IDENTIFIKASI, KESERAGAMAN SEDIAAN, DAN

PENETAPAN KADAR TABLET ALOPURINOL

DISUSUN OLEH
Kelompok 1

Dya Iqtha Poetri 1506767233

Hana Rotua Selvi 1506767031
Fariz Muhammad 1506729172
Ilham Kurniawan 1306479904
Nusaibah Muthiah 1506677471
Wike Widasari 1506721951

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS INDONESIA
DEPOK
2019
 KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa atas rahmat dan karunia-Nya sehingga
penulis dapat menyelesaikan pembuatan makalah tentang “Identifikasi, Keseragaman Sediaan,
dan Penetapan Kadar Tablet Alopurinol” untuk memenuhi tugas mata kuliah Analisis Farmasi.
Ungkapan terima kasih tak lupa kami sampaikan kepada semua pihak yang telah membantu
dalam kelancaran penyusunan makalah ini, terutama kepada dosen kami, Dr. Drs. Hayun, M.Si.
yang telah memberikan bimbingan dan masukan demi kesempurnaan makalah ini.
Penyusunan makalah ini bertujuan untuk memberikan pengetahuan kepada pembaca
mengenai cara mengidentifikasi tablet alopurinol, mengetahuin keseragaman sediaan serta
memahami cara penetapan kadar baku sesuai farmakope dan cara alternatifnya.
Penulis menyadari bahwa dalam pembuatan makalah ini masih terdapat kekurangan.
Untuk itu, besar harapan penulis kepada pembaca agar dapat memberikan saran dan pendapat
yang dapat membangun kearah perbaikan dan kesempurnaan dalam pembuatan makalah yang
lebih baik nantinya. Semoga makalah ini memberikan informasi bagi masyarakat dan
bermanfaat untuk pengembangan wawasan dan peningkatan ilmu pengetahuan bagi kita semua.

Depok, 1 September 2019

Penulis

i
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ............................................................................................................... i

DAFTAR ISI.............................................................................................................................ii
DAFTAR GAMBAR .............................................................................................................. iii
DAFTAR TABEL .................................................................................................................. iii
BAB 1 PENDAHULUAN ........................................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang ..................................................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ................................................................................................................ 1
1.3 Tujuan .................................................................................................................................. 1
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .............................................................................................. 2
2.1 Monografi Bahan Baku Alopurinol ..................................................................................... 2
2.2 Identifikasi ........................................................................................................................... 2
2.3 Keseragaman Sediaan .......................................................................................................... 3
2.3.1 Keseragaman Kandungan ................................................................................................. 5
2.3.2 Keragaman Bobot ............................................................................................................. 6
2.4 Penetapan Kadar .................................................................................................................. 7
BAB 3 METODOLOGI......................................................................................................... 10
3.1 Identifikasi Bahan Baku dan Tablet Alopurinol (IR) ........................................................ 10
3.1.1 Identifikasi Bahan Baku .................................................................................................. 10
3.1.2 Identifikasi Tablet Alopurinol......................................................................................... 10
3.2 Keseragaman Sediaan ........................................................................................................ 11
3.3 Penetapan Kadar Tablet Alopurinol Berdasarkan Monografi ........................................... 12
3.4 Penetapan Kadar Alternatif Tablet Alopurinol (Spektro UV) ........................................... 14
3.5 Penetapan Kadar Alternatif Tablet Alopurinol (Titrasi Bebas Air) ................................... 15
BAB 4 PEMBAHASAN ......................................................................................................... 17
4.1 Identifikasi Bahan Baku dan Tablet Alopurinol ................................................................ 17
4.1.1 Identifikasi Bahan Baku .................................................................................................. 17
4.1.2 Identifikasi Tablet Alopurinol......................................................................................... 17
4.2 Uji Keseragaman Sediaan .................................................................................................. 17
4.3 Penetapan Kadar Tablet Alopurinol................................................................................... 19
BAB 5 PENUTUP .................................................................................................................. 21

ii
5.1 Kesimpulan ........................................................................................................................ 21
5.2 Saran .................................................................................................................................. 21
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................................. 22

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Struktur Kimia Alopurinol ................................................................................... 3

Gambar 2.1 Spektum IR Alopurinol.........................................................................................3

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Tabel interpretasi bilangan gelombag IR Alopurinol................................................3

Tabel 2.2 Penggunaan Uji Keseragaman Kandungan dan Uji Keragaman Bobot .................... 4
Tabel 2.3 Persyaratan Penyimpangan Bobot Rata-rata ............................................................. 6
Tabel 3.1 Persyaratan Keragaman Bobot Tablet ..................................................................... 12
Tabel 4.1 Hasil Uji Keragaman Bobot Tablet Alopurinol ...................................................... 18

iii
 BAB 1
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Analisis farmasi merupakan analisis senyawa kimia yang digunakan dalam bidang
farmasi. Analisis yang dapat dilakukan meliputi identifikasi, kemurnian senyawa aktif dan
bahan tambahan, kadar dan penetapan kadar. Tujuan dilakukannya analisis farmasi adalah
untuk menentukan kualitas dan mutu dari bahan dan sediaan farmasi atau obat.
Alopurinol adalah oral uricosuric agent yang efektif dalam pengobatan hiperurimia yang
berhubungan dengan encok dan kondisi lainnya. Aksinya berbeda dari bahwa uricosuric agent
lain yang menurunkan kadar asam urat serum dengan meningkatkan ekskresi urin dari asam
urat. Alopurinol mengurangi kedua serum dan kadar asam urat urin dengan menghalangi
pembentukan asam urat. Sediaan tablet alopurinol di pasaran dengan dosis 100 mg tablet
digunakan untuk menurunkan kadar asam urat dalam darah. Obat ini bekerja dengan cara
menghambat enzim xanthine oksidase sehingga mengurangi pembentukan asam urat dan juga
dapat menghambat sintesis purin. Enzim xanthine oksidase adalah enzim yang bertanggung
jawab untuk oksidasi hypoxanthine dan xanthine. Obat ini digunakan untuk pencegahan
serangan gout kronis, mengobati sindrom lisis tumor dalam kemoterapi karena kemoterapi
sering menyebabkan terjadinya hyperuricemia akut berat, mengobati batu ginjal dengan
komponen asam urat dan kalsium oksalat (nefrolitiasis asam urat).
Agar alopurinol dapat memberikan efek farmakologis sesuai yang diinginkan, dilakukan
analisis terhadap sediaan tablet, meliputi identifikasi, keseragaman, dan penetapan kadar.
Identifikasi dilakukan untuk memastikan bahwa sediaan mengandung senyawa aktif alopurinol
dalam sediaan masih memenuhi persyaratan Farmakope Indonesia dan aman untuk
dikonsumsi. Penetapan kadar dilakukan untuk memastikan bahwa kadar alopurinol yang
terkandung dalam sediaan sesuai dengan yang tertera pada label dan etiket sehingga obat dapat
memberikan efek yang berkhasiat bagi tubuh.
1.2. Rumusan Masalah
1. Bagaimana cara identifikasi sediaan tablet alopurinol ?
2. Bagaimana cara menguji keseragaman sediaan pada tablet alopurinol?
3. Bagaimana cara menentukan kadar alopurinol ?
1.3. Tujuan
1. Mengetahui cara identifikasi sediaan tablet alopurinol ?
2. Mengetahui cara menguji keseragaman sediaan pada tablet alopurinol?
3. Mengetahui cara menentukan kadar alopurinol ?
1
 BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Monografi Bahan Baku Alopurinol

a. Struktur

Gambar 2.1 Struktur Kimia Alopurinol

b. Nama Kimia
1H -Pirazol[3,4-d]pyrimidin-4-ol
c. Rumus Molekul
C5H4N4O
d. Pemerian
Serbuk halus, putih, hingga hampir putih; berbau lemah
e. Kelarutan
Sangat sukar larut dalam air dan dalam etanol, larut dalam larutan kalium dan dalam
natrium hidroksida; praktis tidak larut dalam kloroform dan dalam eter.
f. Golongan
Penghambat xantin oksidase
g. Kegunaan
Menurunkan kadar asam urat dalam darah (antigout)

2.2 Identifikasi
Uji identifikasi bertujuam untuk membantu dalam melakukan verifikasi identitas suatu zat
aktif dalam bentuk bahan dan sediaannya, dalam hal ini bahan yang dimaksud adalah
alopurinol dan sediaan tablet alopurinol. Uji identifikasi yang dapat dilakukan berdasarkan
rekomendasi kompendial Farmakope Indonesia Edisi V dan USP 39 adalah dengan
menggunakan metode pengujian spektrum inframerah.

2
 Gambar 2.2 Spektrum IR Alopurinol
Tabel 2.1 Interpretasi bilangan gelombang IR Alopurinol
Gugus Bilangan Gelombang (cm-1)
NH 3080-3166
C=O 1587
C=C 1700

2.3 Keseragaman Sediaan

Untuk menjamin konsistensi suatu sediaan, masing-masing satuan dalam bets harus
mempunyai kandungan zat aktif dalam rentang sempit yang mendekati kadar yang tertera
dalam etiket. Satuan sediaan didefinisikan sebagai bentuk sediaan yang mengandung dosis
tunggal atau bagian dari suatu osis zat aktif pada masing-masing satuan. Persyaratan
keseragaman sediaan tidak berlaku untuk suspensi, emulsi atau gel dalam wadah satuan dosis
yang ditnjukkan untuk pemakaian eksternal pada kulit (Farmakope Indonesia ed. V, 2014 )
Keseragaman sediaan didefinisikan sebagai derajat keseragaman jumlah zat aktif dalam
satuan sediaan. Persyarata yang ditetapkan dalam uji keseragaman sediaan berlaku untuk
masing-masing zat aktif yang terkandung dalam satuan sediaan yang engandung satu atau lebih
zat aktif kecuali yang dinyatakan lain dalam FI (Farmakope Indonesia ed. V, 2014 ).
Keseragaman sediaan ditetapkan dengan salah satu dari dua metode, yaitu keragaman
bobot dan keseragaman bobot sesuai tabel A. Uji keseragaman kandungan berdasarkan pada
penetapan kadar masing-masing kandungan zat aktif dalam satuan sediaan untuk menentukan
apakah kandungan masing-masing terletak dalam batasan yang ditentukan. Metode
keseragaman kandungan dapat digunakan untuk semua kasus (Farmakope Indonesia ed. V,
2014 ).

3
 Tabel 2.2. Penggunaan Uji Keseragaman Kandungan dan Uji Keragaman Bobot
untuk Sediaan
Bentuk Sediaan Tipe Sub tipe Dosis perbandinagn zat aktif
> 25 mg dan <25 mg dan <
>25% 25%
Tablet Tidak bersalut Keragaman Keseragaman
bobot kandungan
Salut Selaput Keragaman Keseragaman
bobot kandungan
Lainnya Keseragaman Keseragaman
kandungan kandungan
Kapsul Keras Keragaman Keseragaman
bobot kandungan
Lunak Suspensi, Keseragaman Keseragaman
emulsi, gel kandungan kandungan
Larutan Keragaman Keragaman
bobot bobot
Sediaan padat Komponen Keragaman Keragaman
dalam dosis tunggal bobot bobot
tunggal
Multi Larutan beku Keragaman Keragaman
komponen kering dalam bobot bobot
wadah akhir
Lainnya Keseragaaman Keseragaman
kandungan kandungan
Larutan dalam Keragaman Keragaman
wadah satu bobot bobot
dosis dan dalam
kapsul lunak
Lainnya Keseragaman Keseragaman
kandungan kandungan

4
 Keragaman bobot diterapkan pada bentuk sediaan berikut (Farmakope Indonesia ed. V,
2014 ):
1. Larutan dalam wadah satuan dosis dan dalam kapsul lunak.
2. Sediaan padat (termasuk serbuk, granul dan sediaan padat steril) yang dikemas
dalam wadah dosis tunggal dan tidak mengandung zat tambahan aktif atau inaktif.
3. Sediaan padat (termasuk sediaan padat steril) yang dikemas dalam wadah dosis
tunggal dengan atau tanpa zat tambahan aktif atau inaktif yang disiapkan dari
larutan asal dan dibeku-keringkan dalam wadah akhir dan pada etiket dicantumkan
metode pembuatan.
4. Kapsul keras, tablet tidak bersalut dan tablet salut selaput mengandung zat aktif 25
mg atau lebih yang merupakan 25% atau lebih terhadap bobot.
Uji keseragaman kandungan dipersyaratkan untuk semua bentuk sediaan yang tidak
memenuhi kondisi bentuk sediaan yang diberlakukan uji keragaman bobot (Farmakope
Indonesia ed. V, 2014 ).

2.3.1. Keseragaman Kandungan

Tes ini hanya berlaku apabila jumlah bahan aktif yang dinyatakan dalam tablet, kapsul,
serbuk oral, suspensi oral tunggal atau supositoria adalah 5 mg atau kurang atau 5% atau kurang
dari total formulasi. Pada tablet salut enteri dan tablet sugar coated di mana uji untuk
keseragaman bobot untuk sediaan dosis tunggal tidak berlaku, atau untuk serbuk injeksi atau
infus intravena di mana kandungan bahan aktif yang dinyatakan adalah 40 mg atau kurang. Tes
ini berlaku untuk semua suspensi dosis tunggal untuk injeksi (The International Pharmacopeia,
2018).
Untuk tablet tertentu, kapsul, serbuk oral, suspensi oral dosis tunggal, supositoria atau
bubuk untuk injeksi atau infus dengan kekuatan lebih tinggi daripada yang ditunjukkan dalam
monograf individu yang relevan, dan untuk mana jumlah bahan aktif yang dinyatakan berada
di luar ambang di atas. Persyaratan apa pun untuk keseragaman kandungan yang termasuk
dalam monografi khusus tidak berlaku (The International Pharmacopeia, 2018).
Keseragaman kandungan memiliki nilai penerimaan yang dihitung berdasarkan rumus
berikut :
|𝑀 − 𝑋̅| + 𝑘𝑠
(Farmakope Indonesia ed. V, 2014 )

5
2.3.2 Keragaman Bobot
Keragaman bobot yaitu ukuran penyimpangan bobot tablet terhadap bobot rata-rata dari
sejumlah tablet yang masih diperolehkan menurut persyaratan yang ditentukan Farmakope
Indonesia, memberikan batasan penyimpangan dengan variasi berdasarkan bobot tablet yang
dikehendaki. Kontrol terhadap bobot tablet secara teratur dalam selang waktu tertentu, pada
proses pembuatan tablet, distribusi ukuran granul yang tidak normal akan mengakibatkan
granul mengalir kurang bebas, menimbulkan adanya kecenderungan partikel-partikel granul
memisah menjadi lapisan-lapisan dengan ukuran berbeda selama mengalir melalui hopper pada
saat penabletan, sehingga variasi bobot tablet yang dihasilkan semakin bertambah.
Keragaman bobot diterapkan pada bentuk sediaan berikut :
1. Larutan dalam wadah satuan dosis dan dalam kapsul lunak.
2. Sediaan padat (termasuk serbuk, granul dan sediaan padat steril) yang dikemas dalam
wadah dosis tunggal dan tidak mengandung zat tambahan aktif atau inaktif.
3. Sediaan padat (termasuk sediaan padat steril) yang dikemas dalam wadah dosis tunggal
dengan atau tanpa zat tambahan aktif atau inaktif yang disiapkan dari larutan asal dan
dibeku-keringkan dalam wadah akhir dan pada etiket dicantumkan metode pembuatan.
4. Kapsul keras, tablet tidak bersalut dan tablet salut selaput mengandung zat aktif 25 mg
atau lebih yang merupakan 25% atau lebih terhadap bobot.
Tablet tidak bersalut harus memenuhi syarat keragaman bobot yang ditetapkan sebagai
berikut: Timbang 20 tablet, hitung bobot rata–rata tiap tablet. Jika ditimbang satu persatu, tidak
boleh lebih dari 2 tablet yang masing-masing bobotnya menyimpang dari bobot rata-ratanya
lebih besar dari harga yang ditetapkan kolom A, dan tidak satu tablet pun yang bobotnya
menyimpang dari bobot rata-ratanya lebih dari harga yang ditetapkan kolom B. Jika tidak
mencukupi 20 tablet, dapat digunakan 10 tablet; tidak satu tabletpun yang bobotnya
menyimpang lebih besar dari bobot rata-rata yang ditetapkan kolom A dan tidak satu tabletpun
yang bobotnya menyimpang lebih besar dari bobot rata-rata yang ditetapkan kolom B.
Tabel 2.3 Persyaratan Penyimpangan Bobot Rata-Rata
Penyimpangan bobot rata-rata (%)
Bobot rata-rata
A B
25 mg atau kurang 15% 30%
26 mg – 150 mg 10% 20%
151 – 300 mg 7,5% 15%
Lebih dari 300 mg 5% 10%

6
 Untuk penetapan keseragaman sediaan dengan cara keragaman bobot, pilih tidak
kurang dari 30 satuan, dan lakukan sebagai berikut untuk sediaan yang dimaksud. Untuk tablet
tidak bersalut, timbang saksama 10 tablet, satu per satu, dan hitung bobot rata-rata. Dari hasil
penetapan kadar, yang diperoleh seperti yang tertera dalam masing-masing monografi, hitung
jumlah zat aktif dari masing-masing dari 10 tablet dengan anggapan zat aktif terdistribusi
homogen. Kecuali dinyatakan lain dalam masing-masing monografi, persyaratan keseragaman
dosis dipenuhi jika jumlah zat aktif dalam masing-masing dari 10 satuan sediaan seperti yang
ditetapkan dari cara keseragaman bobot atau dalam keseragaman kandungan terletak antara
85,0% hingga 115,0% dari yang tertera pada etiket dan simpangan baku relatif kurang dari atau
sama dengan 6,0%.
Jika 1 satuan terletak di luar rentang 85,0% hingga 115,0% seperti yang tertera pada
etiket dan tidak ada satuan terletak antara rentang 75,0% hingga 125,0% dari yang tertera pada
etiket, atau jika simpangan baku relatif lebih besar dari 6,0% atau jika kedua kondisi tidak
dipenuhi, lakukan uji 20 satuan tambahan. Persyaratan dipenuhi jika tidak lebih dari 1 satuan
dari 30 terletak diluar rentang 85,0% hingga 115,0% dari yang tertera pada etiket dan tidak ada
satuan yang terletak di luar rentang 75,0% hingga 125,0% dari yang tertera pada etiket dan
simpangan baku relatif dari 30 satuan sediaan tidak lebih dari 7,8%.
Tablet yang tidak dilapisi dan tablet yang dilapisi film yang diformulasikan
mengandung 5% atau lebih bahan aktif harus memenuhi tes berikut. (Pharmacopeia
International, 2018)

2.4 Penetapan Kadar

a. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi merupakan teknik pemisahan berdasarkan fase diam
berupa padatan dan fase gerak berupa cairan. Pemisahan dicapai melalu partisi, adsorpsi, atau
proses pertukaran ion tergantung jenis fase diam yang digunakan. Fase diam yang digunakan
umumnya adalah silika yang dimodifikasi atau butiran polimerik. Butiran dibuat dengan
penambahan hidrokarbon rantai panjang. Kolom kromatografi termasuk baja tahan karat
berlapis dan kolom polimer diisi dengan fase diam. Panjang dan diameter dalam kolom
mempengaruhi pemisahan (Farmakope Indonesia Edisi V, 2014). Fase gerak merupakan
pelarut atau campuran pelarut yang secara umum harus mempunyai sifat murni, tidak bereaksi
dengan kolom, sesuai dengan detector, dapat melarutkan cuplikan, selektif terhadap komponen,
viskositas rendah, dan dapat memisahkan zat dengan baik (Harmita, 2014). Peralatan
kromatografi cair terdiri dari wadah yang berisi fase gerak, pompa untuk mendorong fase gerak
7
masuk kedalam sistem dengan tekanan tinggi, injektor untuk memasukkan sampel kedalam
fase gerak, kolom kromatografi, detektor, dan perangkat pengumpul data. Sistem pengolah data
berupa komputer berbasis sistem yang mengontrol parameter KCKT, menerima dari detektor,
dan memonitor kinerja sistem kromatografi (fase gerak, suhu, tekanan, dan lain-lain).
Komponen yang terelusi mengalir ke detektor, dan dicatat sebagai puncak-puncak yang secara
keseluruhan disebut sebagai kromatogram.
Analisis kromatogram dapat dilakukan secara kuantitaif dan kulitatif
1. Analisis kualitatif
Metode terbaik untuk analisis KCKT kualitatif adalah metode waktu retensi. Data
waktu retensi bersifat khas, tetapi tidak spesifik. Hal ini berarti bahwa lebih dari satu
komponen zat mempunyai waktu retensi yang sama.
2. Analisis kuantitatif
Luas puncak proporsional dengan jumlah sampel yang diinjeksikan dan dapat
digunakan untuk menghitung konsentrasi.

b. Spektrofotometer UV-Vis
Spektrofotometer dapat digunakan untuk mengukur besarnya energi yang diabsorpsi
atau diteruskan. Jika radiasi monokromatik melewati larutan yang mengandung zat yang dapat
menyerap, radiasi ini akan dipantulkan, diabsoprsi oleh zat, dan sisanya ditransmisikan.
Spektrum UV-Visibel berada pada panjang gelombang (λ) 3x10-5 cm. Spektrofotometri UV-
Visibel digunakan terutama untuk analisis kuantitatif, tetapi dapat juga digunakan untuk
analisis kualitatif. Pada analisis kualitatif, proses yang dilakukan adalah membandingkan λ
maksimum, membandingkan serapan (A), daya serap (a) dan 𝐸11 %
𝑐𝑚
serta membandingkan
spektrum serapan.
Beberapa keuntungan dari metode ini antara lain: sensitif, batas deteksinya rendah,
mudah, akan tetapi memiliki kelemahan yaitu perlu perlakuan awal untuk menghilangkan
unsur-unsur pengganggu dan menggunakan beberapa macam bahan kimia sebagai pereaksi.
Untuk memperoleh data pengujian yang valid, diperlukan validasi metode analisis dengan
parameter yaitu akurasi, presisi, batas deteksi, selektivitas, linearitas kisaran konsentrasi.

c. Titrasi Bebas Air

Titrasi bebas air (TBA) banyak digunakan dalam penetapak kadar berbagai zat dengan
sifat asam lemah atau basa lemah. Sejumlah besar zat farmasi asam lemah dapat dititrasi secara

8
efektif dengan memanfaatkan pelarut non-air yang cocok dengan titik akhir yang tajam.
Spektrum luas dari senyawa organik tersebut meliputi: anhidrida, asam, asam amino, asam
halida, enol (yaitu, barbiturat), xantin, sulfonamida, fenol, imida dan garam organik dari asam
anorganik.
Kekuatan yang nyata suatu asam atau basa ditentukan oleh kemampuannya bereaksi
denganpelarut. Pada dasarnya dapat dibedakan empat jenis pelarut, yaitu pelarut aprotik,
pelarut amfiprotik(bersifat asam dan basa), pelarut protogenik (bersifat asam), dan pelarut
protofilik (bersifat basa).
1. Protogenic solvent, elarut yang dapat melepaskan proton apabila terdisosiasi, misalnya
asam asetat dan asam sulfat
2. Protophylic solvent, pelarut yang dapat menerima proton misalnya anhdrida asetat
3. Amphiprotic solvent, pelarut yang dapat melepaskan dan menerima proton misalnya air
dan alcohol
4. Aprotic solvent, pelarut yang tidak mempunyai tendensi untuk melepaskan atau
menerima proton misalnya klorofom dan hidrokarbon.

Reaksi yang terjadi pada titrasi bebas air dapat diterangkan dengan konsep Bronsted
dan Lowry, yaitu asam adalah pemberi proton sedangkan basa adalah yang akan menerima
proton dari asam, begitu juga sebaliknya. Pada titrasi bebas air indikator bereaksi dengan H+
atau melepaskan H+, masing-masing disertai dengan terjadinya perubahan warna. Perubahan
warna sangat tergantung pada jenis sampel. Indikator yang dipilih adalah yang memperlihatkan
perubahan warna yang tajam dekat dengan titik ekuivalen.

9
 BAB 3
METODE

3.1 Identifikasi Bahan Baku dan Tablet Alopurinol (IR)

3.1.1 Identikfikasi Bahan Baku
a. Spektroskopi Inframerah
a. Alat:
1. Spektroskopi Inframerah FTIR-IR 8300/8700 Perkin Elmer

b. Bahan:
1. Serbuk Alopurinol
2. Alopurinol BPFI
3. KBr

c. Langkah kerja:
1. Menyiapkan baku pembanding (Alopurinol BPFI) yang telah dilakukan
pengeringan dalam hampa udara suhu 1050C selama 5 jam sebelum digunakan
2. Zat yang ingin diidentifikasi didispersikan ke dalam kalium bromide P untuk
dijadikan sampel
3. Lakukan pengujian menggunakan alat spektrofotometri inframerah, spektrum
menunjukkan maksimum yang sama seperti pada Alopurinol BPFI.

3.1.2 Identifikasi Tablet Alopurinol

a. Alat:
2. Timbangan
3. Mortir dan gelas ukur
4. Gelas ukur
5. Erlenmeyer
6. Spektroskopi Inframerah FTIR-IR 8300/8700 Perkin Elmer

10
 b. Bahan:
4. Serbuk Alopurinol
5. Alopurinol BPFI
6. Natrium hidroksida 0,1 N
7. Asam asetat 1 N
8. Etanol mutlak P
9. Eter P
10. KBr

Berdasarkan Farmakope Indonesia Edisi V tahun 2014, identifikasi tablet alopurinol

dengan prosedur sebagai berikut:
1. Sejumlah serbuk tablet ditimbang setara dengan 50 mg alopurinol dan kemudian
digerus
2. Sejumlah 10 ml natrium hidroksida 0,1 N ditambahkan, kemudian campuran
disaring
3. Filrat yang diperoleh kemudian diasamkan dengan asam asetat 1 N, kemudian
didiamkan selama 10-15 menit sampai terbentuk endapan
4. Endapan yang terbentuk dicuci dengan 3ml etanol mutlak P sedikit demi sedikit,
kemudian dicuci dengan 4 ml eter P
5. Endapan dibiarkan kering di udara selama 15 menit, kemudian dikeringkan pada
suhu 1050C selama 3 jam
6. Endapan yang diperoleh memenuhi identifikasi seperti yang tertera pada
alopurinol

3.2 Keseragaman Sediaan

Keseragaman sediaan didefinisikan sebagai derajat keseragaman jumlah zat aktif dalam
satuan sediaan. Metode keseragaman sediaan yang digunkan pada tablet Alopurinol 100 mg
ialah keragaman bobot. Kali ini uji keragaman bobot dapat mewakili keseragaman kandungan
karena tablet mengandung zat aktif lebih dari 25 mg atau yang merupakan 25% atau lebih
terhadap bobot (Farmakope V, 2014).

a. Alat
1. Timbangan analitik
2. Kalkulator

11
b. Bahan :
1. 30 Tablet Alopurinol 100 mg

c. Langkah kerja
1. Siapkan alat dan bahan
2. Kalibrasi timbangan analitik
3. Ambil 20 tablet Alopurinol 100 mg
4. Timbang 20 tablet satu persatu
5. Hitung bobot rata-rata tablet.
6. Hitung penyimpangan bobot rata-rata.
7. Kriteria keseragaman sediaan yang memenuhi syarat iala tidak ada 2 tablet yang masing-
masing menyimpang dari bobot rata-rata lebih besar dari harga yang ditetapkan pada
kolom “A” tabel 1 dan tidak ada satu pun yang menyimpang dari bobot rata-rata lebih
dari harga pada kolom “B” tabel 1.
8. Jika perlu dapat diulang dengan 10 tablet lainnya dan tidak boleh ada satu tablet pun
yang bobotnya menyimpang lebih besar dari bobot rata-rata yang ditetapkan pada kolom
“A” tabel 1 maupun kolom “B” tabel 1.

Tabel 3.1. Persyaratan Keragaman Bobot Tablet

Bobot rata-rata Penyimpangan bobot rata-rata (%)
A B
< 25 mg 15% 30%
26 mg - 150 mg 10% 20%
150 mg - 300 mg 7,5% 15%
>300 mg 5% 10%

3.3 Penetapan Kadar Tablet Alopurinol Berdasarkan Monografi

Berdasarkan Farmakope Indonesia edisi V tahun 2014, persyaratan tablet alopurinol
mengandung zat aktif berupa alopurinol tidak kurang dari 93,0% dan tidak lebih dari 107,0%
dari jumlah yang tertera pada etiket. Penetapan kadar dilakukan dengan metode Kromatografi
Cair Kinerja Tinggi fase terbalik, di mana pemisahan dilakukan pada sistem yang
menggunakan fase diam bersifat non polar dan fase gerak yang bersifat polar. Berikut ini
merupakan metode penetapan kadar Tablet Alopurinol berdasarkan FI V:

12
a. Penyiapan Bahan
Fase Gerak : Larutan amonium fosfat monobasa 0,05 M (catatan tidak
boleh ada sisa fase gerak dalam kolom. Sesudah digunakan cuci
kolom dengan aliran air selama 20 menit, kemudian dilanjutkan
dengan metanol P selama 20 menit)
Larutan Baku Internal : Larutkan lebih kurang 50 mg hipoksantin P dalam 10 ml
natrium hidroksida 0,1 N, kocok selama 10 menit, hingga larut.
Encerkan dengan air hingga 50 ml. Buat larutan pada saat akan
digunakan
Larutan Baku : Timbang seksama lebih kurang 50 mg Alopurinol BPFI
(Alopurinol BPFI; lakukan pengeringan dalam hampa udara
pada suhu 105‫ ﹾ‬selama 5 jam sebelum digunakan), masukkan
kedalam labu tentukur 50-ml, tambahkan 10 ml natrium
hidroksida 0,1 N, kocok selama 10 menit, encerkan dengan air
sampai tanda. Masukkan 4,0 ml larutan ini dan 2,0 ml Larutan
baku Internal ke dalam labu tentukur 200-ml, encerkan dengan
Fase gerak sampai tanda. Buat larutan pada saat akan
digunakan.
Larutan Uji : Timbang dan serbukkan tidak kurang dari 20 tablet. Timbang
saksama sejumlah serbuk setara dengan lebih kurang 50 mg
alopurinol, masukkan ke dalam labu tentukur 50-ml, tambahkan
10 ml natrium hidroksida 0,1 N, kocok selama 10 menit,
tambahkan air sampai tanda. [Catatan: Penetapan selanjutnya
tidak boleh ditunda]. Saring, buang 10 ml filtrat pertama.
Masukkan 4,0 ml larutan ini dan 2,0 ml Larutan baku internal
ke dalam labu tentukur 200-ml, encerkan dengan Fase gerak
sampai tanda.

b. Sistem Kromatografi
Metode : KCKT fase terbalik
Detektor : UV 254 nm
Kolom : L1 30 cm x 4 mm
Laju Alir : 1,5 ml/menit
Volume injeksi : 15 µL
13
 c. Kesesuaian Sistem
Simpangan Baku Relatif (RSD) pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 3,0%. Resolusi
antara puncak zat uji dan baku internal tidak kurang dari 5

d. Prosedur Penetapan Kadar

1. Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama ( lebih kurang 15 µL) Larutan
baku dan Larutan uji ke dalam kromatogram.
2. Rekam kromatogram.
3. Ukur respon puncak utama
4. Waktu retensi relatif dari hipoksantin 0,6 dan alopurinol 1,0 (larutan baku)
5. Hitung jumlah dalam mg Alopurinol (C5H4N4O4) dalam serbuk tablet yang
digunakan dengan rumus :
𝑹𝒖
𝟐, 𝟓 𝑪 ⌊ ⌋
𝑹𝒔

Keterangan :

• C adalah kadar Alopurinol BPFI dalam µg per ml Larutan baku;

• rU dan rS berturut-turut adalah perbandingan respons puncak antara Alopurinol

dan baku internal dari Larutan uji dan Larutan baku.

e. Persyaratan
Tablet alopurinol mengandung zat aktif berupa alopurinol tidak kurang dari 93,0% dan
tidak lebih dari 107,0% dari jumlah yang tertera pada etiket

3.4 Penetapan Kadar Alternatif Tablet Alopurinol (Spektro UV)

a. Alat
1. Seperangkat alat Spektrofotometer UV
2. Timbangan Analitik
3. Alat-alat gelas

b. Bahan
1. Tablet Alopurinol
2. Natrium hidroksida
3. Buffer fosfat pH 6,8

14
 c. Langkah Kerja
1. Larutkan setara 20 mg alopurinol dalam 10 ml natrium hidroksida
2. Adkan 100 ml dengan buffer fosfat pH 6,8 sehingga didapatkan larutan dengan
konsentrasi 200 µg/ml
3. Encerkan larutan tersebut hingga didapatkan konsentrasi larutan masing-masing 4,
6, 8, 12, 14 µg/ml
3.5 Penetapan Kadar Alternatif Tablet Alopurinol (Titrasi Bebas Air)
Penyiapan Bahan
Persiapan Natrium Metoksida 0,1 N dalam Toluene Methanol
Bahan yang Dibutuhkan:
1. Metanol absolut 40 ml
2. toluena kering 50 ml
3. logam Natrium 2,3 g.
Prosedur: Tambahkan ke dalam labu kering, campuran metanol (40 ml) dan toluena
kering (50 ml) dan tutup dengan longgar. Dengan hati-hati tambahkan potongan-
potongan logam natrium yang baru dipotong ke dalam campuran di atas secara bertahap
dengan pengocokan konstan. Setelah pelarutan total logam natrium, tambahkan metanol
absolut secukupnya untuk menghasilkan larutan bening. Toluena 50 ml ditambahkan
dengan pengocokan konstan hingga campuran tampak jernih. Proses ini diulangi dengan
penambahan metanol dan benzena alternatif sampai diperoleh 1 liter larutan, berhati-hati
dalam menambahkan volume minimum metanol untuk memberikan larutan yang jelas
terlihat.
Reaksi yang terjadi:

Interaksi antara logam natrium dan metanol adalah reaksi eksotermik dan karenanya,
perhatian khusus harus diberikan saat menambahkan logam ke dalam pelarut kering
dalam lot kecil dengan interval pendinginan yang memadai sehingga menjaga reaksi
tetap terkendali.

Larutan jernih dari natrium metoksida harus dijauhkan dari kelembaban dan CO2 di udara
sejauh mungkin untuk menghindari dua reaksi kimia di atas yang pada akhirnya dapat
mengakibatkan pembentukan kekeruhan.

15
Prosedur Titrasi:
1. Timbang seksama sampel setara dengan lebih kurang 200 mg Alopurinol
2. Larutkan dalam 50 ml dimetilformamida P, hangatkan bila perlu
3. Tambahkan 2 tetes indikator larutan timol biru
4. Titrasi dengan Natrium metoksida 0,1 N ke titik akhir berwarna biru tua, lakukan
tindakan pencegahan untuk mencegah penyerapan karbon dioksida dari udara
5. Lakukan penetapan blanko.
1 mL Natrium Metoksida 0.1 N setara dengan 0.01361 g C5H4N4O

16
 BAB 4
PEMBAHASAN

4.1 Identifikasi Bahan Baku dan Tablet Alopurinol

4.1.1 Identikfikasi Bahan Baku
Pada identifikasi digunakan spektroskopi inframerah, dilakukan identifikasi zat aktif
menggunakan alopurinol sebagai bahan baku untuk memastikan bahwa zat uji terbukti benar
sebagai alopurinol BPFI. Hasil dinyatakan positif apabila bentuk spektrum yang dihasilkan
sama dengan spektrum inframerah standard alopurinol BPFI pada bilangan gelombang yang
sesuai.

4.1.2 Identifikasi Tablet Alopurinol

Identifikasi ini dilakukan untuk melihat bahwa sediaan tablet alopurinol benar
mengandung alopurinol sebagai zat aktifnya. Metode yang digunakan untuk identifikasi tablet
alopurinol adalah menggunakan Spektrofotometri IR. Pada pengujian digunakan serbuk
Alopurinol BPFI sebagai pembanding. Pada metode spektrofotometri IR, serbuk tablet harus
dimurnikan dari eksipien tablet. Langkah yang dilakukan sebelum spektrofometri IR, yaitu
melarutkan tablet alopurinol yang telah diserbukkan dengan penambahan natrium hidroksida
0,1 N dan asam asetat 1N hingga terbemtuk endapan. Endapan yang merupakan endapan dari
zat aktif alopurinol, endapan tersebut dicuci dengan etanol mutlak P dan eter P agar diperoleh
zat aktif alopurinol tanpa pengotor dari eksipien. Proses pengeringan dilakukan agar diperleh
serbuk zat aktif alopurinol yang siap diuji dengan spetrofotometri IR. Hasil positif dinyatakan
jika bentuk spektrum inframerah yang dihasilkan sama dengan spetrum alopurinol BPFI pada
bilangan gelombang yang sesuai. Hal ini menunjukkan bahwa sediaan tablet tersebut benar
mengandung alopurinol.

4.2 Uji Keseragaman sediaan

Uji keragaman bobot cukup mewakili keseragaman kandungan pada tablet Alopurinol
100 mg, hal ini dikarenakan kandungan zat aktif lebih dari 25 mg. Tujuan dari pengujian
keragaman bobot tablet Alopurinol 100 mg yaitu untuk mengetahui apakah sediaan yang dibuat
memiliki bobot dan dosis yang seragam. Contoh data tablet Alopurinol yang didapat setelah
ditimbang seperti seperti berikut (Tabel 4.1) :

17
 Tabel 4.1. Hasil Uji Keragaman Bobot Tablet Alopurinol
Tablet Bobot (mg) Tablet Bobot (mg)
1 307,9 11 307,1
2 310,1 12 303,9
3 311,4 13 305,9
4 306,4 14 310,0
5 307,5 15 302,0
6 305,6 16 302,0
7 306,0 17 302,7
8 309,2 18 304,1
9 305,6 19 303,2
10 304,4 20 304,8
Rata-rata Bobot 306 mg

 Rata-rata : 306 mg
 Penyimpangan bobot rata-rata A (5%)
 5/100 X 306 mg = 15,3 mg
 Batas min = 306 mg – 15,3 mg = 290,4 mg
 Batas max = 306 mg + 15,3 mg= 321,3 g
 Rentang = 290,4 mg sampai 321,3 mg
 Syarat : tidak boleh ada 2 tablet yang masing-masing menyimpang dari
bobot rata-rata lebih besar dari harga yang ditetapkan.

 Penyimpangan bobot rata-rata B (10%)

 10/100 X 306 mg = 30,6 mg
 Batas min = 306 mg – 30,6 mg = 275,4 mg
 Batas max = 306 mg + 30,6 mg = 336,6 mg
 Rentang = 275,4 mg sampai 336,6 mg
 Syarat : tidak boleh ada satu pun tablet yang menyimpang dari bobot rata-
rata lebih dari harga yang ditetapkan.

Hasil uji keragaman bobot tablet Allopurinol 100 mg telah memenuhi syarat keragaman
bobot yang tertera pada Farmakope Indonesia V yaitu penyimpangan tablet Allopurinol 100

18
mg tidak ada dua tablet yang menyimpang lebih dari 5% dan tidak satu pun tabletnya yang
menyimpang lebih dari 10%.

4.3 Penetapan Kadar Tablet Alopurinol

A. Berdasarkan Farmakope Indonesia Edisi V
Penetapan kadar Tablet allopurinol berdasarkan Farmakope Indonesia edisi V tahun 2014
adalah dengan cara kromatografi cair kinerja tinggi fase terbalik. Pada fase terbalik, fase gerak
relative lebih polar daripada fase diam. Penetapan kadar tablet Alopurinol berdasarkan
monografi menggunakan fase diam berupa jenis kolom L1. Kolom L1 berisi oktadesilsilana
terikat secara kimiawi pada partikel mikro silika berpori atau partikel mikro keramik, dengan
diameter 3-10 µm (Harmita, 2014). Fase gerak yang digunakan adalah amonium fosfat
monobasa 0,05 M bersifat lebih polar dari fase diam (oktadesildimetilsilil). Komponen sampel
terlarut Alopurinol bersifat polar dimana allopurinol larut dalam larutan kalium dan natrium
hidroksida akan terelusi lebih dahulu karena ikatannya dengan eluen lebih besar dibandingkan
ikatannya dengan fase diam yang bersifat non polar.
B. Penetapan Kadar Alternatif
Penetapan kadar tablet alopurinol menurut Farmakope Indonesia edisi V adalah metode
analisis menggunakan KCKT, namun metode ini biayanya tidak murah dan memakan waktu.
Waktu analisis dengan KCKT yang cenderung lama dan penggunaan pelarut dapat mengurangi
efektivitas kolom sehingga tidak disarankan untuk penggunaan rutin. Metode analisis
menggunakan spektrofotometer UV dapat dipilih sebagai alternatif untuk uji yang lebih murah,
sederhana, dan singkat. Hasil analisis dengan metode ini diketahui tidak terpengaruh dengan
adanya eksipien dan zat lain. Hal yang harus diperhatikan adalah larutan uji harus dilindungi
dari cahaya selama pengujian dan metode yang dipilih harus divalidasi.
Sedangkan pada metode titrasi bebas air, pada proses penentuan kadar alopurinol dengan
titrasi bebas air, sampel alopurinol dilarutkan dalam 50 ml dimetilformamida . Indikator
ditambahkan kedalam larutan kemudian dititrasi dengan NaOH hingga terjadi perubahan
warna pada indikator karena perubahan warna indikator menunjukkan telah tercapainya titik
akhir titrasi. Pada penentuan kadar allopurinol dalam sampel, digunakan indikator yaitu timol
biru. Indikator timol biru adalah senyawa yang memiliki rumus kimia C27H30O5S dan bobot
molekul 466.59 gram/mol. Indikator ini berwarna biru pada pH di atas 9.2, berwarna kuning
pada pH diantara 2.8 dan 8.0, dan berwarna merah pada pH di bawah 1.2 dengan rentang pH
antara 8.0 – 9.2. Timol biru jika berada dalam pH asam akan bermuatan netral, jika berada
dalam pH diantara 1.7 – 8.9 akan bermuatan negatif dengan bilangan oksidasi –1, dan jika
19
berada dalam pH basa akan bermuatan positif dengan bilangan oksidasi –2. Proses sintesis dari
timol biru adalah sebagai berikut. Timol biru dibuat dengan mencampurkan domperidone
(DOM) dengan bromtimol biru (BTB) membentuk kompleks domperidone – bromtimol biru
(DOM – BTB). Selanjutnya, ion H+ yang dihasilkan oleh kompleks tersebut akan diserap dan
terbentuk kesetimbangan hingga menghasilkan timol biru. Pada pelaksanaan proses titrasi
bebas air digunakan aseton sebagai pengganti air untuk mencuci dan membilas peralatan yang
digunakan karena tidak boleh terdapat air dalam titrasi bebas air.

20
 BAB 5
PENUTUP

5.1 Kesimpulan
a. Identifikasi bahan baku alopurinol dapat dilakukan dengan menggunakan spektroskopi
inframerah. Identifikasi alopurinol dengan spektroskopi inframerah menunjukkan
maksimum hanya pada bilangan gelombang yang sama seperti pada alopurinol BPFI.
b. Identifikasi sediaan alopurinol tablet dilakukan dengan spektroskopi inframerah, apabila
menunjukkan serapan maksimum hanya pada bilangan gelombang yang sama seperti pada
alopurinol BPFI, maka menunjukkan bahwa sediaan tersebut benar mengandung
alopurinol.
c. Penetapan kadar alopurinol tablet dapat dilakukan dengan menggunakan metode
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi fase terbalik. Metode kromatografi gas-cair
menggunakan detektor UV 254 nm, ukuran kolom 30 cm x 4 mm, laju alir 1,5 ml/menit
dan volume injeksi 15 µL.
d. Penetapan kadar alternatif alopurinol tablet dapat dilakukan dengan menggunakan metode
spektrofotometer UV. Metode spektrofotometer UV dilakukan dengan mengukur serapan
larutan sampel pada panjang gelombang 250 nm.

5.2 Saran
a. Farmasis hendaknya memahami mengenai uji identifikasi alopurinol dan penetapan kadar
alopurinol tablet untuk dapat memastikan dan menjamin mutu dari sediaan tersebut.
b. Identifikasi dan penetapan kadar alopurinol dalam tablet dilakukan sesuai dengan metode
dalam kompendial. Prosedur pengujian alternatif dapat dilakukan berdasarkan sumber
yang absah serta tervalidasi, apabila tidak memungkinkan untuk melakukan metode dalam
kompendial.

21
 DAFTAR PUSTAKA

Farhan, Mohammed. (2019). pharmaceutical drug analysis by ashutosh kar.

Harmita. Analisis Fisikokimia: Kromatografi. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC, 2014.

Kementrian Kesehatan Republik Indonesia (2014). Farmakope Indonesia Edisi V. Jakart:

Direktorat Jenderal Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan, Kementrian Kesehatan RI

United States Pharmacopeia 39. (2016).

WHO, (2018), Pharmacopeia International.WHO.

22