatan.
 Konsentrasi supernatan.

Metode ini digunakan dalam kasus ekstraksi dan deteksi alkaloid oksindol dari ramuan,
Uncaria tormentosa
5. Prosedur Ekstraksi Alkaloid Quinolizidin untuk Deteksi Menggunakan
Kromatografi Gas (KG)

Allen, Greirson, dan Harris, dari Laboratorium Kimia Pertanian, Pusat Kimia di
Australia Barat, menggunakan langkah-langkah berikut untuk melakukan alkaloid
lupin untuk deteksi menggunakan KG:
 Penggerusan halus biji lupin.
 Semalaman merendam 2 g tepung biji lupin dengan trichloroaceticacid (30 mL).
 Sentrifugasi ekstrak.
 Basifikasi ekstrak dengan penambahan 4,5 mL 10 N NaOH.
 Ekstraksi (3 kali) menggunakan metilen klorida.
 Penambahan standar internal.
 penguapan metilen klorida.
 Rekonstitusi alkaloid dalam etil asetat.
 Penyimpanan dengan trimethylsilylimidazole siap untuk deteksi GC.

Metode ini dilaporkan efisien dan cocok untuk semua spesies lupin
6. Prosedur Ekstraksi Alkaloid Quinolizidin untuk Deteksi
Menggunakan ELISA

Allen, Greirson, dan Harris, dari Laboratorium Kimia Pertanian, Pusat Kimia di Australia
Barat, menggunakan langkah-langkah berikut untuk ekstraksi alkaloid lupin untuk deteksi
menggunakan ELISA:

 Penggerusan halus biji lupin.

 perendam 2 g tepung biji lupin dengan asam trikloroasetat (30 mL) selama 24 jam.
 Sentrifugasi ekstrak.
 Netralisasi alikuot dengan penambahan 75 μL dari NaHCO310%.
 Pengenceran dengan 6 mL Trine buffered saline (pH 7, 4).
 Aplikasi untuk pelat mikroliter.
 Inkubasi dengan antibodi ELISA.

Metode ini dilaporkan lebih efisien dalam ekstraksi dan deteksi alkaloid tetapi kurang tepat
untuk deteksi dengan kromatografi Gas
7. Prosedur Eksraksi Alkaloid Prolizidin
Bolechova ', Cˇ a´slavsky´, Pospı´chalova´, dan Kosubova´ melaporkan prosedur terpilih untuk ekstraksi
pirolizidin Alkaloid (PA) dalam pakan. Mereka menentukan PA menggunakan sistem kromatografi cair
ultraperformance (UPLC) yang digabungkan ke sebuah tandem spektrometri massa yang dilengkapi dengan
antarmuka electrospray (ESI). Langkah-langkah mereka untuk mengekstrak alkaloid untuk penentuan ini adalah
sebagai berikut:

 Penggilingan dan pengayakan sampel (ukuran partikel 1 mm).

 Homogenisasi sampel.
 Menyimpan sampel di lokasi gelap (suhu kamar, kondisi kering).
 Persiapan standar alkaloid (50 μg / mL).
 Penyimpanan standar alkaloid pada –20 ° C.
 Persiapan campuran standar stok dengan asetonitril 50%.
 Menempatkan sampel studi 2,5 g ke dalam tabung propilen untuk ekstraksi.
 Ekstraksi dengan 10 mL asetonitril dan 10 mL asam format 0,1% dalam air.
 Penambahan 4 g MgSO4 dan 1 g NaCl ke dalam campuran ekstraksi.
 Tube bergetar selama 1 menit dan sentrifugasi selama 5 menit pada 5.000 rpm.
 Pengenceran 0,5 mL fasa organik atas dengan 0,5 mL air deionisasi.
 Pencampuran dan penyaringan sampel ini melalui filter membran 0,2 μm.
 Menggunakan ekstrak akhir dalam penentuan alkaloid UPLC-MS / MS.
8. Prosedur Ekstraksi Alkaloid Kuinin

Flieger dan Czajkowska-Z˙ elazko mengekstraksi dan menententukan kina dari sampel plasma
darah manusia. ekstraksi kina dilakukan dengan langkah-langkah berikut:

 Persiapan sampel plasma kosong dengan kina.

 Menggambar sampel penelitian darah ke dalam tabung yang mengandung heparin sebagai
antikoagulan.
 Sentrifugasi sampel selama 15 menit (1800g).
 Transfer plasma ke tabung reaksi.
 Pembekuan sampel pada –20 ° C.
 Persiapan campuran plasma (100 μL alikuot plasma, 1 ml cairan ionik berair [BMIM Cl, kons.
Dari 15 hingga 25% berat], 0,5 ml larutan kina, 0,5 mL air dengan K3PO4) dan transfer ke 5 ml
tabung sentrifugal.
 Pencampuran dan sentrifugasi campuran.
 Persiapan sampel (1 mL) untuk penentuan dalam sistem.
9. Prosedur Ekstraksi Alkaloid

Xie, Wang, Kang, Hu, Su, Huang, Che, dan Guo menggunakan ekstraksi alkaloid yang dibantu
microwave dari Stephania sinica. langkah-langkah berikut:

 Bahan bubuk Stephania sinica.

 Campurkan 0,5 g bubuk Stephania sinica dengan 12 mL etanol 65% dalam wadah.
 Iradiasi campuran dengan kekuatan gelombang mikro (150 W) pada 60 ° C selama 90 detik.
 Pendinginan ekstrak.
 Filtrasi ekstrak.
 Pencucian residu dengan pelarut ekstraksi.
 Transfer larutan ke dalam labu ukur 25 mL dan penambahan etanol 65% ke volume.
 Sentrifugasi pada 10.000 rpm selama 5 menit.
 Persiapan supernatan (20 μL) untuk deteksi.
10. Prosedur Ekstraksi UEA Alkaloid

Xie, Wang, Kang, Hu, Su, Huang, Che, dan Guo juga melaporkan ekstraksi ultrasonic
assisted (UEA) alkaloid dari Stephania sinica. Ekstraksi berisi langkah-langkah berikut:

 Bahan bubuk Stephania sinica.

 Penempatan 0,5 g bubuk Stephania sinica dalam gelas labu berbentuk kerucut 25 mL.
 Ultrasonication dalam 20 mL etanol 65% selama 30 menit pada 45 KHz dalam
peralatan ultrasonik.
 Filtrasi ekstrak.
 Pencucian residu dengan pelarut ekstraksi.
 Transfer larutan ke dalam labu ukur 25 mL dan penambahan etanol 65% ke volume.
 Sentrifugasi pada 10.000 rpm selama 5 menit. Persiapan supernatan (20 μL) untuk
deteksi.
11. Prosedur Ekstraksi dengan Alat Soxhlet dari Alkaloid

Xie, Wang, Kang, Hu, Su, Huang, Che, dan Guo juga melaporkan juga ekstraksi
Soxhlet dari alkaloid dari Stephania sinica.10 Ekstraksi berisi langkah-langkah
berikut:

 Bahan bubuk Stephania sinica.

 Penempatan 0,5 g bubuk Stephania sinica dalam peralatan Soxhlet
 Ekstraksi dengan etanol (100 mL) dalam penangas air pada 78 ° C selama 6 jam.
 Filtrasi ekstrak di bawah tekanan rendah.
 Redissolving dari ekstrak dengan 25 mL etanol.
 Sentrifugasi pada 10.000 rpm selama 5 menit.
 Persiapan supernatan (20 μL) untuk deteksi.
12. Prosedur HRE Esktraksi Alkaloid

Liang, Tian, Li, Gao, Zhang, Gao, dan Song menggunakan ekstraksi refluks panas (HRE)
dari alkaloid dari Portulaca oleracea. Ekstraksi berisi langkah-langkah berikut:

 Serbuk bahan Portulaca oleracea.

 Penempatan 10 g bubuk ke dalam labu gelas 250 mL.
 Ekstraksi dengan metanol (100 mL) dalam penangas air pada suhu 80 ° C selama 2 jam.
 Ekstraksi kedua dengan metanol (100 mL) dalam bak air pada suhu 80 ° C selama 2
jam.
13. Prosedur Ekstraksi Infusi Alkaloid

Liang, Tian, Li, Gao, Zhang, Gao, dan Song juga menggunakan ekstraksi
infus alkaloid dari Portulaca oleracea. Ekstraksi berisi langkah-langkah
berikut:

 Serbuk bahan Portulaca oleracea.

 Penempatan 10 g bubuk ke dalam labu berbentuk kerucut 250 mL.
 Ekstraksi dengan metanol (100 mL) pada suhu kamar selama 2 jam.
 Ekstraksi kedua dengan metanol (100 mL) pada suhu kamar selama 2 jam.
14. Prosedur Ekstraksi Alkaloid Bisindole

Beniddir, Martin, Dau, Rasoanaivo, Gue´ritte, dan Litaudon mengekstraksi beberapa

alkaloid dari Gonioma malagasi. Ekstraksi berisi langkah-langkah berikut:

 Serbuk dari bahan kulit kayu Gonioma malagasi.

 Ekstraksi 250 g bubuk dengan etanol (3x1000 mL) pada suhu 38 ° C.
 Konsentrasi ekstrak etanol.
 Pengasaman ekstrak etanol dengan 10% HCl.
 Ekstraksi dengan CH2Cl2.
 Basifikasi residu berair dengan larutan NH4OH 10% hingga pH 9.
 Ekstraksi dengan CH2Cl2
PEMURNIAN
• Kristalisasi langsung dari pelarut
• Perawatan asam basa berulang
• Teknik kromatografi
• Mis: Partisi, pertukaran ion dan kromatografi kolom
• Metode presipitasi
• Contoh: AuCl3, PtCl4, Mayer’s Reagent,
Deteksi Selektif
• Berdasarkan prosedur isolasi yang diikuti, seseorang dapat
menyimpulkan dengan tingkat kepastian apakah senyawa yang
diisolasi adalah alkaloid atau tidak
• Skema ekstraksi asam / basa khususnya menghasilkan ekstraksi
alkaloid yang agak spesifik. Selain itu, beberapa pereaksi yang
bereaksi khusus dengan alkaloid telah dijelaskan, misalnya, pereaksi
Dragendorff, kalium iodoplatinate, pereaksi Mayer.
UJI KIMIA
• Tes Dragendorff: Untuk 2-3 mL larutan alkaloid tambahkan
beberapa tetes reagen Dragendorff (larutan kalium bismuth
iodide). Endapan coklat oranye terbentuk.
• Tes Mayer: Untuk 2–3 mL larutan alkaloid tambahkan
beberapa tetes reagen Mayer (larutan kalium merkuri
iodida). Endapan coklat putih terbentuk.
• Tes Wagner: Untuk 2-3 mL larutan alkaloid tambahkan
beberapa tetes reagen Wagner (larutan yodium-kalium
iodida). Endapan coklat kemerahan terbentuk
Kromatografi Lapis Tipis
• 1.1. ADSORBEN
• 1.1.1. Gel silika
• 1.1.2. Aluminium oksida
• 1.1.3. Lain-lain
1.2. SISTEM SOLVENT

Semua jenis kombinasi pelarut dapat dibuat untuk mencapai pelarut terbaik untuk pemisahan.
Namun, peningkatan kompleksitas komposisi sistem pelarut menyebabkan peningkatan masalah
untuk reproduktifitas hasil analitik

reproduktifitas, sistem pelarut komponen tunggal lebih disukai. Namun, hanya sangat jarang
sistem pelarut tersebut dapat ditemukan yang akan memberikan pemisahan KLT yang
memuaskan dari alkaloid yang dimaksud

Polaritas sistem pelarut dapat bervariasi dengan penambahan komponen non-polar atau sangat
polar ke pelarut polaritas menengah. Seringkali pengubah dasar (amonia, dietilamin, dan
bahkan trietilamin dan trietanolamin) ditambahkan untuk mengurangi tailing karena
chemisorpsi alkaloid.
1.3. TANGKI DAN PENGEMBANGAN

Teknik pengembangan naik dengan pelat TLC dalam tangki di mana atmosfer jenuh dengan
uap dari sistem pelarut dengan melapisi dinding dengan kertas saring banyak digunakan

Jika pelarut dengan titik didih di bawah 100 ° C digunakan, saturasi dicapai dalam 5 menit.
Jika dinding tidak dilapisi kertas saring, saturasi mungkin memakan waktu beberapa jam.
Dengan beberapa pengecualian, semua pemisahan TLC yang dijelaskan untuk alkaloid telah
dilakukan dengan teknik ini.
1.4. APLIKASI SAMPEL

Pemisahan TLC yang baik sangat tergantung pada penerapan sampel.

Ukuran titik akhir yang diperoleh setelah pengembangan kromatogram terkait dengan
ukuran tempat pada aplikasi, Ini tergantung pertama pada perawatan dengan mana
sampel diterapkan, tetapi juga pada volume sampel yang diterapkan, pelarut yang
digunakan untuk melarutkan sampel dan karakter sampel (basa alkaloid atau garam).

Semakin kecil volume sampel yang diterapkan, semakin mudah pula diperoleh
bintik-bintik kecil. Ukuran sampel yang diterapkan pada titik awal biasanya dalam
kisaran 0,1-10 pg, yang memberikan perbandingan jumlah sampel dengan jumlah
adsorben dari 1: 1000 sampai 1: 10.000.
Karakter senyawa yang akan dianalisis harus diperhitungkan sebelum aplikasi.
Alkaloid dapat diaplikasikan sebagai basa atau sebagai garam. Ketika diterapkan
sebagai garam, beberapa masalah dapat meningkat dengan sistem pelarut netral,
yaitu. , pembentukan tailing atau double spot. Namun, alkaloid yang diaplikasikan
sebagai garam dapat diubah menjadi basa bebas bila diolah dengan setetes basa
sebelum pengembangan, Dengan sistem pelarut yang bersifat basa atau asam,
tidak ada masalah yang akan terjadi ketika alkaloid diaplikasikan sebagai garam

Pilihan pelarut yang tepat untuk sampel yang akan diterapkan dalam KLT
ditentukan oleh polaritas alkaloid (garam atau basa) tetapi stabilitas alkaloid juga
harus diperhitungkan. Karena karakter donor proton kloroform, ia merupakan
pelarut yang cocok untuk basa alkaloid. Untuk lebih banyak senyawa polar,
sejumlah kecil etanol atau metanol dapat ditambahkan. Untuk garam alkaloid,
alkohol lebih disukai