Naskah Revisi Sidang Tertutup

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI TANIN TANAMAN BUAH LINDUR
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) TERHADAP PERTUMBUHAN

BAKTERI Escherichia coli ATCC 25922
SKRIPSI
Diajukan untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi Program Studi S1 Farmasi
Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi “Yayasan Pharmasi Semarang”
Wijayanti Marheani
1041211191
PROGRAM STUDI S1 FARMASI

SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI “YAYASAN PHARMASI SEMARANG”
2017
i
HALAMAN PENGESAHAN
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI TANIN TANAMAN BUAH LINDUR

(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) TERHADAP PERTUMBUHAN
BAKTERI Escherichia coli ATCC 25922
Oleh :
Wijayanti Marheani
1041211191
Program Studi S1 Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi “YAYASAN PHARMASI”

Pada tanggal : Januari 2017
Mengetahui
Program Studi S1 Farmasi
Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi
“YAYASAN PHARMASI”
Pembimbing I Ketua
Christina A., M.Si., Apt. Intan Martha Cahyani, M.Sc., Apt.

Pembimbing II
Wulandari, M.Sc., Apt.
Penguji :
1. Lia Kusmita, M.Si. _____________________
2. Yuvianti Dwi Franyoto, M.Sc., Apt. _____________________
3. Christina A., M.Si., Apt. _____________________
4. Wulandari, M.Sc., Apt. _____________________
ii
HALAMAN PERNYATAAN
Yang bertanda tangan dibawah ini :
Nama : Wijayanti Marheani
NIM : 1041211191
Judul Skripsi : Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Tanin Tanaman Buah
Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli ATCC 25922
Tahun Pembuatan : 2017
Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi saya tidak terdapat karya yang
pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi,
dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang
pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali secara tertulis diacu dalam
naskah skripsi saya dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Semarang, Januari 2017
Wijayanti Marheani
iii
MOTTO DAN PERSEMBAHAN
Buatlah Orang Tuamu Bangga, Buatlah Musuhmu Iri
dan Buatlah Dirimu Sendiri Bahagia.
“Sesungguhnya bersama kesulitan ada kemudahan. Maka apabila engkau telah

selesai (dari sesuatu urusan), tetaplah bekerja keras (untuk urusan yang lain),
dan hanya kepada Tuhanmulah engkau berharap.”
(QS. Al-Insyirah, 94 : 6-8)
“Dialah Allah, tidak ada Tuhan selain Dia. Mengetahui yang gaib dan yang
nyata. Dialah yang Maha Pengasih, Maha Penyayang.”
(QS. Al-Hasyr, 59 : 22)
Kupersembahkan karya ini untuk :
Sembah sujud serta syukur kepada Allah SWT atas karunia dan kemudahan yang
Engkau berikan
Serta Sholawat dan salam bagi junjunganku Nabi Muhammad SAW
Kedua orang tuaku dan adik ku tercinta
Ungkapan rasa Hormat, Sayang, dan Baktiku.
Ibu Christin dan Ibu Wulandari sebagai sumber motivatorku
iv
v
Sahabat-sahabatku dan teman seperjuangan sebagai rasa sayang, terimakasih

atas dukungan, penyemangat dan doa untukku
Almamaterku yang selalu kubanggakan.

PRAKATA
Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan
hidayah-Nya, sehingga skripsi ini dapat diselesaikan dengan baik. Dalam
penyelesaian dan penyusunan skripsi ini tidak terlepas dari bantuan berbagai
pihak, oleh karena itu penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Dra. Erlita Verdia Mutiara, M.Si., Apt., selaku Ketua Sekolah Tinggi Ilmu
Farmasi “YAYASAN PHARMASI” Semarang.
2. Intan Martha Cahyani, M.Sc., Apt., selaku Ketua Program Studi S1 Sekolah
Tinggi Ilmu Farmasi “YAYASAN PHARMASI” Semarang.
3. Christina A., M.Si., Apt. sebagai dosen pembimbing I yang telah memberikan
bimbingan, arahan, saran, kritik, dan motivasi selama penyusunan skripsi ini.
4. Wulandari, M.Sc., Apt. sebagai dosen pembimbing II yang telah memberikan
bimbingan, arahan, kritik, dan motivasi selama penyusunan skripsi ini.
5. Lia Kusmita, M.Si., sebagai dosen penguji I yang telah memberikan arahan,
bimbingan, kritik, dan saran dalam memperbaiki skripsi ini.
6. Yuvianti Dwi Franyoto, M.Sc., Apt., sebagai dosen penguji II yang telah
memberikan arahan, bimbingan, kritik, dan saran dalam memperbaiki
skripsi ini.
7. Ika Puspitaningrum., M.Sc., Apt. selaku dosen wali yang telah memberikan
arahan dan nasehat selama kuliah.
8. Bapak dan Ibu Dosen serta seluruh staff pengajar Sekolah Tinggi Ilmu
Farmasi ”Yayasan Pharmasi” Semarang yang telah memberikan bekal ilmu
pengetahuan yang bermanfaat bagi penulis.
vi
9. Seluruh staf, laboran dan karyawan Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi ”Yayasan
Pharmasi” yang telah memberikan bantuan selama penelitian ini berlangsung.
10. Keluargaku, sahabatku dan teman-temanku yang selalu memberikan semangat
serta dukungan dalam menyelesaikan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa dengan keterbatasan kemampuan masih banyak
kekurangan dalam penyusunan skripsi ini, sehingga kritik dan saran yang
membangun sangat diharapkan penulis guna kesempurnaan skripsi ini.
Semarang, Januari 2017
Penulis
vii
SARI
Infeksi merupakan kondisi dimana tubuh bereaksi terhadap mikroorganisme

penyakit yang dapat menimbulkan gejala klinis. Bakteri penyebab penyakit yang
paling banyak ditemui di negara tropis adalah Escherichia coli. Penanggulangan
penyakit infeksi dapat dilakukan dengan pemilihan obat-obatan yang bersifat
antibakteri dan alami. Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) merupakan
salah satu tanaman obat yang memiliki kandungan antibakteri. Pada bagian
buahnya berkhasiat sebagai bahan pangan, mengobati sakit perut dan mengobati
infeksi saluran pencernaan.
Tujuan dilakukan penelitian ini untuk mengetahui aktivitas antibakteri fraksi
tanin buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) terhadap pertumbuhan
Escherichia coli dengan metode difusi sumuran, selain itu untuk mengetahui
senyawa tanin pada aktivitas antibakteri dengan metode bioautografi dan untuk
mengetahui konsentrasi yang digunakan sebagai antibakteri untuk mencegah
pertumbuhan Escherichia coli.
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan salah satu metode ekstraksi
yaitu remaserasi yang kemudian dilanjutkan dengan fraksinasi senyawa tanin
menggunakan kromatografi kolom vakum dengan menggunakan fase gerak
klorofom : metanol dan fase diam silika gel. Fraksi tanin diuji aktivitas
antibakterinya dengan metode sumuran pada konsentrasi 5%, 15%, 25%. Kontrol
positif digunakan ciprofloksasin dan kontrol negatif digunakan DMSO (Dimethyl
Sulphoxide). Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi tanin diperoleh zona hambat
yang dihasilkan pada konsentrasi 5%, 15%, 25% secara berturut-turut sebesar
8,73 mm; 10,76 mm; 12,40 mm dan ciprofloksasin 0,005% sebesar 28,08 mm.
Berdasarkan hasil penelitian, dapat disimpulkan bahwa fraksi tanin ada perbedaan
signifikan antar konsentrasi fraksi tanin yang menghambat pertumbuhan bakteri
Escherichia coli. Hasil bioautografi didapatkan senyawa tannin memberikan
aktivitas antibakteri.
Kata kunci : buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk), fraksi tanin,
antibakteri, Escherichia coli.
viii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL........................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN.......................................................................... ii
HALAMAN PERNYATAAN.......................................................................... iii
MOTTO DAN PERSEMBAHAN.................................................................... iv
PRAKATA....................................................................................................... v
SARI................................................................................................................. vii
DAFTAR ISI.................................................................................................... viii
DAFTAR TABEL............................................................................................ xi
DAFTAR GAMBAR........................................................................................ xii
DAFTAR LAMPIRAN.................................................................................... xiii
BAB I PENDAHULUAN................................................................................. 1
1.1 Latar Belakang Masalah............................................................................. 1
1.2 Rumusan Masalah....................................................................................... 3
1.3 Batasan Masalah......................................................................................... 4
1.4 Tujuan Penelitian........................................................................................ 4
1.5 Manfaat Penelitian...................................................................................... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA DAN HIPOTESIS........................................ 6
2.1 Tinjauan Tentang Tanaman Buah Lindur.................................................. 6
2.1.1 Klasifikasi Tanaman Buah Lindur........................................................ 6
2.1.2 Morfologi Tanaman Buah Lindur......................................................... 7
2.1.3 Ekologi dan Penyebaran Tanaman Buah Lindur.................................. 8
2.1.4 Kandungan Kimia Tanaman Buah Lindur............................................ 9
2.1.5 Khasiat Tanaman Buah Lindur............................................................. 13
2.2 Tinjauan Tentang Simplisia dan Cara Penyarian...................................... 14
2.2.1 Simplisia .............................................................................................. 14
2.2.2 Cara Penyarian ..................................................................................... 16
2.2.2.1 Maserasi ................................................................................... 17
2.2.3 Cairan Penyarian................................................................................... 17
ix
2.3 Tinjauan Tentang Kromatografi................................................................ 19
2.3.1 Kromatografi Lapis Tipis (KLT).......................................................... 19
2.4 Tinjauan Tentang Bakteri Escherichia coli............................................... 22
2.4.1 Klasifikasi............................................................................................. 23
2.4.2 Morfologi dan Fisiologi........................................................................ 24
2.4.3 Patogenesis........................................................................................... 24
2.5 Tinjauan tentang Antibakteri..................................................................... 25
2.6 Daya Kerja Bahan Antibakteri................................................................... 26
2.7 Pengukuran dan Metode Uji Antibakteri................................................... 27
2.8 Tinjauan tentang Ciprofloksasin................................................................ 30
2.9 Tinjauan Tentang DMSO.......................................................................... 31
2.10...................................................................................................................H
ipotesis.............................................................................................................. 31
BAB III METODE PENELITIAN................................................................... 32
3.1 Obyek Penelitian........................................................................................ 32
3.2 Sampel dan Teknik Sampling.................................................................... 32
3.3 Variabel Penelitian..................................................................................... 32
3.4 Teknik Pengumpulan Data........................................................................ 33
3.5 Alat dan Bahan yang Digunakan............................................................... 34
3.5.1 Alat................................................................................................ 34
3.5.2 Bahan............................................................................................. 34
3.6 Cara Kerja.................................................................................................. 35
3.6.1 Persiapan Bahan............................................................................. 35
3.6.2 Ekstraksi Bahan............................................................................. 35
3.6.3 Uji Bebas Etanol............................................................................ 36
3.6.4 Fraksinasi Buah Lindur.................................................................. 36
3.6.4.1 Kromatografi Kolom Vakum Cair..................................... 36
3.6.5 Uji Skrining Fitokimia Buah Lindur.............................................. 37
3.6.6 Penyiapan Untuk Uji Mikrobiologi............................................... 39
3.6.6.1 Sterilisasi Media dan Alat.................................................. 39
3.6.6.2 Pembuatan Media Cair Nutrien Broth............................... 39
x
3.6.6.3 Pembuatan Media EMB (Eosin Methylene Blue).............. 39
3.6.6.4 Pembuatan Larutan ½ Mc Farland..................................... 40
3.6.6.5 Pembuatan Biakan Bakteri................................................ 40
3.6.6.6 Pembuatan Suspensi Bakteri.............................................. 40
3.6.6.7 Pembuatan Kontrol Positif................................................. 41
3.6.6.8 Prosedur Pengujian Daya Antibakteri............................... 41
3.6.7 Uji Aktivitas Antibakteri dengan Metode Bioautografi Kontak.... 42
3.7 Skema Kerja............................................................................................... 43
3.8 Analisis Data ............................................................................................. 47
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN.................................. 49
BAB V SIMPULAN DAN SARAN................................................................. 64
5.1 Simpulan.................................................................................................... 64
5.2 Saran.......................................................................................................... 64
DAFTAR PUSTAKA....................................................................................... 66
LAMPIRAN..................................................................................................... 75
xi
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
1. Indeks Polaritas........................................................................................... 18
2. Hasil Pengujian Bebas Etanol Ekstrak Buah Lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk).............................................................................. 50
3. Hasil Pengamatan Uji Reaksi Warna Tanin Pada Fraksi n-heksan,
Aseton, dan Air........................................................................................... 52
4. Hasil Skrining Fitokimia Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk).......................................................................................................... 52
5. Hasil KLT Fraksi Aseton dengan Eluen Kloroform : Metanol (2:8)
dibawah Sinar UV 254 nm dan penampak bercak FeCl3............................ 54
6. Hasil KLT Fraksi Tanin dengan eluen Kloroform : Metanol Buah Lindur
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)........................................................... 55
7. Hasil KLT ekstrak dan fraksi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk).......................................................................................................... 56
8. Data Diameter Zona Hambat Fraksi Tanin Buah Lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) terhadap Bakteri Escherichia coli ATCC 25922. 58
9. Ringkasan Hasil Uji LSD Konsentrasi Fraksi Tanin Buah Lindur
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1. Buah Lindur................................................................................................ 6
2. Morfologi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)..................... 7
3. Struktur Flavonoid...................................................................................... 10
4. Struktur Tanin............................................................................................. 12
5. Struktur senyawa saponin........................................................................... 13
6. Bakteri Escherichia coli............................................................................. 23
7. Struktur Ciprofloksasin............................................................................... 30
8. Skema Kerja Ekstraksi dan Fraksinasi Buah Lindur (Bruguiera
9. Skema Kerja Fraksinasi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk).......................................................................................................... 44
10. Skema kerja uji kualitatif fraksi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza
(L) Lamk).................................................................................................... 44
11. Skema kerja Penentuan Aktivitas Antibakteri Escherichia coli ATCC
25922 dengan Metode Bioautografi Kontak............................................... 45
12. Skema kerja Pembuatan suspensi bakteri................................................... 46
13. Skema kerja uji aktivitas antibakteri Buah Lindur terhadap bakteri
Escherichia coli ATCC 25922.................................................................... 46
14. Grafik rerata zona hambat fraksi tanin Buah Lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) terhadap Escherichia coli ATCC 25922.............. 58
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Determinasi Tanaman Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk).. 75
2. Surat Keterangan Bakteri Escherichia coli ATCC 25922........................... 76
3. Certificate of Analysis Ciprofloksasin........................................................ 77
4. Proses Pembuatan Ekstrak Etanol Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza
(L) Lamk).................................................................................................... 78
5. Hasil Pengujian Bebas Etanol Ekstrak Buah Lindur (Bruguiera
6. Proses Fraksinasi Menggunakan Kolom Vakum........................................ 80
7. Hasil Fraksinasi Kromatografi Vakum Cair Buah Lindur (Bruguiera
8. Hasil KLT Kromatografi Vakum Cair Buah Lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) UV 254 nm.......................................................... 82
9. Hasil KLT Kromatografi Vakum Cair Buah Lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) UV 366 nm.......................................................... 83
10. Penambak Bercak Hasil KLT Kromatografi Vakum Cair Buah Lindur
11. Hasil Identifikasi Serbuk dan Ekstrak Etanol Buah Lindur (Bruguiera
12. Proses Fraksi Kental Klorofom : Metanol Buah Lindur (Bruguiera
13. Hasil Uji KLT Fraksi Ekstrak Etanol Buah Lindur (Bruguiera
14. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Ekstrak Etanol Buah Lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) Terhadap Bakteri Escherichia coli ATCC 25922 92
15. Hasil Uji Bioautografi Fraksi Ekstrak Etanol Buah Lindur (Bruguiera
16. Hasil Uji Analisa Statistika......................................................................... 95
17. Alat Penelitian............................................................................................ 98
xiv
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang Masalah
Bakteri merupakan salah satu mikroorganisme penyebab infeksi. Infeksi
merupakan kondisi dimana tubuh bereaksi terhadap mikroorganisme penyakit
yang dapat menimbulkan gejala klinis. Kasus infeksi disebabkan oleh bakteri
yang masuk ke dalam jaringan tubuh dan berkembang biak di dalam jaringan
tubuh (Waluyo, 2004). Infeksi bakteri disebabkan karena berbagai macam hal,
yaitu kondisi lingkungan yang kurang terjaga, makanan, dan berbagai hal lainnya
yang terkait dengan kebersihan sehingga banyak terjadi kasus infeksi bakteri.
Kasus yang sering terjadi ialah adanya infeksi bakteri Escherichia coli.
Escherichia coli memiliki mekanisme tersendiri dalam penyebaran
infeksinya. Infeksi bakteri Escherichia coli yang terjadi pada manusia biasanya
berasal dari makanan dan minuman yang terkontaminasi, terutama sayuran
mentah dan juga daging yang kurang matang (alodokter, 2016). Salah satu
penyakit yang terjadi karena infeksi Escherichia coli ialah diare. Escherichia
coli enterotoksigenik (ETEC) telah mengakibatkan lebih dari 600 juta kasus diare
setahun dengan korban meninggal 700.000 anak balita, terutama di negara
berkembang (Arisman, 2012 dan Sari et al., 2010). Untuk menurunkan risiko
mengalami infeksi usus, persiapan memasak dan kebersihan makanan sangat
penting untuk dijaga (alodokter, 2016).
1
2
Pengobatan infeksi yang disebabkan oleh Escherichia coli ini dapat
menggunakan antibiotik kimiawi. Penggunaan antibiotik kimiawi merupakan
salah satu solusi baik dalam menangani infeksi, namun penggunaan antibiotik ini
ada kemungkinan memiliki efek samping yang tidak diinginkan. Penelitian ini
bertujuan untuk mencari alternatif lain dalam pembuatan antibiotik alami untuk
mengatasi infeksi. Antibiotik alami berasal dari tanaman yang diekstrak dan
diambil senyawa aktifnya.
Salah satu tanaman yang dapat digunakan masyarakat sebagai antibakteri
adalah buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk). Buah lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) mengandung komponen bioaktif seperti saponin,
flavonoid, alkaloid dan tanin yang dapat digunakan untuk diare dan demam
(Allen & Duke, 2006) dan dapat bersifat sebagai sumber antimikroba alami
(Sivaperumal et al., 2010). Hasil penelitian Haq et al., (2011) menunjukkan
bahwa ekstrak etanol dari tumbuhan buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk) menunjukkan adanya senyawa antioksidan dan antimikroba, khususnya
terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Escherichia coli, dan
Pseudomonas aeruginosa. Hal ini menunjukkan bahwa buah lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) mampu menghambat pertumbuhan bakteri. Maka perlu
dilakukan analisa lebih lanjut untuk mengetahui senyawa tannin yang ada pada
buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) dalam menghambat pertumbuhan
bakteri Escherichia coli.
Metode pemisahan untuk mengambil senyawa tanin dari buah lindur
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) dengan menggunakan metode ekstraksi dan

3
metode fraksinasi. Fraksinasi adalah suatu proses pemisahan senyawa-senyawa
berdasarkan tingkat kepolaran. Berdasarkan latar belakang di atas, maka
dilakukan penelitian untuk mengetahui efektifitas senyawa tanin yang memiliki
aktifitas antibakteri dari buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk).
Pengujian aktivitas antibakteri pada tanaman buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza
(L) Lamk) terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli dilakukan
menggunakan metode sumuran agar dan untuk mengetahui senyawa tannin dari
penghambatan pertumbuhan bakteri Escherichia coli dilakukan menggunakan
metode bioautografi kontak.
1.2 Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang tersebut, maka rumusan masalah pada penelitian
ini adalah :
1. Apakah fraksi tanin dalam buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
memiliki aktivitas antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri Eschericha coli
ATCC 25922 dengan menggunakan metode sumuran agar pada konsentrasi
5%, 15%, dan 25%?
2. Apakah senyawa tanin yang terdapat dalam fraksi buah lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) mempunyai aktivitas antibakteri terhadap
pertumbuhan bakteri Eschericha coli ATCC 25922 yang diuji dengan
menggunakan metode bioautografi kontak?

4
1.3 Tujuan Penelitian
1. Untuk mengetahui fraksi tanin yang memiliki aktivitas antibakteri pada buah
lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) pada konsentrasi 5%, 15%, dan
25% terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli ATCC 25922 yang diuji
menggunakan metode sumuran agar.
2. Untuk mengetahui senyawa tanin pada fraksi buah lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) yang mempunyai aktivitas antibakteri terhadap
Eschericha coli ATCC 25922 yang diuji menggunakan metode bioautografi
kontak.
1.4 Manfaat Penelitian
Manfaat penelitian fraksi tannin serta uji aktivitasnya terhadap antibakteri
Eschericha coli ATCC 25922 adalah :
1. Penelitian ini diharapkan dapat meningkatkan pengetahuan masyarakat
tentang tanaman buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) yang
mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Eschericha coli ATCC 25922
2. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat
tentang tanaman buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) untuk
meningkatkan peranan obat asli Indonesia dalam upaya pelayanan kesehatan.
3. Penelitian ini dimaksudkan untuk skrining awal terhadap fraksi tanin buah
lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) yang dapat menghambat
pertumbuhan bakteri Eschericha coli ATCC 25922.

5
1.5 Batasan Masalah
Masalah dalam penelitian ini perlu diberikan batasan agar lebih jelas dan
penyimpangan terhadap masalah penelitian dapat dihindari, batasan-batasan
tersebut antara lain :
1. Tanaman yang digunakan adalah buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk) yang diperoleh di Kecamatan Tugu, Kota Semarang. Bagian tanaman
yang digunakan adalah buah yang masih segar.
2. Bakteri yang digunakan adalah Eschericha coli ATCC 25922 yang diperoleh
dari Laboratorium Kesehatan Provinsi Jawa Tengah.
3. Proses ekstraksi dengan metode remaserasi dengan pelarut etanol 70%.
4. Analisis kualitatif dilakukan dengan menggunakan Kromatografi Lapis Tipis.
5. Proses fraksinasi dengan metode kromatografi Kolom Vakum Cair.
6. Fraksi aseton yang mengandung senyawa tanin diuji aktivitas antibakteri
menggunakan metode sumuran agar.
7. Aktivitas antibakteri berupa zona bening yang diperoleh dengan cara
mengurangi diameter zona bening keseluruhan yang dihasilkan dengan
diameter silinder cup dalam satuan mm yang diukur menggunakan jangka
sorong.
8. Pengujian senyawa aktif fraksi aseton dari tanaman buah lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) menggunakan metode bioautografi kontak.

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA DAN HIPOTESIS
2.1 Tinjauan Tentang Tanaman Buah Lindur
2.1.1 Klasifikasi Tanaman Buah Lindur
Klasifikasi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) menurut
Plantamor (2012) adalah sebagai berikut:
Kingdom : Plantae (Tanaman)
Sub kingdom : Tracheobionta (Tanaman berpembuluh)
Super Divisi : Spermatophyta (Menghasilkan biji)
Divisi : Magnoliophyta (Tanaman berbunga)
Kelas : Magnoliopsida (berkeping dua / dikotil)
Sub Kelas : Rosidae
Ordo : Myrtales
Famili : Rhizophoraceae
Genus : Bruguiera
Spesies : Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk
Nama lain : Bakau daun besar, Bakau oranye, kandeka, lindur, pertut, putut,
salasala, taheup, tenggel, tomo, tongke, tumu.
Gambar 1. Buah Lindur (Allen dan Duke, 2006)
6
7
2.1.2 Morfologi Tanaman Buah Lindur
Gambar 2. Morfologi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)

(Allen dan Duke, 2006)
Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) memiliki pohon yang
kadang-kadang mencapai ketinggian 30-35 m dengan lebar batang 15-35 cm.
Batang dari tanaman ini umumnya berwarna abu-abu sampai hitam, memiliki
lentisel yang besar dengan percabangan simpodial. Kulit kayu memiliki lentisel,
permukaannya halus hingga kasar dengan warna abu-abu tua sampai coklat.
Tanaman buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) memiliki daun yang
8
umumnya berwarna hijau tua dan berbentuk elips. Daun memiliki panjang 8-
22 cm dan lebar 5-8 cm. Ujung daun meruncing, berwarna hijau pada bagian atas
dan hijau kekuningan pada bagian bawah dengan bercak-bercak hitam. Letak daun
biasanya saling berhadapan dengan posisi menyilang. Akar membentuk akar
papan dan melebar ke samping tetapi juga memiliki sejumlah akar lutut. Tanaman
buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) juga memiliki bunga dan buah,
bunga terletak di ujung buah dengan kelopak berwarna merah muda hingga
merah serta panjang bunga 1,5-3,5 cm. Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk) berwarna hijau dengan kelopak bunga di ujung buah (berwarna merah),
buah berbentuk silinder memanjang 15-25 cm dengan diameter 2 cm
(Supriharyono, 2002).
2.1.3 Ekologi dan Penyebaran Tanaman Buah Lindur
Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) merupakan jenis yang
dominan pada hutan mangrove yang tinggi dan merupakan ciri dari perkembangan
tahap akhir dari hutan pantai, serta tahap awal dalam transisi menjadi tipe vegetasi
daratan yang memiliki kemampuan adaptasi yang tinggi. Pohon ini kerap
mendominasi hutan bakau tua, menandai tahap akhir perkembangan zona litoral
dan transisi ke zona daratan yang lebih kering, meski lebih umum ditemukan di
bagian pedalaman dibandingkan dengan di zona intertidal bawah atau di sisi yang
berhadapan langsung dengan laut. Pohon buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk) ini mampu hidup di berbagai kondisi dari yang hampir tawar hingga air
laut, dengan berbagai tingkat penggenangan hutan bakau dan aneka jenis substrat.
Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) tumbuh di areal dengan
salinitas rendah dan kering, serta tanah memiliki aerasi yang baik. Jenis ini toleran
9
terhadap daerah terlindung maupun yang mendapat sinar matahari langsung. Buah
lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) juga tumbuh baik pada tepi daratan dari
mangrove, sepanjang tambak, serta sungai pasang surut dan payau. Buah lindur
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) juga ditemukan di tepi pantai hanya jika
terjadi erosi pada lahan di hadapannya. Substrat-nya terdiri dari lumpur, berpasir,
dan sesekali juga di lumpur bergambut, terkadang juga ditemukan di pinggir
sungai yang kurang terpengaruh air laut. Hal tersebut dimungkinkan karena
buahnya terbawa arus air atau gelombang pasang. Regenerasinya seringkali hanya
dalam jumlah terbatas. Propagulnya (buah yang berkecambah) terapung-apung
dibawa arus dan pasang-surut air laut, hingga tersangkut dan tumbuh besar
menjadi pohon baru.
Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) tersebar di daerah tropis
Afrika Selatan, Afrika Timur dan Madagaskar, ke Asia Tenggara dan Selatan
(termasuk Indonesia dan negara di kawasan Malaysia), sampai timur laut
Australia, Mikronesia, Polinesia dan kepulauan Ryukyu (Ahmad, 2013).
Penyebaran tanaman buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) di Indonesia
meliputi pulau Jawa, Kalimantan, Bali, Nusa Tenggara Timur, Maluku dan Papua
(Helmy 2012).
2.1.4 Kandungan Kimia Tanaman Buah Lindur
Komposisi kimia Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) kaya akan
senyawa flavonoid, alkaloid, tanin dan saponin (Correl et al., 1955). Hasil
penelitian yang dilakukan Homhual et al., (2006) menunjukkan bahwa komponen
bioaktif yang terdapat pada Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
10
terdiri atas senyawa fenol, flavonoid, tanin, steroid, kandungan sulfur, dan
komponen terpenoid.
1. Flavonoid
Flavonoid merupakan salah satu kelompok senyawa metabolit sekunder yang
paling banyak ditemukan di dalam jaringan tanaman (Rajalakshmi dan Narasimhan,
1985). Flavonoid termasuk dalam golongan senyawa fenolik dengan struktur kimia
C6-C3-C6. Kerangka flavonoid terdiri atas satu cincin aromatik A, satu cincin
aromatik B, dan cincin tengah berupa heterosiklik yang mengandung oksigen dan
bentuk teroksidasi cincin ini dijadikan dasar pembagian flavonoid ke dalam sub-sub
kelompoknya. Sistem penomoran digunakan untuk membedakan posisi karbon di
sekitar molekulnya (Cook dan Samman, 1996).
3'
2' 4'
1
8 B
9 O 2 5'
7 1'
C 6'
A
6 10 3
5 4
Gambar 3. Struktur Flavonoid (Markham, 1988)
Flavonoid merupakan senyawa polar maka umumnya flavonoid larut dalam
pelarut polar seperti etanol, metanol, butanol, aseton, dimetil sulfoksida (DMSO),
dimetil formamida, dan air. Gula yang terikat pada flavonoid lebih menyebabkan
senyawa tersebut lebih mudah larut air maka campuran pelarut polar dengan air
merupakan pelarut yang lebih baik untuk glikosida, sebaliknya aglikon yang kurang
polar seperti isoflavon, flavonon, flavon, dan flavonol yang termetoksilasi

11
cenderung lebih mudah larut dalam pelarut seperti eter, kloroform, benzen, aseton,
dan lain-lain (Markham, 1988). Flavonoid dapat berfungsi sebagai antibakteri
dengan cara membentuk senyawa kompleks terhadap protein ekstra seluler yang
dapat mengganggu integritas membran sel bakteri (Juliantina dkk, 2009).
2. Alkaloid
Alkaloid adalah senyawa kimia yang secara khas diperoleh dari tanaman
dan hewan, bersifat basa, mengandung satu atau lebih atom nitrogen (biasanya
dalam cincin heterosiklik), dibiosintesis dari asam amino, banyak di antaranya
memiliki aktivitas biologis pada manusia dan hewan, sering bersifat racun bagi
manusia dan banyak memiliki efek fisiologi yang menonjol, jadi digunakan secara
luas dalam bidang pengobatan (Harborne, 1987).
Alkaloid dibedakan dari sebagian besar komponen tanaman lain
berdasarkan sifat basanya (kation). Oleh karena itu, senyawa ini biasanya terdapat
dalam tanaman sebagai garam. Garam dan alkaloid bebas, berupa senyawa padat
berbentuk kristal tak berwarna (Robinson, 1995).
Alkaloid memiliki kemampuan sebagai antibakteri. Mekanisme yang diduga
adalah dengan cara mengganggu komponen penyusun peptidoglikan pada sel
bakteri, sehingga lapisan dinding sel tidak terbentuk secara utuh dan
menyebabkan kematian sel tersebut (Robinson, 1995).
3. Tanin
Tanin merupakan salah satu senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada
tanaman dan disintesis oleh tanaman. Tanin tergolong senyawa polifenol dengan
12
karakteristiknya yang dapat membentuk senyawa kompleks dengan makromolekul
lainnya (Waghorn dan McNabb, 2003). Tanin dibagi menjadi dua kelompok yaitu
tanin yang mudah terhidrolisis dan tanin terkondensasi. Tanin yang mudah
terhidrolisis merupakan polimer gallic atau ellagic acid yang berikatan ester dengan
sebuah molekul, sedangkan tanin terkondensasi merupakan polimer senyawa
flavonoid dengan ikatan karbon-karbon (Westendarp, 2006).
Gambar 4. Struktur Tanin (Harborne, 1987)
4. Saponin
Saponin adalah jenis glikosida yang banyak ditemukan dalam tanaman.
Saponin memiliki karakteristik berupa buih. Sehingga ketika direaksikan dengan air
dan dikocok maka akan terbentuk buih yang dapat bertahan lama. Saponin mudah
larut dalam air dan tidak tarut dalam eter. Saponin memiliki rasa pahit menusuk dan
menyebabkan bersin serta iritasi pada selaput lendir. Saponin merupakan racun
yang dapat menghancurkan butir darah atau hemolisis pada darah. Saponin bersifat
racun bagi hewan berdarah dingin dan banyak di antaranya digunakan sebagai
13
racun ikan. Saponin yang bersifat keras atau racun biasa disebut sebagai sapotoksin
(Prihatman, 2001).
Senyawa golongan saponin memiliki karakteristik aktivitas biologis yang
sangat luas antara lain antimikroba, antiradang, antibiotik, obat hemolitik,
hipoglikemi, dan sitotoksik (Miles, 1999; Bandaranayake 2002). Kokpol et al.,
(1984). Mahato et al., (1988) menemukan bahwa saponin juga bermanfaat sebagai
spermisida (obat kontrasepsi laki-laki) (Purnobasuki, 2004).
Gambar 5. Struktur senyawa saponin (Bandaranayake, 2002)
2.1.5 Khasiat Tanaman Buah Lindur
Pada umumnya, masyarakat lebih banyak memanfaatkan kayu dari tanaman
Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) sebagai kayu bakar dan untuk
membangun rumah. Selain itu, tanaman Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk) juga dapat digunakan sebagai makanan, pewarna, dan obat-obatan.
Di Indonesia, secara medis tanaman Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk) digunakan untuk mengobati diare, demam, antimalaria, antivirus, dan
antikanker. Di India, Bangladesh, dan bagian lain dari Asia Tenggara, tanaman
14
Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) dimanfaatkan sebagai makanan
pokok dengan memanfaatkan daunnya dengan cara dicuci, direndam, direbus, dan
dimakan. Di Melanesia dan Nauru, tanaman Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza
(L) Lamk) memanfaatkan buahnya dengan cara dicuci, dikeringkan, dan kadang-
kadang dicampur dengan Buah Kelapa lalu dimakan. Di Pasar Honiara
(Kepulauan Solomon) buah dari tanaman Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza
(L) Lamk) dijual dipasar sebagai sayuran (Clarke dan Thman, 1993).
2.2 Tinjauan Tentang Simplisia dan Cara Penyarian
2.2.1 Simplisia
Simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang
belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dinyatakan lain simplisia
merupakan bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI., 1985). Simplisia dapat
berupa simplisia nabati, simplisia hewani dan simplisia pelikan atau mineral.
Pembuatan simplisia meliputi beberapa tahap antara lain :
1. Pengumpulan bahan baku.
Pengumpulan bahan baku ini sangat berpengaruh terhadap kadar senyawa
aktif dalam suatu simplisia yang berbeda-beda tergantung pada bagian tanaman
yang digunakan, umur tanaman atau bagian tanaman saat dipanen, waktu panen,
dan lingkungan tempat tumbuh. Waktu panen erat kaitannya dengan pembentukan
senyawa aktif yang terdapat di dalam bagian tanaman yang akan dipanen. Waktu
panen yang tepat adalah pada saat tanaman tersebut mengandung senyawa aktif
dalam jumlah besar. Senyawa aktif terbentuk secara maksimal di dalam bagian
tanaman pada umur tertentu (Depkes RI., 1985).

15
2. Sortasi basah.
Sortasi basah dilakukan untuk memisahkan kotoran-kotoran atau bahan-
bahan asing lainnya dari bahan simplisia (Depkes RI., 1985).
3. Pencucian.
Pencucian dilakukan untuk menghilangkan kotoran-kotoran yang melekat
pada bahan simplisia seperti misalnya debu dan tanah. Pencucian dilakukan
sesingkat mungkin dengan menggunakan air bersih, misalnya air yang berasal dari
air sumur atau air PAM (Depkes RI., 1985).
4. Perajangan.
Perajangan dilakukan untuk mempermudah proses pengeringan,
pengepakan, dan penggilingan. Tanaman yang baru diambil jangan langsung
dirajang tetapi dijemur dalam keadaan utuh selama 1 hari. Perajangan disesuaikan
dengan ukuran yang dikehendaki, semakin tipis bahan yang akan dikeringkan
maka akan semakin cepat penguapannya sehingga mempercepat waktu
pengeringan, akan tetapi irisan yang terlalu tipis juga dapat menyebabkan
berkurangnya atau hilangnya zat berkhasiat yang mudah menguap (Depkes RI.,
1985).
5. Pengeringan.
Pengeringan dilakukan untuk mendapatkan simplisia yang tidak mudah
rusak, sehingga simplisia dapat disimpan dalam waktu yang lama, mengurangi
kadar air dan menghentikan reaksi enzimatik serta mencegah penurunan mutu
atau kualitas simplisia, karena air yang masih tersisa dalam simplisia pada kadar
tertentu dapat merupakan media pertumbuhan kapang dan jasad renik lainnya.
Pengeringan dapat dilakukan dengan pengeringan alami atau pengeringan buatan.

16
Pengeringan alami dilakukan dengan panas sinar matahari langsung dan
pengeringan dengan sinar matahari tidak langsung dengan cara diangin-anginkan.
Pengeringan buatan dilakukan dengan alat atau mesin pengering yang suhu,
kelembaban, tekanan dan aliran udaranya dapat diatur (Depkes RI., 1985).
6. Sortasi kering.
Sortasi kering dilakukan untuk memisahkan benda-benda asing seperti
bagian-bagian tanaman yang tidak diinginkan dan pengotor–pengotor lain yang
masih tertinggal pada simplisia kering. Proses ini merupakan tahap akhir
pembuatan simplisia (Depkes RI., 1985).
2.2.2 Cara Penyarian
Penyarian atau ekstraksi adalah kegiatan penarikan zat aktif yang dapat larut
dari bahan yang tidak dapat larut dalam pelarut cair. Simplisia yang disari
mengandung zat aktif yang dapat larut dari zat yang tidak dapat larut seperti serat,
karbohidrat, protein dan lain-lain. Simplisia ada yang lunak (rimpang, daun, kulit
buah yang lunak) dan ada simplisia yang keras (biji, kulit kayu, kulit akar).
Umumnya simplisia perlu dihaluskan terlebih dahulu sebelum dilakukan
ekstraksi. Ekstrak adalah sediaan sari pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi
zat aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang
sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan (Depkes RI., 2000).
Kecepatan penyarian dipengaruhi oleh kecepatan sumuran zat yang larut
melalui lapisan-lapisan batas antara cairan penyari dengan bahan yang
mengandung zat tersebut. Zat aktif yang terdapat dalam simplisia dapat
digolongkan ke dalam beberapa golongan senyawa, antara lain alkaloid, glikosida,

17
flavonoid dan dengan mengetahui zat aktif yang terkandung dalam simplisia akan
mempermudah pemilihan cairan penyari serta cara penyarian yang tepat.
Metode penyarian atau ekstraksi dapat dilakukan dengan cara dingin dan
panas. Cara dingin antara lain maserasi dan perkolasi sedangkan cara panas antara
lain refluks, soxhlet, digesti, dan infundasi.
2.2.2.1 Maserasi
Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana (Voight, 1994).
Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari.
Maserasi digunakan untuk penyarian simplisia yang mengandung zat aktif yang
mudah larut dalam cairan penyari dan tidak mengandung zat yang mudah
mengembang dalam cairan penyari. Keuntungan cara penyarian dengan maserasi
adalah cara pengerjaan dan peralatan yang digunakan sederhana dan mudah
diusahakan, sedangkan kerugiannya adalah pengerjaannya lama dan penyariannya
kurang sempurna (Depkes RI., 1986). Prinsip maserasi adalah cairan penyari akan
menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung
zat aktif, zat aktif akan larut dan adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat
aktif di dalam sel dan di luar sel. Peristiwa tersebut berulang sehingga
terjadi keseimbangan konsentrasi antara larutan di luar sel dan di dalam sel
(Depkes RI., 1986).
2.2.3 Cairan Penyari
Pemilihan cairan penyari juga harus mempertimbangkan banyak faktor di
antaranya yaitu murah dan mudah diperoleh, stabil secara fisika dan kimia,
bereaksi netral, tidak mudah menguap dan tidak mudah terbakar, selektif dan tidak
mempengaruhi zat berkhasiat (Depkes RI., 1986). Farmakope Indonesia

18
menetapkan sebagai cairan penyari adalah air, etanol, etanol-air atau eter. Air
dipertimbangkan sebagai cairan penyari karena murah dan mudah diperoleh,
stabil, tidak mudah menguap, dan tidak mudah terbakar, tidak beracun dan
alamiah sedangkan etanol dipertimbangkan sebagai cairan penyari karena lebih
selektif, kapang dan kuman sulit tumbuh dalam etanol 20% ke atas, tidak beracun,
netral, absorpsinya baik, etanol dapat bercampur dengan air pada segala
perbandingan (Depkes RI., 1986).
Berdasarkan sifat polaritas, cairan pelarut dapat dikelompokkan berdasarkan
indeks polaritas yang dapat disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Indeks Polaritas

Pelarut Tetapan dielektrik pada 20oC
n- heksan 1,89
petroleum eter 1,90
n- oktan 1,95
n-dektan 1,99
n-dodekan 2,01
sikliheksana 2,02
1,4-dioksan 2,21
Benzena 2,28
Toluena 2,38
Furan 2,29
Asam propanoat 3,30
Eter (dietil eter) 3,34
Kloroform 4,81
Butyl asetat 5,01
Etil asetat 6,02
Asam asetat (glasial) 6,15
Metal asetat 6,68
Tetra hidrofuran 7,58
Metilenklorida 9,08
1-butanol 10,09
Piridina 12,30
2-butanol 15,80
n-butanol 17,80
2-propanol 18,30
1-propanol 20,10
Aseton 20,70
Etanol 24,30
Metanol 33,60
Asam formiat 58,50
Air 80,40
(Stahl, 1985 : 7)
19
Indeks polaritas menunjukkan tentang kepolaran suatu pelarut. Semakin
besar indeks polaritasnya, maka pelarut tersebut semakin polar (Stahl, 1985).
Pertimbangan pemilihan cairan pelarut atau penyari yang akan digunakan pada
proses ekstraksi antara lain murah dan mudah diperoleh, stabil secara fisika dan
kimia, bereaksi netral, tidak mudah menguap dan tidak mudah terbakar, tidak
mempengaruhi zat berkhasiat, ramah terhadap lingkungan, ekonomis, aman untuk
digunakan, kemudahan dalam bekerja dan proses dengan pelarut tersebut dan
diperbolehkan oleh peraturan yang berlaku (Depkes RI., 1986).
2.3 Tinjauan tentang Kromatografi
2.3.1 Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Kromatografi adalah cara fisikokimia untuk memisahkan campuran
senyawa berdasarkan perbedaan waktu retensi berbagai komponennya dalam
suatu sistem fase diam-fase gerak. Fase diam adalah lapisan serbuk halus bahan
(dapat pula disaputkan cairan) atau bahan berbutir-butir yang mempunyai aktifitas
kapiler yang dialiri fase gerak dan ditempatkan pada penyangga berupa pelat
gelas, logam, atau lapisan yang sesuai. Fase gerak adalah cairan yang terdiri atas
satu komponen atau lebih menyebar dalam fase diam karena adanya gaya kapiler
dan sekaligus berfungsi sebagai alat pembawa dan sebagai pelarut (Stahl, 1985).
Kromatografi Lapis Tipis (KLT) yang juga dikenal dengan nama Thin
Layer Chromatography atau TLC adalah salah satu alat pemisah dan alat uji
senyawa kimia secara kualitatif dan kuantitatif. Senyawa yang dapat diuji berupa
20
senyawa tunggal maupun campuran dari produk pabrik, hasil sintesis, isolasi dari
hewan percobaan maupun dari tanaman dan mikroorganisme (Sumarno, 2001).
Pemisahan senyawa yang sangat berbeda seperti senyawa organik alam dan
senyawa organik sintetik, komplek anorganik-organik dan bahkan ion anorganik
dengan metode kromatografi lapis tipis dapat dilakukan dalam beberapa menit
dengan alat yang harganya tidak terlalu mahal. Pemakaian pelarut dan cuplikan
hanya memerlukan jumlah yang sedikit dan penotolan cuplikan dapat dilakukan
secara berulang (Gritter et al., 1991). Selain itu kromatografi lapis tipis adalah
metode yang paling sesuai untuk analisis obat di laboratorium farmasi (Stahl,
1985). Jarak pengembangan senyawa pada kromatogram biasanya dinyatakan
dengan angka Rf. Retensi waktu (Rf) merupakan perbandingan antara jarak
tempuh linarut dibanding jarak tempuh fase gerak.
Jarak titik pusat bercak dari titik awal

Rf = Jarak garis depan dari titik awal
(Stahl, 1985)
Kromatografi Lapis Tipis sering digunakan secara universal karena
kecepatannya dan kebutuhan akan senyawa dengan kadar yang sangat kecil
merupakan prosedur analitik yang ideal untuk laboratorium optik.
Prosedur ini dapat digunakan untuk :
1. Pemeriksaan identifikasi dan kemurnian senyawa.
2. Untuk pemeriksaan simplisia tanaman dan hewan.
3. Pemeriksaan komposisi dan komponen aktif.
4. Untuk menentukan kuantitatif masing–masing senyawa aktif campuran
senyawa obat (Blascke, 1994).

21
Beberapa hal–hal yang harus diperhatikan dalam Kromatografi Lapis Tipis
adalah sebagai berikut:
1. Fase gerak atau pelarut pengembang.
Medium angkut yang terdiri atas satu atau beberapa pelarut (Stahl, 1985).
2. Fase diam atau lapisan penyerap.
Fase diam pada Kromatografi Lapis Tipis merupakan fase yang polar
maupun fase non polar.
Penyerap yang umum adalah :
a. Silika gel, bahan ini banyak digunakan untuk pemisahan senyawa yang
bersifat asam atau basa, sehingga untuk elusi menggunakan eluen tersebut
bersifat asam atau basa.
b. Alumina atau alumunium oksida, bersifat sedikit basa, bila akan digunakan
diaktifkan kembali dengan pemanasan. Digunakan sebagai fase diam untuk
Kromatografi Lapis Tipis yang bebas air, sehingga mempunyai aktifitas
penyerap yang tinggi.
c. Keisulguhr, sebenarnya merupakan asam silika yang amorf, berasal dari
kerangka diatomae, kurang bersifat adsortif dibanding silika.
d. Magnesium silikat, digunakan bila adsorben lain tidak dapat digunakan.
e. Selulosa, karena polaritasnya tinggi digunakan sebagai pemisahan secara
partisi, baik dengan bentuk kertas maupun lempeng (Sumarno, 2001).
3. Pelarut.
Pelarut yang digunakan harus murni dan mudah didapatkan, mudah
diuapkan agar tidak selalu dalam lapisan lempeng, mantap di udara, mudah
22
tercampur dengan pelarut lain dan tidak toksik, mudah dipisahkan pada linarut
untuk pemurnian (Sumarno, 2001).Pelarut tunggal biasanya memberikan hasil
kurang memuaskan. Pelarut menggerakkan bercak terlalu jauh dan pelarut berikut
di atasnya dengan kepolaran lebih rendah tidak dapat mengelusi cukup jauh
sehingga harus mencampur pelarut untuk memperoleh kepolaran yang diinginkan
(Gritter et al., 1991).
4. Deteksi
Terdapat berbagai kemungkinan untuk deteksi senyawa tanpa warna pada
kromatogram. Deteksi paling sederhana jika menyerap di daerah UV gelombang
pendek dengan radiasi utama sekitar 254 nm atau senyawa itu dapat dieksitasi ke
fluoresensi radiasi UV gelombang pendek dan gelombang panjang sekitar 365
nm. Jika dengan kedua cara itu senyawa tidak dapat dideteksi, harus dicoba
dengan reaksi kimia (Stahl, 1985).
5. Penilaian kromatogram.
Jarak pengembangan senyawa pada kromatogram biasanya dinyatakan
dengan angka Rf. Angka Rf berjangka antara 0,00 sampai 1,00 dan hanya dapat
ditentukan dua desimal (Stahl, 1985).
Harga Rf merupakan parameter karakteristik kromatografi kertas dan
kromatografi lapis tipis. Harga Rf didefinisikan sebagai perbandingan antara jarak
noda dari titik awal penotolan dengan jarak elusi.
2.4 Tinjauan tentang Bakteri Escherichia coli
Escherichia coli merupakan bakteri batang gram negatif yang termasuk
flora normal dalam usus manusia. Escherichia coli mempunyai bentuk batang
23
pendek atau kokobasil, tidak berkapsul dan juga tidak berspora, dapat tumbuh
mudah pada media yang sederhana yang dipakai sehari-hari, menguraikan glukosa
menjadi asam dan gas, pada media simon sitrat menunjukan hasil negatif dan hasil
positif pada media indol dengan membentuk cincin warna merah. Escherichia coli
mempunyai ciri yang khas pada media EMBA (Eosin Methylene Blue Agar)
karena memberikan warna merah methalik dengan koloni berukuran sedang
(Soemarno, 2000).
Gambar 6. Bakteri Escherichia coli (Sri Agung Kusuma, 2011)
2.4.1 Klasifikasi
Eschericia coli (E.coli) adalah bakteri gram negatif berbentuk batang yang
tidak membentuk spora yang merupakan flora normal di usus.
Klasifikasi ilmiah Escherichia coli menurut Songer dan Post (2005) adalah
sebagai berikut:
Domain : Bacteria
Phylum : Proteobacteria
Class : Gamma Proteobacteria
Family : Enterobacteriaceae
Genus : Escherichia
Species : E.coli
24
2.4.2 Morfologi dan Fisiologi
Escherichia coli merupakan bakteri gram negatif yang berbentuk batang
lurus dengan panjang 1-3 μm dan lebar 0,4-0,7 μm, tidak berspora, tidak
berkapsul (namun ada yang berkapsul) dan bergerak aktif (ada pula yang tidak
bergerak) (Yulia, 2009).
Pelczar dan Chan (2008) mengatakan Escherichia coli merupakan bagian
dari mikrobiota normal saluran pencernaan. Escherichia coli dipindah sebarkan
dengan kegiatan tangan ke mulut atau dengan pemindahan pasif lewat makanan
atau minuman. Escherichia coli tidak dapat memproduksi H2S (hydrogensulfida),
tetapi dapat membentuk gas dari glukosa, menghasilkan tes positif terhadap indol,
dan memfermentasikan laktosa.
2.4.3 Patogenitas
Escherichia coli menjadi patogen jika jumlah bakteri ini dalam saluran
pencernaan meningkat atau berada di luar usus. Escherichia coli menghasilkan
enterotoksin yang menyebabkan beberapa kasus diare. Escherichia coli
berasosiasi dengan enteropatogenik menghasilkan enterotoksin pada sel epitel
(Jawetz, dkk., 2005).
Manifestasi klinik infeksi oleh Escherichia coli bergantung pada tempat
infeksi dan tidak dapat dibedakan dengan gejala infeksi yang disebabkan oleh
bakteri lain. Penyakit yang disebabkan oleh Escherichia coli yaitu :
1. Infeksi saluran kemih.
Escherichia coli merupakan penyebab infeksi saluran kemih pada kira-kira
90% wanita muda. Gejala dan tanda-tandanya antara lain sering kencing, disuria,
25
hematuria, dan piuria. Nyeri pinggang juga berhubungan dengan infeksi saluran
kemih bagian atas (Jawetz, dkk., 2005).
2. Diare.
Escherichia coli yang menyebabkan diare banyak ditemukan di seluruh
dunia. Escherichia coli diklasifikasikan oleh ciri khas sifat-sifat virulensinya, dan
setiap kelompok menimbulkan penyakit melalui mekanisme yang berbeda
(Jawetz, dkk., 2005).
3. Sepsis.
Bila pertahanan inang normal tidak mencukupi, Escherichia coli dapat
memasuki aliran darah dan menyebabkan sepsis (Jawetz, dkk., 2005).
4. Meningitis.
Escherichia coli dan Streptokokus adalah penyebab utama meningitis pada
bayi. Escherichia coli merupakan penyebab pada sekitar 40% kasus meningitis
neonatal (Jawetz, dkk., 2005).
2.5 Tinjauan tentang Antibakteri
Istilah yang sering digunakan sehubungan dengan bahan antibakteri dan
penggunaannya adalah :
1. Bakteriostatik.
Kelompok ini memiliki kemampuan untuk menghambat perkembangbiakan
bakteri. Jika bahan ini dihilangkan, perkembangbiakan bakteri berjalan seperti
semula (Lay dan Hastowo, 1992).

26
2. Bakterisidal.
Kelompok ini memiliki kemampuan untuk membunuh bakteri. Daya
bakterisidal berbeda dengan bakteriostatik oleh karena prosesnya hanya berjalan
searah, yaitu bakteri yang telah mati tidak dapat berkembang biak kembali
meskipun bahan bakterisidal dihilangkan (Lay dan Hastowo, 1992).
2.6 Daya Kerja Bahan Antibakteri
Berdasarkan mekanisme kerjanya, antimikroba dibagi menjadi lima
kelompok, yaitu :
1. Antimikroba yang menghambat metabolisme sel mikroba.
Mikroba membutuhkan asam folat untuk kelangsungan hidupnya. Apabila
suatu antimikroba memang bersaing dengan Para Amino Benzoic Acid (PABA)
dalam pembentukan asam folat, maka akan terbentuk analog asam folat yang non
fungsional. Akibatnya, kehidupan mikroba terganggu.
2. Antimikroba yang menghambat sintesis dinding sel mikroba.
Obat yang termasuk kelompok ini adalah penisilin, sefalosporin, basitrasin,
vankomisin dan sikloserin. Dinding sel bakteri terdiri dari polipeptidoglikan yaitu
suatu kompleks polimer glikopeptida. Oleh karena tekanan osmotik dalam sel
bakteri lebih tinggi daripada di luar sel bakteri akan menyebabkan lisis, yang
merupakan dasar efek bakterisidal pada bakteri yang peka.
3. Antimikroba yang mengganggu keutuhan membran sel mikroba.
Obat yang termasuk dalam kelompok ini adalah polimiksin, golongan
polien, serta berbagai antimikroba kemoterapeutik, misalnya antiseptik yang

27
mengubah tegangan permukaan dapat merusak permeabilitas selektif dan
membran sel mikroba yaitu protein, asam nukleat, nukleotida dan lain-lain.
4. Antimikroba yang menghambat sintesis protein sel mikroba.
Obat yang termasuk kelompok ini adalah golongan aminoglikosida, dengan
cara, misalnya terbentuknya protein abnormal yang nonfungsional bagi sel
mikroba, akibat kode pada m-RNA yang salah baca oleh t-RNA peptida,
akibatnya rantai polipeptida tidak dapat diperpanjang, menghalangi masuknya
kompleks t-RNA, menghambat pengikatan asam amino baru rantai polipeptida
oleh enzim peptidil transferase.
5. Antimikroba yang menghambat sintesis asam nukleat sel mikroba.
Antimikroba yang termasuk golongan ini adalah rifampisin dan golongan
kuinolon. Rifampisin berkaitan dengan enzim polimerasi-RNA sehingga
menghambat sintesis RNA dan DNA oleh enzim tersebut. Golongan kuinolon
menghambat enzim DNA girase pada bakteri yang fungsinya menata kromosom
yang sangat panjang menjadi bentuk spiral hingga bisa muat dalam sel bakteri
yang kecil (Ganiswara, 2003).
2.7 Pengukuran dan Metode Uji Antibakteri
Efektifitas antimikroba terhadap spesies bakteri dari suatu galur bakteri
berbeda antara yang satu dengan yang lain. Sensitivitas setiap bakteri patogen
terhadap suatu antimikroba harus diuji dengan berbagai konsentrasi yang
menyebabkan pertumbuhan bakteri tersebut terhambat atau mati. Pada pengujian

28
tersebut dapat diketahui apakah bakteri tersebut masih sensitif atau telah resisten
terhadap suatu antibiotika. Uji itu berguna untuk menentukan pengobatan yang
spesifik terhadap bakteri patogen penyebab penyakit infeksi (Tim Mikrobiologi
Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya, 2003).
Faktor yang dapat mempengaruhi ukuran zona penghambatan dan harus
dikontrol adalah:
1. Konsentrasi mikroba pada permukaan medium. Semakin tinggi konsentrasi
mikroba maka zona penghambatan akan semakin kecil.
2. Kedalaman medium pada cawan petri. Semakin tebal medium pada cawan
petri maka zona penghambatan akan semakin kecil.
3. Nilai pH dari medium. Beberapa antibiotika bekerja dengan baik pada kondisi
asam dan beberapa basa kondisi alkali atau basa.
4. Kondisi aerob atau anaerob. Beberapa antibakterial kerja terbaiknya pada
kondisi aerob dan yang lainnya pada kondisi anaerob (Greenwood, 1995).
Pengujian aktivitas antibakteri dapat dilakukan dengan beberapa cara, yaitu :
1. Metode Difusi.
Prinsip dari metode ini yaitu larutan sampel dengan seri konsentrasi tertentu
yang diduga mempunyai daya antibakteri dimasukkan pada dua lapis permukaan
agar. Lapisan I berisi media padat sebagai dasar dari sumuran, lapisan ke II berisi
media yang telah ditanami bakteri uji secara merata, kemudian diinkubasi pada
suhu 37C selama 24 jam. Selama inkubasi larutan sampel akan bersumuran ke
dalam media pembenihan.

29
Beberapa modifikasi dari metode sumuran yaitu :
a. Metode Sumuran Agar.
Metode sumuran dipilih karena zat antibakteri yang dimasukkan ke dalam
sumuran lebih banyak daripada metode kertas cakram, sehingga proses sumuran
pada media yang diberi suspensi bakteri berjalan lebih baik dan dalam jumlah
yang lebih banyak.
b. Metode Cylinder Cup.
Bakteri ditanam pada media agar, kemudian cylinder cup diletakkan pada
media tersebut setelah memadat dengan tujuan untuk menampung sejumlah zat
antibakteri yang diuji. Metode cylinder cup dipilih karena lebih cepat dan mudah
dalam pengerjaannya.
c. Metode Cakram Kertas.
Bakteri ditanam pada media agar kemudian kertas cakram ditetesi dengan
zat antibakteri dengan konsentrasi tertentu, kemudian diletakkan di atas media.
Keuntungan dari metode adalah zat antibakteri yang digunakan lebih sedikit,
sehingga lebih efisien dalam penggunaanya (Jawetz, et al., 2005).
2. Metode Dilusi.
Cara ini digunakan untuk menentukan kadar hambat minimal (KHM) dan
kadar bunuh minimal (KBM) dari obat antibakteri. Prinsip dari metode dilusi
adalah dengan menggunakan satu seri tabung reaksi yang diisi media cair dan
sejumlah tertentu sel mikroba yang diuji (Bonang dan Koeswardoyo, 1982).
Konsentrasi terendah obat pada tabung yang ditunjukkan dengan hasil
biakan yang mulai tampak jernih yang berarti tidak ada pertumbuhan mikroba
adalah kadar hambat minimal (KHM) dari obat. Selanjutnya biakan dari semua
30
tabung yang jernih diinokulasikan pada media agar padat, diinkubasikan dan
keesokan harinya diamati ada tidaknya koloni mikroba yang tumbuh. Konsentrasi
terendah obat pada biakan padat yang ditunjukkan dengan tidak adanya
pertumbuhan koloni mikroba adalah kadar bunuh minimal (KBM) dari obat
terhadap bakteri uji (Dwidjoseputro, 1998).
3. Metode Kromatografi Lapis Tipis Bioautografi.
Bioautografi merupakan metode yang spesifik untuk mendeteksi bercak
pada kromatogam hasil Kromatografi Lapis Tipis atau KKT yang mempunyai
aktivitas sebagai antibakteri, antifungi, dan antiviral (Zweig dan Whitaker, 1971).
2.8 Tinjauan tentang Ciprofloksasin
Derivat siklopropil dari kelompok fluorokuinolon ini berkhasiat lebih luas
dan kuat daripada nalidiksinat dan pipemidinat, juga menghasilkan kadar darah
atau jaringan dan plasma t½ yang lebih tinggi (Tjay dan Rahardja, 2007). Struktur
siprofloksasin ditunjukkan pada gambar 7.
Gambar 7. Struktur Ciprofloksasin (Siswandono dan Soekardjo, 2000)
Cara kerja ciprofloksasin dengan menghambat sintesis DNA bakteri dengan
membloking enzim girase (DNA gyrase). Spektrum aktifitas antimikroba

31
siprofloksasin pada bakteri gram positif medium, untuk bakteri gram negatif kuat,
sedangkan untuk bakteri anaerob lemah (Jawetz, dkk., 2005).
Ciprofloksasin digunakan untuk pengobatan infeksi yang disebabkan oleh
bakteri gram negatif, seperti Escherichia coli, Proteusmirabilis, Klebsiella
species, Shigella species, Enterobacter, Haemophylus species, Chlamydia species,
Salmonella species dan Pseudomonas aeruginosa, serta bakteri gram positif
tertentu seperti Staphylococcus species, Streptococcus species (Siswandono dan
Soekardjo, 2000).
2.9 Tinjauan tentang DMSO
DMSO (Dimethyl Sulphoxide) adalah zat yang bersifat polar dan memiliki
sifat pelarut dan pengencer yang baik untuk bahan kimia organik dan anorganik.
DMSO tidak bersifat bakteriostatik (Martindale, 1982).
2.10 Hipotesis
Berdasarkan tinjauan pustaka yang disajikan dapat dibuat hipotesis sebagai
berikut :
1. Terdapat aktivitas antibakteri pada fraksi tanin buah lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) dalam menghambat pertumbuhan bakteri Eschericia
coli ATCC 25922 pada konsentrasi tertentu dengan menggunakan metode
sumuran agar.
32
2. Senyawa tannin yang terkandung dalam buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza
(L) Lamk) memiliki aktivitas antibakteri terhadap Eschericia coli ATCC
25922 yang dianalisa menggunakan metode bioutografi.

BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Obyek Penelitian
Obyek penelitian ini adalah zona hambat yang dihasilkan dari fraksi
tanaman buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) sebagai antibakteri
terhadap Eschericha coli ATCC 25922.
3.2 Sampel dan Teknik Sampling
Sampel yang digunakan adalah buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk) yang diambil di daerah Dukuh Tapak Tugurejo Rt.04/IV, Kelurahan
Tugurejo, Kecamatan Tugu, Kota Semarang. Teknik sampling yang digunakan
adalah teknik purposive sampling yaitu pengambilan sampel dengan tujuan
tertentu dengan memilih buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
berwarna hijau dan segar. Bakteri yang digunakan adalah Eschericha coli ATCC
25922.
3.3 Variabel Penelitian
1. Variabel bebas : Fraksi tanin buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
dengan konsentrasi 5%, 15%, dan 25% Eschericha coli ATCC 25922.
2. Variabel terikat : Aktivitas antibakteri yang dilihat dari adanya zona hambat
pada media yang ditumbuhi Eschericha coli ATCC 25922 dalam satuan mm.
3. Variabel terkontrol yang digunakan dalam penelitian ini yaitu :
33
34
a. Sampel buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) yang di peroleh
dari daerah Kecamatan Tugu, Kota Semarang.
b. Lama maserasi.
c. Jenis bakteri yang ditanam.
d. Suhu inkubasi.
e. Waktu inkubasi.
f. Jenis dan jumlah media yang digunakan.
g. Konsentrasi bakteri yang setara dengan ½ Mc. Farland.
h. Volume suspensi bakteri yang digunakan adalah 5 µL dan volume fraksi
tannin 50 µL.
3.4 Teknik Pengumpulan Data
Dalam penelitian ini, teknik pengumpulan data yang ada dibagi menjadi
beberapa tahap. Teknik pengumpulan data pada penelitian ini diawali dengan
melakukan identifikasi senyawa terhadap serbuk, ekstrak dan fraksi pada tanaman
buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) dan uji penegasan menggunakan
Kromatografi Lapis Tipis.
Setelah dilakukan identifikasi, tahap selanjutnya dilakukan pengujian
aktivitas antibakteri fraksi tanin buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
terhadap Eschericha coli ATCC 25922 dengan dilihat zona hambat yang
dihasilkan menggunakan metode sumuran. Hasil pengamatan diamati dan diukur
zona bening yang terbentuk dengan menggunakan jangka sorong dalam satuan
mm. Hasil penelitian yang dihasilkan digunakan untuk mengetahui ada atau
35
tidaknya perbedaan aktivitas antibakteri ekstrak etanol dan fraksi tanin.
Selanjutnya dilakukan identifikasi senyawa tannin yang terdapat dalam fraksi
tannin yang mempunyai aktivitas antibakteri menggunakan metode bioautografi
kontak. Hasil penelitian diuji menggunakan uji ANOVA 1 Jalan dan apabila ada
perbedaan dilanjutkan dengan Uji Post hoc untuk mengetahui tingkat perbedaan
yang terjadi antar perlakuan.
3.5 Alat dan Bahan yang Digunakan
3.5.1 Alat
Alat penelitian yang digunakan pada penelitian ini meliputi beaker glass
dengan berbagai ukuran, gelas ukur dengan berbagai ukuran, corong pisah, corong
kaca, klem, ring, labu ukur berbagai ukuran, gelas arloji, timbangan mettler,
vacum rotary evaporator, pompa vakum, pengaduk kaca, kolom vakum,
waterbath, kertas saring, pipa kapiler, plat Kromatografi Lapis Tipis silika G 60
F254, bejana pengembang, tabung reaksi, pipet tetes, seperangkat alat UV-Vis
merk Shimadzu tipe 1800. Alat penelitian yang digunakan pada penelitian untuk
uji mikrobiologi adalah beker glass, erlenmeyer, cawan petri, mikropipet, enkas,
oktoklaf, inkubator, jarum ose, pinset, tabung reaksi, dan lampu spiritus, ring.
3.5.2 Bahan
Bahan uji yang digunakan adalah Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk). Bahan yang digunakan penyarian dan fraksinasi adalah aquadest, etanol
70% (Bratacem), Feri Ammonium Sulfat, n-heksan (Merck), aseton (Merck),
n-butanol (Merck), asam asetat glasial (Merck). Bahan yang digunakan untuk uji
36
pendahuluan adalah serbuk silika gel G60 F254 (Merck), lempeng Kromatografi
Lapis Tipis, metanol (p.a), serbuk Zn (Farco), HCl 2N, serbuk Mg, FeCl3 1%,
AlCl3 1%, aquadest, HNO3, etanol 70%, asam klorida 1%, HCl(p), amil alkohol,
NaOH, HCl 1%, NaOH 2M, amonia encer, amoniak pekat (Bratachem). Bahan
yang digunakan untuk Kromatografi Lapis Tipis adalah fase diam lempeng silika
gel G60 F254, fase gerak n-butanol : asam asetat : air (4:1:5) serta deteksinya
menggunakan lampu UV 254 nm dan 366 nm. Bahan yang digunakan untuk uji
mikrobiologi media EMB (Eosin Methylene Blue). Bakteri yang digunakan adalah
Eschericha coli ATCC 25922.
3.6 Cara Kerja
3.6.1 Persiapan Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah buah lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk). Bahan didapatkan dari Dukuh Tapak Tugurejo Rt.04/IV,
Kelurahan Tugurejo, Kecamatan Tugu, Kota Semarang, lalu bahan buah lindur
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) yang telah dipersiapkan dipilih secara acak
sebanyak sampel yang diperlukan. Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk) dicuci sampai bersih dan dikeringkan di almari pengering dengan suhu
50°C / 120°F selama 8 jam. Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
kering dihaluskan dengan blender lalu diayak untuk menghasilkan serbuk buah
lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) yang seragam.
3.6.2 Ekstraksi Bahan

37
Proses ekstraksi serbuk buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
dilakukan menggunakan metode remaserasi. Proses remaserasi diawali dengan
menggunakan serbuk buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) sebanyak
500 gram lalu ditambahkan pelarut etanol teknis 70% sebanyak 2 liter. Rendam
buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) selama 6 jam dan letakkan pada
toples. Hasil ekstraksi buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) didiamkan
selama 24 jam. Hasil cairan ekstraksi tersebut disaring dengan menggunakan kain
saring. Ampas yang tersisa dimaserasi kembali dengan pelarut etanol 70% hingga
warna filtrat mendekati warna pelarut etanol. Ekstrak etanol yang diperoleh
dipekatkan menggunakan waterbath dengan suhu ± 50 - 70ºC, sehingga diperoleh
ekstrak kental buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk). Ekstrak kental
yang telah diperoleh dilakukan uji pendahuluan dengan reaksi warna dan uji
penegasan dengan KLT.
3.6.3 Uji Bebas Etanol
Ekstrak kental yang diperoleh diuji pendahuluan untuk mengetahui tidak
ada kandungan etanol pada hasil ekstrak. Dalam penelitian ini dilakukan satu
metode uji bebas etanol menggunakan asam asetat dan H 2SO4 yang ditambahkan
ke dalam ekstrak buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) lalu dipanaskan.
Hasil ekstrak tersebut dianalisa secara sensori bau yang terbentuk.
3.6.4 Fraksinasi Buah Lindur
3.6.4.1 Kromatografi Kolom Vakum Cair
Hasil dari kromatografi lapis tipis akan digunakan untuk memilih eluen
yang akan digunakan dalam kromatografi kolom. Penggunaan eluen yang sesuai
38
akan berpengaruh terhadap fraksi yang positif yang akan dipisahkan dengan
kromatografi kolom menggunakan fase diam silika gel 60. Tiap fraksi yang
dihasilkan dianalisis dengan kromatografi lapis tipis (silika gel GF254), kemudian
fraksi dengan pola noda yang sama digabungkan, diuapkan, ditimbang dan
selanjutnya fraksi di uji penegasan dengan KLT (Armin et al., 2015).
Ekstrak yang diperoleh dilarutkan dengan air. Ekstrak air yang diperoleh
ditambah dengan pelarut n-heksan dalam corong pisah, sehingga diperoleh ekstrak
n-heksan dan ekstrak air. Ekstrak n-heksan dan ekstrak air yang diperoleh
dikumpulkan. Terhadap ekstrak air yang diperoleh ditambah pelarut aseton dalam
corong pisah hingga di dapat ekstrak aseton dan ekstrak air. Fraksi n-heksan, fraksi
aseton dan fraksi air kemudian ditimbang, diuapkan dan dilakukan uji skrining
senyawa tanin.
Fraksi aseton buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) ditimbang
sebanyak 5 gram lalu ditambah ± 2,5 gram silika gel GF 254. Hasil campuran
tersebut diaduk sampai berbentuk serbuk. Serbuk fraksi buah lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) difraksinasi menggunakan kolom vakum dengan fase
gerak kloroform : methanol secara bergradien.
3.6.5 Uji Skrining Fitokimia Buah Lindur
1. Uji Flavonoid (Lumbessy, 2013).
Sampel ditambah serbuk magnesium (Mg), HCl, dan amil alkohol serta 4 ml
etanol kemudian dicampur hingga homogen. Terbentuknya warna merah, kuning
atau jingga pada lapisan amil alkohol menunjukkan adanya flavonoid.
2. Uji Alkaloid (Rahmat, 2009).

39
Sampel sebanyak 1 ml ditambah dengan 1,5 ml HCl 2 N kemudian disaring.
Filtrat yang diperoleh ditambahkan 2-3 tetes reagen dragendroff. Terbentukya
endapan merah jingga menunjukkan adanya senyawa alkaloid.
3. Uji Tanin (Anwar, 1989; Robinson, 1995; Sirait, 2007, Mulyani dan Laksana,
2011; dan Simaremare, 2014).
Untuk memeriksa adanya senyawa tanin dalam bahan tumbuhan dilakukan
dengan beberapa uji warna. Sebanyak satu gram sampel Buah Lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) ditambah 10 ml aquadest, kemudian disaring. Filtrat
digunakan untuk percobaan identifikasi tanin.
a. Uji senyawa phenolic menggunakan pereaksi FeCl3.
Metode pengujian yang dilakukan yaitu filtrat dari buah Lindur sebanyak 2 ml
ditambah 1 ml larutan FeCl3 1% di dalam tabung reaksi, adanya senyawa
phenolic pada sampel ditunjukkan dengan terjadinya perubahan warna
menjadi hijau atau biru kehitaman.
b. Dengan menggunakan larutan gelatin.
Filtrat buah Lindur sebanyak 2 ml ditambah beberapa tetes larutan gelatin
0,5% di dalam tabung reaksi, reaksi positif terbentuk endapan putih.
c. Dengan menggunakan Larutan Air Brom
Filtrat sebanyak 2 ml ditambah larutan air brom di dalam tabung reaksi,
hasilnya terdapat endapan putih positif mengandung tanin.
4. Uji Saponin (Simaremare, 2014).

40
Sampel sebanyak 2 ml dilarutkan dalam aquadestilata pada tabung reaksi
dan dikocok selama 15 menit. Adanya senyawa saponin ditunjukkan dengan
terbentuknya busa.
3.6.6 Penyiapan Untuk Uji Mikrobiologi
3.6.6.1 Sterilisasi Media dan Alat
Semua media dan alat-alat baik gelas maupun plastik yang akan digunakan
untuk pengujian aktivitas antibakteri harus disterilkan terlebih dahulu. Alat-alat
gelas, seperti erlenmeyer, tabung reaksi, beaker glass, cawan petri dan lain-lain
disterilkan menggunakan otoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit. Alat-alat
yang terbuat dari bahan plastik seperti mikro pipet (yellow tip) disterilkan dengan
cara direndam dalam etanol 70% selama 15 menit.
3.6.6.2 Pembuatan Media Cair Nutrien Broth
Ditimbang 1,1 g Nutrien Broth dimasukkan dalam beker gelas, ditambahkan
100 ml aquadestilata sambil terus diaduk sampai larut. Dimasukkan tabung reaksi
sebanyak 5 ml tabung ditutup dengan kapas kemudian disterilkan dengan otoklaf
pada suhu 121°C selama 15 menit.
3.6.6.3 Pembuatan Media EMB (Eosin Methylene Blue)
Media EMB (Eosin Methylene Blue) merupakan media yang selektif
terhadap bakteri Eschericha coli. EMB (Eosin Methylene Blue) dibuat dengan
cara melarutkan 37,5 gram serbuk EMB dengan aquades sampai volumenya
1000 ml ke dalam beaker glass. Aduk sampai larutan sempurna dan homogen.
41
Campuran tersebut selanjutnya disterilisasi di dalam autoklaf pada suhu 1210C
selama 15 menit. Tuangkan kedalam cawan petri steril dengan ketebalan lapisan
1 ± 2 mm dan lapisan 2 ± 2 mm.
3.6.6.4 Pembuatan Larutan ½ Mc Farland
Komposisi larutan 1 Mc Farland adalah sebagai berikut :
1. Larutan BaCl2.H2O 0,048 M 0,50 ml.
2. Larutan H2SO4 0,18 M 99,5 ml.
Cara pembuatannya adalah dibuat larutan H2SO4 0,18 M diukur 99,5 ml
dimasukkan labu takar 100,0 ml. Dibuat larutan BaCl2.H2O 0,048 M diukur
0,5 ml dan dimasukkan labu takar yang sama. Dicukupkan sampai tanda batas dan
dicampur sampai homogen kemudian dipipet 50 ml ditambah media NB 50 ml
dan dihomogenkan dalam labu takar 100 ml. Absorbansinya diukur dengan
spektrofotometer UV pada panjang gelombang 625 nm. Larutan ½ Mc Farland
mempunyai kekeruhan setara dengan 1 x 108 CFU/ml dengan absorbansi 0,08-0,1.
3.6.6.5 Pembuatan Biakan Bakteri
Bakteri Eschericha coli ATCC 25922 diambil menggunakan jarum ose steril
kemudian ditanam pada media agar miring Nutrient Agar dengan cara digoreskan
pada media yang sudah memadat dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.
3.6.6.6 Pembuatan Suspensi Bakteri
1. Bakteri Eschericha coli ATCC 25922 dari kultur murni diambil 1 ose
dimasukkan dalam media cair Nutrien Broth (NB) kemudian diinkubasi pada
suhu 37°C selama 24 jam.

42
2. Absorbansinya diukur dengan spektrofotometer UV pada panjang gelombang
625, disetarakan dengan absorbansi larutan standar ½ Mc Farland dengan
asumsi biakan cairan yang kekeruhannya setara dengan ½ Mc Farland yang
mempunyai populasi 0.5 x 108 CFU/ml.
3.6.6.7 Pembuatan Kontrol Positif
Tablet Ciprofloksasin ditimbang seksama sebanyak 50,0 mg, kemudian
dilarutkan dan diencerkan dengan DMSO (Dimethyl Sulphoxide) sampai volume
100,0 ml lalu dari larutan tersebut dipipet sebanyak 1,0 ml kemudian ditambah
DMSO (Dimethyl Sulphoxide) sampai volume 10,0 ml pada labu takar
(konsentrasi 50 mg/L).
3.6.6.8 Prosedur Pengujian Daya Antibakteri
Uji daya antibakteri dilakukan dengan metode sumuran agar. Tuangkan ke
dalam cawan petri 10 mL media EMB (Eosin Methylene Blue) dan dibiarkan
memadat, setelah itu dipasang silinder cup di atas media yang sudah padat. Media
EMB (Eosin Methylene Blue) sebanyak 20 mL dihomogenkan dengan 5 µL
suspensi bakteri dan dituangkan pada cawan petri yang sudah dipasang silinder
cup, dibiarkan memadat dan diambil silinder cup. Fraksi tannin dipipet 50 µL dan
dimasukkan ke dalam lubang sumuran. Larutan Ciprofloksasin 0,005% sebagai
kontrol positif sedangkan larutan DMSO (Dimethyl Sulphoxide) sebagai control
negative lalu diinkubasi pada suhu 370C selama 1 x 24 jam. Media EMB
diinkubasi pada suhu 370C selama 1 x 24 jam. Kemudian diukur diameter
hambatan pertumbuhan Eschericha coli ATCC 25922. Adanya daerah jernih pada
media yang mengelilingi masing-masing fraksi menunjukkan adanya aktivitas

43
antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri Eschericha coli ATCC 25922. Diameter
daerah hambatan yang dihasilkan diukur dengan menggunakan alat jangka sorong.
Pengulangan dilakukan sebanyak 5 kali. Hasil daerah hambatan dicatat dalam
satuan mm.
3.6.7 Uji Aktivitas Antibakteri dengan Metode Bioautografi Kontak (Fadlila

et al. ,2015)
Fraksi tannin buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) yang
mempunyai aktivitas antibakteri dilakukan uji bioautografi kontak. Sampel fraksi
tannin buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) dilarutkan dalam methanol
lalu diletakkan pada lempeng silika gel GF254 nm. Lempeng silika yang berisi
fraksi buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) dikeringkan dan dilihat di
bawah sinar UV 254 nm. Hasil dari pelarutan ini kemudian dielusi dengan eluen
yang sesuai dengan identifikasi golongan senyawanya.
Setelah proses elusi selesai, lempeng silika dikeringkan dan ditempelkan
pada 40 ml media EMB (Eosin Methylene Blue) yang telah diinokulasikan 7 µl
suspensi bakteri Escherichia coli ATCC 25922 selama 15 - 30 menit. Media EMB
(Eosin Methylene Blue) diinkubasi pada suhu 370C selama 24 jam. Zona hambat
yang terbentuk dibandingkan dengan hasil Rf dari identifikasi KLT yang telah
dideteksi dengan pereaksi.

44
3.7 Skema Kerja
500 g serbuk buah Lindur
Ditambah etanol 2000 ml

Diremaserasi selama 6 jam diaduk dan 24 jam
didiamkan
Disaring, didapat ampas dan ekstrak etanol
Ampas yang ada dimaserasi lagi
Ekstrak etanol buah Lindur
Dilakukan uji bebas etanol

Diuapkan di waterbath suhu 50 - 70ºC
Ekstrak kental buah Lindur
Lapisan air : n-heksana buah Lindur
Fraksi n-heksana Fraksi air
Diuapkan di penangas Ditambah aseton (1:1) (3x25ml)

air suhu 30 - 40ºC
Fraksi n-heksana
kental buah Lindur Fraksi air Fraksi aseton
Diuapkan di penangas Diuapkan di penangas

air suhu 30 - 40ºC air suhu 30 - 40ºC
Fraksi air kental Fraksi aseton kental
buah Lindur buah Lindur
Skrining senyawa tanin
Uji KLT senyawa tanin
Metode Kromatografi Kolom Vakum Cair

45
Gambar 8. Skema Kerja Ekstraksi dan Fraksinasi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk)
46
Difraksinasi dalam kolom vakum dengan perbandingan fase gerak

klorofom : metanol
Fraksi yang didapatkan ditampung dalam vial
Dilakukan Uji KLT
Rf yang sama diuapkan menjadi fraksi kental
Uji Bioautografi Kontak
Gambar 9. Skema Kerja Fraksinasi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
Ekstrak dan fraksi kental buah Lindur
Uji kualitatif
Saponin
Flavonoid Alkaloid Tanin
Larutan Air
Uji Fenolik Larutan Gelatin + Brom
NaCl
Gambar 10. Skema kerja uji kualitatif fraksi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk)
47
Fraksi tannin buah lindur yang mempunyai aktivitas

antibakteri
Ditotolkan pada lempeng KLT
Dielusi menggunakan yang sesuai dengan saat

identifikasi dengan KLT
Dikeringkan
Dilihat di bawah sinar UV 254 nm
Ditempelkan lempeng KLT diatas media yang sudah diinokulasi

bakteri Escherichia coli ATCC 25922
Dibiarkan selama 30 menit
Diangkat lempeng dan diinkubasi selama 24 jam suhu 37o
Diamati zona hambat yang muncul
Gambar 11. Skema kerja Penentuan Aktivitas Antibakteri Escherichia coli ATCC 25922
dengan Metode Bioautografi Kontak
48
Bakteri Escherichia coli ATCC 25922
Dibiakkan pada agar miring (NA)
Kultur murni Bakteri

Diinkubasi selamaEscherichia
24 jam padacoli ATCC
suhu 37ºC25922
Dimasukkan dalam media NB

Diukur absorbansinya pada panjang
gelombang 625 nm, disetarakan
dengan larutan ½ Mc Farland
Suspensi bakteri
Gambar 12. Skema kerja Pembuatan suspensi bakteri
Diukur 10 ml untuk masing-masing media EMB
Dimasukkan ke dalam cawan petri dibiarkan memadat
Diletakkan 5 cylinder cup
Dimasukkan 20 ml media dan 5 µl suspensi

bakteri ke dalam cawan petri
Setelah media memadat cylinder cup diambil
Dimasukkan ekstrak, fraksi, kontrol positif (ciprofloksasin),

dan kontrol negatif (DMSO) pada lubang cylinder cup
Diinkubasi pada suhu 37ºC selama 24 jam
Diukur diameter zona bening
Gambar 13. Skema kerja uji aktivitaspertumbuhan

antibakteri Buah Lindur terhadap bakteri
Escherichia coli ATCC 25922
49
3.8 Analisis Data
Data yang diperoleh dari pemeriksaan laboratorium, dikumpulkan,
ditabulasikan dan dianalisis menggunakan program SPSS. Sebelum dilakukan
hipotesis, data yang terkumpul terlebih dahulu diedit, dicoding dan dientry dalam
file komputer. Uji kenormalan data dapat dilakukan dengan uji shapiro wilk,
kemudian diuji lanjut dengan menggunakan Analysis of Variance (ANOVA).
Nilai signifikan data penelitian ini apabila variabel yang dianalisis memiliki
p < 0,05. Jika p < 0,05 maka Ho ditolak dan Ha diterima. Jika p > 0,05 maka Ho
diterima dan Ha ditolak. Analisis statistik menggunakan program SPSS.
1. Ho : Tidak ada pengaruh konsentrasi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza
(L) Lamk) dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli.
2. Ha : Ada pengaruh konsentrasi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk) dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli.
3. KK (Koefisien keragaman) digunakan untuk menunjukkan derajat kebebasan
simpulan dari suatu percobaan. Semakin besar nilai KK berarti semakin besar
keragaman dalam suatu ulangan artinya tingkat ketelitian semakin rendah.
Dengan rumus yaitu:
Keterangan :
KK = Koefisien Korelasi
RKD = Rata-rata Kuadrat Dalam
= Mean Keseluruhan
50
Menurut Supranto (2000) Uji pengaruh yang digunakan adalah :
1. KK besar (minimal 10% pada kondisi homogen) uji lanjutan yang digunakan
adalah uji Duncan.
2. KK sedang (antara 5-10% pada kondisi homogen) uji lanjutan yang digunakan
adalah uji LSD (Least Significance Deferance).
3. KK kecil (maksimal 5% pada kondisi homogen) uji lanjutan yang digunakan
adalah uji Tuckey.

BAB IV
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan dan perbedaan
aktivitas antibakteri fraksi tanin buah lindur dalam menghambat pertumbuhan
bakteri Escherichia coli ATCC 25922. Sampel dalam penelitian ini adalah buah
lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) yang diperoleh dari Dukuh Tapak
Tugurejo Rt.04/IV, Kelurahan Tugurejo, Kecamatan Tugu, Kota Semarang pada
Juni, 2016. Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) dideterminasi di
Laboratorium Biologi Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi “Yayasan Pharmasi”
Semarang. Determinasi bertujuan untuk menghindari kesalahan pengambilan
sampel. Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) yang digunakan yaitu
buah yang sudah masak ditandai dengan warna hijau pada kulit (Lampiran 1).
Buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) yang sudah dikumpulkan
kemudian disortasi, dicuci lalu dikeringkan (Katno dkk., 2008). Pengeringan
dilakukan di almari pengering dengan suhu 50°C. Prinsip dari metode almari
pengering adalah bahwa air yang terkandung dalam suatu bahan akan menguap
bila bahan tersebut dipanaskan pada suhu 50°C selama waktu tertentu
(Underwood, 2002). Simplisia kering diperkecil ukuran partikelnya dengan
blender kemudian diayak dengan ukuran 20/80 (100 mesh), sehingga diperoleh
serbuk dengan derajat kehalusan yang sama. Pengecilan ukuran partikel berkaitan
dengan proses penarikan senyawa aktif oleh cairan penyari. Semakin kecil ukuran
partikel serbuk, maka luas permukaan akan semakin besar dan proses penyarian
51
52
akan berlangsung lebih efektif. Serbuk simplisia diayak untuk mendapatkan
ukuran yang seragam.
Metode ekstraksi yang digunakan adalah metode remaserasi yang dilakukan
dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Pelarut akan masuk
ke dalam sel melewati dinding sel, sehingga isi sel akan larut dalam pelarut karena
adanya perbedaan konsentrasi antara larutan di dalam sel dengan di luar sel.
Pelarut berdifusi masuk ke dalam sel dan zat terlarut bergantian berdifusi ke luar
sel. Peristiwa tersebut akan berlangsung secara terus-menerus sampai terjadi
keseimbangan konsentrasi antara larutan di dalam sel dengan di luar sel. Setelah
proses ekstraksi selesai maserat yang diperoleh kemudian dipisahkan antara filtrat
dan residu. Filtrat yang diperoleh diuapkan di atas waterbath dengan suhu 50o-70o
C hingga terbentuk ekstrak kental. Tujuan dilakukan pemekatan untuk
menguapkan pelarut sehingga diperoleh konsentrasi zat aktif lebih banyak. Hasil
yang diperoleh pada proses ekstraksi dari 500 gram serbuk simplisia kering yaitu
263,6 gram ekstrak kental berwarna coklat tua. Rendemen yang diperoleh pada
proses ekstraksi adalah 52,72% menunjukkan bahwa besar kecilnya nilai
randemen menunjukkan keefektifan proses ekstraksi (Mia Permawati, 2008)
Sebelum dilakukan fraksinasi ekstrak kental buah Lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) dilakukan pengujian bebas etanol. Uji bebas etanol
seperti pada tabel dibawah ini :
Tabel 2. Hasil Pengujian Bebas Etanol Ekstrak Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk)
Perlakuan Pustaka Hasil Uji Ekstrak

Ekstrak + Asam Asetat + H2SO4 p,
Bau Pisang (Schoorl, Tidak berbau
lalu dipanaskan (Kusumawati et
1988 : 48) alkohol (-)
al. ,(2015) dan Dia et al., (2015))
53
Berdasarkan tabel 2 bebas etanol ekstrak buah lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) hasil penelitian membuktikan bahwa ekstrak etanol buah
lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) negatif pelarut etanol karena tidak
tercium bau pisang. Tujuan dilakukan ekstrak bebas etanol untuk mengetahui
apakah masih ada kandungan etanol yang terdapat pada ekstrak buah lindur
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) dan untuk meyakinkan bahwa hasil uji
aktivitas antibakteri nantinya bukan disebabkan adanya etanol dalam ekstrak.
Ekstrak kental yang diperoleh dilakukan fraksinasi dengan menggunakan
corong pisah. Proses fraksinasi dimulai dengan melarutkan ekstrak kental dalam
air untuk mendapatkan kembali ekstrak yang sudah diuapkan dan mempermudah
proses fraksinasi. Ekstrak dilakukan fraksinasi dengan pelarut n-heksan sebanyak
tiga kali bertujuan untuk melarutkan senyawa seperti aglikon flavonoid yang
kurang polar (Markham, 1988:15). Lapisan air yang didapat dilakukan fraksinasi
dengan aseton untuk melarutkan senyawa – senyawa polifenol seperti tanin.
Sedangkan air merupakan pelarut polar yang mampu melarutkan senyawa
glikosida flavonoid dan sisa tanin yang terlarut dalam air.
Ketiga fraksi yang didapat dipekatkan hingga didapatkan fraksi kental.
Selanjutnya fraksi kental dilakukan identifikasi tanin dengan menggunakan reaksi
warna. Identifikasi dilakukan untuk mengetahui masih ada tidaknya senyawa tanin
dalam masing – masing fraksi. Berdasarkan hasil uji reaksi warna pada tabel 3 dan
warna yang terbentuk menunjukkan pada fraksi aseton dan air positif mengandung
gugus fenol dimungkinkan pada fraksi aseton dan air terdapat senyawa polifenol.
Pada fraksi n-heksan tidak menunjukkan adanya gugus fenol dan tanin.
Tabel 3. Hasil Pengamatan Uji Reaksi Warna Tanin Pada Fraksi n-heksan, Aseton, dan Air
54
Pereaksi
Fraksi (Robinson,1995; Harborne,1987)
FeCl3 1%
n-heksan Hijau cerah (negatif)
Aseton Hijau kehitaman (positif)
Air Hijau kehitaman (positif)
Berdasarkan uji reaksi warna dari semua fraksi yang diperoleh yang positif
mengandung tanin adalah fraksi aseton dan air. Setelah dilakukan proses
remaserasi dan uji bebas etanol kemudian dilakukan uji skrining fitokimia yang
terdapat pada serbuk, ekstrak, dan fraksi yang meliputi uji senyawa flavonoid,
tanin, saponin dan alkaloid. Hasil uji ditunjukkan pada Tabel 4.
Tabel 4. Hasil Skrining Fitokimia Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
Hasil
Hasil Reaksi
Senyawa Sampel Pereaksi berdasarkan Keterangan
Warna
pustaka
Serbuk serbuk Bewarna ungu
magnesium (Mg) pada lapisan Jingga pada Positif
Flavonoid + HCL, + 0,4 ml amil alkohol. lapisan amil mengandung
Ekstrak
amil alkohol (Lumbessy, alcohol Flavonoid
serta 4 ml etanol 2013)
Serbuk Positif
Reagen Endapan jingga Endapan merah
Alkaloid mengandung
Ekstrak dragendroff (Rahmat, 2009) jingga
Alkaloid
Serbuk Aquadestilata,Terbentuk busa Positif
Terdapat busa
Saponin ditunggu 10 (Simaremare, mengandung
Ekstrak stabil
menit + HCL 2014) Saponin
Hasil
Hasil Reaksi
Senyawa Sampel Pereaksi berdasarkan Keterangan
Warna
pustaka
Serbuk Hijau kehitaman
Ekstrak atau biru tua
FeCl3 Biru kehitaman
(Mulyani dan
Fraksi
Laksana, 2011)
Serbuk Terbentuk
Positif
Ekstrak Gelatin 0,5% + endapan putih Terdapat
Tanin mengandung
NaCl (Mulyani dan endapan putih
Fraksi Tanin
Laksana, 2011)
Serbuk Terbentuk
Ekstrak endapan putih Terdapat
Air brom
(Mulyani dan endapan putih
Fraksi
Laksana,2011)
55
Uji skrining fitokimia warna menggunakan FeCl3 digunakan untuk
menentukan kandungan gugus fenol pada sampel. Adanya gugus fenol
ditunjukkan dengan perubahan warna coklat menjadi warna biru tua karena
terbentuk senyawa komplek antara tanin yang merupakan senyawa polifenol
dengan FeCl3.
Terbentuknya endapan putih setelah penambahan larutan gelatin
menyatakan bahwa sampel mengandung tanin. Harborne (1987) menyatakan
semua tanin menimbulkan endapan sedikit atau banyak jika ditambahkan gelatin.
Tanin dapat dibedakan dari senyawa fenol lainnya karena kemampuannya untuk
mengendapkan protein. Gelatin merupakan protein alami yang mampu
diendapkan oleh tanin. Endapan putih tersebut terbentuk karena adanya ikatan
hidrogen antara tanin dengan protein dalam gelatin (Robinson, 1995:72).
Terbentuknya endapan setelah ditambahkan air brom yang menyatakan bahwa
sampel pada buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) positif mengandung
tanin.
Selanjutnya dilakukan uji identifikasi tanin dengan menggunakan KLT. Uji
KLT tanin pada fraksi bertujuan sebagai uji penegasan pada fraksi yang
mengandung tanin yang dibandingkan dengan baku asam galat yang digunakan.
Identifikasi dengan KLT menggunakan eluen yang juga digunakan untuk fraksi
yaitu kloroform : metanol (2:8) yang ditandai dengan munculnya noda. Fraksi
aseton selanjutnya dilakukan proses pemisahan menggunakan teknik kromatografi
kolom, fase gerak yang akan digunakan dipilih berdasarkan pendekatan pencarian
eluen pada kromatografi lapis tipis (KLT). Noda hasil pemisahan dilihat dibawah
lampu UV pada panjang gelombang 254 nm dan penampak bercak untuk dilihat
56
pola pemisahannya. Hasil uji KLT fraksi aseton dengan eluen kloroform :
methanol (2:8) seperti pada tabel 5.
Tabel 5. Hasil KLT Fraksi Aseton dengan Eluen Kloroform : Metanol (2:8) dibawah Sinar
UV 254 nm dan penampak bercak FeCl3
Warna Noda
Noda Rf
UV 254 nm Penampak Bercak
1 Ungu kehitaman Hitam kecoklatan 0,93
Berdasarkan tabel 5, tannin memiliki warna noda saat di bawah sinar UV
254 nm berwarna biru kehitaman. Hal itu diperkuat Harborne (1987:105) bahwa
tanin dapat dideteksi dengan sinar UV pendek berupa bercak lembayung.
Sehingga campuran pelarut klorofom : methanol dipilih sebagai fase gerak dalam
proses pemisahan dengan kromatografi kolom. Hasil tiap fraksi yang dihasilkan
dianalisis dengan kromatografi lapis tipis (silika gel GF 254), kemudian fraksi dengan
pola noda yang sama digabungkan, diuapkan, ditimbang dan selanjutnya fraksi di uji
aktivitas antibakteri.
Hasil fraksinasi ini menghasilkan 11 fraksi. Masing-masing fraksi ini
kemudian dilakukan uji penegasan dengan menggunakan KLT untuk melihat
kandungan senyawa tannin pada fraksi kloroform dengan fase diam yang
digunakan adalah silica GF254 dan menggunakan fase gerak berupa n-butanol :
57
asam asetat : air dengan perbandingan (4:1:5). Uji KLT fraksi disajikan pada
Tabel 6.
Tabel 6. Hasil KLT Fraksi Tanin dengan eluen Kloroform : Metanol Buah Lindur
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
Kloroform : Warna noda Warna noda Penampak Bercak

Fraksi Rf
methanol (UV 254 nm) (UV 366 nm) (FeCl3)
1 100 : 0 Biru kehitaman Ungu Coklat kehitaman 0,56
2 90 : 10 Biru kehitaman Ungu Coklat kehitaman 0,56
3 80 : 20 Biru kehitaman - Tidak Berwarna -
5 60 : 40 Tidak Berwarna - Tidak Berwarna -
Keterangan :
Fraksi yang digunakan
Hasil KLT fraksi tannin buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
yang memiliki nilai Rf berdekatan yaitu fraksi nomor 1 (Rf 0,56). Sehingga fraksi
nomor 1 selanjutnya di uji aktivitas antibakteri dan fraksi kental kloroform yang
diperoleh sebanyak 1,95 gram. Namun pada fraksi nomor 2, tidak dilakukan uji
aktivitas antibakteri dikarenakan ditakutkan adanya senyawa lain yang dapat
menganggu aktivitas senyawa aktif.
Selanjutnya dilakukan uji kualitatif ekstrak dan fraksi tannin dengan
menggunakan KLT. Uji Hasil KLT ekstrak dan fraksi ditunjukkan pada tabel 7
dibawah ini :
Tabel 7. Hasil KLT ekstrak dan fraksi Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
Hasil positif berdasarkan Deteksi Penampak

Pengujian Fase gerak Rf Noda
pustaka warna bercak
Flavonoid Butanol : Asam Positif flavonoid jika Ungu Kuning 0,93
Asetat : Air (4:1:5) terbentuk warna kuning Kecoklatan
58
muda hingga jingga setelah

diuapi dengan uap ammonia
(Robinson, 1995)
Positif alkaloid jika
terbentuk warna orange
Kloroform : etil Ungu
Alkaloid setelah ditambah penampak Orange 0,93
asetat (70:30) kekuningan
bercak dragendorff
(Sugijanto dkk, 2014)
Positif saponin jika
terbentuk warna biru sampai
biru violet dengan
Koloroform : penampak bercak vannilin-
Saponin Metanol : Air asam sulfat atau anisaldehid- Ungu tua Ungu tua 0,87
(64:50:10) asam sulfat. Di bawah sinar
UV 254 nm tidak terjadi
pemadaman bercak
(Sulistyani dkk, 2012).
Positif tanin jika terbentuk
warna biru kehitaman
Butanol : Asam Biru Biru
Tanin setelah disemprot penampak 0,93
Asetat : Air (4:1:5) Kehitaman Kehitaman
bercak FeCl3 (Trease dan
Evans, 1978)
Hasil uji KLT pada tabel 7 menegaskan bahwa ekstrak dan fraksi tannin
buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) mengandung senyawa flavonoid,
alkaloid, saponin dan tanin. Pada uji KLT dapat dilihat perbedaan warna
berdasarkan sinar UV dan penampak bercak dibandingkan dengan pustaka. Nilai
Rf tersebut menunjukkan bahwa senyawa yang ada antara ekstrak dan fraksi
adalah senyawa yang sama.
Uji aktivitas antibakteri dilakukan pada ekstrak etanol, fraksi tannin buah
lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk). Metode uji aktivitas antibakteri yang
digunakan adalah sumuran agar. Media yang digunakan adalah Eosin Methylen
Blue Agar (EMB Agar). Eosin Methylen Blue Agar (EMB Agar) dipilih karena
merupakan salah satu media selektif yang digunakan untuk isolasi dan identifikasi
bakteri gram negatif. Bakteri Escherichia coli pada media EMB (Eosin Methylen
Blue Agar) tumbuh membentuk warna ungu dengan koloni warna hijau metalik.
59
Media Eosin Methylen Blue Agar (EMB Agar) mempunyai keistimewaan yaitu
dapat memfermentasi laktosa dan menghasilkan koloni dengan inti berwarna
gelap dan kilap logam karena mengandung laktosa dan sukrosa, sedangkan
mikroba yang tidak dapat memfermentasi laktosa, koloninya tidak berwana.
Kemampuan Escherichia coli memfermentasikan laktosa menyebabkan
penurunan pH, sehingga mempermudah absorbs neural red untuk mengubah
koloni menjadi hijau metalik (Suwandi, 1999).
Ciprofloksasin digunakan sebagai kontrol positif. Cara kerja siprofloksasin
adalah menghambat sintesis DNA bakteri dengan membloking enzim girase
(DNA gyrase). Spektrum aktifitas antimikroba Ciprofloksasin pada bakteri gram
positif bersifat medium, untuk bakteri gram negatif bersifat kuat, sedangkan untuk
bakteri anaerob bersifat lemah.
Suspensi bakteri diukur absorbansinya dan disetarakan dengan absorbansi
standar ½ Mc Farland I, Escherichia coli ATCC 25922 memiliki nilai absorbansi
0,098. Konsentrasi uji ekstrak dan fraksi yang digunakan adalah 5%, 15%, dan
25%. Uji aktivitas antibakteri fraksi dilakukan lima kali pengulangan.
Hasil yang diperoleh berupa zona hambat. Pengukuran zona hambat
dilakukan dengan mengukur daerah disekitar sumuran yang tidak terdapat
pertumbuhan koloni bakteri dikurangi diameter silinder cup, berdasarkan hasil
pengukuran diameter silinder cup sebesar 0,986 cm. Data diameter zona hambat
terhadap bakteri Escherichia coli ATCC 25922 ditunjukkan pada tabel 8.
Tabel 8. Data Diameter Zona Hambat Fraksi Tanin Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza
(L) Lamk) terhadap Bakteri Escherichia coli ATCC 25922
No. Kontrol (-) / Konsentrasi Fraksi Tanin (mm) Kontrol (+) /
DMSO (mm) 5% 15% 25% Ciprofloksasin
60
(mm)
Replikasi 1 0,000 7,80 9,66 11,90 29,08
Replikasi 2 0,000 7,86 8,86 11,04 29,08
Replikasi 3 0,000 8,47 10,94 11,56 29,08
Replikasi 4 0,000 9,25 11,90 13,08 29,08
Replikasi 5 0,000 10,25 12,45 14,40 29,08
Rata-rata 0,000 8,73 10,76 12,40 29,08
Tabel 8 menunjukkan rata – rata diameter zona hambat fraksi tannin buah
lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) terhadap bakteri Escherichia coli
ATCC 25922 pada kosentrasi 25% menunjukan diameter tertinggi yaitu 12,40
mm dan diameter terendah pada kosentrasi 5%.
Gambar 14. Grafik rerata zona hambat fraksi tanin Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza
(L) Lamk) terhadap Escherichia coli ATCC 25922
Gambar 14. menunjukkan bahwa semakin tinggi kosentrasi fraksi tannin
maka semakin besar zona hambatnya. Analisis data zona hambat yang diperoleh
terlebih dahulu diuji normalitas dengan analisis Shapiro Wilk untuk mengetahui
apakah data yang diperoleh berdistribusi normal dengan tingkat kepercayaan 95%.
Selanjutnya di uji homogenitas dengan analisis Levene Statistic untuk mengetahui
data berdistribusi homogen. Uji normalitas dan uji homogenitas data disajikan
pada lampiran.
61
Hasil uji statistika menunjukkan bahwa data berdistribusi normal dan
homogen, karena nilai signifikansinya (sig)> 0,05 sehingga dilanjutkan dengan
ANOVA 1 jalan. Hasil ANOVA 1 jalan menunjukkan ada perbedaan signifikan
antar konsentrasi fraksi tannin dan kontrol positif yang dibuktikan dengan hasil
nilai asym sig 0,000 (P<0,05). Data kemudian dilakukan pengujian lanjutan yaitu
Uji Post Hoc Test untuk mengetahui perbedaan antar konsentrasi 5%, 15%, 25%,
dan kontrol positif.
Uji Post Hoc Tests yang digunakan adalah Uji LSD (Least Significanse
Deferance) karena nilai koefisien keragaman (KK) sebesar 8,89% (5-10% pada
kondisi homogen).
Tabel 9. Ringkasan Hasil Uji LSD Konsentrasi Fraksi Tanin Buah Lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk)
Konsentrasi Fraksi
5% 15% 25% Kontrol (+)
Tanin Buah Lindur
5% - 0,012 (d) 0,000 (g) 0,000 (j)
15% 0,012 (a) - 0,037 (h) 0,000 (k)
25% 0,000 (b) 0,037 (e) - 0,000 (l)
Kontrol (+) 0,000 (c) 0,000 (f) 0,000 (i) -
Keterangan: Angka yang diikuti huruf berbeda dalam satu kolom yang sama
menunjukkan beda nyata menurut uji LSD dengan derajat kesalahan
5%.
Pada ringkasan hasil uji LSD dapat diketahui bahwa konsentrasi fraksi
tannin buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) menunjukkan perbedaan
zona hambat yang signifikan, terbukti terlihat pada konsentrasi 5% dengan
konsentrasi 15% dinyatakan signifikan, konsentrasi 5% dengan konsentrasi 25%
dinyatakan signifikan dan konsentrasi 5% dengan kontrol positif (Ciprofloksasin)
dinyatakan signifikan, konsentrasi 15% dengan konsentrasi 5% dinyatakan
signifikan, konsentrasi 15% dengan konsentrasi 25% dinyatakan signifikan,

62
konsentrasi 15% dengan kontrol positif (Ciprofloksasin) dinyatakan signifikan
juga. Konsentrasi 25% dengan 5 %, Konsentrasi 25% dengan 15%, konsentrasi
25% dengan kontrol positif (Ciprofloksasin) juga dinyatakan positif. Kontrol
positif (Ciprofloksasin) dengan 3 konsentrasi yaitu 5%, 15% dan 25% dapat
dinyatakan signifikan sesuai dari uji Post Hoc Tests.
Hasil uji aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa antar konsentrasi
memberikan perbedaan yang signifikan terhadap daya antibakteri Escherichia coli
ATCC 25922. Konsentrasi fraksi tannin buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk) 25% memberikan aktivitas antibakteri yang paling besar dibandingkan
dengan konsentrasi fraksi tannin buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
5% dan 15%. Hal ini karena senyawa yang terdapat pada fraksi tannin buah lindur
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) 25% lebih banyak dibandingkan konsentrasi
fraksi tannin buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) 5% dan 10%.
Disajikan dari Tabel 9, kemampuan fraksi tannin dalam menghambat masih di
bawah kontrol positif, karena zona hambat yang dihasilkan oleh kontrol positif
lebih besar dibandingkan dengan fraksi tannin. Hal ini dikarenakan kontrol positif
yang digunakan telah diuji baik secara klinis dan praklinis dan kontrol positif
yang digunakan telah teruji khasiat nya dimasyarakat.
Aktivitas antibakteri senyawa kandungan dari fraksi ekstrak etanol buah
lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) dibuktikan secara kualitatif melalui uji
bioautografi kontak. Hasil kromatografi lapis tipis yang telah dielusi ditempelkan
pada media suspensi bakteri padat selama 10 - 15 menit agar senyawa kandungan
pada noda lempeng kromatogram dapat berdifusi ke dalam media tersebut,

63
kemudian diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam untuk melihat zona bening
yang terbentuk. Letak noda pada lempeng kromatogram dan letak zona bening
hasil uji bioautografi berada pada letak yang sama setiap kandungan senyawa.
Berdasarkan hasil tersebut maka dapat disimpulkan bahwa senyawa kandungan
dalam lempeng kromatogram yang berdifusi ke dalam media memberikan
aktivitas antibakteri. Golongan senyawa yang mempunyai daya antibakteri pada
fraksi buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) adalah flavonoid, alkaloid,
saponin dan tannin. Hasil uji bioautografi disajikan pada lampiran 15.
Daya antibakteri pada ekstrak, fraksi tannin disebabkan karena mengandung
senyawa flavonoid, alkaloid, tanin dan saponin. Mekanisme antibakteri pada
masing-masing senyawa memiliki metode penghambatan yang berbeda-beda.
Menurut pustaka yang ada, senyawa flavonoid dalam menghambat pertumbuhan
bakteri yaitu dengan membentuk senyawa kompleks dengan protein ekstraseluler
yang terlarut sehingga dapat merusak membran sel bakteri dan diikuti dengan
keluarnya senyawa intraseluler (Bobbarala, 2012). Flavonoid akan merusak
membran sel mikroba dan mengkoagulasi protein. Rusaknya membran dan
dinding sel akan menyebabkan metabolit penting di dalam sel akan keluar dan
mengakibatkan terjadinya kematian sel (Fitrianti, et al., 2011).
Senyawa alkaloid memiliki aktivitas antibakteri karena kemampuannya
dalam mengganggu komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri sehingga
lapisan dinding sel tidak terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel
tersebut (Robinson, 1995). Alkaloid merupakan senyawa nitrogen heterosiklik
yang mengandung basa nitrogen. Mekanisme kerja dari alkaloid dihubungkan

64
dengan kemampuan mereka untuk berinterkalasi atau meletakkan diri di antara
DNA. Adanya zat yang berada di antara DNA akan menghambat replikasi DNA
itu sendiri, akibatnya terjadi gangguan replikasi DNA yang menyebabkan
kematian sel (Fitrianti, et al., 2011).
Tanin memiliki aktivitas antibakteri yang berhubungan dengan
kemampuannya untuk menginaktifkan adhesin sel mikroba juga menginaktifkan
enzim dan menggangu transport protein pada lapisan dalam sel (Cowan, 1999).
Menurut Sari, et al.,(2011), tanin juga mempunyai target pada polipeptida dinding
sel sehingga pembentukan dinding sel menjadi kurang sempurna. Hal ini
menyebabkan sel bakteri menjadi lisis karena tekanan osmotik maupun fisik
sehingga sel bakteri akan mati. Mekanisme kerja tanin sebagai antibakteri dengan
mengkerutkan dinding sel atau membran sel sehingga mengganggu permeabilitas
dinding sel bakteri itu sendiri, akibat terganggunya permeabilitas, sel tidak dapat
melakukan aktivitas hidup sehingga pertumbuhannya terhambat atau bahkan mati
(Juliantina, et al., 2010). Tanin dalam konsentrasi rendah mampu menghambat
pertumbuhan bakteri, sedangkan pada konsentrasi tinggi, tanin bekerja sebagai
antimikroba dengan cara mengkoagulasi atau menggumpalkan protoplasma
bakteri.
Mekanisme kerja saponin sebagai antibakteri adalah menurunkan tegangan
permukaan sehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas atau kebocoran sel dan
mengakibatkan senyawa intraseluler akan keluar (Nuria, et al., 2009). Senyawa
saponin merupakan zat yang apabila berinteraksi dengan dinding bakteri maka
dinding tersebut akan pecah atau lisis. Saponin akan mengganggu tegangan
permukaan dinding sel, maka saat tegangan permukaan terganggu zat antibakteri
65
akan dapat dengan mudah masuk kedalam sel dan akan mengganggu metabolisme
hingga akhirnya terjadilah kematian bakteri (Pratiwi, 2008). Saponin bekerja
sebagai antibakteri dengan mengganggu stabilitas membran sel bakteri, yang
menyebabkan komponen penting bakteri seperti protein, asam nukleat dan
nukleotida keluar sehingga bakteri menjadi lisis. Pada bakteri Escherichia coli
ATCC 25922, senyawa saponin akan lebih dulu masuk dalam lapisan lipid terluar
dari bakteri Escherichia coli sehingga akan menghambat pertumbuhan lebih lanjut
dari bakteri Escherichia coli.
Berdasarkan hasil dan pembahasan yang ada, maka penelitian ini
menunjukkan bahwa buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) dapat
menghambat pertumbuhan bakteri Eschericia coli ATCC 25922 pada kosentrasi
5%, 15%, dan 25%. Senyawa aktif dalam fraksi tannin yang terkandung dalam
buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) mempunyai aktivitas antibakteri
terhadap Eschericia coli ATCC 25922 yang dianalisa menggunakan metode
bioutografi. Senyawa aktif yang mampu menghambat pertumbuhan merupakan
flavonoid, alkaloid, tanin, dan saponin. Senyawa aktif tersebut memiliki
mekanisme penghambatan pertumbuhan bakteri Escherichia coli yang berbeda-
beda.
BAB V
SIMPULAN DAN SARAN
5.1 Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian mengenai Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi
tannin Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) Terhadap Pertumbuhan
Bakteri Escherichia Coli ATCC 25922 dapat diambil kesimpulan sebagai berikut :
1. Fraksi tannin pada tanaman buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
dengan konsentrasi 5%, 15%, dan 25% memiliki aktivitas antibakteri terhadap
pertumbuhan Escherichia coli ATCC 25922 dengan menghasilkan zona
hambat sebesar 8,73 mm; 10,76 mm; dan 12,40 mm.
2. Senyawa tannin yang terdapat pada tanaman buah lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk) mempunyai aktivitas antibakteri terhadap
pertumbuhan bakteri Escherichia coli ATCC 25922 dengan metode
bioautografi kontak.
5.2 Saran
Dari hasil penelitian yang telah dilakukan maka peneliti memberikan saran-
saran sebagai berikut :
1. Masyarakat dapat menggunakan buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)
Lamk) sebagai salah satu pilihan obat alami alternatif yang berkhasiat
menghambat diare yang disebabkan oleh bakteri Eschericha coli.
66
67
2. Peneliti lain dapat melakukan penelitian lebih lanjut mengenai tanaman buah
lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) terhadap jenis bakteri lain dan
kandungan zat aktif lain yang ada pada buah lindur (Bruguiera gymnorrhiza
(L) Lamk).
3. Perlu adanya pengujian lebih lanjut mengenai penggunaan buah lindur
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) dan efek sampingnya pada manusia.

DAFTAR PUSTAKA
Agoes, A. 2010. Tanaman Obat Indonesia. Jakarta : Salemba Medika.
Ahmad, S. 2013. Sukses Usaha Pembibitan Mangrove. Yogyakarta : Pustaka Baru

Press.
Allen, J.A., Krauss, K.W., Duke, N.C., Herbst, D.R., Bjorkman, and O. Shih.
2000. Bruguiera species in Hawaii: systematic considerations and
ecological implications. Pacific Science 54(4): 331–343.
Allen, J.A. and N.C. Duke. 2006. Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk (large-leafed
mangrove), Rhizophoraceae mangrove family). Species Profile for Pacific
Island Agroforestry. Tradisional Tree Initiative. ver. 2.I. pp: 1–15
Alodokter. 2016. www.alodokter-ecoli.com
Amanda, F.R. 2014. Efektivitas Ekstrak Bawang Dayak (Eleutherine palmifolia

(L.) Merr.) dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli.
Skripsi. Jakarta : Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran dan
Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah.
Andriyanti, R. 2009. Ekstraksi Senyawa Aktif Antioksidan Dari Lintah Laut

(Discodoris sp.) Asal Perairan Kepulauan Belitung. Skripsi. Bogor :
Departemen Teknologi Hasil Perairan Fakultas Perikanan dan Ilmu
Kelautan Institut Pertanian Bogor.
Ansel, H.C. 2005. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Jakarta : Universitas

Indonesia Press.
Anwar, F.H. 1989. Alkaloida dari Litsea monopetala (Roxb.) Pers. Penelitian
Tanaman Obat Beberapa Perguruan Tinggi di Indonesia IV
Arisman. 2012. Keracunan Makanan: Buku Ajar Ilmu Gizi. Jakarta : EGC.
Armin, F; Revita, Bita; Adnan, Adek Z. 2015. Pengembangan dan Validasi

Metode Kromatografi Lapis Tipis Densitometri untuk Analisis Pewarna
Merah Sintentik pada Beberapa Merek Saus Sambal Sachet. Jurnal Sains
Farmasi & Klinis, 2(1), 60-65.
Bandaranayake, W.M. 1995. Survey of Mangrove Plants from Northern Australia

for phytochemical constituents and UV-absorbing compounds. Current
Topics in Phytochemistry 14: 69–78.
Bandaranayake, W.M. 1998. Traditional and Medicinal Uses of Mangroves.

Mangroves and Salt Marshes 2: 133–148.
68
69
Bandaranayake, W.M. 1999. Economic, Traditional and Medicinal Uses of

Mangroves. Australian Institute of Marine Science, AIMS Report #28,
Townsville, Australia.
Bandaranayake, W.M., 2002. Bioactivities, Bioactive Compounds and Chemical

Constituents of Mangrove Plants. AIMS Research. URL
http :// http://www.aims.go.au/Australia Institute of Marine Science.
Bandaranayake, W.M., 2005. The Uses of Mangrove. AIMS Research. URL

http://http://www.aims.gov.au/Australia Institute of Marine Science.
Bobbarala, V. 2012. Antimicrobial Agents. Croatia : Intech
Bonang Gerhard, S. Enggar dan Koeswardono. 1982. Mikrobiologi Kedokteran.

Jakarta : P.T Gramedia.
Cholid, Sofyanto. 2011. Pengaruh pemberian Madu Pada Anak yang Menderia
Diare Akut Cair Dengan Dehidrasi Ringan Sedang, Artikel Skripsi
(Doctoral dissertation, Diponegoro). Di unduh 26 Desember, 2015. From
http://eprints.undip.ac.id/29091.
Clarke, W.C., and R.R. Thman. 1993. Agroforestry in the Pacifi Islands: Systems
for Sustainability. United Nations University Press, Tokyo
Clarke, A., and L. Johns. 2002. Mangrove nurseries: construction, propagation

and planting. Fish Habitat Guidelines FHG 004. Department of Primary
Industries, Queensland Fisheries Service. <http://www.dpi.qld.gov.au
/fihweb/10802.html>.
Correll, D.S., B.G.Schubert, H.S. Gentry and W.D. Hawley. 1955. The search for
plant precursors of cortisone. Economic Botany 52: 307-375.
Cowan, M.M. 1999. Plant Products as Antimicrobial Agents. Clinical

Microbiology Reviews. Vol 12 : 564-582.
Darsana, I.G.O., I Nengah K., B. Hapsari, M. 2012. Potensi Daun Binahong

(Anrederacordifolia (Tenore) Steenisd dalam menghambat Pertumbuhan
Bakteri Escherichia coli secara In Vitro. Indonesia Medicus Veterinus hal
337-351.
Departemen Kesehatan RI. 1979. Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta :

Departemen Kesehatan RI.
______________________. 1986. Sediaan Galenika. Jakarta : Departemen

Kesehatan RI.
______________________. 1987. Analisa Obat Tradisional. Jilid I. Jakarta :

Departemen Kesehatan RI.
70
______________________. 2000. Parameter Standart Umum Ekstrak Tumbuhan

Obat. Jakarta : Departemen Kesehatan RI.
______________________. 2005. Pharmaceutical Care untuk Penyakit Infeksi

Saluran Pernafasan. Direktorat Bina Farmasi Komunitan dan Klinik.
Dia, Siluh Putu Sri; Nurjanah; Jacoeb, Agoes Moerdiono. 2015. Chemical
Composition, Bioactive Components and Antioxidant Activities from Root,
Bark and Leaf Lindur. JPHPI 2015, Volume 18 Nomor 2.
Direktorat Obat Asli Indonesia. 2008. Taksonomi Koleksi Tanaman Obat Kebun
Tanaman Obat Citeureup. Jakrta : Badan Pengawas Obat dan Makanan.
Duke, N.C., J.S. Bunt, and W.T. Williams. 1984. Observations on the flral and
vegetative phenologies of northeastern Australian mangroves. Australian
Journal of Botany 32: 87–99.
Duke, N.C., and Z.S. Pinzón. 1992. Aging Rhizophora seedlings from leaf scar
nodes: a technique for studying recruitment and growth in mangrove
forests. Biotropica 24(2a): 173–186.
Duke, N.C. 1992. Mangrove flristics and biogeography. Tropical Mangrove

Ecosystems. In: Robertson, A.I. and D.M. Alongi. American Geophysical
Union, Washington, DC.
Duke, N.C., M.C. Ball, and J.C. Ellison. 1998. Factors inflencing biodiversity and
distributional gradients in mangroves. Global Ecology and Biogeography
Letters 7: 27–47.
Duke, N.C. 1999. Th 1998 survey of Rhizophora species in Micronesia. Report to

the USDA Forest Service. Marine Botany Group, Botany Department, Th
University of Queensland, Brisbane, Australia.
Duke, N.C. 2001. Gap creation and regenerative processes driving diversity and
structure of mangrove ecosystems. Wetlands Ecology and Management 9:
257–269.
Dwidjoseputro. 1998. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta : Djamban.
Entjang, I. 2001. Mikrobiologi dan Parasitologi untuk Akademi Keperawatan.

Bandung : PT. Citra aditya Bakti.
Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. 1994. Mikrobiologi Kedokteran. Edisi

Revisi. Jakarta : Binarupa Aksara.
Fessenden dan Fessenden. 1986. Kimia Organik. Edisi Ketiga. Jilid 1. Jakarta :
Penerbit Erlangga.
71
Fitrianti D.A.R., Noorhamdani, A.S., Karyono, S.S. 2011. Efektivitas Ekstrak

Daun Ceplukan sebagai Antimikroba terhadap Methicillin Resistant
Staphylococcus aureus in Vitro. Skripsi. Malang : Fakultas Kedokteran
Universitas Brawijaya.
Ganiswara, G.S. 2003. Farmakologi dan Terapi. Edisi IV. Jakarta : Bagian
Farmakologi FK UI.
Greenwood. 1995. Antibiotics Susceptibility (Sensitivity) Test Antimiccobial and

chemotherapy. New York.
Hanif, Sultan; Fitri, Putri; Amalia; Sari. 2003. Deteksi Keberadaan Antibodi Anti-
Eschericia coli pada Beberapa Tanaman Obat. Bogor : Institut Pertanian
Bogor.
Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia. Diterjemahkan oleh Kosasih P. & Iwang
S. Bandung: ITB.
Hashim, F. A. 2013. Antibacterial and Phytochemical Screening on Datura

stramonium. Dissertation. Departement of Bonaty, Faculty of Scineces,
Univesity of Khatoum, India.
Haq M, Wirakarnain S, Hossain BMS, Taha RM, Monneruzzaman KM. 2011.

Total phenolic contents, antioxidant and antimicrobial activities of
Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk. J Med Plant Research. 5(17): 4112-4119.
Hayati, E., Halimah, N. 2010. Phytochemical Test and Brine Shrimp Lethality
Test Agains Artemia Salina Leach of Anting-Anting (Acalypha indica
Linn.) Plant Extract. Journal ALCHEMY. I. (2): 53-103.
Helmy. 2012. Analisis Jaringan Tanaman Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L)

Lamk) dan Pemanfaatannya Sebagai Bahan Baku Pembuatan Etanol.
Skripsi. Bogor: Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian
Bogor.
Jawetz, E., Melnick, L. J & Adelberg, A. E. 2005. Mikrobiologi Kedokteran.

Diterjemahkan oleh Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas
Airlangga. Jakarta : Salemba Medika.
Juliantina F., Dewa A.C.M., Bunga N., Titis N dan Endrawati T. B., 2010.
Manfaat Sirih Merah (Piper crocatum) Sebagai Agen Anti Bakterial
terhadap Bakteri Gram Positif dan Gram Negatif. Jurnal Kedokteran dan
Kesehatan Indonesia.
Katno, 2008. Penanganan Pasca Panen Tanaman Obat. Balai Besar Penelitian
dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat Tradisional. Depkes RI.
72
Khasanah, I., Sarwiyono., dan Surjowardojo, P. 2014. Ekstrak Etanol Daun

Kersen (Muntingia calabura L.) sebagai Antibakteri terhadap Streptococcus
agalactiae Penyebab Mastitis Subklinis pada Sapi Perah. Jurnal Ternak
Tropika. Vol 15. No 2:7-14.
Kokpol, U., V. Chittawong, and H.D. Millis. 1984. Chemical constituents of the
roots of Acanthusillicifolius. Journal of Natural Products 49: 355-
356.
Lay, B.W dan Hastowo S. 1992. Mikrobiologi. Cetakan I. Jakarta : CV. Rajawali.
Lumbessy, Mirna. (2013). Uji Total Flavonoid Pada Beberapa Tanaman Obat
Tradisonal Di Desa Waitina Kecamatan Mangoli Timur Kabupaten
Kepulauan Sula Provinsi Maluku Utara. Manado : Universitas Sam
Ratulangi Manado. http://download.portalgaruda.org/article.php?
article=15331&val=1014
Lutfillah, M. 2008. Karakteristik Senyawa Alkaloid Hasil Isolasi dari Kulit

Batang Angrest (Spatoda campanulata Beauty) serta Uji Aktivitasnya
sebagai Antibakteri secara In Vitro. Skripsi. Malang : Jurusan Kimia
KMIPA Universitas Brawijaya.
Markham, K.R. 1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid. Diterjemahkan oleh

Padmawinata, K. Bandung : ITB.
Martindale. 1982. The Extra Pharmacopeia. Edisi 28. London : The

Pharmaceutical Press.
Marliana, Soerya Dewi; Suryani, Venty; Suyono. 2005. Skrining Fitokimia dan
Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam
(Sechium edule Jacq. Swartz.) dalam Ekstrak Etanol. Biofarmasi 3 (1): 26-
31, Pebruari 2005, ISSN: 1693-2242  2005 Jurusan Biologi FMIPA UNS
Surakarta. http://biosains.mipa.uns.ac.id/F/F0301/F030106.pdf
Mia, M., Rahman, M.S., Begum, K., Begum, B., and Rashid, M.A. 2007.
Phytochemical and Biological Studies of Averrhoa carambola. Short
Communication. Bangladesh : Dhaka Univ. J. Pharm. Sci. 6(2):125-128.
Mia Permawwati. 2008. Karakterisasi Ekstrak Air Daun Gandarusa (Justicia

gendarussa Burm. F.) Dan Pengaruhnya Terhadap Kadar Asam Urat Plasma
Tikus Putih Jantan Yang Diinduksi Kalium Oksonat. Skripsi. Depok :
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Departemen Farmasi.
Universitas Indonesia Depok
Mulyani, Sri dan Laksana, Toga. 2011. Analisis Flavonoid dan Tannin dengan
Metoda Mikroskopi-mikrokimiawi. Majalah Obat Tradisional, 16(3),109 –
114 2011.
73
Nala, A.M.H. 2013. Aktivitas Antipoliferasi Ekstrak n-heksana Daun Benalu

Kelor (Helixanthera sessiliffflora (Merr.) Denser) terhadap Cell Line
Kanker Payudara T47D. Skripsi. Yogyakarta : Fakultas Sains dan
Teknologi, UIN Sunan Kalijaga Yogyakarta.
Nuria, M.C., Faizatun, A., dan Sumantri. 2009. Uji Antibakteri Ekstrak Etanol
Daun Jarak Pagar (Jatropha cuircas L) terhadap Bakteri Staphylococcus
aureus ATCC25923, Escherichia coli ATCC 25922 dan Salmonella typhi
ATCC 1408. Jurnal Ilmu-ilmu Pertanian. Vol 5:26-37.
Nursidika, P., Saptarini, O., Rafiqua, N. 2014. Aktivitas Antimikrob Fraksi

Ekstrak Etanol Buah Pinang (Areca catechu L) pada Bakteri Methicillin
Resistant Staphylococcus aureus. MKB. Vol 46. NO. 2.
Oleszek, W.A. 2002. Chromatographic Determination Of Plant Saponins. Journal

Of Chromatography. Vol. 967:147-162.
Pakaya, A.P. 2014. Ethyl Alkohol dan Metode Uji Bebas Etanol.
https://www.google.co.id/webhp?sourceid=chrome-
instant&ion=1&espv=2&ie=UTF-8#
Palanisamy, P., Jayakar, B., Kumuthavalli, M.V. Kumar, Y., Srinath, K.R. 2012.
Preliminary Phytochemical Evaluation off Whole Plant Extract of
Dipteracanthus prostatus Ness. International Research Journal of
Pharmacy. 3 (1).
Pratiwi, S. T. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Erlangga.
Pratiwi, S.T. 2008. Aktivitas Antibakteri Tepung Daun Jarak (Jatropha curcas L.)
pada berbagai Bakteri Saluran Pencernaan Ayam Broiler secara in Vitro.
Skripsi. Bogor : Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor.
Purnama, W.B. 2013. Aktivitas Antibakteri Glukosa terhadap Bakteri

Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa,Bacillus subtilis dan
Escherichia coli. Naskah Publikasi. Surakarta : Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Putri, W.S., Warditiani, N.K., Larasanty, L.P.F. 2013. Skrining Fitokimia Ekstrak
Etil Asetat Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.). Bali : Jurusan
Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas
Udayana.
Rahmat, Hardianzah. 2009. Identifikasi Senyawa Flavonoid pada Sayuran

Indigenous Jawa Barat. Fakultas Teknologi Pertanian, Bogor : Institut
Pertanian Bogor.
Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Diterjemahkan oleh

Kosasih P. Bandung: ITB.
74
Rohman, A. 2009. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakartan : UGM Press.
Sari, F.P., dan Sari, S.M. 2011. Ekstraksi Zat Aktif Antimikroba dari Tanaman
Yodium (Jatropha multifida Linn) sebagai Bahan Baku Alternatif
Antibiotik Alami. Skripsi. Semarang : Fakultas Teknik Universitas
Diponegoro.
Sari, R., Mustari, F. N. A., Wahdaningsih, S. 2013.Aktivitas Antibakteri Minyak

Atsiri Kulit Jeruk Pontianak terhadap Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli. Tradisional Medicine Journal. Pontianak : Fakultas
Kesehatan Departemen Farmasi Universitas Tanjungpura.
Sari, Y.D., Djannah, S. N., Nurani, L.Y. 2010. Uji Aktivitas Antibakteri
InfusaDaun Sirsak (Annona muricata L.) secara in Vitro terhadap
Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 35218
serta Profil Kromatografi Lapis Tipisnya. Kesmas. Vol 4. No 3 : 232-238.
Sastrohamidjojo, H. 1991. Spektroskopi. Yogyakarta : Liberty.
_______________. 1996. Sintesis Bahan Alam. Yogyakarta: UGM.
Sastrapradja, S. 1990. Buah-Buahan. Jakarta : Balai Pustaka.
Schoorl. 1998. Materi Pelengkap Kemurnian Cara Pemisahan Obat. Yogyakarta:

Gajah Mada University Press.
Simaremare, Eva Susanty. 2014. Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Gatal.
(Laportea decumana (Roxb.) Wedd). PHARMACY, Vol.11 No. 01 Juli
2014 ISSN 1693-3591
Sirait, M. 2007. Penuntun Fitokimia dalam Farmasi. Bandung: Penerbit Institut

Teknologi Bandung.
Siswandono dan Soekardjo, B. 2000. Kimia Medisinal. Surabaya : Airlangga

University Press.
Sivaperumal P., Ananthan G., Mohamed Hussain S. Exploration of antibacterial

effects on the crude extract of marine ascidian Aplidium multiplicatum
against clinical isolates. International Journal of Medicine and Medical
Sciences. 2010, 2(12):382-386.
Soebagio, B., Rusdiana, T. dan Khairudin. 2007. Pembuatan Gel dengan Aqupec
HV-505 dari Ekstrak Umbi Bawang Merah (Allium cepa, L.) sebagai
Antioksidan. Fakultas Farmasi, Universitas Padjadjaran. Bandung.
Songer, J.G. dan Post, K.W. 2005. Veterinary Microbiology: Bacterial and Fungal
Agents of Animal Disease, Elsivier Saunders.
75
Stahl, E. 1985. Analisis Obat Secara Kromatografi dan Mikroskopi.

Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata. Bandung: ITB.
Sudjadi. 1986. Metode Pemisahan. Yogyakarta: Kanisius.
Sukadana, I. M. 2009. Senyawa Antibakteri Golongan Flavonoid dari Buah

Belimbing Manis (Averrhoa carambola L.). Jurnal Kimia 3. Jimbaran :
Kelompok Penelitian Kimia Organik Bahan Alam Jurusan Kimia FMIPA
Universitas Udayana.
Sumarmo. 2001. Kromatografi Teori dasar dan Petunjuk Praktikum. Yogyakarta:

Fakultas Farmasi UGM.
Supranto, J. 2000. Statistik : Teori dan Aplikasi. Edisi Keenam. Jakarta: Erlangga.
Sulistyawati, Wignyanto, Sri Kumalaningsih. 2012. Produksi Tepung Buah

Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk Lamk.) Rendah Tanin Dan Hcn
Sebagai Bahan Pangan Alternatif. Malang : Program Studi Agroteknologi,
Fakultas Pertanian, Universitas Merdeka Pasuruan dan Jurusan Teknologi
Industri Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya.
Vol. 13 No. 3 [Desember 2012] 187-198
Suwandi, U. 1999. Peran Media untuk Identifikasi Mikroba Patogen. Cermin

Dunia Kedokteran. (124) : 22-23.
Tanaya, V., Retnowati R. dan Suratmo. 2015. Fraksi Semi Polar dari Daun
Mangga Kasturi (Mangifera casturi Kosterm). Kimia Student Journal. Vol
1. No 1. Malang : Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya.
Tim Mikrobiologi FK Universitas. Brawijaya. 2003. Bakteriologi Medik.

Surabaya : Bayumedia Publishing.
Tjay, T. H., Rahardja, K. 2007. Obat-obat Penting Khasiat, Penggunaan, dan

Efek-Efek Sampingnya. Jakarta : PT. Elex Media Komputindo Kelompok
Kompas-Gramedia.
Voigt, R. 1994. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Edisi V. Diterjemahkan

oleh Soewandhi, S.N., dan Widianto, M.B. Yogyakarta : Gadjah Mada
University Press.
Voigt, R. 1995. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Edisi V. Diterjemahkan

oleh Soewandhi, S.N., dan Widianto, M.B. Yogyakarta : Gadjah Mada
University Press.
Volk and Weller. 1990. Mikrobiologi Dasar. Diterjemahkan oleh Adisoemarto, S.

edisi V. Jakarta : Erlangga
76
Wahab, S., Arshad H., Parwez A., Sarfaraj H., Aliza R., ruque A., Nizamul H.A.,
Alaul H.A.F. 2014. The Ameliorative Effects of Averroha carambola on
Humoral Response to Sheep Erythrocytes in Non-Treated and
Cyclophosphamide-Immunocompromised Mice. Journal of Acute Disease.
Waluyo, Lud. 2004. Mikrobiologi Umum. UMM PRESS, Malang.
Wen, Q., Xing L., Yeqi L., Xiaohui X., Tao L., Ni Z., Kintoko K., and Renbin
H.2012. Phenolic and Lignan Glycosides from the Butanol Extract of
Averrhoa carambola L. Root. Molecules. 17:12331.
Whittam, Paul; Luke, Sterlinder; Theodore, Owen. (2011). Eschericia coli.

https://www.google.co.id/webhp?sourceid=chrome-
instant&ion=1&espv=2&ie=UTF-8#
Wijayakusuma, H., Dalimartha, S. 2000. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan

Darah Tinggi. Cetakan VI. Jakarta : Penerbit Penebar Swadayat.
Yulia, 2009. Pola Asuh Makan dan Kesehatan Anak Balita Pada Keluarga
Wanita Pemetik Teh Di PTPN VIII Pangalengan. Makalah Seminar Tesis
IPB
Zweig, G., Whitaker, J. R., 1971, Paper Chromatography and Electrophoresis,

vol.II, 398, Academic Press, New York.
Lampiran 1. Determinasi Tanaman Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza
(L) Lamk)
77
Lampiran 2. Surat Keterangan Bakteri Escherichia coli ATCC 25922
78
Lampiran 3. Certificate of Analysis Ciprofloksasin
79
Lampiran 4. Proses Pembuatan Ekstrak Etanol Buah Lindur (Bruguiera
gymnorrhiza (L) Lamk)
Buah Lindur (Bruguiera

gymnorrhiza)
Serbuk Buah Lindur
(Bruguiera gymnorrhiza)
Ekstrak Kental Buah Lindur Proses Remaserasi Buah Lindur

(Bruguiera gymnorrhiza) (Bruguiera gymnorrhiza)
80
Lampiran 5. Hasil Pengujian Bebas Etanol Ekstrak Buah Lindur
Pereaksi Pustaka Hasil bau Dokumentasi
Asam asetat + Tercium bau Tidak tercium
H2SO4, lalu pisang (Schrool, bau pisang (-)
dipanaskan 1988 : 48)
81
Lampiran 6. Proses Fraksinasi Menggunakan Kolom Vakum
Fase Diam : Silika Gel GF 254

Fase Gerak : Kloroform : Metanol
82
Lampiran 7. Hasil Fraksinasi Kromatografi Vakum Cair Buah Lindur
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
11
Keterangan perbandingan pelarut fraksi tannin buah lindur ;

1. Kloroform : Metanol (100 : 0)
3. Kloroform : Metanol (80 :20)
4. Kloroform : Metanol (70 :30)
83
Lampiran 8. Hasil KLT Kromatografi Vakum Cair Buah Lindur
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) UV 254 nm
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Hasil KLT Kromatografi Vakum Cair
Fase Diam : Silika Gel GF 254
Fase Gerak : Kloroform : Metanol (100 : 0)
Rf : 4,5:8 = 0,56 cm
84
Lampiran 9. Hasil KLT Kromatografi Vakum Cair Buah Lindur
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) UV 366 nm
1 2
Hasil KLT Kromatografi Vakum Cair Buah Lindur UV 366 nm.

Identifikasi Tanin.
85
Lampiran 10. Penambak Bercak Hasil KLT Kromatografi Vakum Cair
Buah Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Penampak Bercak : FeCl3
Idnetifikasi : Senyawa Tanin
86
Lampiran 11. Hasil Identifikasi Serbuk dan Ekstrak Etanol Buah Lindur
Senyawa Hasil reaksi warna Dokumentasi

berdasarkan pengujian Serbuk Ekstrak
Flavonoid (+)
Warna pada lapisan
amil alkohol
(+)
Alkaloid Endapan merah coklat
(+)
Saponin Busa stabil
Tanin
Pereaksi : FeCl3
Biru Kehitaman (+)
87
88
Pereaksi : NaCl + Gelatin

0,5 %
Timbul endapan putih (+)
Pereaksi : Air brom

Timbul endapan (+)
Lampiran 12. Proses Fraksi Kental Klorofom : Metanol Buah Lindur
Diuapkan dipenangas air
Fraksi nomor 1 dari

KVC
Fraksi Kental Klorofom : metanol
89
Lampiran 13. Hasil Uji KLT Fraksi Ekstrak Etanol Buah Lindur
Senyawa Flavonoid
Pengamatan
Ekstrak dan Fraksi
UV 254 nm Penampak bercak
Ekstrak
Harga Rf 0,93 0,93

Warna Noda Ungu Kuning Kecoklatan
Fraksi Tanin
Harga Rf 0,93 0,93

Warna Noda Hijau Kuning Kecoklatan
90
91
Senyawa Alkaloid
Pengamatan
Ekstrak dan Fraksi
Ekstrak
Harga Rf 0,93 0,93

Warna Noda Ungu Orange
Fraksi Tanin
Harga Rf 0,93 0,93

Warna Noda Ungu Orange
92
Senyawa Saponin
Pengamatan
Ekstrak dan Fraksi
Ekstrak
Harga Rf 0,87 0,87

Warna Noda Ungu Ungu tua
Fraksi Tanin
Harga Rf 0,92 0,92

Warna Noda Ungu Ungu tua
93
Senyawa Tanin
Ekstrak
Harga Rf 0,93 0,93

Warna Noda Ungu kehitaman Biru kehitaman
Ekstrak dan Pengamatan

Fraksi
UV 254 nm Penampak Bercak
Fraksi Tanin
Harga Rf 0,93 0,93

Warna Noda Biru kehitaman Hitam Kecoklatan
Lampiran 14. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Tanin Buah Lindur
(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) Terhadap Bakteri
Escherichia coli ATCC 25922
Fraksi Fraksi Fraksi

25% 15% 5%
Kosentrasi Fraksi tannin
Uji aktivitas antibakteri Escherichia coli
94
25%
Lampiran 15. Hasil Uji Bioautografi Fraksi Ekstrak Etanol Buah Lindur
Golongan Uji Bioautografi Kontak Keterangan
Flavonoid Ada aktivitas antibakteri
Saponin Ada aktivitas antibakteri
95
96
Alkaloid Ada aktivitas antibakteri
Tanin Ada aktivitas antibakteri

Lampiran 16. Hasil Uji Analisa Statistika
Case Processing Summary

Cases Cases
Konsentrasi
Valid Missing Missing Total
sampel
N Percent N Percent N Percent
5% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0%
15% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0%
zona
hambat 25% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0%
Kontrol
5 100.0% 0 .0% 5 100.0%
positif
Tests of Normalityb
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Konsentrasi
sampel Statistic df Sig. Statistic df Sig.
zona 5% 0.199 5 .200* 0.903 5 0.428
hambat 15% 0.176 5 .200* 0.951 5 0.743
25% 0.244 5 .200* 0.93 5 0.598
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
b. zona hambat is constant when Konsentrasi sampel = Kontrol positif. It has

been omitted.
97
98
ONE WAY ANOVA

Descriptives
zona hambat
95% Confidence
Interval for Mean
Std. Std. Lower Upper
N Mean Deviation Error Bound Bound Minimum Maximum
5% 5 8.7260 1.0332 0.4621 7.4431 10.0089 7.8000 10.2500
15% 5 10.7620 1.5007 0.6711 8.8987 12.6253 8.8600 12.4500
25% 5 12.3960 1.3479 0.6028 10.7223 14.0697 11.0400 14.4000
Kontrol 5 19.0800 0.0000 0.0000 19.0800 19.0800 19.0800 19.0800
positif
Total 20 12.7410 4.1182 0.9209 10.8136 14.6684 7.8000 19.0800
Test of Homogeneity of Variances

zona hambat
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
5.566 3 16 0.008
ANOVA
zona hambat
Sum of Mean
Squares df Square F Sig.
Between 301.693 3 100.564 78.315 0.000
Groups
Within 20.546 16 1.284
Groups
Total 322.239 19
Perhitungan Koefisien Keragaman (KK):
x 100 %
= 8,89%
KK = 8,89% < 10%
99
UJI POST HOC TESTS

Multiple Comparisons
Dependent Variable:zona hambat
95% Confidence
Interval
(I) (J) Mean
Konsentrasi Konsentrasi Difference Lower Upper
sampel sampel (I-J) Std. Error Sig. Bound Bound
Tukey 5% 15% -2.036 0.71669 0.052 -4.0865 0.0145
HSD
25% -3.67000* 0.71669 0.001 -5.7205 -1.6195
*
Kontrol -10.35400 0.71669 0.000 -12.4045 -8.3035
positif
15% 5% 2.036 0.71669 0.052 -0.0145 4.0865
25% -1.634 0.71669 0.144 -3.6845 0.4165
Kontrol -8.31800* 0.71669 0.000 -10.3685 -6.2675
positif
25% 5% 3.67000* 0.71669 0.001 1.6195 5.7205
15% 1.634 0.71669 0.144 -0.4165 3.6845
Kontrol -6.68400* 0.71669 0.000 -8.7345 -4.6335
positif
Kontrol 5% 10.35400* 0.71669 0.000 8.3035 12.4045
positif 15% 8.31800* 0.71669 0.000 6.2675 10.3685
25% 6.68400* 0.71669 0.000 4.6335 8.7345
LSD 5% 15% -2.03600* 0.71669 0.012 -3.5553 -0.5167
25% -3.67000* 0.71669 0.000 -5.1893 -2.1507
Kontrol -10.35400* 0.71669 0.000 -11.8733 -8.8347
positif
15% 5% 2.03600* 0.71669 0.012 0.5167 3.5553
25% -1.63400* 0.71669 0.037 -3.1533 -0.1147
Kontrol -8.31800* 0.71669 0.000 -9.8373 -
positif 6.7987
25% 5% 3.67000* 0.71669 0.000 2.1507 5.1893
15% 1.63400* 0.71669 0.037 0.1147 3.1533
Kontrol -6.68400* 0.71669 0.000 -8.2033 -5.1647
positif
Kontrol 5% 10.35400* 0.71669 0.000 8.8347 11.8733
positif 15% 8.31800* 0.71669 0.000 6.7987 9.8373
25% 6.68400* 0.71669 0.000 5.1647 8.2033
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Lampiran 17. Alat Penelitian
Nama alat Dokumentasi
Rotary evaporator
Kromatografi Kolom
Vakum
Lampu UV 254 nm
100
101
Laminair Air Flow
Enkas
Inkubator
102
Outoklaf
Jangka sorong
Spektrofotometri Doble
Beam

Naskah Revisi Sidang Tertutup

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Naskah Revisi Sidang Tertutup

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI TANIN TANAMAN BUAH LINDUR

(Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) TERHADAP PERTUMBUHAN

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI TANIN TANAMAN BUAH LINDUR

Program Studi S1 Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi “YAYASAN PHARMASI”

Christina A., M.Si., Apt. Intan Martha Cahyani, M.Sc., Apt.

Wulandari, M.Sc., Apt.

1. Lia Kusmita, M.Si. _____________________

2. Yuvianti Dwi Franyoto, M.Sc., Apt. _____________________

3. Christina A., M.Si., Apt. _____________________

4. Wulandari, M.Sc., Apt. _____________________

Yang bertanda tangan dibawah ini :

Nama : Wijayanti Marheani

Judul Skripsi : Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Tanin Tanaman Buah

Lindur (Bruguiera gymnorrhiza (L) Lamk) Terhadap

Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli ATCC 25922

Tahun Pembuatan : 2017

pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi,

naskah skripsi saya dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Semarang, Januari 2017

Buatlah Orang Tuamu Bangga, Buatlah Musuhmu Iri

dan Buatlah Dirimu Sendiri Bahagia.

“Sesungguhnya bersama kesulitan ada kemudahan. Maka apabila engkau telah

Kupersembahkan karya ini untuk :

Serta Sholawat dan salam bagi junjunganku Nabi Muhammad SAW

Kedua orang tuaku dan adik ku tercinta

Ungkapan rasa Hormat, Sayang, dan Baktiku.

Ibu Christin dan Ibu Wulandari sebagai sumber motivatorku

Sahabat-sahabatku dan teman seperjuangan sebagai rasa sayang, terimakasih

Almamaterku yang selalu kubanggakan.

hidayah-Nya, sehingga skripsi ini dapat diselesaikan dengan baik. Dalam

pihak, oleh karena itu penulis mengucapkan terima kasih kepada :

Farmasi “YAYASAN PHARMASI” Semarang.

Tinggi Ilmu Farmasi “YAYASAN PHARMASI” Semarang.

4. Wulandari, M.Sc., Apt. sebagai dosen pembimbing II yang telah memberikan

bimbingan, arahan, kritik, dan motivasi selama penyusunan skripsi ini.

bimbingan, kritik, dan saran dalam memperbaiki skripsi ini.

memberikan arahan, bimbingan, kritik, dan saran dalam memperbaiki

arahan dan nasehat selama kuliah.

Farmasi ”Yayasan Pharmasi” Semarang yang telah memberikan bekal ilmu

pengetahuan yang bermanfaat bagi penulis.

Pharmasi” yang telah memberikan bantuan selama penelitian ini berlangsung.

10. Keluargaku, sahabatku dan teman-temanku yang selalu memberikan semangat

serta dukungan dalam menyelesaikan skripsi ini.

Penulis menyadari bahwa dengan keterbatasan kemampuan masih banyak

membangun sangat diharapkan penulis guna kesempurnaan skripsi ini.

Semarang, Januari 2017

Infeksi merupakan kondisi dimana tubuh bereaksi terhadap mikroorganisme

1.1 Latar Belakang Masalah

Bakteri merupakan salah satu mikroorganisme penyebab infeksi. Infeksi

merupakan kondisi dimana tubuh bereaksi terhadap mikroorganisme penyakit

Escherichia coli memiliki mekanisme tersendiri dalam penyebaran

berasal dari makanan dan minuman yang terkontaminasi, terutama sayuran

setahun dengan korban meninggal 700.000 anak balita, terutama di negara

mengalami infeksi usus, persiapan memasak dan kebersihan makanan sangat

penting untuk dijaga (alodokter, 2016).

Pengobatan infeksi yang disebabkan oleh Escherichia coli ini dapat

menggunakan antibiotik kimiawi. Penggunaan antibiotik kimiawi merupakan

diambil senyawa aktifnya.

Salah satu tanaman yang dapat digunakan masyarakat sebagai antibakteri

gymnorrhiza (L) Lamk) mengandung komponen bioaktif seperti saponin,

(Sivaperumal et al., 2010). Hasil penelitian Haq et al., (2011) menunjukkan

Lamk) menunjukkan adanya senyawa antioksidan dan antimikroba, khususnya

terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Escherichia coli, dan