Npm : 1811060011 Kelas : VA Tugas : PCR Dosen : Nurhaida Widiani, M.Biotech
1. Jelaskan bagaimana cara mendeteksi korban kecelakaan pesawat dengan menggunakan
teknik PCR? Jawaban: Cara mendeteksinya dilakukan dengan memeriksa seluruh bagian tubuh korban, mulai dari gigi, wajah, tulang, dan organ tubuh lainnya. Pada tahap ini pula akan di ambil sampel untuk pemeriksaan DNA. Terdapat dua jenis DNA yaitu DNA inti sel dan DNA mitokondria. DNA inti sel umumnya lebih akurat, namun bila ada kerusakan pada DNA misalnya karena suhu atau terbakar maka diperiksa adalah DNA mitokondria. DNA mitokondria bisanaya dicocokan dengan profil DNA ibu korban. Sampel DNA tersebut akan dianalisis dengan teknik polymerase cahin reaction ( PCR) lalu kemudian dibuat profil DNA korban secara spesifik. Pemeriksaan DNA dapat menggunakan teknik fingerprinting dengan sampel V, S dan M Sampel V adalah sanpel darah dari korban Sampel S adalah noda air mani pada pakaian dalam Sampel M adalah sampel darah dari dugaan pelaku Lalu sampel DNA tersebut akan dianalisis dengan teknik polymerase chain reaction (PCR) dan kemudian dibuat profil DNA secara spesifik sehingga diketahui hasil kode DNA. 2. Akibat pergaulan bebas saat ini kasus penderita HIV semakin banyak. Jelaskan bagaimana mendeteksi penderita HIV dengan teknik PCR? Jawaban: Tes PCR (Polymerase chain reaction) adalah tes yang digunakan untuk mendeteksi RNA atau DNA HIV dalam darah. Tes PCR dilakukan dengan cara memperbanyak DNA melalui reaksi enzim. Metode PCR memakai suatu enzim untuk menggandakan HIV dalam contoh darah. Kemudian reaksi kimia menandai virus. Penanda diukur dan dipakai untuk menghitung jumlah virus. Tahapan-tahapannya sebagai berikut:
1. Mengambil sampel darah dari orang yang terinfeksi
2. Menghilangakan sel dengan sentrigulasi 3. Partikel HIV langka dalam serum orang yang terinfeksi 4. Ekstrak genik RNA virus atau ekstraksi materi genetik dari sampel (ekstraksi adalah suatu pemisahan suatu zat berdasarkan perbedaan kelarutan terhadap dua cairan tidak saling larut yang berbeda) 5. RNA-pcr amplification atau penggandaan materi genetik 6. Kontrol menggunakan dara orang yang terinfeksi 7. Gel elektroforesis atau pembacaan hasil RNA yang menunjukkan positif atau negative. 3. Jelaskan kelebihan dan kelemahan teknik PCR tersebut! Jawaban: a). Kelebihan Memiliki spesialisasi tinggi Sangat cepat, dapat memberikan hasil yang sama pada hari yang sama Dapat membedakan varian mikroorganisme Mikroorganisme yang dideteksi tidak harus hidup Mudah di set-up b). Kelemahan PCR Sangat mudah terkontaminasi Biaya peralatan dan reagen mahal Interpretasi hasil PCR yang positif belum tervaliditasi untuk semua penyakit infeksi ( misalnya infeksi pasif atau laten) Teknik prsedural yang kompleks dan bertahap membutuhkan keahlian khusus untuk melakukannya.