Nama : Nesti Puji Astuti

Npm : 5117011
Prodi : D-IV Teknologi Laboratorium Medik
Tugas Matkul : Bioteknologi Kesehatan
Review Jurnal Internasional

Judul Monoclonal antibodies

Penerbit J Clin Pathol: Mol Pathol
Volume dan Vol 53, 111-117
Halaman
Tahun Terbit 2000
Penulis P N Nelson, G M Reynolds, E E Waldron, E Ward, K
Giannopoulos, P G Murray
Reviewer Nesti Puji Astuti
Tanggal 22 April 2020

Tujuan Tujuan dari pembahasan jurnal ini adalah untuk membahas teori
antibodi monoklonal dan generasi praktis antibodi monoklonal
murine dan penerapannya dalam diagnosa histopatologis dan
pengobatan penyakit ganas.
Subjek Penelitian Tikus
Pendahuluan Antibodi monoklonal adalah alat penting untuk banyak investigasi
imunologi molekuler. Khususnya, ketika digunakan dalam
kombinasi dengan teknik seperti pemetaan epitop dan pemodelan
molekuler, antibodi monoklonal memungkinkan pengisian
antigenik dan visualisasi permukaan makromolekul. Selain itu,
antibodi monoklonal telah menjadi komponen kunci dalam
beragam tes diagnostik laboratorium klinis. Aplikasi mereka yang
luas dalam mendeteksi dan mengidentifikasi analit serum, penanda
sel, dan agen patogenik sebagian besar telah muncul melalui
spesifikasi yang sangat baik dari reagen yang unik ini.
Selanjutnya terus menerus budaya dari sel hibridoma yang
menghasilkan anti-tubuh ini o V ada potensi pasokan reagen yang
tidak terbatas. Pada dasarnya, ketika dibandingkan dengan suplai
yang agak terbatas dari reagen antibodi poliklonal, fitur dari suplai
kontinu memungkinkan standarisasi baik pereaksi dan teknik
pengujian. Jelas, antibodi poliklonal dan monoklonal memiliki
kelebihan dan kekurangan dalam hal generasi, biaya, dan aplikasi
keseluruhan. Pada akhirnya, antibodi monoklonal hanya
diproduksi bila diperlukan karena produksinya memakan waktu
dan membuat frustrasi, meskipun sangat bermanfaat (setidaknya
sebagian besar waktu!). Ini terutama terlihat ketika antibodi
monoklonal dapat diterapkan dengan sukses di laboratorium
patologi rutin atau dapat membantu dalam diagnosis klinis dan
 perawatan pasien.
Hasil dan Antibodi adalah molekul khusus dalam darah dan cairan
Pembahasan jaringan yang membantu kita melawan infeksi. Ada berbagai
molekul antibodi di V bentuk dan ukuran yang berbeda, molekul
antibodi di V bentuk dan ukuran yang berbeda, molekul antibodi
di V bentuk dan ukuran yang berbeda, meskipun struktur
dasarnya pada dasarnya berbentuk "Y", dengan dua ujung
dirancang untuk merekam dan mengikat (gbr. 1) agen asing
(misalnya, bakteri), zat asing, atau sel berbahaya.
Ketika respon imun humoral diprovokasi oleh
imunogen, seperti tetanus toksoid, sejumlah besar antibodi
diproduksi secara individu melawan V. Beberapa bagian atau
wilayah zat asing ini. Ini disebut penentu antigenik, atau epitop,
yang biasanya mengandung enam hingga delapan asam amino.
Harus dipahami bahwa sebagian besar antibodi mengenali dan
berinteraksi dengan bentuk tiga dimensi yang terdiri dari residu
"terputus-putus" yang dibawa ke penjajaran oleh lipatan molekul.
Sebagai alternatif, antibodi juga dapat mengenali peregangan
linier asam amino atau epitop "kontinu". Tentu saja, konsep
penting yang perlu diingat adalah bahwa setiap molekul antibodi
adalah spesifik untuk epitop tunggal, dan bahwa masing-masing
anti-tubuh adalah produk dari klon sel B tunggal. Dengan
demikian, suatu antibodi dari spesifis unik, yang berasal dari klon
sel B tunggal, disebut antibodi monoklonal.
Antibodi poliklonal mendeteksi multiplisitas epitop dan
karenanya mengenali antigen. Selain itu, reagen poliklonal relatif
sederhana dan murah untuk diproduksi dalam jangka pendek
dibandingkan dengan reagen monoklonal. Penggunaan hewan
yang lebih besar seperti kuda, kambing dan kelinci
memungkinkan pemulihan volume yang lebih besar. Akibatnya
antibodi monoklonal memungkinkan pengembangan sistem
imunoassay yang terstandarisasi dan aman.
Secara keseluruhan, antibodi monoklonal berfungsi
sebagai alat untuk penyelidikan makromolekul dan sel. Terdapat
5 tahap dalam produksinya :
1. Tahap imunisasi
Zat yang menginduksi respons imun biasanya asing bagi
individu dan disebut imunogen. termasuk adjuvan lengkap / tidak
lengkap. Biasanya, protein diberikan secara subkontinyus
sedangkan sel diberikan secara intraperito- nal. Untuk strategi in
vivo, digunakan tikus yang sesuai (umumnya responden terbaik
dari ekor berdarah) dan mengeluarkan (secara aseptik) sel B yang
merespon secara antigen dari limpa (atau kelenjar getah bening)
untuk mendapatkan sel yang layak untuk hibridisasi. Patut dicatat
bahwa walaupun imunisasi in vivo (termasuk pemberian
intrasplenic) adalah pilihan favorit di banyak laboratorium, ada
juga kesempatan untuk imunisasi in vitro. Dalam hal ini, sel-sel
lain yang dikultur distimulasi dengan jumlah antigen yang
minimal.
2. Fusion dan Seleksi
Proses hibridisasi berpusat pada fusi sel B limpa murine
dengan sel myeloma histokompatibel, seperti Sp2 / 0. sebagai
contoh, dengan membiakkan dalam medium yang mengandung 8-
azaguanine. Intinya, enzim ini sangat penting untuk proses seleksi
hibridoma pasca-fusi. Dalam proses fusi, sel B limpa dicampur
dengan sel myeloma negatif HGPRT dan zat pelebur, seperti
polietilen glikol. Setelah sel-sel hibrida ini dibentuk dan disepuh
ke dalam sumur kultur jaringan, prioritas bergeser ke arah
penghapusan sel myeloma yang tidak terpakai. Situasi ini
diselesaikan dengan menggunakan media selektif yang
mengandung hipoksantin, aminopterin, dan timidin, atau dikenal
sebagai "HAT".hibridoma yang baru terbentuk bertahan dalam
proses seleksi ini karena enzim jalur penyelamatan disediakan
oleh rekanan sel B liunya.
3. Screening
Tahap ini berfokus pada identifikasi dan pemilihan
hibridoma yang menghasilkan antibodi dengan spesifikasi yang
sesuai. Proses pemilihan harus kejam jika tidak, banyak
hibridoma yang tidak diinginkan. sistem skrining “primer” yang
cepat digunakan yang menguji suplementasi kultur hibridoma
untuk reaktivitas dan spesifisitas antibodi. Sebagai contoh, protein
atau peptida terkait virus Epstein-Barr dapat dilapisi ke piring
ELISA plastik. Setelah inkubasi supernatan kultur hibridoma,
konjugat bertanda enzim sekunder, dan substrat kromogenik,
produk berwarna mengindikasikan higogen doma positif.
4. Karakterisasi
Adakah analisis lebih lanjut dari antibodi monoklonal
potensial yang menghasilkan hibridoma dalam hal reaktivitas,
spesifisitas, dan reaktivitas silang dapatdicapai dengan
menggunakan supernatan kultur atau sediaan imunoglobulin
murni. Aspek penting dari karakterisasi berkaitan dengan
pengisian antibodi monoklonal di V sistem pengujian erent. Ini
berkaitan dengan potensi antibodi sebagai pereaksi diagnostik
karena beberapa antibodi monoklonal berkinerja baik dalam
beberapa sistem tetapi tidak pada yang lain.
5. Perkembangan Lebih Lanjut
Setelah diturunkan, antibodi monoklonal dapat berfungsi
sebagai alat penelitian investigasi, atau menemukan aplikasi
dalam uji diagnostik atau sebagai agen terapeutik. Selain peluang
kolaboratif potensial, eksploitasi komersial antibodi monoklonal
dapat memberikan beberapa pendapatan untuk proyek penelitian
masa depan. Lebih jauh lagi, pemetaan epitop dari antibodi
monoklonal dalam hubungannya dengan pemodelan molekuler
dapat memungkinkan visualisasi dan lokalisasi daerah antigenik
utama pada suatu molekul. Informasi ini mungkin membantu
untuk menjelaskan hubungan struktur-fungsi protein, karbohidrat,
dan molekul lain yang relevan secara klinis.

 Antibodi monoklonal dalam diagnosis histopatologis

kanker dan sebagai agen dalam pengobatan penyakit
ganas
Ini dapat digunakan untuk mengklasifikasikan jaringan
dan tumor sesuai dengan ekspresi mereka dari penanda
tertentu yang mencerminkan jaringan atau genesis seluler.
Misalnya, antibodi monoklonal terhadap antigen terkait organ
tertentu, seperti antigen spesifik prostat, alkali fosfatase
plasenta, manusia gonadotrophin korion, dapat membantu ahli
patologi dalam menetapkan sifat tunor primer. Dalam hal ini,
antibodi monoklonal telah terbukti sangat berguna dalam
membuat perbedaan antara lesi yang secara morfologis serupa,
seperti antara mesothelioma dan adenokarsinoma.
Penanda tertentu yang terdeteksi oleh antibodi
monoklonal dapat memberikan informasi tentang prognosis
pada pasien dengan kanker. Sebagai contoh, deteksi protein
anti-apoptosis, BCL-2, adalah indikator prognostik yang buruk
dalam berbagai jenis tumor, termasuk kanker ovarium dan
prostat. Antioksi monoklonal dapat mendeteksi
imunohistokimia dengan rutin reseptor estrogen telah terbukti
berharga dalam memprediksi pasien kanker payudara yang
akan mendapat manfaat dari pengobatan anti-estrogen. Studi
imunohistokimia telah memetakan ekspresi berbagai antigen
CD ke sel dan jaringan tertentu. Ini telah menyebabkan
penggunaannya sebagai penanda sel atau jaringan dalam
diagnosis limfoma histopatologis. Beberapa antigen CD yang
diekspresikan pada sel limfoma telah memberikan target untuk
pendekatan imunoterapi.
Demikian pula, identifikasi overekspresi onkogen, HER-
2 / neu (c-erbB-2), pada kanker payudara telah mengarah pada
pengembangan pendekatan imunoterapi untuk penyakit ini
berdasarkan penggunaan antibodi monoklonal.
Penggunaan Rituxan dan Herceptin adalah contoh dari
 aplikasi antibodi monoklonal yang berkembang di arena klinis.
Produksi dan karakterisasi antibodi monoklonal manusia atau
fragmen antibodi antitumor menggunakan teknologi tampilan
fage harus mendukung pengembangan banyak agen yang lebih
kuat untuk mengobati pasien kanker.
Kesimpulan Dalam jurnal ini memberikan poin penting untuk alasan
dalam menghasilkan antibodi monoklonal dan langkah-langkah
yang diperlukan untuk produksinya. Selain itu, sejumlah aplikasi
telah dikutip untuk dibaca lebih lanjut. Menggunakan model
mouse dan prosedur yang terkait untuk menghasilkan antibodi
monoklonal tentu saja menyediakan cara demistifikasi antibodi
monoklonal. Namun, perlu dicatat bahwa tersedia lain dan
antibodi yang berasal dari teknologi antibodi fag rekombinan akan
menjadi lebih menonjol di masa depan. Selain itu, proses
menghasilkan hibridoma harus selalu dianggap sebagai
pengalaman belajar.Baru-baru ini, beberapa antigen peptida yang
dirancang untuk sekuens asam amino yang terkait virus Epstein-
Barr menghasilkan hibridoma yang paling dominan menghasilkan
antibodi monoklonal dari isotipe IgM. Dalam hal ini, peptida
mungkin tidak dapat menginduksi perpindahan sel B kelas.
Sebagai konsekuensinya, strategi imunisasi apa pun di masa depan
harus dipertimbangkan temuan ini untuk produksi antibodi IgG.
Akhirnya, tugas menghasilkan hibridoma tidak dapat dilakukan
dengan mudah.