Laporan Tetap Mikrobiologi Umum Kelompok I PDF

LAPORAN TETAP
PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI UMUM
OLEH :
KELOMPOK I
Oleh :
Kelompok 1
PROGRAM STUDI ILMU DAN TEKNOLOGI PANGAN

FAKULTAS TEKNOLOGI PANGAN DAN AGROINDUSTRI
UNIVERSITAS MATARAN
MATARAM
2012
2
3
KATA PENGANTAR
Puji syukur kami panjatkan kepada Tuhan, karena atas berkat dan rahmat-Nya
laporan tetap Mikrobiologi Umum ini dapat terselesaikan sesuai dengan waktu yang
telah ditentukan. Laporan ini disusun sebagai salah satu syarat mata kuliah
Mikrobiologi Umum di Fakultas Teknologi Pangan dan Agroindustri Universitas
Mataram.
Dalam kesempatan ini tidak lupa kami haturkan terima kasih kepada dosen,
koordinator praktikum, dan para Co. Assisten yang telah banyak membantu serta
membimbing kami baik dalam praktikum maupun dalam penyusunan laporan ini.
Kami menyadari sepenuhnya bahwa laporan ini masih banyak kekurangannya baik
dari segi isi, penampilan maupun teknik pengetikannya. Oleh karena itu kami
mengharapkan kritik dan saran-saran yang sifatnya membangun demi perbaikan dan
penyempurnaan laporan ini selanjutnya.
Akhirnya kami mengharap agar laporan ini dapat menjadi sumbangan ilmu
pengetahuan bagi rekan-rekan yang lain dan juga dapat menambah pengetahuan kita.
Mataram, Desember 2012
Penyusun
4
DAFTAR ISI
Halaman
Halaman Judul ........................................................................................... 1
Halaman Pengesahan ................................................................................. 2
Kata Pengantar .......................................................................................... 3
Daftar Isi ............................................................................................... 4
Daftar Gambar ........................................................................................... 6
Daftar Tabel ............................................................................................... 7
Acara 1. Pengenalam Alat-Alat Praktikum
Pendahuluan ............................................................................................... 8
Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 9
Pelaksanaan Praktikum ................................................................................ 12
Hasil Pengamatan ......................................................................................... 13
Pembahasan ............................................................................................... 17
Kesimpulan ............................................................................................... 21
Acara 2. Morfologi Jamur Benang
Pendahuluan ............................................................................................... 22
Hasil Pengamatan ........................................................................................ 28
Pembahasan ............................................................................................... 30
Kesimpulan ............................................................................................... 32
Acara 3. Pembuatan Medium Pertumbuhan Mikroba
Pendahuluan ............................................................................................... 33

5
Pembahasan ............................................................................................... 40
Kesimpulan ............................................................................................... 43
Acara 4. Morfologi Sel Khamir
Pendahuluan ............................................................................................... 44
Pembahasan ............................................................................................... 53
Kesimpulan ............................................................................................... 55
Acara 5. Pengecatan Bakteri
Pendahuluan ............................................................................................... 56
Pembahasan ............................................................................................... 63
Kesimpulan ............................................................................................... 65
Acara 6. Isolasi dan Morfologi Bakteri
Pendahuluan ............................................................................................... 66

6
Pembahasan ............................................................................................... 74
Kesimpulan ............................................................................................... 76
Acara 7. Perhitungan Jumlah dan Penentuan Ukuran Mikroba
Pendahuluan ............................................................................................... 77
Pembahasan ............................................................................................... 83
Kesimpulan ............................................................................................... 85
Acara 8. Pengaruh Faktor Lingkungan Terhadap Pertumbuhan Mikroba
Pendahuluan ............................................................................................... 86
Pembahasan ............................................................................................... 93
Kesimpulan ............................................................................................... 95
Daftar Pustaka
7
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Alat-Alat Praktikum ................................................................... 13
Gambar 2. Morfologi Jamur ......................................................................... 28
Gambar 3. Pengecatan dan Morfologi Bakteri .............................................. 61
Gambar 4. Perhitungan Jumlah dan Penentuan Ukuran Mikroba .................. 81

8
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil Pengamatan Pembuatan Medium ........................................ 39
Tabel 2. Hasil Pengamatan Morfologi Khamir .......................................... 50
Tabel 3. Hasil Pengamatan Isolasi dan Morfologi Mikroba ....................... 72
Tabel 4. Hasil Pengamatan Perhitungan Jumlah dan Penentuan
Ukuran Mikroba ........................................................................ 82
Tabel 5. Hasil Pengamatan Pengaruh Faktor Lingkungan
Terhadap pertumbuhan Mikroba ................................................ 92

9
ACARA I
PENGENALAN ALAT- ALAT PRAKTIKUM
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Pengenalan alat-alat laboratorium penting dilakukan untuk keselamatan
kerja saat melakukan penelitian. Alat-alat laboratorium biasanya dapat rusak atau
bahkan berbahaya jika penggunaannya tidak sesuai dengan prosedur. Sebab
pentngnya dilakukan pengenalan alat-alat laboratorium agar dapat diketahui cara-
cara penggunaan alat tersebut dengan baik dan benar. Sehingga kesalahan
prosedur pemakaian alat dapat diminimalisir sedikit mungkin. Hal ini penting
supaya saat melakukan penelitian, data yang diperoleh akan benar pula. Data-data
yang tepat akan meningkatkan kualitas penelitian seseorang.
Tujuan Praktikum
Tujuan praktikum pengenalan alat-alat praktikum adalah untuk
mengetahui alat-alat apa saja yang terdapat di laboratorium mikrobiologi, cara
penggunaan yang benar serta fungsi dan spesifikasi masing-masing alat tersebut.
10
TINJAUAN PUSTAKA
Dalam sebuah praktikum, praktikan diwajibkan mengenal dan memahami
cara kerja serta fungsi dari alat-alat yang ada dilaboratorium. Selain untuk
menghindari kecelakaan dan bahaya, dengan memahami cara kerja dan fungsi dari
masing-masing alat, praktikan dapat melakukan praktikum dengan sempurna
(Walton 2008).
Pengenalan alat-alat ini meliputi macam-macam alat, mengetahui nama-
namanya, memahami bentuk, fungsi serta cara kerja alat-alat tersebut. Setiap alat
dirancang atau dibuat dengan bahan-bahan yang berbeda satu sama lain dan
memiliki fungsi yang sfesifik (Imamfhasai, 2010).
Mikroskop adalah alat yang paling khas dalam laboratorium mikrobiologi
yang memberikan perbesaran yang membuat kita dapat melihat sruktur organism
yang tidak dapat dilihat oleh mata telanjang. Mikroskop yang tersedia
memungkinkan jangkauan perbesaran yang luas dari beberapa kali hingga ribuan
kali (Lay, 2008).
Peralatan yang dipergunakan di laboratorium mikrobiologi selain
mikroskop adalah tabung reaksi, beaker gelas, labu ukur, gelas ukur, cawan petri,
pipit labu, metric, buret, jarum inakulasi/ose, oven, autoklaf, lampu spritus, alat
timbangan, PH meter, inkubator, water bath (penangas air), refrigator, freezer,
haemocytometer, spektronik 200, colony counter, hot plate, vartex mixer, shaker,
gelas benda, pipet tetes, jarum enter dan sebagainya. Peralatan yang tersebut
diatas merupakan seebagian kecil dari peralatan yang terdapat dilaboraturium
mikrobiologi (Irianto, 2007).

11
Autoklaf adalah berbagai macam alat dan bahan yang digunakan dalam
mikrobiologi menggunakan uap air panas bertekanan. Tekanan yang digunakan
umumnya 15 psi atau sekitar 2 atm. Lama sterilisasi yang dilakukan biasanya 15
menit untuk 12°C (Dwidjoseputro, 2010).
Inkubator adalah alat untuk menginkubasi mikroba pada suhu yang
terkontrol. Alat ini dilengkapi dengan pengatur suhu dan pengatur waktu ( Imam
K, 2010 ).
Oven adalah alat untuk sterilisasi alat-alat yang tahan terhadap panas
tinggi misalnya, cawan petri, tabung reaksi, labu erlenmeyer, dan lain-lain. Alat
ini umumnya dilengkapi dengan thermometer. Temperatur yang digunakan untuk
alat ini umumnya 180°C selama 2 jam. Tabung reaksi berfungsi sebagai tempat
media pertumbuhan mikrobia dalam bentuk media tegak atau miring yang
disumbat dengan kapas, dibulatkan lalu disterilkan dengan kapas berada tetap
diatasnya dan diikat. Cawan petri merupakan alat sejenis dengan gelas kimia yang
berfungsi untuk pembuatan kultur media (Irianto, 2007).
Bunsen merupakan alat yang digunakan untuk pemijaran serta untuk
mensterilisasikan mikroba. Bunsen juga mempunyai fungsi lain, yakni
mengamankan praktikan pada saat melakukan penanaman medium. Drigalski
(batang penyebar) berbentuk segi tiga kecil dan ose (loop) berfungsi untuk
mengambil dan menggores mikroorganisme, terdiri dari ose lurus untuk
menanami mikroorganisme dan ose bulat untuk menggores mikroorganisme yang
biasanya berbentuk tig-tag. Engkas merupakan sebuah kotak tertutup, terbuat dari
kaca/playwood yang bagian depannya terdapat dua lubang untuk memasukkan

12
tangan pemakai yang berfungsi sebagai tempat untuk mengambil bakteri
(menghindari kontaminasi langsung). Dapat juga digunakan sebagai tempat
menanam eksplan dan subkultur (pengganti laminar air flou) pada kultur jaringan.
Sedangkan shaker berfungsi untuk menghomogenkan larutan dengan tabung
reaksi yang berisi larutan ditaruh dilubang pada shaker kemudian menekan
tombol ON dengan mengatur kecepatannya (Ali, 2009).

13
PELAKSANAAN PRAKTIKUM
Waktu dan tempat praktikum
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis, 22 November 2012 di
Laboratorium Mikrobiologi dan Biotekhnologi Fakultas Pertanian Universitas
Mataram.
Alat dan Bahan Praktikum
a. Alat-alat praktikum
Adapun alat-alat yang digunakan dalam praktikun ini adalah Mikroskop,
Colony counter, Shaker, Enkas, Water Bath, Centrifuge, Autoklof, Laminar Air
Flow, jarum enter, jarum ose, jarum priparat, Pipet mikro, oven dan petri
dish/cawan.
b. Bahan-bahan praktikum
Adapun dalam praktikum tidak menggunakan ini tidak menggunakan
bahan apapun karena hanya pengenalan alat-alat praktikum.
Prosedur Kerja
1. Disiapkan alat-alat praktikum yang akan diperkenalkan
2. Diamati alat-alat praktikum
3. Diambar dan ditulis fungsi masing-masing alat

14
HASIL PENGAMATAN
Gambar Nama Fungsi
Autoklaf Mensterilkan
berbagai macam alat
dan bahan
Cawan Petri Untuk membiakkan

sel
Oven Untuk mengeringkan

alat-alat sebelum
digunakan dan
digunakan untuk
mengeringkan bahan
yang dalam keadaan
basah.
15
Coloni Counter Untuk menghitung

jumlah mikroba
Centrifuge Untuk memisahkan

senyawa dengan berat
molekul yang
beberbeda dengan
memanfaatkan gaya
centrifuge
16
Mikroskop untuk melihat benda-

benda atau organisme
yang berukuran
sangat kecil.
Mikro pipet Untuk memindahkan

cairan yang
bervolume cukup
kecil
Shakers Untuk
menghomogenkan
larutan dengan
menggunakan tabung
reaksi
17
Enkas Sebagai tempat

penanaman mikroba
Jarum Ose Memindahkan atau

mengambil koloni
suatu mikrobia
Jarum Preparat Untuk menipiskan

dan melepaskan
gumpalan-gumpalan
obyek diatas gelas
benda
Jarum Enten Digunakan bersama-

sama dengan jarum
preparat untuk
menipiskan obyek
diatas gelas benda
18
PEMBAHASAN
Oven merupakan alat yang digunakan untuk mengeringkan alat-alat
sebelum digunakan dan digunakan untuk mengeringkan bahan yang dalam
keadaan basah (Irianto, 2007). Oven atau sering juga disebut hot air. Oven adalah
alat sterilisasi yang menggunakan prinsip panas kering. Oven digunakan untuk
mensterilkan alat gelas yang berongga atau material seperti minyak yang tidak
dapat disterilkan dengan autoklaf karna tidak permeable teradap uap air. Alat ini
terdiri dari panas elektrik, pengontrol suhu dan ruang insulasi yang umumnya
dilengkapi kipas untuk mensirkulasi udara sehingga panas merata. Kondisi
sterilisasi yang umumnya adalah 160 - 170°C dalam waktu 1 jam.
Autoklaf adalah alat untuk menterilkan berbagai macam alat dan bahan
yang pada mikrobiologi menggunakan uap air panas bertekanan. Tekanan yang
digunakan pada umumnya 15 psi atau sekitar 2 atm dan dengan suhu 121°C. lama
waktu untuk mensterilkan alat kurang lebih 15–20 menit (Dwidjoseptro, 2010).
Sedangkan lama waktu untuk menstrilkan bahan kurang 10–15 menit. Komonen –
komponen autoklaf adalah tombol pengatur waktu mundur, katup pengeluaran
uap, pengatur tekanan, klep pengaman, termometer dan lempeng sumber panas.
Autoklaf digunakan untuk sterilisasi bahan yang tidak tahan terhadap panas tinggi,
bahan-bahan yang teroksidasi dengan suhu tinggi, alat yang memiliki skala.
Laminar Air Flow adalah kelengkapan dasar laboraturium khususnya
laboratorium di bidang biologi atau kedokteran. Berbeda dengan lemari asam
yang prinsip kerjanya membuang udara dari dalam ruang kerja, Laminar Air Flow
adalah kebalikannya, membuat kerja tetap steril dengan mengambil udara dari luar
19
laminar disaring dengan filter yang khusus sehingga udara dari luar tidak dapat
mengkontaminasi ruang kerja yang ada di Laminar Air Flow (Walto,2008). Ada
dua system pengolahan di Laminar Air Flow yaitu, sistem pengolahan udara
vertical dan horizontal, yang masing-masing punya kelebihan dan kekurangan.
Pemilihan penggunaan Laminar Air Flow ini dapat disesuaikan dengan pola kerja
dan kebutuhan laboratorium. Laminar Air Flow adalah alat sterilisasi yang
menggunakan prinsip filtrasi udara dan penggunaan radiasi ultraviolet. Laminar
Air Flow digunakan sebagai tempat untuk melakukan kegiatan laboatorium yang
membutuhkan kondisi steril, seperti membuka alat yang telah disterilkan dan
menyiapkan sampul mikroba. Lingkungan dalam Laminar Air Flow disterilkan
dengan 2 cara sebelum digunakan, Laminar Air Flow ditutup dan lampu UUR
dinyalakan sehingga mikrobia diudara dan permukaan ruang mati, lalu saat
bekerja, kondisi udara dijaga stabil dengan fitrasi udara. Komponen Laminar Air
Flow antara lain ruang kaca steril yang dilengkapi tutup, filter udara di bagian
belakang, lampu UUR di langit –langit ruang, lampu biasa untuk menyiapkan
sampel membantu proses kerja, serta panel tombol untuk menyalakan lampu
UUR, filter dan lampu biasa.
Pipet mikro adalah alat untuk memindahkan cairan yang bervolume cukup
kecil. Biasanya kurang dari 1000 N1 (Ali,2009). Banyak pilihan kapasitas dalam
pipet mikro yang dapat diatur volume pengambilannya (Adjustable volume
pipette) antara 1 NI sampai 20 NI atau mikropipet yang tidak bisa diatur
volumenya, hanya tersedia satu pilihan volume (Fixed volume pipette) misalnya 5
20
NI. Dalam penggunaannya mikropipet memerlukan tip-tip yang sudah disterilkan
tidak boleh disentuh tangan karena akan menyebabkab kontaminasi.
Cawan petridish atau talepa pitri adalah sebuah wadah yang bentuknya
bundar dan terbuat dari plastik atau kaca yang digunakan untuk membiakkan sel
Cawan petri selalu berpasangan, yang ukurannya agak kecil sebagai wadah dan
yang lebih besar merupakan tutupnya (Lay, 2008). Cawan Petri dinamai menurut
nama penemunya pada tahun 1877 yaitu Julius Richard Petri (1852—1921), ahli
bakteri berkebangsaan Jerman. Alat ini digunakan sebagai wadah untuk
penyelidikan tropi dan juga untuk mengkultur bakteri, khamir spora atau biji--
bijian. Cawan petri plastik dapat dimusnahkan setelah sekali pakai untuk kultur
bakteri.
Centrifuge adalah suatu alat yang digunakan untuk memisahkan senyawa
dengan berat molekul yang berbeda dengan memanfaatkan gaya centrifuge.
Besarnya gaya centrifuge tergantung dari besarnya gaya jari – jari dari titik pusat
dan kecepatan sudut. Ada dua jenis centrifuge yaitu, centrifuge listrik dan
centrifuge putar manual. Jarum ose dibuat dari kawat chrom berukuran 0,5 – 0,75
mm. Jarum ose berfungsi untuk memindahkan atau mengambil koloni suatu
mikrobia ke media yang akan digunakan kembali. Jarum preparat digunakan
untuk menipiskan dan melepaskan gumpalan–gumpalan obyek diatas gelas benda,
terutama obyek yang berupa potongan media yang mengandung miselium jamur
sebelum ditutup dengan gelas penutup. Jarum enter berbentuk serupa dengan
jarum preparat, tetapi ujungnya ditipiskan dan dibengkokkann. Jarum enten

21
digunakan bersama-sama dengan jarum preparat untuk menipiskan obyek di atas
gelas benda.
Water bath adalah alat pemanas air yang suhunya dapat diatur, biasanya
berkisar antara suhu kamar sampai dengan 120°C. Alat ini digunakan untuk
mempertahankan suhu media agar tidak membeku sebelum dituang ke dalam
cawan petri. Mikroskop adalah alat laboratorium yang berfungsi melihat atau
mengenali benda-benda renik yang terlihat kecil menjadi lebih besar dari aslinya.
Komponen dari mikroskop adalah lensa okuler, tubus, sekerup pengatur tubus
(kasar), sekerup pengatur tubuh (halus), sekerup pengatur meja benda, meja
benda, sekerup pengatur kondensor, kondesor, cermin, revolver dan lensa
obyektif. Enkas merupakan alat laboratorium yang berfungsi sebagai tempat
penanaman mikroba. Shaker adalah alat laboratorium yang berfungsi untuk
menghomogenkan larutan dengan menggunakan tabung reaksi.

22
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan, maka dapat ditarik
beberapa kesimpulan sebagai berikut:
1. Oven, autoklaf dan Laminar Air Flow merupakan alat–alat yang digunakan
untuk menstrilkan alat dan bahan untuk praktikum.
2. Cawan petri berfungsi sebagai sebagai wadah penyimpan dan pembuatan
kultur media.
3. Coloni counter berfungsi untuk menghitung jumlah koloni mikroba.
4. Mikropipet berfungsi memindahkan cairan yang bervolume cukup kecil.
5. Jarum ose berfungsi untuk memindahkan atau mengambil koloni suatu
mikroba ke media yang akan digunakan kembali.
6. Enkas berfungsi sebagi tempat penanaman mikroba.

23
ACARA II
MORFOLOGI JAMUR BENANG
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Jamur benang dapat membentuk miselium dan berbagai bentuk spora. Hal ini
dipisahkan berdasarkan spora seksualnya, sebagai contoh Ascomycetes
membentuk spora seksual dalam struktur tertentu yang disebut askus, sedangkan
basidiomycetes membentuk spora seksual dalam basidium. Selain bentuk spora
seksual, morfologi dan penataan spora aseksual juga membantu dalam identifikasi
kapang atau jamur benang. Morfologi dan penataan spora aseksual berperan
dalam identifikasi jamur karena keragamannya.
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini yaitu untuk mengetahui morfologi
beberapa jamur benang baik secara makroskopis maupun secara mikroskop dan
membedakan jenis jamur benang satu dengan lainnya.

24
TINJAUAN PUSTAKA
Adapun klasifikasi jamur yang penting dalam pembicaraan mikrobiologi
ialah kelas Mycomycetes, kelas Pycomycetes, kelas Ascomycetes, dan kelas
Ceuteromycetes. Perbedaan yang penting diantara kelas Pycomycetes dan kelas
Ascomycetes ialah bahwa miselium Pycomycetes serupa tabung panjang yang
tidak terbagi-bagi, sedangkan miselium Ascomycetes serupa tabung panjang yang
bersekat-sekat. Miselium dapat bercabang-cabang, suatu helai disebut hifa. Tubuh
Mycomycetes tidak terdiri atas hifa atau miselium, tetapi berupa seonggok plasma
yang tidak selalu terwadahi dalam suatu sel (Dwidjoseputro,1985).
Sebagian besar eukariota tumbuh sebagai filament tubular yang disebut
hifa. Jalinan massa hifa disebut miselium. Hifa adalah senositik, artinya tidak
digolongkan menjadi sel-sel tersendiri. Walaupun sekat dijumpai, beberapa tetap
berlubang-lubang sehingga sitoplasma dan nucleus banyak didalam hifa bebas
mengalir ke seluruh miselium. Dinding hifa diperkuat oleh kitin, suatu polimer
dari N-asetil glukosamina pautan diantara gula-gula seperti yang ada pada
selulosa dan peptidoglikan dan pembentukan macam kekakuan struktur yang sama
seperti halnya polimer-polimer tadi. Fungi tidak mempunyai klorofil dan karena
itu heterotrifik. Fungi dikelompokkan menjadi Phycomycetes berdasarkan dua
kriterianya yaitu pembentukan spora di dalam sporangium dan tidak mempunyai
septa (dinding sekat) pada hifa. Tetapi agaknya kedua kategori itu bukan dasar
yang memadai untuk menyatakan hubungan kerabatnya (Kimball,1999).
Jamur dibagi dalam 4 divisi yaitu, Zygomycetes yang memiliki ciri-ciri
hifa bersifat koenositik. Spora seksualnya adalah zygospora dan spora

25
aseksualnya adalah sporangiospora. Contohnya Rhizopus sp dan Mucor sp..
Ascomycetes yang memiliki ciri-ciri hifa bersifat koenositik. Pembiakan seksual
pada yang bersel satu, konjugasi antara 2 gametangia menghasilkan zigot,
kemudian membesar menjadi askus. Pembiakan aseksual pada yang bersel banyak
dengan konidia (konidiospora), pada yang bersel satu dengan membentuk tunas.
Contohnya Penicillium sp.. Basidiomycetes yang memiliki ciri-ciri hifanya
bersekat, pembiakan seksual dengan konidia. Pembiakan aseksual dengan
basidiospora. Contohnya Volvariela sp.. Serta Deuteromycetes yang memiliki
ciri-ciri bentuk seperti khamir atau filamen. Hifa seperti Ascomycetes. Tidak
mempunyai stadia seksual. Spora aseksual adalah berbagai bentuk konidia.
Contohnya Tricosporon sp, Aspergillus sp (Lay, 1994).
Nama yang diberikan untuk cendawan (fungi) berasal dari wakilnya yang
mencolok, yaitu cendawan topi (Yunani : mykes, Latin : fungus). Fungi termasuk
eukariot, dan memiliki sifat-sifat tertentu sama dengan tumbuh-tumbuhan, seperti
memiliki dinding sel, vakuola berisi getah sel dan dengan mikroskop dapat
diamati aliran plasma yang baik dan juga sifat nyata ketidakmampuannya untuk
tidak bergerak. Fungi tidak mengandung pigmen fotosintesis dan bersifat C-
heterotrof (khemoorganoheterotrof). Fungi tumbuh pada kondisi aerob dan
memperoleh energi dengan mengoksidasi bahan organik. Kalau dibandingkan
dengan tumbuh-tumbuhan terbagi-bagi dalam daun, batang, dan akar, fungi
menunjukkan diferensiasi yang sederhana dan juga hampir tidak ada pembagian
kerja. Benda fegetasi fungi adalah talus. Talus terdiri dari benang-benang dengan
garis tengah 5 mikron, yang bercabang-cabang beberapa dan juga melanjutkan diri
26
di atas atau ke dalam substrat nutrient. Benang atau hifa ini terdiri dari dinding sel
dan sitoplasma dengan benda-benda inklusi. Keseluruhan massa hifa talus fungi
disebut miselium. Pada fungi derajat tinggi miselium membentuk utas-utas tali
tebal, rizomorf yang berfungsi sebagai pengangkut zat (Schlegel, 1994).
Jamur ada yang menguntungkan dan ada yang merugikan. Contoh jamur
yang menguntungkan adalah Rhizopus oligosporus dan Rhizopus stoloniferus
yang berperan dalam pembuatan tempe, Aspergillus wentii untuk pembuatan
kecap, Penicillium chrysogenum dan Penicilliun rotatum sebagai penghasil
penisilin, Penicillium requeorti dan Penicillium cemmemberti untuk pembuatan
keju. Sedangkan contoh jamur yang merugikan adalah Mucor Parasiticus sebagai
penyebab penyakit kulit dan Aspergillus fumigatus sebagai penyebab penyakit
TBC-semu (Suriawiria, 1993).

27
Waktu dan Tempat Praktikum
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis, 25 November 2012 dilakukan
di Laboratorium Mikrobiologi dan Biotekhnologi Fakultas Pertanian Universitas
Mataram.
a. Alat-alat Praktikum
Adapun alat-alat yang digunakan pada praktikum ini yaitu gelas benda,
tisu, gelas penutup, mikroskop, jarum enten.
b. Bahan-bahan Praktikum
Adapun bahan yang digunakan dalam praktikum ini yaitu biakan murni
jamur benang Aspergillus sp., Mucor sp., Penicillium sp., Rhizopus sp., Fusarium
sp., Trichoderma sp., aquades dan alkohol 70%.
Prosedur Kerja
1. Dibersihkan gelas benda dengan tissue hingga bebas dari lemak dan debu,
kemudian diletakkan setetes air suling di bagian tengahnya.
2. Diambil sedikit miselium dari biakan murni jamur dengan jarum preparat dan
diletakkan di atas tetesan air suling. Jika miselium ini terlalu padat, diratakan
dengan memisah-misahkan miselium dengan bantuan jarum preparat dan jarum
enten.
3. Ditutup preparat dengan gelas penutup. Dijaga, agar pada saat gelas penutup
diletakkan tidak terbentuk gelembung udara di bawah gelas penutup.

28
4. Diamati dengan mikroskop, mula-mula dengan perbesaran lemah.
5. Digambar dan diberi keterangan.

29
HASIL PENGAMATAN
Keterangan :
1. Konidia
2. Sterigmata
3. Metula
4. Brancia
5. Konidiofor
6. Sel kaki
Gambar 1. Penicillium sp.
Keterangan :
1. Konidia
2. Konidiofor
3. Sterigmata
Gambar 2. Trchoderma sp.

30
Keterangan :
1. Konidia
2. Sterigmata
3. Vesikula
4. Konidiofor
5. Sel kaki
6.Miselium
Gambar 3. Aspergilus sp.
Keterangan :
1. Konidia
2. Sterigmata
3. Vesikula
4. Konidiofor
5. Sel kaki
6. Miselium
Gambar 4. Fusarium Sp.

31
PEMBAHASAN
Jamur benang merupakan jamur-jamur berbentuk benang multiseluler
(bersel banyak). Adapun ciri-cirinya antara lain tidak berklorofil, bersifat
eukariotik, hidupnya heterotrof baik secara parasit atau saprofit. Dinding selnya
tersusun dari kitin, bentuk tubuhnya bersel banyak dan menyerupai benang yang
disebut dengan hifa. Hifa bercabang-cabang membentuk jaring yang disebut
miselium.
Pada praktikum ini, dilakukan pengamatan terhadap berbagai macam
jamur yaitu Trichoderma sp, Fusarium sp, Aspergillus sp. dan
Penicillium.Trichoderma sp merupakan salah satu jamur yang menguntungkan
yaitu sebagai antagonis terhadap jamur lain yang bersifat patogenik. Trichoderma
sp menghasilkan enzim selulosa yang dapat diisolasi dan dimurnikan. Dengan
selulosa ini, Trichoderma sp dapat memproduksi protein sel tunggal.
Fusarium sp hidup secara parasit pada batang tebu, padi, pisang, tomat dan
kentang. Hifanya bersepta. Pada praktikum kali ini, tidak ditemukan gambaran
Fusarium sp secara lengkap, yang terlihat hanyalah konidia (makrokonidia) saja.
Hal ini disebabkan karena adanya ketidaktelitian praktikan yang menyebabkan
kesalahan pada saat menyiapkan preparat.
Aspergillus sp umumnya terdapat pada kulit buah, keju, dan bagian
tumbuhan yang mati. Aspergillus sp membentuk konidia berwarna hijau kebiruan.
Konidia terletak dibagian luar ujung hifa yang menggelembung.
Perkembangbiakan seksualnya dengan membentuk badan buah yang berbentuk

32
bulat,kecil dan berwarna kuning. Aspergillus sp banyak digunakan dalam
pembuatan makanan tradisional seperti tauco, kecap dan sake.
Penicillium sp memiliki tempat hidup dan sifat yang mirip Aspergillus sp.
Akan tetapi berbeda dengan Aspergillus sp, konidia Penicillium sp terdapat pada
ujung hifa yang bercabang. Jamur ini dikenal sebagai jamur penghasil antibiotik
yaitu penicillin.
Jamur-jamur diatas merupakan bagian kecil dari jumlah jamur yang
terdapat di alam. Jamur-jamur ini lebih dapat bertahan dalam keadaaan alam yang
tidak menguntungkan dibandingkan dengan jasad-jasad renik lainnya.

33
KESIMPULAN
Adapun kesimpulan yang dapat diambil dari hasil pengamatan dan
pembahasan adalah sebagai berikut:
1. Jamur benang merupakan organisme multiseluler (bersel banyak).
2. Jamur benang memiliki bentuk tubuh yang menyerupai benang dan disebut
hifa.
3. Penicillium sp dan Aspergillus sp memiliki kemiripan dalam hal sifat dan
tempat hidup, tetapi konidia Penicillium sp terdapat pada ujung hifa yang
bercabang.
4. Bentuk spora jamur benang dibedakan berdasarkan reproduksi seksual dan
reproduksi aseksualnya.
5. Pada jamur Penicillium terdapat branchia atau percabangan.

34
ACARA III
PEMBUATAN MEDIUM
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Medium adalah suatu bahan yang terdiri atas campuran nutrisi yang
dipakai untuk menumbuhkan mikroba. Selain untuk pembuatan mikroba, medium
dapat pula digunakan untuk melakukan isolasi, memperbanyak, pengujian sifat-
sifat fisiologi dan perhitungan mikroba. Sehingga pembuatan medium itu harus
sesuai komposisi dan tujuan penanamannya, serta cara pembuatan medium iru
harus dengan baik agar medium yang dihasilkan sesuai dengan yang diingikan.
Semua makhluk hidup membutuhkan nutrien untuk pertumbuhan dan
reproduksinya. Nutrien merupakan bahan baku yang digunakan untuk
membangun komponen-komponen baru dan untuk menghasilkan energi yang
dibutuhkan dalam proses kehidupan sel. Untuk menumbuhkan dan
mengembangbiakkan mikroba diperlukan suatu substrat yang disebut medium.
Sedangkan medium itu sendiri sebelum digunakan harus dalam keadaan steril,
artinya tidak ditumbuhi oleh mikroba lain yang tidak diharapkan. Agar mikroba
dapat tumbuh dan berkembang dengan baik didalam medium, maka diperlukan
persyaratan tertentu yaitu diantaranya bahwa di dalam medium harus terkandung
semua unsur hara yang diperlukan untuk pertumbuhan dan perkembangan
mikroba. Oleh karena hal tersebut, maka diadakan praktikum ini guna menambah
keterampilan dan pengetahuan mengenai pembuatan medium pertumbuhan
mikroba.
35
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk membuat medium dasar
jamur, untuk membuat medium dasar bakteri dan untuk medium dasar khamir
36
TINJAUAN PUSTAKA
Mempelajari pertumbuhan bakteri merupakan faktor terpenting dalam
mengetahui beberapa aspek fisiologis. Hal itu karena karakteristik pertumbuhan
mencerminkan kejadian fisiologis suatu bakteri. Oleh karena itu dalam melakukan
penelitian biasanya para peneliti melakukan manipulasi pertumbuhan (misalnya
menggunakan kultur yang baru) untuk dapat mempelajari suatu aspek fisiologis
(Tjahjadi, 2007).
Media adalah suatu substrat untuk menumbuhkan bakteri yang menjadi
padat dan teap tembus pandang pada suhu inkubasi. Medium adalah suatu bahan
nutrisi tempat menumbuhkan bakteri di laboratorium (Tortora, 2007).
Media berfungsi untuk menumbuhkan mikroba, isolasi, memperbanyak
jumlah, menguji sifat-sifat fisiologi dan perhitungan jumlah mikroba, dimana
dalam proses pembuatannya harus disterilisasi dan menerapkan metode aseptis
untuk menghindari kontaminasi pada media (Anonim, 2009).
Medium adalah suatu bahan yang terdiri atas campuran nutrisi yang
dipakai untuk menumbuhkan mikroba. Selain untuk menumbuhkan mikroba,
medium dapat digunakan pula untuk isolasi, memperbanyak, pengujian sifat-sifat
fisiologis dan perhitungan mikroba (Dwyana, 2009).
Media dibedakan menjadi dua menurut komposisi kimiawinya yaitu
medium sintetik dan medium non-sintetik atau kompleks. Medium sintetik dibuat
dari bahan kimia dengan kemurnian tinggi dan ditentukan dengan tepat,
sedangkan medium non-sintetik tidak diketahui dengan pasti (Hadioetomo, 2010).

37
Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari
campuran zat-zat makananan (nutrisi) yang diperlukan mikroorganisme untuk
pertumbuhannya. Mikrooorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa molekul-
molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel. Dengan media
pertumbuhan dapat dilakukan isolat mikroorganisme menjadi kultur murni dan
juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya (Indra, 2008).
Berdasarkan konsistennya atau kepadatannya, medium dibagi menjadi tiga
jenis , yaitu : medium cair/broth/liquid medium, medium setengah padat (semi
solid medium) dan medium padat (solid medium) (Anonimous, 2008).
Untuk menelaah mikroorganisme dilaboratorium, kita harus dapat
menumbuhkan mereka. Mikroorganisme dapat berkembang biak dengan alami
atau dengan bantuan manusia. Mikroorganisme yang dikembangkan oleh manusia
dilaboratorium melalui substrat yang disebut media. Untuk melakukan hal ini
haruslah dimengerti jenis-jenis nutrien yang disyaratkan oleh bakteri dan juga
macam lingkungan fisik yang menyediakan kondisi optimum bagi
pertumbuhannya (Label, 2008).
Nutrien Agar (NA) digunakan untuk budidaya bakteri dan untuk
pencegahan organisme dalam air, limbah, kotoran dan lainnya. Komposisinya
terdiri dari ekstrak daging, pepton, agar dan aquades (Ruly, 2009).
38
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis, 29 November 2012 di
Laboratorium Mikrobiologi dan Bioteknologi Fakultas Pertanian Universitas
Mataram.
Adapun alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah timbangan,
erlenmeyer, hot plate, kapas, kain saring, gelas kimia, pisau dan pengaduk.
Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah ekstrak
daging, pepton, agar NA, aquades, kentang dekstrose, tauge, agar PDA dan
sukrosa.
Prosedur Kerja
a. Pembuatan Medium Nutrien Agar (NA)
1. Dipanaskan air hingga mendidih diatas hot plate.
2. Dituangkan ekstrak daging kedalam air yang sudah mendidih, lalu diaduk
rata dan direbus beberapa menit.
3. Ditambahkan pepton, lalu diaduk rata dan direbus kembali beberapa menit.
4. Ditambahkan agar sedikit demi sedikit sambil diaduk.
5. Dipanaskan beberapa menit.
6. Ditutup mulut erlenmeyer dengan kapas dan didiamkan.

39
7. Diamati.
b. Pembuatan Medium Potato Dekstrose Agar (PDA)
1. Dikupas kentang dan dipotong-potong kecil seperti kubus, lalu ditimbang
sebanyak 40 gram.
2. Direbus dengan aquades sampai kentang menjadi lunak.
3. Disaring dengan kain saring dan atur volumenya hingga menjadi 200 ml.
4. Ditmabahkan dekstrose dan aduk sampai larutan homogen. Dipanaskan
hingga larutan tersebut mendidih.
5. Diturunkan dari hot plate, kemudian ditambahkan agar sedikit demi sedikit
sambil diaduk.
6. Dipanaskan hingga agar mencair dan larut.
7. Ditutup mulut erlenmeyer dengan kapas dan didiamkan.
8. Diamati.
c. Tauge Cair (TC)
1. Ditimbang tauge sebanyak 10 gram dan direbus tauge dengan aquades
sampai lunak.
2. Disaring dan diambil ekstraknya sebanyak 100 ml.
3. Ditambahkan sukrosa dan direbus kembali sampai semua sukrosa larut.
4. Diturunkan dari hot plate dan ditutup mulut erlenmeyer dengan kapas, lalu
didiamkan dan diamati.

40
HASIL PENGAMATAN
Tabel 3. Hasil Pengamatan Pembuatan Medium

Media Bahan Keterangan
Potato Dekstrose Agar Kentang 40 gram Berwarna putih keruh
(PDA) Dekstrose 4 gram Warna tetap, larutan
menjadi lebih kental
Agar 3 gram Warna lebih jernih,
larutan semakin kental
Nutrient Agar (NA) Ekstrak daging 0,6 gram Berwarna orange
Pepton 1 gram Warna tetap, larutan
menjadi lebih kental
Agar 4 gram Warna tetap, larutan
sekamin kental
Tauge Cair (TC) Tauge 10 gram Berwarna putih keruh
Sukrosa 6 gram Warna lebih jernih,
larutan menjadi lebih
kental
41
PEMBAHASAN
Media adalah substrat dimana mikroorganisme dapat tumbuh dan sesuai
dengan lingkungannya. Kehidupan mikroorganisme tergantung pada nutrisi dalam
substrat/medium dan faktor lingkungan yang baik, karena tidak semua medium
untuk pertumbuhan mikroorganisme sangat bervariasi, tergantung dari apa yang
dijadikan dasar penanaman. Mikroba dapat tumbuh dengan baik jika dalam suatu
medium tersebut memenuhi syarat-syarat, yaitu harus mengandung semua zat hara
yang mudah digunakan oleh mikroba, harus mempunyai tekanan osmosis,
tegangan permukaan dan pH yang sesuai dengan kebutuhan mikroba yang
ditumbuhkan, tidak mengandung zat-zat yang dapat menghambat pertumbuhan
mikroba, dan harus berada dalam kondisi steril sebelum digunakan (Hafrah,
2009).
Medium Nutrien Agar (NA) berdasarkan susunan kimianya merupakan
medium non-sintetik/semi alamiah, berdasarkan konsistensinya merupakan
medium padat. Medium ini dibuat dalam dua jenis, yaitu NA miring dan NA
tegak. NA miring digunakan untuk membiakkan mikroba sedangkan NA tegak
digunakan untuk menstimulir pertumbuhan bakteri dalam kondisi kekurangan
oksigen. NA digolongkan pada medium umum sebab dapat digunakan untuk
menumbuhkan beberapa jenis bakteri. Nutrien Agar (NA) merupakan suatu
medium yang berbentuk padat, yang merupakan perpaduan antara bahan alamiah
dan senyawa-senyawa kimia. NA dibuat dari campuran ekstrak daging dan pepton
dengan menggunakan agar sebagai pemadat, karena sifatnya yang mudah
membeku dan mengandung karbohidrat yang berupa galaktan sehingga tidak

42
mudah diuraikan oleh mikroorganisme. Dalam hal ini ekstrak daging dan pepton
digunakan sebagai bahan dasar karena merupakan sumber protein, nitrogen,
vitamin serta karbohidrat yang sangat dibutuhkan oleh mikroorganisme untuk
tumbuh dan berkembang. Aquades berfungsi sebagai pelarut dan untuk
menghomogenkan larutan. Nutrien Agar (NA) merupakan medium untuk
menumbuhkan bakteri (Waluyo, 2007).
Medium Potato Dekstrose Agar (PDA) menurut konsistensinya termasuk
medium padat, berdasarkan susunan kimianya termasuk non-sintetik/semi
alamiah. Berdasarkan fungsinya, medium PDA ini termasuk medium umum
karena dapat digunakan untuk menumbuhkan satu atau lebih kelompok jamur.
Medium PDA digunakan untuk menumbuhkan jamur (kapang). Komposisinya
terdiri dari dekstrose yang berfungsi sebagai sumber karbon, kentang sebagai
sumber karbohidrat, agar berfungsi memadatkan medium dan aquades berfungsi
sebagai pelarut dan sumbert oksigen.
Medium Tauge Cair (TC) merupakan medium yang bersifat non-sintetik.
Sedangkan berdasarkan konsistensinya, termasuk medium cair. Medium ini
digunakan untuk pertumbuhan dan pembiakan khamir. Komposisi medium tauge
cair terdiri dari tauge yang berfungsi sebagai sumber-sumber zat organik yang
dibutuhkan oleh khamir, sukrosa merupakan sumber karbohidrat bagi khamir,
dimana setelah mengalami fermentasi, sukrosa akan berubah menjadi glukosa dan
fruktosa yang juga dibutuhkan oleh khamir, aquades digunakan untuk melarutkan
bahan pada medium tersebu. Pada medium ini tidak ada penambahan agar untuk
43
konsistensinya. Oleh karena pada komposisinya tidak terdapat agar sehingga
medium ini disebut medium cair.

44
KESIMPULAN
beberapa kesimpulan sebagai berikut :
1. Mikroba dapat tumbuh dengan baik jika dalam suatu media tersebut
memenuhi syarat-syarat, yaitu harus mengandung semua zat hara yang
mudah digunakan oleh mikroba, harus mempunyai tekanan osmosa,
tegangan permukaan dan pH yang sesuai dengan kebutuhan mikroba yang
ditumbuhakan.
2. Nutrien Agar (NA) merupakan medium untuk menumbuhkan bakteri.
3. Medium Potato Dekstrose Agar (PDA) digunakan untuk menumbuhkan
jamur.
4. Medium Tauge Cair (TC) digunakan untuk pertumbuhan dan pembiakan
khamir.
5. Ekstrak daging dan pepton merupakan sumber protein, nitrogen, vitamin
serta karbohidrat.
6. Agar berfungsi sebagai pemadat, karena sifatnya yang mudah membeku
dan mengandung karbohidrat.

45
ACARA IV
MORFOLOGI KHAMIR
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Khamir atau yeast adalah katagori non – takson yang mencangkup semua
fungsi uniseluler yang berasal dari kingdom zygomkota, askomykota,dan
basidiomykota. Khamir umumnya berkembang biak baik secara seksual maupun
aseksual (Waluyo, 2007). Pada umumnya khamir terdapat di permukaan buah –
buahan, pada debu, ditanah – tanah, pada makanan, minuman, dan lain – lain.
Khamir sering kali hampir tidak kelihatan karena tidak kontras dengan medium
dimana mereka hidup. Oleh karena itu, perlu dilakukan pewarnaan agar khamir
tampak jelas bila diamati dengan mikroskop. Pewarnaan ini ada yang bersifat non
– differensial dan diferensial. Pewarnaan non diferensial hanya bertujuan agar
khamir yang diamati tanpak jelas atau kontras dengan latar belakangnya.
Pewarnaan differensial bertujuan agar dapat membedakan antara jenis bakteri
yang berbeda. Contoh pewarna differensial adalah pewarnaan khamir dengan
methylene blue. Sehingga sel mati dan sel hidup memiliki warna yang berbeda.
Berdasarkan penjelasan diatas maka perlu dilakukan suatu pengamatan untuk
mengetahui morfologi khamir dan membedakan sel khamir yang mati dan hidup.
46
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengenal bermacam –
macam bentuk sel, membedakan sel yang mati dan yang hidup dan menghitung
persentase kematian khamir.

47
TINJAUAN PUSTAKA
Sel khamir mempunyai ukuran yang bervariasi, yaitu dengan panjang 1,5
mm sampai 20,50 mm dan lebar 1 sampai 10 m. Bentuk khamir bermacam –
macam, yaitu bulat, oval, silinder, ogival yaitu bulan panjang dengan salah satu
ujung runcing, segitiga melengkung (tringuler), berbentuk botol, bentuk apikulat
atau lemon, membentuk spedomiselium, dan sebagai ukuran dan bentuk sel
khamir dalam kultur yang sama mungkin berbeda–beda karena pengaruh
perbedaan dan kondisi lingkungan selama pertumbuhan (Waluyo, 2007).
Pengamatan sel khamir dapat dilakukan dengan cara pengecetan sederhana
yaitu pemberian warna pada khamir dengan menggunakan larutan tunggal suatu
warna pada lapisan tipis atau olesan yang sudah difiksasi. Pewarnaan sederhana
yaitu pewarnaan dengan menggunakan satu macam zat warna dengan tujuan
hanya untuk melihat bentuk sel khamir dan untuk mengetahui morfologi dan
susunan selnya serta membedakan sel yang mati dan yang hidup (Balley, 2007).
Khamir adalah mikroorganisme bersel tunggal dengan ukuran 5 dan 20
mikron. Biasanya berukuran 5–10 kali lebih besar dari bakteri. Terdapat berbagai
macam bentuk ragi tergantung dari cara pembelahan selnya. Sel khamir dapat
berbebtuk lonjong, bentuk batang atau bulat. Sel–sel khamir sering di jumpai
secara tunggal, tetapi apabila anak–anak sel tidak dilepas kan dari induknya
setelah pembelahan maka akan terjadi bentuk yang disebut pseudemisellium.
Khamir tidak bergerak karena tidak mempunyai flagela. Beberapa jenis khamir
membentuk kapsul disebelah luar (Buckle,2008).

48
Dinding sel khamir terdiri atas khitin. Sel yang masih muda dinding selnya
tipis dan lentur, sedangkan yang tua dinding selnya tebal dan kaku. Dibawah
dinding sel terdapat membran sitoplasma yang bersifat permiabel selektif. Tipe sel
khamir adalah Eukariotik. Untuk identifikasi dan determinasi khamir, perlu
dipelajari sifat-sifat morfologi dan fisiologinya. Sifat-sifat morfologi yang perlu
dipelajari meliputi bentuk, ukuran sel, dan jumlah spora, cara–cara
perkembangbiakan, pembentukan pseudemycellium, ordian, giant cdony,
klamidospora, blastospora dan sebagainya. Sifat–sifat fisiologis meliputi pengijian
asimilasi C dan N, fermentasi karbohidrat, kemampuan mencairkan gelatin,
reduksi nitrat dan sebagainya (Dwidjoseputro, 2010).

49
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis 6 desember 2012 di
Mataram.
a. Alat–alat Praktikum
Adapun alat–alat praktikum yang digunakan dalam praktikum ini adalah
jarum, ose, gelas benda, gelas penutup, tisu, mikroskop, dan lampu spiritus.
b. Bahan–bahan Praktikum
Adapun bahan–bahan yang digunakan pada praktikum ini adalah khamir
24 jam, khamir 48 jam dan larutan methylen blue.
Prosedur Kerja
1. Dibersihkan gelas benda dan gelas penutup sehingga bebas dari lemak dan
debu.
2. Diambil dua ose khamir secara aseptik yang berumur 24 jam, diletakkan
diatas gelas benda.
3. Diambil satu tetes larutan methylen blue dan diletakkan diatas gelas benda
yang telah diberi khamir 24 jam, lalu campur sebaik–baiknya.

50
4. Diletakkan gelas penutup diatas bahan tersebut, juga agar pada waktu
meletakkan gelas penutup jangan sampai terbentuk gelembung udara
didalam preparat.
5. Diamati dengan mikroskop, mula–mula dengan perbesaran sedang
dibedakan antara sel khamir yang hidup dan yang mati.
6. Dihitung jumlah khamir yang hidup dan yang mati pada lima bidang
pandang.
7. Dihitung persentase kematian dengan rumus :
% kematian =
8. Diulangi pekerjaan 1 sampai 6 dengan menggunakan khamir yang
berumur 48 jam.
51
HASIL PENGAMATAN DAN PERHITUNGAN
Hasil Pengamatan
Tabel 5.1 Hasil pengamatan persentase kematian Khamir 24 jam

Bidang pandang Sel hidup Sel mati
1 1 18
2 3 11
3 3 6
4 2 4
5 2 6
Jumlah 11 45
% 80% 20%
Perhitungan
Misal : sel hidup = x, sel mati = y
% kematian1 = x 100 %
= x 100 %
= 95 %
= x 100 %
= 78 %
= x 100 %
= 67 %
52
= x 100 %
= 67 %
= x 100 %
= 75 %
% kematianrata - rata = x 100 %
= x 100 %
= 80 %
Tabel 5.2. Hasil pengamatan persentase kematian Khamir 48 jam

Bidang pandang Sel hidup Sel mati
1 4 10
2 2 12
3 3 46
4 2 15
5 5 41
Jumlah 16 124
% 88% 12%
= x 100 %
= 71 %
= x 100 %
= 86 %
53
= x 100 %
= 94 %
= x 100 %
= 88 %
= x 100 %
= 89 %
% kematianrata - rata = x 100 %
= x 100 %
= 88 %
54
PEMBAHASAN
Khamir merupakan salah satu mikroorganisme yang termasuk ke dalam
fungsi mikroskopik. Khamir terdapat sebagai sel bebas yang sederhana. Khamir
yang ditemukan memiliki berbagai bentuk seperti bulat, lonjong, tringular dan
sebagainya. Khamir tidak bergerak karena tidak mempunyai flagela. Khamir dapat
tumbuh dalam media cair dan padatdengan cara seperti bakteri yaitu pembelahan
sel.
Di alam terdapat berbagai bentuk khamir, namun khamir dalam
pengamatan berbentuk bulat. Dalam pengamatan dilakukan dengan pengecatan
sederhana menggunakan methylen blue. Penggunaan methylen blue pada
pengecetan sederhana dimaksudkan untuk dapat membedakan sel yang mati dan
sel yang hidup dengan perbedaan atau perubahan mana yang ditimbulkan.
Pengecetan sederhana yaitu pengecetan yang di lakukan untuk membedakan
antara mikroba yang hidup dengan mikroba yang mati. Sel khamir yang mati dan
sel khamir yang hidup dapat dibedakan dengan adanya perbedaan warna pada sel
khamir tersebut. Sel khamir yang mati akan berwarna biru, sedangkan sel khamir
yang hidup tidak berwarna (transparan). Terbentuknya warna biru pada sel khamir
yang telah mati disebabkan karena sifat semi perneabel membran dari sel khamir
yang mati tersebut tidak berfungsi lagi sehingga sel khamir yang mati tersebut
tidak berfungsi lagi sehingga sel khamir yang mati menyerap warna biru dari
larutan methylen blue. Pada khamir yang berumur 24 jam jumlah sel yang mati
sebanyak 80 %. Sedangkan pada khamir yang berumur 48 jam, jumlah sel mati
55
sebanyak 88 %. Jumlah sel khamir yang mati, pada khamir yang berumur 24 jam
lebih sedikit dari pada khamir yang berumur 48 jam. Hal ini dikarenakan oleh
beberapa faktor yang mempengaruhi pertumbuhannya, di antaranya seperti
kandungan nutrisi substrak, pH, suhu, tersedianya oksigen dan ada tidaknya
senyawa penghambat, penyinaran lampu mikroskop dan lain–lain. Pada khamir
yang berumur 48 jam sel yang mati lebih banyak dibandingkan sel khamir yang
berumur 24 jam juga disebabkan karena pada sel khamir yang berumur 48 jam sel
yang mati lebih banyak dibandingkan sel khamir yang berumur 48 jam sudah
berada pada fase menuju kematian dimana pada fase ini nutrisi dalam substrak
sudah habis dan energi cadangan didalam sel habis. Kecepatan kematian juga
bergantung pada kondisi nutrien, lingkungan dan jenis dari khamir tersebut.
Kandungan nutrisi substrat, sel khamir yang saling berkompetisi untuk
mendapatkan nutrisi yang saling memakan satu sama lainnya. Kebanyakan khamir
lebih cepat tumbuh pada pH 4,0–4,5, suhu optimum khamir yaitu 25–30ᵒC dan
suhu maksimum 35–47ᵒC, tetapi beberapa khamir dapat tumbuh pada suhu 0ᵒC.
Tersedianya oksigen, khamir tumbuh baik pada kondisi aerobik, meskipun lambat.
Akibat penyinaran lampu mikroskop yang terlalu lama, suhu untuk pertumbuhan
khamir menjadi lebih dari batas maksimumnya, sehingga khamir yang diamati
lebih banyak mati.

56
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan maka dapat di ambil
kesimpulan sebagai berikut :
1. Khamir merupakan salah satu mikroorganisme yang termasuk kedalam
fungsi mikroskopik.
2. Khamir tidak bergerak karena tidak mempunyai flagela.
3. Persentase kematian sel khamir yang berumur 24 jam lebih sedikit
dibandingkan sel khamir yang berumur 48 jam.
4. Sel khamir yang diamati berbentuk bulat.
5. Perbedaan sel khamir yang berumur 24 jam dan 48 jam disebabkan oleh
beberapa faktor, yaitu kandungan nutrisi substrak, pH, suhu, tersedianya
oksigen dan ada tindaknya senyawa penghambat, lampu mikroskop dan
lain–lain.
57
ACARA V
PENGECATAN DAN MORFOLOGI BAKTERI
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Bakteri atau mikroba lainnya dapat dilihat dengan mikroskop biasa tanpa
pengecatan, yaitu dengan cara-cara khusus. Tetapi pengamatan dengan tanpa
pengecatan akan lebih sulit dan tidak dapat dipakai untuk melihat bagian-bagian
sel yang diteliti, karena umumnya sel bakteri bersifat tembus cahaya (transparan)
atau semi transparan. Oleh karena itu perlu dilakukannya praktikum ini untuk
mengetahui cara pengecatan dan morfologi bakteri.
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk mempelajari cara
pembuatan preparat bakteri dengan latar belakang gelap dan mengamati bentuk
serta besar sel sesungguhnya. Selain itu juga, untuk mempelajari cara pengecatan
gram dan mengamati bentuk serta sifat bakteri terhadap pengecatan gram.
58
TINJAUAN PUSTAKA
Pewarnaan gram adalah tekhnik pewarnaan diferensial yang paling banyak
digunakan dalam bakteriologi, pewarnaan ini memisahkan bakteri menjadi 2
kelompok yaitu gram positif dan gram negatif. Larutan yang digunakan dalam
pewarnaan ini ada 4 yaitu gram A, B, C dan D ( Harley, 2007 ).
Bakteri gram positif adalah jenis bakteri dengan dinding peptidoglikan
yang tebal, sementara bakteri gram negatif adalah jenis bakteri dengan dinding
peptidoglikan yang tipis. Perbedaan ketebalan dinding ini mengakibatkan
perbedaan kemampuan aktifitas dengan pewarnaan gram (Savada, 2008).
Pewarnaan negatif adalah pewarnaan yang tidak langsung mewarnai
bakteri, melainkan mewarnai latar belakang preparat bakteri tersebut. Pewarnaan
ini dilakukan menggunakan pewarnaan yang bersifat asam seperti nigrosin, tinta
india atau eursin. Pewarna ini tidak akan menembus atau berikatan dengan
dinding sel bakteri karena daya muatan negatif dinding sel bakteri. Pewarna akan
membentuk deposit disekitar bakteri atau menghasilkan latar belakang hitam
sehingga bakteri tampak tidak berwarna, sementara latar belakangnya berwarna
gelap (Presscot, 2009).
Selain berdasarkan genetis, terkadang bakter diklasifikasikan berdasarkan
pewarnannya, misalnya dengan pewarnaan gram, bakteri dibagi menjadi bakteri
gram positif dan bakteri gram negatif (Purvess, 2009).

59
Waktu dan Tempat praktikum
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis, 6 Desember 2012 di
Mataram.
a. Alat-alat Praktikum
Adapun alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini yaitu antara lain
mikroskop, gelas benda, ose,dan lampu spirtus.
b. Bahan-bahan Praktikum
Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah
biakan murni Bacillus Sp. , Ralstonia Sp. , larutan nigrosin, larutan
alkohol, larutan cat gram A,B,C dan D.
Prosedur Kerja
a. Pengecatan Negatif
1. Dibersihkan terlebih dahulu gelas benda dan gelas penutup agar bebas
lemak dan debu , dilewatkan diatas lampu spiritus hingga kering dan
didinginkan.
2. Diamati suspensi biakan murni masing-masing bakteri secara spesifik
dengan ose dan diletakkan pada permukaan gelas benda.

60
3. Ditambahkan satu tetes larutan cat nigrosin pada suspense bakteri
tersebut dan campurkan dengan batang gelas hingga berbentuk lapisan
tipis preparat, selanjutnya dikeringkan.
4. Diamati preparat tersebut dengan mikroskop, mula-mula dengan
perbesaran kecil, sedang dan kemudian perbesaran yang besar atau
kuat. Untuk perbesaran yang terakhir ini ditambahkan setetes minyak
imersi di atas lapisan bakteri untuk memperjelas kenampakan objek,
bagaimana warna bakteri yang tampak.
5. Digambar preparat bakteri yang tampak dengan latar belakang di arsir.
Perhatikan bentuk dan ukuran masing-masing bakteri.
b. Pengecatan Gram
1. Dibersihkan terlebih dahulu gelas benda dengan alkohol dan dilewatkan
pada lampu spiritus hingga kering.
2. Diambil secara diseptik satu ose suspense bakteri dan diratakan diatas
permukaan gelas benda sehingga membentuk bidang seluas 1 cm2.
3. Difiksasi dengan cara dipanaskan di atas lampu spirtus sebanyak 6-7
kali.
4. Ditambahkan 2-3 tetes cat utama (gram A) pada permukaan lapisan
bakteri sampai menutup lapisan tersebut.
5. Dibiarkan selama 1 menit, dilakukan pencucian dibawah air mengalir
dan dikeringanginkan.
61
6. Diteteskan larutan mordan (gram B) dan diamkan selama 1 menit,
kemudian dicuci dengan air mengalir dan didinginkan.
7. Dibubuhkan larutan peluntur (gram C) dan dibiarkan selama 30 detik
kemudian dicuci dengan air mengalir dan dikeringanginkan.
8. Diberi cat penutup (gram D), didiamkan selam 1 menit dan kemudian
dicuci dengan air mengalir dan dikering anginkan.
9. Diamati dengan mikroskop perbesaran kuat dengan menambahkan
minyak inersi dan bagaimana perbedaan antara bakteri gram positif dan
bakteri gram negatif.
10. Digambar dan diberi keterangan bakteri yang tampak serta diperhatikan
bentuk sel, warna dan reaksi pengecatan.

62
HASIL PENGAMATAN
Hasil Pengamatan
Pengecatan Nefatif Keterangan :
1. Latarnya berwarna
Ungu.
2. Bakterinya
berbentuk basil
dan terlihat
transparan.
Gambar 4. Bacillus Sp. ( 10 x 100 )
Pengecatan Gram
Keterangan :
putih.
2. Bakterinya
berwarna merah
muda dan
termasuk gram
negatif.
Gambar 5. Ralstonia Sp. ( 10 x 100 )

63
Pengecatan Gram
Keterangan :
putih
2. Bakterinya
berwarna merah
Gambar 6. Bacillus Sp. ( 10 x 100 )

64
PEMBAHASAN
Bakteri atau mikroba lainnya dapat dilihat dengan mikroskop biasa tanpa
pengecatan yaitu dengan cara yang khusus. Pewarnaan negatif, metode ini bukan
untuk mewarnai bakteri tetapi mewarnai latar belakangnya menjadi hitam gelap.
Pada pewarnaan ini, mikroorganisme kelihatan transparan. Tekhnik ini berguna
untuk menentukan morfologi dan ukuran sel. Pewarnaan olesan tidak mengalami
penangai mordant atau penguat warna.
Pada pengamatan pengecatan negatif, nampak Bacillus sp. Berbentuk basil
atau batang dan merupakan bakteri gram positif. Ini bisa diketahui pada tahap
dekoldrisasi. Pada tahap tersebut warna yang dihasilkan sama dengan warna
utama yaitu warna ungu. Ini menunjukkan bahwa bakteri tersebut memiliki
dinding yang tebal sehingga pada saat bakteri mengalami dehidrasi, pori-porinya
menciut yang akhirnya menyebabkan warna utama tidak bisa keluar.
Pada pengamatan pengecatan gram, bakteri Ralstonia sp. Memiliki warna
bakteri merah muda dan warna latar belakangnya adalah warna putih. Bakteri ini
termasuk dalam gram negatif sedangkan bakteri Bacillus sp. Memiliki warna
merah dan latar belakangnya berwarna putih. Kedua bakteri ini termasuk dalam
Gram negatif.
Perbedaan antara pengecatan Negatif dan pengecatan Gram, pertama
pengecatan negatif merupakan pengecatan yang dilakukan secara tidak langsung.
Dikatakan demikian karena yang dicat adalah latar belakangnya bukan bakterinya,
sedangkan bakterinya sendiri tidak mengalami pengecatan. Pada pengecatan gram
termasuk pengecatan diferensial, artinya pengecatan ini dilakukan untuk

65
membedakan bakteri-bakteri gram positif dan negatif. Pada pengecatan gram,
kedua bakteri tersebut merupakan bakteri gram negatif karena bakteri yang daya
ikatnya terhadap cat utama tidak kuat sehingga dapat dilunturkan oleh peluntur
oleh cat lawan atau cat penutup.

66
KESIMPULAN
1. Pewarnaan bakteri dapat dilakukan dengan cara pengecatan negatif dan
pengecatan gram.
2. Pada pengecatan negatif, Bacillus sp. berbentuk batang dan latar belakangnya
ungu.
3. Pada pengecatan gram Ralstonia sp. dan Bacillus sp. membentuk warna
merah muda dan merah saja dengan latar belakang keduanya sama-sama
putih,termasuk dalam gram negatif.
4. Perbedaan antara pengecatan negatif dan pengecatan gram adalah pengecatan
negatif itu merupakan pengengecatan yang dilakukan secara tidak langsung
sedangkan pengecatan gram termasuk dalam pengecatan diferensial yaitu
pengecatan yang membedakan bakteri-bakteri gram positif dan negatif.
5. Pada bakteri Ralstonia sp. dan Bacillus sp. sama-sama termasuk gram negatif
karena bakteri yang daya ikatnya terhadap cat utama tidak kuat sehingga
dapat dilunturkan oleh peluntur dan dapat diwarnai oleh cat penutup.
67
ACARA VI
ISOLASI MIKROBA DAN MORFOLOGI MIKROBA
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Suatu mikroba yang hidup dialam terbuka jarang dijumpai tumbuh sebagai
biakan murni. Tetapi pada umumnya dalam populasi campuran dengan mikrobia
lainnya. Untuk mengidentifikasi mikrobia, termasuk pengujian morfologi,
fisiologi, dan serologi, sebelumnya perlu dilakukan isolasi dari habitatnya. Jadi
isolasi suatu mikrobia adalah memindahkan mikrobia tersebut dari lingkungannya
di alam dan dapat menjadi suatu biakan murni.
Di dalam bidang mikrobiologi, untuk dapat menelaah mikrobia, khususnya
skala laboratorium, maka terlebih dahulu mikroba tersebut dapat ditumbuhkan
dalam suatu biakan yang mana didalamnya hanya terdapat mikroba yang
dibutuhkan tersebut tanpa adanya kontaminasi dari mikroba lainnya. Oleh karena
itu, perlu dilakukannya praktikum ini, agar kita dapat mengetahui tekhnik-tekhnik
isolasi dan morfologi dari mikroba tersebut.
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui dan dapat
melakukan beberapa cara dalam mengisolasi mikroba, dan untuk mengetahui
pertumbuhan mikroba, mengamati bentuk-bentuk dan sifat karakteristiknya jika
ditumbuhkan dengan tekhnik-tekhnik isolasi.

68
TINJAUAN PUSTAKA
Mikroorganisme terdapat dimana-mana, jadi persiapan untuk biakan murni
tidak saja isolasi mikroorganisme tertentu dari populasi mikroba campuran di
alam, tetapi juga pemeliharan individu yang diisolasi itu dan keturunannya pada
lingkungan buatan, dan di dalamnya dicegah pemasukan mikroorganisme lain.
Mikroorganisme tidak memerlukan banyak ruangan untuk perkembangannya,
sebab itu media buatan dapat dimasukkan ke dalam sebuah tabung percobaan,
labu, atau cawan petri. Ketiga jenis ini sangat umum digunakan untuk
membiakkan mikroorganisme. Pada permulaanya bejana biakan harus dijadikan
steril (bebas dari setiap mikroorganisme yang hidup) dan setelah diamasukkan
jenis mikroorganisme yang diinginkan, bejana itu harus dilindungi terhadap
kontaminasi yang berasal dari luar atau sumber utama pencemaran dari luar
adalah udara, yang selalu mengandung mikroorganisme yang berterbangan
(Stanier, 1982).
Mikroorganisme dibiakkan di laboratorium pada bahan nutrient yang
disebut medium. Banyak sekali medium yang tersedia macamnya yang dipakai
bergantung pada banyak faktor, salah satu diantaranya ialah macam
mikroorganisme yang akan ditumbuhkan (Pelczar, 2008).
Pekerjaan memindahkan mikroba dari medium lama ke medium yang baru
harus di laksanakan secara teliti. Terlebih dahulu harus diusahakan agar semua
alat-alat yang ada sangkut pautnya dengan medium dan pekerjaan inokulasi
(penanaman) itu benar-benar steril. Hal ini untuk menghindarkan kontaminasi,
yakni masuknya mikroorganisme yang tidak kita inginkan. Beberapa langkah

69
pada pekerjaan inokulasi dan isolasi mikroba adalah sebagai berikut, menyiapkan
ruangan, pemindahaan dengan kawat inokulasi, dan pemindahan dengan pipet.
Menyiapkan ruang; ruang tempat inokulasi harus bersih, dan bebas angin. Pada
waktu mengadakan inokulasi, baik sekali bila meja tempat inokulasi didasari
dengan kain basah. Dinding ruang yang basah menyebabkan butir-butir debu
menempel. Pekerjaan inokulasi dapat dilakukan di dalam suatu kotak berkaca
(enkas). Dialam bebas tidak ada mikroba yang hidup sendiri atau terlepas dari
spesies yang lain. Sering kali mikroba patogen kedapatan secara bersama-sama
dengan mikroba saprobe (saprobakteri). Dalam teknik biakan murni tidak saja
diperlukan bagaimana memperoleh suatu biakan murni, tetapi juga bagaimana
memelihara serta mencegah pencemaran dari luar. Medium untuk membiakan
mikroba haruslah steril sebelum digunakan. Pencemaran (kontaminasi) dari luar
terutama berasal dari udara yang mengandung banyak mikroorganisme. Teknik
biakan murni untuk suatu spesies dikenal dengan beberapa cara, yaitu, cara
pengenceran, cara penuangan, cara penggoresan. Cara pengenceran, cara ini
pertama dilakukan oleh Lister pada tahun 1865. Lister berhasil memelihara murni
Streptococcus lactis yang diisolasi dari susu yang sudah masam. Caranya adalah
dengan mengencerkan suatu suspensi yang berupa campuran bermacam-macam
spesies kemudian diencerkan dalam suatu tabung tersindiri. Dari pengenceran ini
kemudian diambil 1 ml untuk diencerkan lebih lanjut (Waluyo, 2007).
Cara penuangan yaitu, terdiri atas penginokulasian biakan campuran
kedalam tabung uji yang mengandung agar mencair yang telah didinginkan pada
suhu 45o C. Isinya diaduk untuk memencarkan bakteri keseluruhan medium.

70
Campuran itu kemudian dituangkan kedalam cawan petri steril dan dibiarkan
menjadi padat. Secara alternatif, inokulum ditempatkan pada cawan petri kosong
dan medium yang mencair dituangan diatasnya. Cawan ini diputar untuk
mencampur isinya sebelum medium menjadi padat (Volk dan Wheeler, 1988).
Cara penggoresan, cara ini dilakukan pada medium pembiakan padat
bentuk lempeng. Bila dilakukan dengan baik cara ini adalah cara yang paling
praktis. Setiap laboratorium memiliki cara atau metode pengerjaan yang berbeda-
beda, tetapi tujuannya adalah sama, yaitu untuk membuat garis sebanyak mungkin
pada permukaan lempeng medium pembiakan dengan ose atau jarum bahan
pemeriksaan yang terlepas pada garis-garis terakhir koloni-koloni bakteri yang
terbentuk akan terpisah agak jauh (Irianto, 2006).

71
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis, 14 Desember 2012 di
Laboraturium Mikrobiologi dan Bioteknologi Fakultas Pertanian Universitas
Mataram.
Adapun alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah cawan petri,
lampu spiritus, pipet mikro, jarum enten, jarum ose, dan driglaski.
Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah alkohol,
Bacillus sp, Ralstonia sp, Trichoderma sp, dan Fusarium sp.
Prosedur Kerja
a. Metode Goresan
1. Diambil satu ose suspensi biakan bakteri secara aseptis, kemudian
digoreskan ujung ose sehalus mungkin diatas permukaan medium.
2. Diberi label pada masing-masing cawan petri.
3. Diinkubasi selama 3 hari.
4. Diamati bantuk-bentuk pertumbuhan koloni bakteri hasil inkubasi.
b. Metode Sebaran
72
1. Diambil 0,1 ml suspensi biakan bakteri dengan mikro pipet steril dan
diletakkan diatas permukaan medium.
2. Diratakan biakan dipermukaan dengan driglaski.
3. Diberi label pada masing-masing cawan petri.
5. Diamati bentuk-bentuk pertumbuhan koloni bakteri hasil inkubasi.
c. Metode Taburan
1. Diambil 1 ml suspensi bakteri dengan pipet mikro steril dan diletakkan
dalam cawan petri.
2. Dituangkan secara aseptis medium NA yang sudah disiapkan kedalam
cawan petri steril dan digoyangkan cawan petri dengan arah memutar di
atas permukaan meja untuk meratakan penyebaran biakan.
4. Diamati bentuk perubahan koloni bakteri.
d. Isolasi Jamur
1. Diambil suspensi jamur dengan jarum enten secara aseptis.
2. Diletakkan pada media PDA yang steril.
4. Diamati bentuk perubahan jamur.

73
HASIL PENGAMATAN
Hasil Pengamatan
Tabel. 6.1. Hasil Pengamatan Perubahan Bentuk Jamur.

Hari Trichoderma Sp. Fusarium Sp.
ke - Diameter (cm) Warna Diameter (cm) Warna
Pertama 2,55 Putih 1,45 Putih
Putih
Kedua 7 2,8 Putih
Kehijauan
Ketiga 8,95 Hijau 4,45 Putih
Tabel. 6.2. Hasil Pengamatan Bentuk Pertumbuhan Koloni Bakteri

Bacillus Sp.
Parameter
Sebar Tabur Gores
Bentuk (dari
Bulat-bulat Titik-titik Bulat-bulat
atas)
Tepi Koloni
Utuh Utuh Berkelompok
(dari samping)
Permukaan
Koloni (dari Datar - Melengkung
samping)
Wajah
Suram - Mengkilap
Permukaan
Kepekatan Lunak - Lunak seperti lender
Warna Putih Bening Putih Kekuningan

74
Tabel. 6.3. Hasil Pengamatan Bentuk Pertumbuhan Koloni Bakteri

Parameter Ralstonia Sp.
Sebar Tabur Gores
Bentuk (dari atas) Tak teratur Bulat-bulat Titik-titik
Tepi Koloni (dari Berkelompok Utuh Rata

samping)
Permukaan Timbul datar Timbul datar Mencembung

Koloni (dari
samping)
Wajah Permukaan Suram Suram Suram
Kepekatan Lunak Lunak seperti Lunak

mentega
Warna Putih Kekuningan Putih Kekuningan Putih Kekuningan

75
PEMBAHASAN
Isolasi mikroba adalah memisahkan satu jenis mikrobia dengan mikrobia
lainnya yang terdapat di alam dan menumbuhkannya dalam suatu medium
buatan. Beberapa cara yang dilakukan untuk mengisolasi mikroorganisme yaitu
seperti dengan cara goresan, tabur, sebar, pengenceran, serta mikropanipulatur.
Pada pengamatan yang menggunakan cara sebar yaitu mendapatkan hasil,
pada bakteri Bacillus sp. berbentuk bulat sedangkan pada Ralstonia sp. tak teratur.
Dilihat dari tepi koloni Bacillus sp. utuh dan Ralstonia sp. berkelompok. Pada
permukaan koloni Bacillus sp. datar sedangkan Ralstonia sp. timbul datar, wajah
permukaan pada Bacillus sp. dan Ralstonia sp. sama-sama suram. Kepekatannya
sama-sama lunak dan warna yang terbentuk pada Bacillus sp. adalah putih
sedangkan Ralstonia sp. putih kekuningan.
Pada cara taburan Bacillus sp. berbentuk titik-titik sedangkan Ralstonia sp.
bulat-bulat. Tepi koloninya sama-sama utuh, kemudian pada permukaan koloni
pada Bacillus sp. utuh sedangkan Ralstonia sp. timbul datar. Wajah permukaan
sama-sama suram, kepekatannya pada Bacillus sp. lunak, Ralstonia sp. lunak
seperti mentega. Dan warna yang terbentuk pada Bacillus sp. yaitu bening
Ralstonia sp. putih kekuningan.
Pada pengamatan menggunakan cara gores pada dasarnya dilakukan
dengan cara menggoreskan suspensi bahan yang mengandung bakteri pada
permukaan medium agar dalam cawan petri steril atau tabung reaksi (medium
76
agar miring) dan alat yang digunakan untuk teknik goresan adalah ose. Pada
pengamatan ini didapatkan hasil bakteri Bacillus sp. bentuknya bulat sedangkan
Ralstonia sp. titik-titik. Di lihat dari tepi koloninya Bacillus sp. berkelompok
sedangkan Ralstonia sp. rata. Permukaan koloninya melengkung dan
mencembung. Wajah permukaan sama-sama suram, kepekatannya sama-sama
lunak dan wana keduannya sama-sama putih kekuningan.
Dari setiap metode isolasi akan menghasilkan morfologi yang berbeda-
beda walaupun bakteri yang digunakan sama. Hal itu dikarenakan perlakuan yang
berbeda-beda pada setiap metode.
Pada pengamatan perubahan bentuk jamur, didapatkan hasil pada bakteri
Trichorderma Sp. Pada hari pertama didapatkan diameternya 2,55 cm dan
warnanya putih, hari kedua diameternya bertambah atau tumbuh menjadi 7 cm
dan warnanya pun berubah menjadi putih kehijauan, hari ketiga diameternya terus
tumbuh hingga mencapai 8,95 cm dengan warna hijau. Sedangkan pada jamur
Fusarium Sp. Pada hari pertama diameternya 1,45 cm dengan warna putih, hari
kedua 2,8 cm dan hari ketiga 4,45 cm dengan warna yang sama atau tetap yaitu
putih. Dari hasil pengamatan yang didapat dari kedua jamur tersebut yaitu jumlah
diameter dari Trichorderma Sp. lebih besar dari pada Fusarium sp., hal ini terjadi
karena pertumbuhan optimumnya pada bakteri Trichorderma sp. lebih cepat
dalam pengamatan selama 3 hari tersebut karena setiap jamur pertumbuhannya
berbeda-beda.
77
KESIMPULAN
beberapa kesimpulan berbagai berikut:
1. Isolasi mikroba adalah memisahkan jenis mikroba dengan mikroba lainnya
yang terdapat dialam dalam suatau medium-medium.
2. Ada beberapa cara yang digunakan dalam praktikum ini yaitu dengan cara
goresan, tabur, dan sebar.
3. Dari hasil pengamatan pada praktikum isolasi dan morfologi bakteri ini
mendapat hasil yang berbeda-beda walaupun menggunakan media yang sama.
4. Pada pengamatan perubahan bentuk mikroba didapat hasil diameter dari
Trichorderma sp. 2,55 cm hari pertama, hari kedua 7cm, dan ketiga 8,95 cm
dengan warna hari pertama yaitu putih, kedua putih kehijauan, dan ketiga
hijau.
5. Fusarium sp. diameternya 1,45 cm pada hari pertama, kedua 2,8 cm dan
ketiga 4,45 cm dengan warna yang tetap yaitu putih.
6. Diameter pada hari ketiga, jamur Trichorderma sp. lebih besar daripada
Fusarium sp.
78
ACARA VII
PERHITUNGAN JUMLAH DAN PENENTUAN UKURAN MIKROBIA
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Mikroorganisme merupakan makhluk hidup yang sangat banyak, baik
ditanah, air, maupun udara. Penyebaran mikroorganisme yang tumbuh pada bahan
hasil pertanian atau pada hasil olahannya. Umumnya terdiri dari bakteri,
jamur/kapang, virus dan disamping itu terdapat juga binatang satu sel.
Pertumbuhan dan perkembangan mikroorganisme dalam bahan atau makanan,
akan menyebabkan perubahan-perubahan tertentu yaitu, perubahan yang bersifat
fisik dan kimiawi, sebagai contoh yaitu, konsistensi bahan menjadi lunak, timbul
gas atau aroma tertentu dan zat racun yang membahayakan. Jumlah penyebaran
bakteri/mikroorganisme pada bahan atau makanan yang sedang mengalami
pembusukan sangat bervariasi jumlahnya dan tidak sama jenis (spesies)nya serta
tegantung pada varietas, habitat, susunan kimia, cara penanganan, suhu
penyimpanan dan lain-lain. Oleh karena itu, perlu dilakukan pengamatan dan
perhitungan mikroba, sehingga penyebaran mikroba dapat diketahui dan ukuran
dari mikroba tersebut juga dapat diketahui.
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui jumlah dan
menentukan ukuran mikroba

79
TINJAUAN PUSTAKA
Haemocytometer ditemukan oleh Louis Charles dan terdiri dari sebuah
slide mikroskop kaca tebal dengan lekukan persegi panjang yang menciptakan
sebuah kamar. Ruangan atau kamar tersebut diukir dengan laser grid tergores
garis tegak lurus. Perangkat tersebut dibuat dengan hati-hati sehingga daerah yang
dibatasi oleh garis diketahui dan kedalaman ruang tersebut telah diketahui. Oleh
karena itu, alat tersebut berguna untuk menghitung jumlah sel atau partikel dalam
suatu volume cairan tertentu, sehingga dapat menghitung konsentrasi dalam cairan
secara keseluruhan (Pelczar, 2011).
Haemocytometer sering digunakan untuk menghitung sel-sel darah,
organel dalam sel, sel-sel darah dalam cairan tulang punggung ke otak setelah
melakukan tusukan lumbal atau jenis sel lain (Waluyo, 2009).
Cara menghitung sel individu didalam volume sangat kecil biasanya
dilakukan dengan Counting Chamber. Counting Chamber diatur sedemikian rupa
sehingga kotak-kotak dengan luas tertentu dengan lapisan cairan dengan
kedalaman yang diketahui dapat dimasukkan diantara gelas objek dengan gelas
tutup. Akibatnnya volume cairan yang menutupi setiap kotak diketahui dengan
tepat. Perhitungan langsung ini dikenal dengan jumlah sel total (Stainer, 2007).
Pada perhitungan mikroskopis langsung, sampel ditaruh disuatu ruang
hitung seperti Haemocytometer dan jumlah sel ditentukan secara langsung dengan
bantuan mikroskop. Keuntungan metode ini ialah pelaksaannya adalah cepat dan
tidak memerlukan banyak peralatan. Namun kelemahannya ialah tidak dapat

80
membedakan sel-sel yang hidup dan yang mati. Dengan perkataan lain hasil yang
diperoleh ialah jumlah total sel yang didalam populasi (Campbell, 2009).
Perhitungan jumlah koloni atau mikroorganisme dengan cara “Reable
Count” atau disebut juga sebagai standar plate count didasarkan asumsi, bahwa
setiap sel mikroorganisme hidup dalam suspensi akan tumbuh menjadi satu koloni
setelah diinkubasi dalam media biakan dan lingkungan yang sesuai. Setelah masa
inkubasi, jumlah koloni yang tumbuh dihitung dan merupakan perkiraan atau
dugaan dari jumlah mikroorganisme dalam suspensi tersebut (Bibiana, 2010).

81
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis 13 Desember 2012 di
Laboratorium Mikrobiologi dan Bioteknologi Fakultas Pertanian Uviversitas
Mataram.
Adapun alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah mikroskop,
Haemocytometer, pipet tetes dan gelas penutup.
Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah suspensi
biakan Trichoderma sp. dan Fusarium sp..
Prosedur Kerja
1. Dibersihkan Haemocytometer dan dikeringkan.
2. Ditempatkan gelas penutup pada Haemocytometer tepat pada petak-petaknya.
3. Diambil suspensi jamur dengan pipet tetes dan didekatkan ujung pipet pada
bagian berlekuk pada Haemocytometer.
4. Diamati pada mikroskop pada pembesaran sedang.
5. Dihitung jumlah sel jamur pada 5 bidang pandang.

82
HASIL PENGAMATAN DAN PERHITUNGAN
Hasil Pengamatan
Gambar 8.1. Trichoderma sp. (40 X 10)

Deskripsi : berbentuk bulat dan berwarna transparan
Gambar 8.2. Fusarium Sp. ( 40 X 10)

Deskripsi : Berbentuk bulan sabit, ujungnya tidak runcing dan berwarna
transparan
Perhitungan
83
Tabel 8.1. Hasil Pengamatan Jumlah Trichoderma sp. pada

Haemocytometer
Bidang Pandang Jumlah Mikroba
1 14
2 23
3 45
4 56
5 25
Jumlah 163
Total Sel 8,2 X 106
Jumlah sel mikroba = 163 X 5
= 815/0,1 mm2
= 8.150 mm2
= 8.150 X 1000
= 8.150.000 ml
= 8,2 X 10 6 sel/ml
Tabel 8.2. Hasil Pengamatan Jumlah Fusarim sp. pada Haemocytometer

Bidang Pandang Jumlah Mikroba
1 5
2 14
3 30
4 15
5 3
Jumlah 67
Total Sel 3,4 X 106
Jumlah sel mikroba = 67 X 5
= 335/0,1 mm2
= 3.350 mm2
= 3.350 X 1000
= 3.350.000 ml
= 3,4 X 10 6 sel/ml
84
PEMBAHASAN
Mikroba ialah jasad renik yang mempunyai kemampuan sangat
baik untuk bertahan hidup. Jasad tersebut dapat hidup hampir disemua
tempat dipermukaan bumi. Penentuan jumlah angka mikroorganisme
sangat penting dilakukan. Berbagai metode telah dikembangkan untuk
menghitung jumlah mikroorganisme. Metode tersebut menghitung jumlah
sel, massa sel atau isi sel yang sesuai dengan jumlah sel. Salah satu dari
metode tersebut adalah perhitungan langsung (Direct Count)
(Bibiana,2010).
Perhitungan langsung (direct count) digunakan untuk jumlah sel
atau biomassa mikroorganisme dan sel dihitung langsung dibawah
mikroskop atau perhitungan partikel elektronik (electronik particle
counter). Metode perhitungan langsung dapat menggunakan Counting
Chamber. Perhitungan ini dapat menggunakan Haemocytometer,
Peroffhauser Bacterial Counter atau alat-alat yang sejenis. Pada praktikum
ini digunakan Haemocytometer untuk menghitung jumlah miroba.
Haemocytometer ialah perangkat atau alat yang berfungsi untuk
menghitung jumlah sel serta partikel mikroskopis lainnya.
Haemocytometer memiliki kelemahan dan kelebihan dalam
penggunaannya dalam proses perhitungan bakteri secara langsung.
Kelebihannya antara lain ialah cepat dalam menghasilkan data dan tidak
perlu menunggu lama, serta datanya atau jumlah selnya langsung didapat
85
pada saat itu juga setelah menghitung menggunakan rumusnya dan
menghemat biaya. Sedangkan kelemahannya ialah tidak dapat
membedakan sel yang hidup dan yang mati karena perhitungan secara
keseluruhan dan data yang dihasilkan tidak akurat karena setiap pengamat
memiliki mata yang berbeda-beda dan terdapat keterbatasan dalam melihat
serta menghitung sel yang ada dalam kamar Haemocytometer (Waluyo,
2009). Dalam pengamatan ini digunakan dua bakteri yaitu Fusarium sp.
dan Trichoderma sp.. Dari hasil pengamatan dapat diketahui bahwa
jumlah sel yang terdapat dalam kamar Haemocytometer untuk Fusarium
sp. adalah 3,4 X 106 sel/ml dan untuk Trichoderma sp. adalah 8,2 X 106
sel/ml. Terjadinya perbedaan jumlah dalam perhitungan pada kamar
Haemocytometer disebabkan oleh beberapa faktor, salah satunya adalah
pada saat pengambilan mikroba menggunakan mkropipet untuk diletakkan
pada Haemocytometer.
86
KESIMPULAN
1. Perhitungan langsung digunakan untuk jumlah sel atau biomassa
mikroorganisme dan sel dihitung langsung dibawah mikroskop.
2. Haemocytometer adalah perangkat atau alat yang berfungsi untuk
menghitung jumlah sel suatu partikel mikroskopis lainnya.
3. Jumlah sel Fusarium sp. adalah 3,4 x 106 sel/ml.
4. Jumlah sel Trichoderma sp. adalah 8,2 x106 sel/ml.
5. Salah satu faktor terjadinya perbedaan jumlah mikroba pada kamar
Haemocytometer adalah pada saat pengambilan mikroba
menggunakan mikro pipet.

87
ACARA VIII
PENGARUH FAKTOR LINGKUNGAN
TERHADAP PERTUMBUHAN MIKROBA
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Populasi mikroba di alam sekitar kita sangat banyak, mereka berasal dari
air, tanah dan atmosfer. Masing-masing mikroorganisme memiliki cara tersendiri
utnuk hidup mulai dari lingkungan maupun cara untuk hidup.Kehidupan
mikroorganisme pada umumnya sangat tergantung pada faktor lingkungan. Faktor
lingkungan ini meliputi faktor biotik dan faktor abiotik.Faktor abiotik adalah
faktor luar seperti pada pengaruh suhu, pengaruh pH, pengaruh tekanan osmose
dan lain-lain. Sedangkan pengaruh faktor biotik adalah dari mikrooganisme itu
sendiri.
Faktor-faktor biotik tersebut meliputi faktor fisik (suhu, pH, tekanan
osmose) faktor kimia (senyawa racun), dan faktor biologi (interaksi dengan
mikroorganisme lainnya). Faktor inilah yang sering terjadi dan dialami di dalam
pertumbuhan suatu mikroorganisme yang banyak dari organisme tersebut suatu
senyawaan dapat berlaku sebagai sumber energi.Oleh karena itu dilakukan
percobaan ini, untuk mengetahui bagaimana pengaruh lingkungan sehingga
mikroorganisme tersebut dapat hidup dan berkembangbiak untuk melangsungkan
kehidupannya.
88
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini adalah Untuk mengetahui temperatur
minimum, optimum dan maksimum terhadap pertumbuhan mikroba.

89
TINJAUAN PUSTAKA
Dari pengaruh suhu pada kecepatan reaksi kimia, dapat diramalkan
bahwa semua bakteri dapat melanjutkan tumbuhnya (meskipun dengan
kecepatan yang semakin lama semakin lebih rendah). Selama suhu
diturunkan sampai sistem itu membeku akan tetapi kebanyakan bakteri
berhenti tumbuh pada suhu (suhu minimum untuk tumbuh). Jauh diatas
titik beku air setiap mikroorganisme mempunyai suhu yang tepat untuk
pertumbuhan, tetapi dibawah suhu ini pertumbuhan tidak terjadi
berapapun lamanya masa inkubasi (Stanier, 1984).
Nilai suhu kardinal menurut angka (minimum, optimum dan
maksimum) dan kisaran suhu yang memungkinkan pertumbuhan sangat
beragam pada bakteri. Beberapa bakteri yag diisolasi dari air sumber air
panas dapat tumbuh pada suhu setinggi 95°C yang diisolasi dari
lingkungan dingin dapat tumbuh pada suhu rendah -10°C, jika konsentrasi
solut yang tinggi mencegah mediumnya jadi beku. Berdasarkan kisaran
suhu tumbuh bakteri sering kali dibagi atas tiga golongasn besar
diantaranya Termofil yang tumbuh pada suhu tinggi (diatas 55°C), Mesofil
yang tumbuh baik antara 20°C sampai 45°C dan Psikrofil yang tumbuh
baik pada suhu 0°C (Volk & Wheeler, 1984).
Bakteri memerlukan tekanan osmotik yang sangat berbeda-beda.
Beberapa dapat tumbuh dalam larutan encer sekali dan beberapa dalam
larutan jenuh dengan larutan klorida. Mikroorganisme yang dapat tumbuh
dalam larutan osmolaritas yang tinggi dinamakan osmofil. Kebanyakan

90
lingkugan alam yang berosmolaritas tinggi terdiri dari konsentrasi garam
yang tinggi khususnya disebut Halofil. Bakteri dapat dibedakan dalam
empat golongan berdasarkan toleransinya terhadap garam non halofil.
Organisme marin, halofil moderat dan halofil ekstrim (Legel, 1994).
Dialam yang sewajarnya jarang bakteri menemui zat-zat kimia
yang menyebabkan ia sampai mati karenanya. Hanya manusia didalam
usahanya untuk membebaskan diri dari kegiatan bakteri meramu zat-zat
yang dapat meracuni bakteri, akan tetapi tidak meracuni diri sendiri atau
meracuni zat makanan yang diperlukannya. Zat-zat yang hanya
menghambat pembiakan bakteri dengan tidak membunuhnya disebut zat
antiseptik atau zat bakteriostatik, zat yang dapat membunuh disebut
desinfektan, germisida atau bakterisida (Suriawiria, 1985).
Pertumbuhan mikroba dapat dikendalikan dengan cara fisik dan
kimia. Cara fisik dapat dilakukan melalui penggunaan panas, suhu rendah,
desikasi, tekanan osmosis, filtrasi, dan radiasi sedangkan cara kimiawi
meliputi penggunaan bahan kimia yang mematikan/mengurangi
pertumbuhan pada bahan permukaan benda hidup atau mati (Slamet,
1995).
91
Praktikum ini dilaksanankan pada hari Kamis, 20 Desember 2012 di
Mataram.
a. Alat praktikum
Adapun alat-alat yang digunakan pada praktikum ini adalah drigalski,
cawan petri, pipet mikro, jarum preparat, bunsen, pinset, dan paper disk.
b. Bahan praktikum
Adapun bahan-bahan yang digunakan pada praktikum ini adalah medium
Nutrient Agar, biakan/suspensi Bacillus sp., Ralstonia sp., Fusarium sp.,
Trichoderma sp., ekstrak daun jambu mete, dan kombucha.
Prosedur Kerja
a. Pengaruh Suhu Terhadap Pertumbuhan Mikroba
1. Dimasukkan secara aseptis sebaran bakteri Bacillus sp. dan Ralstonia sp.
sebanyak 1 ml ke dalam cawan petri yang berbeda.
2. Diratakan menggunakan drigalski.
3. Dimasukkan secara aseptis biakan jamur Fusarium sp. dan Trichoderma sp.
menggunakan jarum enten ke dalam dua cawan petri yang berbeda.
4. Dibuat label pada masing-masing media, yaitu dua media untuk suhu ruang
dan dua media untuk suhu rendah.

92
5. Diinkubasi selama 24-48 jam masing-masing pada suhu ruang dan suhu
rendah.
6. Diamati pertumbuhan bakteri pada masing-masing cawan petri.
b. Pengaruh Ekstrak Daun Jambu Mete Terhadap Pertumbuhan Mikroba
1. Dimasukkan secara aseptis suspensi bakteri sebanyak 1 ml ke dalam cawan
petri.
2. Diratakan menggunakan drigalski.
3. Dimasukkan dua paper disk yang telah dicelupkan ke dalam ekstrak daun
jambu mete dan diletakkan di media yang telah berisi bakteri.
4. Dimasukkan dua paper disk yang telah dicelupkan ke dalam kambucha dan
diletakkan pada media yang telah berisi bakteri dalam cawan petri yang lain.
5. Diinkubasi pada suhu ruang selama 24-48 jam.
6. Diamati perubahan yang terjadi di sekeliling paper disk.

93
HASIL PENGAMATAN
Hasil Pengamatan
Tabel 9.1. Hasil Pengamatan Pengaruh Suhu Terhadap Pertumbuhan Mikroba

Perlakuan
Mikroba
Suhu Ruang Suhu Rendah
Bacillus Sp. Ada Tidak ada
Ralstonia Sp. Ada Tidak ada
Fusarium 1,38 cm 2,3 cm
Trichoderma 2,95 cm 8,75 cm
Tabel 9.2. Hasil pengamatan Pengaruh Ekstrak Daun Jambu Mete dan
Kombucha
Paper Disk
Bacillus Sp. Ralstonia Sp.
Diameter Diameter
Kombucha - -
Ekstrak Daun Jambu Mete 1,05 -
94
PEMBAHASAN
Populasi mikroba di alam sekitar kita sangat banyak, mereka berasal dari
air, tanah dan atmosfer. Masing-masing mikroorganisme memiliki cara tersendiri
utnuk hidup mulai dari lingkungan maupun cara untuk hidup. Kehidupan
mikroorganisme pada umumnya sangat tergantung pada faktor lingkungan. Faktor
lingkungan ini meliputi faktor biotik dan faktor abiotik. Faktor abiotik adalah
faktor luar seperti pada pengaruh suhu, pengaruh pH, pengaruh tekanan osmose
dan lain-lain. Sedangkan pengaruh faktor biotik adalah dari mikrooganisme itu
sendiri.
Faktor-faktor biotik tersebut meliputi faktor fisik (suhu, pH, tekanan
mikroorganisme lainnya). Faktor inilah yang sering terjadi dan dialami didalam
pertumbuhan suatu mikroorganisme yang banyak dari organisme tersebut suatu
senyawaan dapat berlaku sebagai sumber energi. Oleh karena itu dilakukan
percobaan ini, untuk mengetahui bagaimana pengaruh lingkungan sehingga
mikroorganisme tersebut dapat hidup dan berkembang biak untuk melangsungkan
kehidupannya.
Nilai suhu kardinal menurut angka (minimum, optimum dan maksimum)
dan kisaran suhu yang memungkinkan pertumbuhan sangat beragam pada bakteri.
Beberapa bakteri yag diisolasi dari air sumber air panas dapat tumbuh pada suhu
setinggi 95°C, yang diisolasi dari lingkungan dingin dapat tumbuh pada suhu
rendah -10°C, jika konsentrasi solut yang tinggi mencegah mediumnya jadi beku.
95
Pada praktikum kali ini dikembang gunakan beberapa mikroba antara lain
Trichoderma sp., Fusarium sp., Bacillus sp. dan Rastolnia sp. dalam suatu wadah
(cawan petri). Perkembangan dan pertumbuhan mikroba ini sangat dipengaruhi
sekali oleh faktor lingkungan, dimana perubahan faktor lingkungan dapat
mengakibatkan perubahan sifat morfologi dan fisiologi mikrobia.
Aktifitas mikrobia dapat dikendalikan dengan mengatur faktor lingkungan
tempat hidupnya. Faktor lingkungan penting artinya dalam usaha mengendalikan
kegiatan mikroba, Faktor-faktor lingkungan tersebut meliputi faktor biotik dan
abiotik. Faktor abiotik meliputi pengaruh dari ekstrak daun jambu mente dan
kombucha.
Pada pengamatan hasil sudah dapat dilihat pertumbuhan dan perkembangan
mikroba untuk Bacillus sp. pada suhu rendah tidak didapatkan koloni bakteri,
sedangkan suhu ruang terdapat pertumbuhan koloni, Ralstonia sp., pada suhu
rendah tidak terdapat koloni bakteri, sedangkan pada suhu ruang terdapat koloni
bakteri, ini dikarenakan bakteri tidak dapat tumbuh pada suhu rendah, sedangkan
pada suhu ruang bakteri sangat cepat tumbuh.
Pada pengujian pengaruh ekstrak daun jambu mete dan kumbucha
didapatkan hasil paper disk pada paper disk pertama maupun kedua untuk
kombucha tidak dapat tumbuh sama sekali. Sedangkan untuk ekstrak daun jambu
mete didapatkan diameter untuk paper disk pertama yaitu 1,05 cm, sedangkan
paper disk yang kedua tidak ada. Ini disebabkan daun jambu mete dan dan
kombuca dapat menghambat pertumbuhan mikroba.

96
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan dapat diterik kesimpulan
sebagai berikut
1. Populasi mikroba di alam sekitar kita sangat banyak, mereka berasal dari air,
tanah dan atmosfer.
2. Faktor-faktor biotik tersebut meliputi faktor fisik (suhu, pH, tekanan
mikroorganisme lainnya).
3. Nilai suhu kardinal menurut angka (minimum, optimum dan maksimum)
dan kisaran suhu yang memungkinkan pertumbuhan sangat beragam pada
bakteri.
4. Suhu rendah dapat menghambat pertumbuhan bakteri.
5. Daun jambu mete dan dan kombucha dapat menghambat pertumbuhan
mikroba.
DAFTAR PUSTAKA
Ali, 2009. Mikrobiologi Dasar Jilid I. Badan Penerbit Universitas Negeri

Makasar, Makasar.
Biabiana, 2010. Analisis Mikrobia di Laboratorium. PT Raya Grafindo Persada.

Jakarta.
Balley, 2007. Diagnosal Mikrobiologi. Houston Elserver. New York.
Bukle, K. A., 2008. Ilmu Pangan. UI Press. Jakarta
Campbell, A., 2009. Biologi.Erlangga. Jakarta
Dwidjoseputro, 2010. Dasar-dasar Mikrobiologi. Bambatang. Jakarta.
Dwyana, Z. dan Nur, H., 2009 Penuntut Praktikum Mikrobiologi Pangan.

Jurusan Biologi. Universitas Hasanuddin. Makassar.
Harley, 2007. Pengertian Pewarnaan Gram. Gramedia. Jakarta.
Hafrah, 2009. Mikrobiologi Umum. Program Study Biologi. UIN Alauddin

Makassar. Makassar.
Iman K., 2010. Biokimia Nutrisi dan metabolism. UI.Prses. Jakarta.
Irianto K., 2007. Mikrobiologi. Yrama Widya. Bandung.
Lay, B.W.,2008. Analisis Mikroba di Laboratorium. PT. Raja Grafindo Persada.

Jakarta.
Nurhainah et al., 2007. Media. UI Press. Jakarta.
Palezar, C. 2008. Dasar – dasar Mikrobiologi. UI Press. Jakarta
Presscot, 2009. Pewarnaan negatif. UI Press. Jakarta.
Purvess, 2009. Klasifikasi Bakteri. UI Press. Jakarta.
Pelezar, J.R., Michael, E.S.C . Chan.,2011. Dasar-Dasar Mikrobiologi. UI Press.

Jakarta.
Savada, 2008. Bakteri. Gramedia. Jakarta.
Stainer J., 2007. Dunia Mikroba 1. Biantara Aksara. Jakarta.

98
Waluyo, L., 2009. Mikrobiologi Umum. UPT Penerbitan UMM. Bandung.
Waluyo, 2007. Mikrobiologi Umum. Erlangga. Jakarta.
Waluyo, L. 2007., Mikrobiologi Umum. UPT Penerbitan UMM. Malang.

Laporan Tetap Mikrobiologi Umum Kelompok I PDF

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Laporan Tetap Mikrobiologi Umum Kelompok I PDF

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

LAPORAN TETAP

PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI UMUM

PROGRAM STUDI ILMU DAN TEKNOLOGI PANGAN

Mikrobiologi Umum di Fakultas Teknologi Pangan dan Agroindustri Universitas

penyempurnaan laporan ini selanjutnya.

Mataram, Desember 2012

Acara 1. Pengenalam Alat-Alat Praktikum

Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 9

Pelaksanaan Praktikum ................................................................................ 12

Hasil Pengamatan ......................................................................................... 13

Acara 2. Morfologi Jamur Benang

Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 23

Pelaksanaan Praktikum ................................................................................ 26

Hasil Pengamatan ........................................................................................ 28

Acara 3. Pembuatan Medium Pertumbuhan Mikroba

Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 35

Pelaksanaan Praktikum ................................................................................ 37

Hasil Pengamatan ........................................................................................ 39

Acara 4. Morfologi Sel Khamir

Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 46

Pelaksanaan Praktikum ................................................................................ 48

Hasil Pengamatan ........................................................................................ 50

Acara 5. Pengecatan Bakteri

Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 57

Pelaksanaan Praktikum ................................................................................ 58

Hasil Pengamatan ........................................................................................ 61

Acara 6. Isolasi dan Morfologi Bakteri

Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 67

Pelaksanaan Praktikum ................................................................................ 70

Hasil Pengamatan ........................................................................................ 72

Acara 7. Perhitungan Jumlah dan Penentuan Ukuran Mikroba

Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 78

Pelaksanaan Praktikum ................................................................................ 80

Hasil Pengamatan ........................................................................................ 81

Acara 8. Pengaruh Faktor Lingkungan Terhadap Pertumbuhan Mikroba

Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 88

Pelaksanaan Praktikum ................................................................................ 90

Hasil Pengamatan ........................................................................................ 92

Gambar 1. Alat-Alat Praktikum ................................................................... 13

Gambar 2. Morfologi Jamur ......................................................................... 28

Gambar 3. Pengecatan dan Morfologi Bakteri .............................................. 61

Gambar 4. Perhitungan Jumlah dan Penentuan Ukuran Mikroba .................. 81

Tabel 1. Hasil Pengamatan Pembuatan Medium ........................................ 39

Tabel 2. Hasil Pengamatan Morfologi Khamir .......................................... 50

Tabel 3. Hasil Pengamatan Isolasi dan Morfologi Mikroba ....................... 72

Tabel 4. Hasil Pengamatan Perhitungan Jumlah dan Penentuan

Ukuran Mikroba ........................................................................ 82

Tabel 5. Hasil Pengamatan Pengaruh Faktor Lingkungan

Terhadap pertumbuhan Mikroba ................................................ 92

Pengenalan alat-alat laboratorium penting dilakukan untuk keselamatan

bahkan berbahaya jika penggunaannya tidak sesuai dengan prosedur. Sebab

pentngnya dilakukan pengenalan alat-alat laboratorium agar dapat diketahui cara-

yang tepat akan meningkatkan kualitas penelitian seseorang.

Tujuan praktikum pengenalan alat-alat praktikum adalah untuk

mengetahui alat-alat apa saja yang terdapat di laboratorium mikrobiologi, cara

Dalam sebuah praktikum, praktikan diwajibkan mengenal dan memahami

masing-masing alat, praktikan dapat melakukan praktikum dengan sempurna

Pengenalan alat-alat ini meliputi macam-macam alat, mengetahui nama-

memiliki fungsi yang sfesifik (Imamfhasai, 2010).

Mikroskop adalah alat yang paling khas dalam laboratorium mikrobiologi

kali (Lay, 2008).

Peralatan yang dipergunakan di laboratorium mikrobiologi selain

timbangan, PH meter, inkubator, water bath (penangas air), refrigator, freezer,