Mozer Aspergillus PDF
Mozer Aspergillus PDF
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi
HARDI MOZER
NIM: 1111102000049
SKRIPSI
HARDI MOZER
NIM: 1111102000049
Kata Kunci : Ekstrak etanol 96% kulit batang kayu jawa, Lannea coromandelica,
difusi cakram, Konsentrasi Hambat Minimum (KHM).
v
ABSTRACT
Keyword: ethanol extract 96% stem bark of kayu jawa, Lannea coromandelica, disc
diffusion, Minimum Inhibitory Concentration (MIC).
vi
KATA PENGANTAR
vii
6. Bapak Bahri yang turut serta membantu saya dalam penelitian ini, yang saya
anggap sebagai pembimbing ketiga saya.Saran dan bantuan dari beliau sangat
berjasa bagi saya.
7. Bapak dan ibu dosen yang membimbing saya selama menempuh pendidikan di
program studi Farmasi. Fakultas Kedokteran dan Ilmu kesehatan. UIN syarif
Hidayatullah Jakarta.
8. Kepada karyawan dan staf laboran program studi Farmasi serta staf laboran, Ka
Tiwi, ka Lisna, ka Eris, ka Liken serta bu Rani yang telah banyak membantu
dalam penyelesaian skripsi ini.
9. Seluruh sahabat-sahabat Farmasi 2011. Terima kasih yang besar untuk semua
kenangan yang pernah kalian berikan.
10. Anak-anak kontrakan. Wahidin mamet, Ali tua, Andis Cocwiiit, dan Rijal Bintang
yang menemani hari-hari dikontrakan.
11. Ahmad Rifqi, yang meminjamkan printer, kertas serta penginapan dikosannya
selama pengerjaan skripsi secara geratis.
12. Harry marloon, Ajo Apis, Ajo Derry, Dek kiki, Ajo gigiah, dan kawan-kawan di
Panam lainnya. Terimakasih buat kalian semua.
13. Serta semua pihak yang tidak dapat disebutkan satupersatu yang turut membantu
menyelesaikan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih belum sempurna.
Oleh karena itu kritik dan saran yang membangun sangat penulis harapkan guna
menyempurnakan skripsi ini kedepan.
Dengan segala kerendahan hati, penulis berharap hasil penelitian ini dapat
menambah ilmu pengetahuan serta bermanfaat bagi kalangan akademis khususnya
dan masyarakat umum pada umumnya
Hardi Mozer
viii
ix
DAFTAR ISI
x
3.4.5 Sterilisasi alat ................................................................................................. 27
3.4.6 Pembuatan Kontrol Positif, Negatif dan Larutan Ekstrak Uji ...................... 27
3.4.7 Pembuatan Medium PDA (Potato Dextrose Agar)........................................ 28
3.4.7 Peremajaan Fungi ........................................................................................... 28
3.6.4 Identifikasi Fungi ........................................................................................... 29
3.6.5 Pembuatan Suspensi Fungi ............................................................................ 29
3.6.6 Penentuan Diameter Zona Hambat ................................................................ 30
3.6.7 Penetapan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) ....................................... 30
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN .................................................................................. 32
4.1. Pemilihan Tanaman .................................................................................................... 32
4.2. Determinasi Tanaman ................................................................................................. 32
4.3. Penyiapan Tanaman .................................................................................................... 32
4.4. Ekstraksi ...................................................................................................................... 33
4.5. Parameter Ekstrak ....................................................................................................... 35
4.6. Skrining Fitokimia ...................................................................................................... 36
4.7. Uji Aktivitas ................................................................................................................ 37
4.7.1 Sterilisasi Alat dan Bahan ................................................................................ 37
4.7.2. Peremajaan Fungi ............................................................................................ 38
4.7.3. Penyiapan Ekstrak Uji..................................................................................... 38
4.7.4. Pembuatan Suspensi Fungi ............................................................................. 39
4.7.5. Penentuan Diameter Zona Hambat ................................................................. 40
BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN .................................................................................. 45
5.1. Kesimpulan ................................................................................................................. 45
5.2. Saran .................................................................................................................... 45
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................................. 46
LAMPIRAN ............................................................................................................................ 50
xi
DAFTAR GAMBAR
Tanaman Kayu Jawa (Lannea coromandelica) ....................................................................... 4
Struktur Nistatin ....................................................................................................................... 15
xii
DAFTAR TABEL
Tabel 1: Nama tumbuhan Kayu Jawa ditiap daerah ................................................................ 6
Tabel 2: Hasil Penentuan Parameter ekstrak............................................................................ 32
Tabel 3: Hasil Penentuan Skrining Fitokimia .......................................................................... 33
Tabel 4: Hasil Penentuan Diameter Zona Hambat................................................................... 37
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1: Skema Kerja ........................................................................................................ 50
Lampiran 2: Alat dan Bahan .................................................................................................... 52
Lampiran 3: Hasil Determinasi ................................................................................................ 53
Lampiran 4:Ekstraksi Dengan Maserasi .................................................................................. 54
Lampiran 5: Hasil Ekstrak ....................................................................................................... 54
Lampiran 6: Rendemen Ekstrak ............................................................................................... 55
Lampiran 7: Parameter Non Spesifik ....................................................................................... 55
Lampiran 8: Skrining Fitokimia............................................................................................... 57
Lampiran 9: Fungi Percobaan .................................................................................................. 58
Lampiran 10: Pembuatan DMSO 5% dan Ekstrak Uji ............................................................ 60
Lampiran 11: Pembuatan Suspensi Fungi ................................................................................ 62
Lampiran 12: Penentuan Diameter Zona Hambat.................................................................... 63
xiv
1
BAB I
PENDAHULUAN
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
(http://commons.hortipedia.com/images/9/92/Lanneacoromandelica) Diakses
pada 17 Maret 2015
a. Klasifikasi tanaman
Berdasarkan kedudukan dalam taksonomi tumbuhan, tanaman Kayu jawa
(Lannea corormandelica) adalah sebagai berikut:
Kingdom : Plantae
Phylum : Magnoliophyta
Class : Spermatophyta
Subclass : Rosids
Order : sapindales
Family : Anacardiaceae
Genus : Lannea
Species : Lannea coromandelica (Houtt.) Merr.
(http://indiabiodiversity.org/species/show/230190)
Kayu jawa merupakan deciduous tree atau pohon gugur yang dapat
tumbuh hingga mencapai 25 m (umumnya 10-15 m). Permukaan batang berwarna
abu-abu sampai coklat tua, kasar, ada pengelupasan serpihan kecil yang tidak
teratur, batang dalam berserat berwarna merah atau merah muda gelap, dan
memiliki eksudat yang bergetah. Daun imparipinnate, meruncing, dan berjumlah
UIN SYARIF HIDAYATULLAH
6
7-11. Bunga berkelamin tunggal berwarna hijau kekuningan. Buah berbiji dengan
panjang 12 mm, bulat telur, kemerahan, dan agak keras. Tanaman ini berbunga
dan berbuah dari bulan Januari hingga Mei (Wahid, 2009).
b. Nama ditiap Negara dari Lannea coromandelica
Tabel 1: Nama Lannea coromandelica disetiap Negara
Nama Daerah Negara
Jiga/jigar/kasmala/ghadi/kocha Bangladesh
Mohin/Kiamil/jhingan India
Halonre/thulo dabdabe Nepal
Baing Myanmar
Jailbhadi/jhingan/wodier Pakistan
Kayu Jawa Indonesia
Tanaman kayu jawa (Lannea coromandelica) merupakan tanaman
pekarangan yang dapat dimanfaatkan daun dan kulit batangnya dengan cara
ditumbuk ataupun direbus untuk mengobati luka luar, luka dalam, dan perawatan
paska persalinan (Rahayu, dkk., 2006). Kulit batang dapat digunakan sebagai
astringen, mengobati sakit perut, lepra, ulcer, penyakit jantung, disentri, dan
sariawan. Kulit batang digunakan bersama dengan kulit batang Aegle mermelos,
Artocarpus heterophyllus dan Sygygium cumini berguna dalam penyembuhan
impotensi. Kulit batang dapat dikunyah selama 2-3 hari untuk menyembuhkan
glossitis. Perebusan daun juga dianjurkan untuk pembengkakan dan nyeri lokal
(Wahid, 2009).
Kulit batang tanaman kayu jawa (Lannea coromandelica) dilaporkan
mengandung metabolit sekunder: Alkaloid, terpenoid, steroid, saponin, flavonoid,
dan glikosida jantung. Dengan adanya senyawa saponin dan flavonoid tersebut
maka tanaman kayu jawa ini diduga dapat digunakan sebagai antifungi, karena
senyawa flavonoid dan saponin telah dilaporkan dapat digunakan sebagai
antifungi dan antimikroba (Wahid, 2009).
2.2 Fungi
Fungi adalah organisme berspora, tidak berklorofil, berupa sel atau
benang bercabang-cabang dengan dinding dari selulosa atau dari kitin atau dari
keduanya. Pada umumnya berkembang biak secara seksual dan aseksual (Pelezar
dan Chan, 1986). Beberapa fungi mempunyai inang yang hidup lalu tumbuh
dengan subur sebagai parasit dan menimbulkan penyakit pada tumbuhan, hewan
termasuk manusia, tidak kurang dari 100 spesies yang patogen terhadap manusia
(Pelezar dan Chan, 1986).
Fungi merupakan organisme heterotrof yang memerlukan zat-zat organik
dari organisme autrotrof. fungi tumbuh pada kondisi aerob dan memperoleh
energi dengan mengoksidasi bahan organik. Unsur-unsur yang diperlukan fungi
untuk pertumbuhannya antara lain nitrogen, hidrogen, oksigen, kalium, fosfor,
sulfur, karbon, dan magnesium. Fungi pada umumnya tumbuh pada suhu 0-60oC
dengan suhu optimal 20-30oC dan pH 2-9 dengan pH optimal 6 (Bauman, 2001).
Fungi dibedakan menjadi empat kelas, yaitu :
1) Zygomycetes
2) Ascomycetes
3) Basidiomycetes
4) Dueteromycetes
(Pertiwi. 2008)
Fungi terdiri dari struktur somatik atau vegetatif yaitu thallus yang
merupakan filamen atau benang hifa, miselium berupa jalinan hifa dan yang
merupakan koloni disebut spora (Pertiwi, 2008).
a. Kapang (mold).
Kapang merupakan fungi yang berfilamen atau mempunyai miselium,
pertumbuhannya dalam bahan makanan mudah sekali dilihat, yakni seperti kapas
(Waluyo, 2005). Sedangkan tubuh atau talus suatu kapang pada dasarnya terdiri
dari dua bagian miselium dan spora. Miselium merupakan kumpulan beberapa
filamen yang dinamakan hifa. Di sepanjang setiap hifa terdapat sitoplasma
bersama (Pelezar dan Chan, 1986). Pertumbuhan fungi mula-mula berwarna
putih, tetapi bila telah memproduksi spora akan membentuk berbagai warna
tergantung dari jenis kapang. Kebanyakan kapang bersifat mesofilik, yaitu
mampu tumbuh baik pada suhu kamar. Suhu optimium pertumbuhan untuk
kebanyakan kapang adalah 25 sampai 30oC, tetapi beberapa dapat tumbuh pada
suhu 35 sampai 37oC atau lebih, misal Aspergillus nigers dan Trichophyton
rubrum.
Beberapa kapang bersifat psikotrofik, yakni dapat tumbuh baik pada suhu
almari es, dan beberapa bahkan masih dapat tumbuh lambat pada suhu di bawah
suhu pembekuan, misal -5 sampai -10oC. Selain itu, beberapa kapang bersifat
termofilik, yakni mampu tumbuh pada suhu tinggi. Semua kapang bersifat
aerobik, yakni membutuhkan oksigen dalam pertumbuhannya. Kebanyakan
kapang dapat tumbuh baik pada pH luas, yakni 2,0 sampai 8,5 tetapi biasanya
pertumbuhannya akan baik bila pada kondisi asam atau pH rendah (Waluyo,
2005).
b. Khamir (yeast)
Khamir merupakan fungi bersel tunggal dan tidak berfilamen. Sebagai sel
tunggal khamir tumbuh dan berkembang biak lebih cepat dibanding kapang yang
tumbuh dengan pembentukan filamen. Reproduksi vegetatif terjadi dengan cara
pertunasan. Khamir juga lebih efektif dalam memecah komponen kimia
dibanding kapang, karena mempunyai perbandingan luas permukaan dengan
volume yang lebih besar. Sel khamir mempunyai ukuran yang bervariasi, yaitu
dengan panjang 12-5 mm sampai 20-50 mm, dan lebar 1-10 mm. Bentuk khamir
bermacam-macam, yaitu bulat, oval, silinder, ogival yaitu bulat panjang dengan
salah satu ujung runcing, segitiga melengkung (trianguler), berbentuk botol
bentuk apulkat atau lemon, membentuk pseudomiselium, dan sebagainya.
Dinding selnya sangat tipis untuk sel-sel yang masih muda, dan semakin lama
semakin tebal jika sel semakin tua. Komponen dinding selnya berupa glukan
(selulosa khamir), mannan, protein, kitin, dan lipid. Contoh dari khamir yang
sering merugikan manusia yaitu Candida albicans (Waluyo, 2005).
c. Pertumbuhan Fungi
Pertumbuhan fungi merupakan peningkatan semua komponen dari suatu
organisme secara teratur. Bila suatu medium ditanam sel-sel fungi maka
pertumbuhannya dapat digambarkan dalam bentuk kurva pertumbuhan.
Pertumbuhan fungi meliputi fase-fase:
1. Fase lag (penyesuaian)
Pada fase ini merupakan fase tidak adanya pertumbuhan populasi
karena sel mengalami perubahan komposisi kimiawi dan ukuran serta
bertambahnya substansi intra seluler sehingga siap untuk membelah diri.
Fase ini disebut juga fase saat penyesuaian sel dengan lingkungan serta
pembentukan enzim-enzim untuk mengurai substrat (Gandjar.,dkk, 2006).
2. Fase Akselerasi
Pada fase ini yaitu sel-sel fungi mulai membelah dan fase lag aan
menjadi aktif (Gandjar.,dkk, 2006).
3. Fase Logaritmik (Eksponensial)
Pada fase ini sel Fungi membelah diri dengan laju konstan,
sehingga masa menjadi dua kali lipat dan keadaan pertumbuhan
seimbang. Pertumbuhan sel-sel ini dipengaruhi oleh beberapa faktor
diantaranya adalah media yang digunakan, konsentrasi, kepadatan media,
suhu, kadar oksigen, volume dan faktor lainnya. Pada awal fase ini kita
dapat memanen enzim-enzim dan merupakan fase yang sangat penting
dalam kehidupan mikroba. (Gandjar.,dkk, 2006).
4. Fase deselerasi
Fase saat sel-sel mulai kurang aktif membelah, kita dapat
memanen biomassa sel atau senyawa yang tidak diperlukan lagi oleh sel-
sel fungi (Gandjar.,dkk, 2006).
5. Fase Stasioner
Terjadinya penumpukan racun akibat mertabolisme sel dan
kandungan nutrien mulai habis, akibatnya terjadi kompetisi nutrisi
sehingga beberapa sel fungi mati dan lainnya tetap tumbuh. Sehingga
pada fase ini pertumbuhan tetap (Gandjar.,dkk, 2006).
6. Fase kematian
Sel menjadi mati akibat penumpukan racun dan habisnya nutrisi,
menyebabkan jumlah sel yang mati lebih banyak daripada jumlah sel
yang bertahan sehingga mengalami penurunan jumlah sel secara
eksponensial (Gandjar.,dkk, 2006).
2.3 Infeksi Fungi
Fungi termasuk tumbuh-tumbuhan filum talofita yang tidak memiliki
akar, batang dan daun. Fungi tidak bisa menghisap makanan dari tanah dan tidak
memiliki klorofil sehingga tidak bisa menyediakan makanan sendiri. Fungi bisa
tumbuh jika mendapatkan makanan dari organisme lain, oleh karena itu Fungi
dikenal sebagai saprofit dan parasit bagi organisme lain (Siregar, 2005).
Sampai saat ini dikenal kurang lebih 200.000 spesies fungi, tetapi hanya
50 spesies yang patogen pada manusia, yaitu: 20 spesies menyerang kulit, 12
spesies menyerang subkutis dan 18 sepesies menyerang organ dalam atau
sistemik. Masuknya/berkembangnya fungi dalam tubuh manusia dapat
dikarenakan oleh berbagai hal yaitu, melalui luka kecil atau aberasi pada kulit.
melalui saluran nafas dengan menghirup elemen-elemen fungi dan melalui
kontak tanpa adanya luka (Siregar, 2005)
Contoh-contoh penyakit yang disebabkan oleh infeksi fungi antara lain:
Mikosis superfisisal. Penyakit ini mengenai lapisan permukaan kulit,
yaitu stratum korneum, rambut dan kuku. Contohnya: Tinea versicolor (panu),
herpes sirsinata dan kurap (Bouman, 2001).
Mikosis Profunda (sistemik). Penyakit fungi ini menyerang organ dalam,
seperti pernafasan, alat genitalia, dan lain-lain. Contohnya: misetoma,
kromomikosis, keputihan dan lain-lain (Bouman, 2001).
2.4 Fungi yang Digunakan Dalam Penelitian
a. Candida albicans
Divisio : Eumycophyta
Kelas : Deuteromycetes
Ordo : Melaneoniales
Familia : Moniliaceae
Genus : Candida
Spesies : Candida albicans
Candida albicans adalah fungi lonjong bertunas yang menghasilkan
pseudomisellium dalam biakan, jaringan dan eksudat. Ukuran Candida albicans
yaitu 2- 3 mm x 4-6 mm. Candida albicans merupakan anggota flora normal
selaput lendir, saluran pernafasan, saluran pencernaan, dan genetalia wanita.
Candida albicans dapat menimbulkan invasi dalam aliran darah, trombofiebitis,
endo karditas atau infeksi pada mata dan organ lain. Candida albicans mampu
meragikan glukosa dan maltosa, menghasilkan asam dan gas, tidak bereaksi
dengan laktosa. Peragian karbohidrat ini bersama-sama dengan sifat koloni dan
b. Aspergillus niger
Divisio : Eumycophyta
Kelas : Ascomycetes
Ordo : Aspergillales
Familia : Aspergillaceae
Genus : Aspergillus
Spesies : Aspergillus niger
Aspergillus niger atau Black Aspergilli merupakan Fungi yang umum
disebut sebagai Fungi hitam. Aspergillus niger biasanya ditemukan dalam paru-
paru burung, tetapi juga dapat ditemukan pada lembu, domba, dan kuda, namun
jarang ditemukan pada manusia. Aspergillus niger juga dapat menyebabkan
infeksi yang serius pada telinga. Pada umumnya Aspergillus niger ditemukan
pada makanan yang dibiarkan terbuka. Aspergillus niger menyebabkan
pembusukan dan kontaminan umum pada laboratorium bakteri dan mikrobiologi.
Aspergillus niger digunakan untuk memproduksi asam oksalat dan asam nitrat
(Salle, 1994).
c. Trichophyton rubrum
Divisio : Eumycophyta
Kelas : Deuteromycetes
Ordo : Melaneoniales
Familia : Moniliaceae
Genus : Trichophyton
Spesies : Trichophyton rubrum.
Fungi ini memiliki koloni seperti kapas, berwarna putih, penyebab
dermatomikosis (Bouman, 2001). Mikronidia merupakan bentuk spora yang
paling banyak. Makrokonidia yang berdinding halus, berbentuk pensil dengan
ujung-ujung yang tumpul biasanya jarang ditemukan. Trichophyton sp.
menyebabkan infeksi pada kulit, kuku, dan rambut. Fungi ini juga menyebabkan
penyakit tine pedis (athlete’s foot), Tinea cruris dan Tinea unginium (Jawetz.,
dkk,; 1995).
Merupakan Fungi parasit yang memiliki kemampuan untuk menyerang
struktur keratin (rambut, kulit dan kuku), menyebabkan infeksi superfisial yang
3. Terpenoid
Terpenoid adalah kelompok senyawa metabolit sekunder yang
terbesar dilihat dari jumlah senyawa maupun variasi kerangka dasar
strukturnya. Terpenoid ditemukan berlimpah dalam tanaman tingkat tinggi.
Senyawa ini menunjukkan aktivitas antifungi secara in vitro
terhadap Microsporum canis, Microsporum gypseum, Tricophyton
mentagrophytes, dan Tricophyton rubrum (Cowan, 1999).
4. Saponin
Saponin mempunyai efek antifungi yang bagus. Efek antifungi dan
antibakteri terganggu dengan adanya gugus monosakarida dan turunannya
Saponin dapat berfungsi sebagai detergen. Detergen memiliki struktur yang
dapat berikatan dengan molekul hidrofilik dan molekul-molekul organik
non polar (lipofilik) sehingga mampu merusak membran sitoplasma dan
membunuh bakteri (Cheeke, 2000).
5. Fenol
Semakin tinggi fenol teroksidasi semakin kuat menghambat
pertumbuhan organisme. Mekanisme antimikroba dari senyawa fenol
adalah penghambatan enzim oleh senyawa teroksidasi kemungkinan lewat
reaksi dengan gugus sulfihidril atau dengan interaksi yang tidak spesifik
oleh protein (Cowan, 1999).
2.6 Nystatin
Antifungi yang digunakan adalah Nystatin
selanjutnya dikultur ulang pada media cair tanpa penambahan mikroba uji
ataupun agen antimikroba dan diinkubasi sesuai dengan mikroba uji.
Media cair yang bening setelah di inkubasi ditetapkan sebagai KBM
(Pratiwi, 2008).
b. Metode dilusi Padat
Metode ini serupa dengan metode dilusi cair, namun menggunakan
media padat (solid). Keuntungan metode ini adalah satu konsentrasi agen
antimikroba yang di uji dapat digunakan untuk menguji beberapa mikroba
uji.
2. Uji difusi
Metode difusi agar disebut juga tes Kirby & Bauer. Metode ini dibagi
menjadi tiga yaitu metode lubang, metode gores silang dan metode cakram
kertas. (Pertiwi, 2008)
a. Metode Lubang/Perforasi.
Fungi uji yang umurnya 18-24 jam disuspensikan ke dalam media
agar pada suhu sekitar 45°C. Suspensi fungi dituangkan ke dalam cawan
petri steril. Setelah agar memadat, dibuat lubang-lubang dengan diameter
6 mm kemudian dimasukkan larutan zat yang akan diuji aktivitasnya
sebanyak 20 μL dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam.
Aktivitas antifungi dapat dilihat dari daerah bening yang mengelilingi
lubang perforasi (Pertiwi, 2008).
b. Metode Gores Silang
Zat yang akan diuji diserapkan ke dalam kertas saring dengan cara
meneteskan pada kertas saring kosong larutan antifungi sejumlah volume
tertentu dengan kadar tertentu. Kertas saring tersebut diletakkan di atas
permukaan agar padat, kemudian digores dengan suspensi fungi 90% pada
agar melalui kertas saringnya, diinkubasi selama 18-24 jam pada suhu
37°C. Aktivitas antifungi dapat dilihat dari daerah bening yang tidak
ditumbuhi fungi dekat kertas saring (Pertiwi, 2008).
c. Metode Cakram Kertas
Zat yang akan diuji diserapkan ke dalam cakram kertas dengan cara
meneteskan pada cakram kertas kosong larutan antifungi sejumlah volume
cairan), serbuk halus atau kasar dari tumbuhan obat yang kontak dengan
pelarut disimpan dalam wadah tertutup untuk periode tertentu dengan
pengadukan yang sering, sampai zat tertentu dapat terlarut. Metode ini
cocok digunakan untuk senyawa yang termolabil (Tiwari,dkk., 2011).
b. Perkolasi
Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai
terjadi penyarian sempurna yang umumnya dilakukan pada temperatur
kamar. Proses perkolasi terdiri dari tahap pengembangan bahan, tahap
perendaman, tahap perkolasi antara, tahap perkolasi sebenarnya
(penampungan ekstrak) secara terus menerus sampai diperoleh ekstrak
(perkolat). Untuk menentukan akhir dari pada perkolasi dapat dilakukan
pemeriksaan zat secara kualitatif pada perkolat akhir. Ini adalah prosedur
yang paling sering digunakan untuk mengekstrak bahan aktif dalam
penyusunan tincture dan ekstrak cairan (Tiwari.,dkk, 2011).
Ekstraksi cara panas dapat dibedakan sebagai berikut:
a. Sokletasi
Sokletasi adalah ekstraksi mengunakan pelarut yang selalu baru,
dengan menggunakan alat soklet sehingga terjadi ekstraksi kontinyu
dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik
(Ditjen POM, 2000).
b. Refluks
Refluks adalah ekstraksi dengan menggunakan pelarut pada
temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut
terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik (Ditjen POM,
2000).
c. Infusa
Infusa adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 90C
selama 15 menit. Infusa adalah ekstraksi menggunakan pelarut air pada
temperatur penangas air dimana bejana infus tercelup dalam penangas air
mendidih, temperatur yang digunakan (96-980C) selama waktu tertentu
(15-20 menit) (Ditjen POM, 2000). Cara ini menghasilkan larutan encer
dari komponen yang mudah larut dari simplisia (Tiwari.,dkk, 2011).
d. Dekok
Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama (≥30oC) dan
temperatur sampai titik didih air (Ditjen POM, 2000). Dekok adalah
ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 90oC selama 30 menit.
Metode ini digunakan untuk ekstraksi konstituen yang larut dalam air dan
konstituen yang stabil terhadap panas (Tiwari,dkk.,2011)
e. Digesti
Digesti adalah maserasi kinetik pada temperatur lebih tinggi dari
temperatur suhu kamar, yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-
50oC (Ditjen POM,2000). Digesti adalah maserasi dengan pengadukan
kontinyu pada temperatur lebih tinggi dari temperatur ruang (umumnya
25-30oC). Ini adalah jenis ekstraksi maserasi di mana suhu sedang
digunakan selama proses ekstraksi (Tiwari.,dkk, 2011).
2.10 Pelarut
Pemilihan pelarut tergantung pada senyawa yang ditargetkan. Faktor-
faktor yang mempengaruhi pemilihan pelarut adalah jumlah senyawa yang akan
diekstraksi, laju ekstraksi, keragaman senyawa yang akan diekstraksi, kemudahan
dalam penanganan ekstrak untuk perlakuan berikutnya, toksisitas pelarut dalam
proses bioassay, potensial bahaya kesehatan dari pelarut (Tiwari.,dkk, 2011).
Berbagai pelarut yang digunakan dalam prosedur ekstraksi antara lain:
1. Air
Air adalah pelarut universal, biasanya digunakan untuk
mengekstraksi produk tumbuhan dengan aktivitas antimikroba. Meskipun
pengobatan secara tradisional menggunakan air sebagai pelarut, tetapi
ekstrak tumbuhan dari pelarut organik telah ditemukan untuk memberikan
aktivitas antimikroba lebih konsisten dibandingkan dengan ekstrak air.
Air juga melarutkan senyawa fenolik yang memiliki aktivitas penting
sebagai antioksidan (Tiwari.,dkk, 2011).
2. Aseton
Aseton melarutkan beberapa komponen senyawa hidrofilik dan
lipofilik dari tumbuhan. keuntungan pelarut aseton yaitu dapat bercampur
dengan air, mudah menguap dan memiliki toksisitas rendah. Aseton
BAB III
METODELOGI PENELITIAN
5. Uji glikosida
Sebanyak 0,5 gram ekstrak ditambahkan 1 ml aquades dan ditambahkan
larutan NaOH. Terbentuknya warna kuning mengindikasikan adanya
senyawa glikosida. (Tiwari.,dkk, 2011).
6. Uji Fenol
Sebanyak 0,5 gram ekstrak dilarutkan dengan 2 ml etanol 96% dan
ditambahkan 3 tetes larutan FeCl3. Terbentuknya warna hitam kebiruan
mengindikasikan adanya senyawa fenol. (Tiwari.,dkk, 2011)
7. Uji tanin
Sebanyak 0,5 gram ekstrak dilarutkan dengan 2 ml etanol 70%,
dididihkan dalam 10 ml aquades dalam tabung reaksi kemudian disaring.
Ditambahkan 3 tetes larutan ferri klorida 0,1% dan diamati terbentuknya
warna hijau kecoklatan atau biru kehitaman menunjukkan adanya tannin.
(Tiwari.,dkk, 2011)
3.4.4 Uji Parameter Ekstrak
Parameter Spesifik
1. Identitas
Ekstrak dideskripsikan dengan tata nama yang meliputi nama ekstrak,
nama latin tumbuhan, bagian tumbuhan yang digunakan dan nama
Indonesia tumbuhan (Depkes RI, 2000)
2. Organoleptik
Ekstrak dideskripsikan menggunakan panca indera untuk mengetahui
bentuk, warna, bau, dan rasa (Depkes RI, 2000).
Parameter Nonspesifik
1. Residu Pelarut Etanol
Sebanyak 800 mg ekstrak etanol 96% dilarutkan dalam aquades hingga
10 ml dan di destilasi pada suhu 78,5°C hingga diperoleh destilat sebanyak
2 ml. Destilat ditambahkan aquades hingga 10 ml. Selanjutnya bobot jenis
cairan ditetapkan menggunakan piknometer. Persentase residu pelarut
etanol dalam ekstrak dihitung menggunakan tabel bobot jenis dan kadar
etanol pada Farmakope Indonesia edisi III (Depkes RI, 2000).
2. Kadar Air
Ekstrak ditimbang sebanyak 1 gram, dimasukan ke dalam cawan penguap
yang sebelumnya telah dipanaskan dan ditara sampai bobot tetap.
Dipanaskan dalam oven pada suhu 105oC selama 5 jam dan ditimbang.
Sebelum dan setiap pemanasan dibiarkan dalam deksikator hingga suhu
kamar. Lanjutkan pemanasan dan timbang hingga bobot tetap (Depkes RI,
2000).
3. Kadar Abu Total
Penetapan kadar abu total dilakukan dengan cara sebanyak 2 gram ekstrak
etanol 96% ditimbang ke dalam krus yang telah ditara dan dipijarkan
perlahan. Suhu dinaikkan secara bertahap hingga 600±25°C. Didinginkan
dalam desikator dan ditimbang berat abu. Kadar abu dihitung dalam persen
terhadap berat sampel awal (Depkes RI, 2000).
3.4.5 Sterilisasi alat
Semua alat yang akan digunakan untuk uji mikrobiologi diperlukan harus
dalam kondisi steril agar tidak terkontaminasi dengan mikroba lain. Sehingga
semua alat yang akan digunakan harus disterilkan terlebih dahulu dengan cara
sterilisasi yang sesuai dengan masing-masing alat dan bahan yang akan
digunakan. Untuk alat gelas yang tahan panas tinggi dilakukan sterilisasi kering
dengan oven pada suhu 160oC selama 2 jam sebelumnya dibungkus dengan
aluminium foil. Untuk medium dan aquadest disterilisasi dengan cara sterilisasi
basah menggunakan autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit. Untuk larutan
uji disterilkan dengan cara melakukan pengerjaann di dalam laminar air flow
yang sebelumnya telah disterilisasi dengan desinfektan (alkohol 70%) dan lampu
UV yang dinyalakan 15 menit sebelum digunakan. (Anonim, 1995)
3.4.6 Pembuatan Kontrol Negatif, Kontrol Positif dan Larutan
Ekstrak Uji
Kontrol Negatif DMSO
1. DMSO 100% yang telah disiapkan sebagai larutan induk diencerkan
menjadi DMSO 5% dengan menggunakan aquadest steril.
2. 2,5 ml dari DMSO 100% ditambahkan menggunakan akuades hingga
volume 50 ml.
V1 = 2,5 ml
Kontrol Positif Nystatin
Keterangan: Untuk kontrol postif, telah disediakan dalam bentuk disk
cakram yang didalamnya telah berisi nystatin sebanyak 100 IU
(Internasional Unit)
Larutan Ekstrak Uji
1. Ekstrak ditimbang sebnyak 2,5 gram.
2. Dilarutkan kedalam 50 ml DMSO 5%. Hingga didapatkan larutan
ekstrak induk 5000 ppm.
3. Dibuat seri pengenceran ekstrak uji dari larutan induk dengan
konsentrasi 1000, 750, 500, 250, 125, dan 62,5 ppm.
Keterangan: Pengenceran dilakukan dengan menggunakan cara
V1 N1 = V2 N2
(V1= Volume larutan 1, N1= Konsentrasi larutan 1, V2= Volume
larutan 2, N2= Konsentrasi larutan 2)
3.4.7 Pembuatan Medium PDA (Potato Dectrose Agar)
1. Sebanyak 20 gram Potato dectrose agar (PDA) dilarutkan dalam
erlenmeyer dengan akuades 500 ml. Dipanaskan di atas hot plate sambil
diaduk hingga larutan menjadi homogen.
2. Medium yang telah homogen disterilkan dalam autoklaf pada suhu
121oC, tekanan 2 atm selama 15 menit.
3. Medium dalam erlenmayer disimpan di dalam refrigerator sebagai stok
medium.
3.4.8 Peremajaan fungi
1. Agar miring PDA disiapkan pada masing-masing tabung reaksi.
2. Diambil fungi standar dengan menggunakan ose yang telah dipijarkan
dengan api dengan cara dikerik.
3. Lalu fungi yang telah diambil dengan ose tersebut ditanam dengan cara
menggores secara zig-zag pada permukaan media.
4. Fungi dinkubasi pada suhu 35OC selama 2-3 hari untuk Candida
albicans dan selama 5-7 hari untuk Aspergillus niger dan Trichophyton
rubrum.
5. Selama pengerjaan dilakukan pada laminar air flow dengan kondisi
aseptis.
3.4.9 Identifikasi Fungi
1. Fungi uji diambil secukupnya dengan ose dengan cara di kerik.
2. Diletakan pada permukaan preparat kaca objek steril, diratakan pada
permukaan preparat tersebut. Dialiri dengan NaCl 0,9% steril
secukupnya tunggu 1 menit.
3. Difiksasi dengan api bunsen.
4. Ditetesi Metylene blue lalu dialiri dengan aquades dan fiksasi kembali
5. Diamati bentuk struktur morfologis fungi dengan Mikroskop.
3.4.10 Pembuatan Suspensi Fungi
Suspensi Candida albicans
Fungi uji yang telah diremajakan pada agar miring dibuat suspensi dengan
menggunakan NaCl fisiologis 0,9% steril
1. Koloni fungi diambil dari agar miring menggunakan jarum ose
kemudian dimasukan kedalam tabung raksi yang telah berisi NaCl
fisiologis steril
2. Kemudian divorteks sampai diperoleh kekeruhan sama dengan standar
Mc Farland 3 yaitu dinyatakan sama dengan 109 CFU/ml. (Aljufri,
2010)
3. Dari suspensi induk Candida albicans yang kekeruhannya dinyatakan
109 CFU/ml lalu di encerkan hingga konsentrasi konsentrasi 106
CFU/ml untuk pengujian aktivitas antifungi.
Suspensi Trichophyton rubrun dan Aspergillus niger
1. Kultur yang telah diremajakan pada agar miring ditambahkan NaCl
steril 5 ml lalu di kerik dengan ose hingga keruh, lalu dikocok hingga
homogen.
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
dikarenakan etanol 96% memiliki kadar air yang lebih sedikit dan dapat
mengurangi pertumbuhan mikroba didalam ekstrak, karena air merupakan salah
satu media yang dapat mempercepat pertumbuhan mikroba asing.
Proses maserasi dilakukan selama 2 hari dengan cara sesekali diaduk.
Hasil maserasi kemudia diasaring hingga didapatkan filtrat proses ini dilakukan
kembali hingga 6 kali remaserasi. Tujuan dari remaserasi kembali adalah agar
senyawa yang terdapat pada simplisia dapat secara maksimal terlarut dalam
pelarut yang digunakan.
Filtrat maserasi dipekatkan dengan vacuum rotary evaporator pada suhu
45-50°C hingga diperoleh ekstrak kental sebanyak 42,111 gram. serta perolehan
hasil rendemen ekstrak etanol 96% adalah 7,01 %.
4.5 Parameter Ekstrak
Hasil penetapan parameter ekstrak dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 3: Hasil penetapan ekstrak parameter spesifik dan non spesifik ekstrak
etanol 96% Kulit batang Kayu Jawa (Lannea coromandelica)
Parameter Karakteristik Hasil
A. Identitas
1. Nama Latin 1. Lannea coromandelica
2. Bagian 2. Kulit batang
Spesifik Tumbuhan 3. Kayu Jawa
3. Nama Indonesia
B. Organoleptik
1. Bentuk 1. Kental
2. Warna 2. Coklat tua
3. Bau 3. Khas
4. Rasa 4. Pahit
A. Residu Pelarut 0%
Non Spesifik B. Kadar air 5,8 %
C. Kadar abu 14 %
Keterangan: Hasil penentuan parameter ekstrak etanol 96% kulit batang kayu
jawa (Lannea coromandelica).
Tabel 4: Hasil Skrining fitokimia ekstrak etanol 96% kulit batang Kayu jawa
(Lannea coromandelica)
Penguji senyawa Hasil
Alkaloid -
Flavonoid +
Saponin +
Glikosida +
Triterpenoid -
Fenol +
Tanin +
Keterangan: Hasil penapisan fitokimia yang dilakukan pada ekstrak etanol 96%
kulit batang kayu jawa (Lannea coromandelica), mengandung flavonoid,
saponin, glikosida, fenol dan tanin.
4.7 Uji aktivitas
Uji aktivitas antifungi dilakukan terhadap tiga fungi uji yaitu, Candida
albicans ATCC 10231, Aspergillus niger ATCC 16404., dan Trichophyton
rubrum ATCC 52020 (Lampiran 9). Candida albicans, Aspergillus niger, dan
Trichophiton rubrum merupakan sebagian fungi yang sering menginfeksi
manusia. Seperti Aspergillus niger yang sering mengakibatkan infeksi pada
saluran pernafasan, Candida albicans yang mengakibatkan penyakit
kandidiasis/keputihan, sariawan serta penyakit lainnya dan Trichophyton rubrum
yang sering mengakibatkan gatal pada kulit, kurap, penyakit kaki atlet dan
penyakit laiinya.
Uji aktivitas antifungi dilakukan dengan metode difusi cakram, metode
difusi dipilih dikarenakan metode ini memiliki cara yang sederhana dan biaya
yang lebih terjangkau dibandingkan dengan metode lain.
4.7.1 Sterilisasi
Tujuan untuk sterilisasi alat dan bahan agar tidak ada kontaminan oleh
mikroba asing saat dilakukannya uji aktivitas antifungi. Sterilisasi menggunakan
alat oven dan autoklaf, alat-alat gelas yang tidak memiliki presisi disterilisasi
dengan menggunakan oven pada suhu 160 oC selama 2 jam. Alat-alat gelas yang
pada nutrien yang dibutuhkan untuk pertumbuhan bakteri hingga bakteri atau
fungi tetap berada dalam fase eksponensial. (Pratiwi, 2008)
Hasil dari peremajaan diuji dengan metode pewarnaan, untuk memastikan
bahwa fungi uji yang di remajakan tidak terkena kontaminasi oleh mikroba-
mikroba lainnya. Hasil didapatkan bahwa fungi yang tumbuh dari hasil
peremajaan sesuai dengan referensi yang ada, dilihat dari miselium yang
ditunjukan serta bentuk hifa yang terdapat pada fungi uji tersebut.
4.7.3 Penyiapan Ekstrak Uji
Ekstrak kental yang telah di peroleh dibuat larutan induk dengan cara
melarutkan ekstrak menggunakan Dimetil sulfoksida (DMSO). Penggunaan
DMSO, karena DMSO merupakan pelarut yang dapat melarutkan senyawa polar
dan nonpolar yang mempunyai range luas seperti halnya air dan tidak
mempunyai aktivitas biologi. (Harliana, 2006)
4.7.4 Pembuatan Suspensi Fungi
Hasil peremajaan setiap fungi uji dibuatkan suspensi masing-masing
untuk dilakukan pengujian aktivitas antifungi dari ekstrak kulit batang kayu jawa
(Lannea coromandelica). Suspensi dibuat dengan menggunakan NaCl 0,9%.
Pada pembuatan suspensi Candida albicans, beberapa cuplikan fungi
hasil dari peremajaan diambil dengan menggunakan ose lalu dimasukan kedalam
tabung reaksi yang telah berisi NaCl 0,9% steril. Setelah itu divortex hingga
mendapati kekeruhan yang sama dengan Standar Mc. Farland 3 (Standar
Mc. Farland dinyatakan dengan konsentrasi fungi 109 CFU/ml). Dari suspensi
induk Candida albicans yang kekeruhannya dinyatakan 109 CFU/ml lalu
diencerkan hingga konsentrasi konsentrasi 106 CFU/ml untuk pengujian aktivitas
antifungi. Konsentrasi 106 dinyatakan sebagai konsentrasi yang dapat
menyebabkan kondisi patogen bagi manusia.
Suspensi fungi Aspergillus niger dan Trichophyton rubrum dibuat dengan
cara menuangkan 5 ml NaCl 0,9% kedalam tabung hasil peremajaan masing-
masing fungi. Setelah dituang, lalu fungi dicampurkan dengan menggunakan ose,
setelah tercampur lalu Suspensi fungi diambil sebanyak 1 ml dan di tambahkan
kedalam tabung reaksi lain yang telah berisi NaCl 0,9% sebanyak 9 ml, hasil
Hasil yang didapatkan dari penentuan zona hambat ekstak kulit batang
kayu jawa (Lannea coromandelica) didapatkan hasil bahwa ekstrak aktif untuk
menghambat pertumbuhan Candida albicans pada konsentrasi 1000, 750 dan
500 ppm, untuk Trychophyton rubrum ekstrak dapat menghambat
pertumbuhannya pada semua seri konsentrasi yaitu 1000, 750, 500 dan 250 ppm.
Sedangkan untuk Aspergillus niger esktrak tidak memiliki daya hambat untuk
semua konsentrasi uji.
Kontrol positif yang digunakan yaitu Nystatin dengan kosnentrasi 100 IU
dalam bentuk cakram disk, hasil ditunjukan dengan adanya zona bening yang
Daya hambat yang ditimbulkan dari ekstrak etanol 96% kulit batang kayu
jawa (Lannea coromandelica) dihasilkan dari kandungan-kandungan senyawa
yang terdapat didalam ekstrak tersebut. Berdasarkan skrining fitokimia yang telah
dilakukan, ekstak kulit batang kayu jawa ini memiliki senyawa-senyawa seperti
flavonoid, tanin, fenol, saponin dan glikosida.
1. Tanin bekerja dengan cara mengendapkan protein dan dapat merusak
membran sel sehingga pertumbuhan fungi terhambat (Utami , S.C., 2007).
2. Senyawa flavonoid memiliki aktivitas antifungi dengan kemampuannya
membentuk ikatan dengan protein dan dinding sel bakteri, semakin
lipofilik suatu flavonoid semakin merusak membran sel fungi (Cowan,
1999).
3. Senyawa saponin memiliki aktivitas antifungi dengan adanya gugus
monosakarida dan turunannya. Saponin dapat berfungsi sebagai detergen.
Detergen memiliki struktur yang dapat berikatan dengan molekul hidrofilik
dan molekul - molekul organik non polar (lipofilik) sehingga mampu
merusak membran sitoplasma dan membunuh fungi(Cheeke, 2000).
4. Senyawa fenol memiliki aktivitas antifungi dengan cara penghambatan
enzim oleh senyawa teroksidasi serta berikatan dengan gugus sulfihidril
atau dengan interaksi yang tidak spesifik oleh protein (Cowan, 1999).
5. Senyawa seperti glikosida dapat menghambat pertumbuhan fungi, tetapi
mekanisme penghambatan dari senyawa ini belum dapat ditentutakan
contoh senyawa glikosida yang dapat menghambat pertumbuhan fungi
yaitu glikosida antrkuinon.
Hasil skrining fitokimia tersebut belum dapat menjelaskan secara pasti
senyawa yang dapat menghambat pertumbuhan dari fungi tersebut karena belum
dilakukannya isolasi senyawa yang bermanfaat sebagai antifungi terhadap ekstrak
kulit batang Kayu Jawa (Lannea coromandelica), tetapi dari hasil skrining
fitokimia secara umum telah didapatkan gambaran senyawa-senyawa yang
kemungkinan berpotensi sebagai antifungi seperti flavonoid, tannin, saponin,
fenol dan glikosida jantung.
Berdasarkan diameter yang dihasilkan pada zona hambat, kekuatan
antifungi digolongkan menjadi 4. Bila diameter hambat 6 mm atau kurang maka
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Dari hasil penelitian yang telah dilakukan didapatkan kesimpulan sebagai
berikut:
1. Ekstrak etanol 96% kulit batang Kayu Jawa (Lannea coromandelica) aktif
sebagai antifungi terhadap Candida albicans dan Trichophyton rubrum.
2. Ekstrak etanol 96% kulit batang Kayu Jawa (Lannea coromandelica) pada
penelitian ini tidak aktif terhadap Aspergillus niger.
3. Zona hambat yang dihasilkan ekstrak kulit batang Kayu Jawa (Lannea
coromandelica) untuk Candida albicans terbesar pada konsentrasi 1000 ppm
dan terkecil dikonsentrasi 500 ppm.
4. Zona hambat yang dihasilkan ekstrak kulit batang Kayu Jawa (Lannea
coromandelica) untuk Trichophyton rubrum terbesar pada konsentrasi 1000
ppm dan terkecil dikonsentrasi 250 ppm.
5.2 Saran
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mencari senyawa aktif dari
ekstrak kulit batang kayu jawa (Lannea coromandelica) yang dapat
digunakan sebagai antifungi/antimikroba.
2. Perlu dilakuakan penelitian lebih lanjut terhadap kulit batang kayu jawa
(Lannea coromandelica) tidak hanya sebagai sebagai antifungi, tetapi juga
sebagai antimikroba lainnya.
DAFTAR PUSTAKA
Andayani Anik, dkk. 2014. Anti Candida Minyak Atsiri Lengkuas Putih (Alpinia
galanga) Terhadap Candida albicans Penyebab Candidiasis Secara
Invitro. ISSN: 2339-190. Vol.2, No.2, hal 1 – 9, September 2014
Atikah, Nur. 2013. Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Herba Kemangi (Ocimum
americanum L). Terhadap Staphylococus aureus dan Candida albicans.
Skripsi. Jurusan Farmasi.Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan. UIN
Syarif Hidayatullah: Jakarta
Badan POM RI. 2010. Acuan Sediaan Herbal. Badan Pengawas Obat dan
Makanan Republik Indonesia. Direktorat Obat Asli Indonesia Deputi
Bidang Pengawasan Obat Tradisional, Kosmetik dan Produk
Komplemen: Jakarta.
Baeza LC, Baila’o AM., Borges CL., Pereira M., Soares CM., Mendes Giannini
MJ (2007) cDNA representational difference analysis used in the
identification of genes expressed by Trichophyton rubrum during
contact with keratin. Microbes Infect 9:1415–1421
Candra, Retno Dewi. 2009. Uji Aktivitas Antifungi Ekstrak Buah Pare Belut
(Trichosanthes anguina L.). Skripsi. Jurusan Kimia. Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Sebelas Maret.
Surakarta
Cheeke. 2000. Natural Toxicants in Feed and Poisonous Plants. Avi Publishing
Company.Inc: Westport Connecticut.
Djauhariya, E., dan Hernani. 2004. Gulma Berkhasiat Obat. Penebar Swadaya,
Jakarta. hlm. 3.
Gandahusada, SS, Pribadi., Ilahude HD. 2004. Parasitologi Kedokteran Edisi III.
Balai penerbit FKUI: Jakarta.
Gandjar Indrawati, dkk. 2006. Mikologi dasar dan terapan. 2006. Yayasan Obor
Indonesia: Jakarta.
Howarth, W.H, et al. 1982. Martindale The extra Pharmacopoeia 28th edition.
The Pharmaceutical Press: London
http://indiabiodiversity.org/species/show/230190
http://www.chemicalbook.com/CAS%5CGIF%5C1400-61-9.gif
http://commons.hortipedia.com/images/9/92/Lanneacoromandelica
Jhon, Arthur G, Dkk. 2011. Mikrobiologi dan Imunologi edisi kelima. Binarupa
Aksara: Jakarta
Katzung, B.G. 1995. Farmakologi Dasar dan Klinik Edisi 3.EGC: Jakarta. Hal:
666
Kaur Rupinder, Lal Jaiswal Mohan dan Jeik Vivien. 2014. Protective effect of
Lannea coromandelica Houtt.Merrill. against three common pathogens.
Department of Pharmacy, Faculty of Science and Technology,
Banasthali Vidhyapith, Tonk, Rajasthan: India. IP: 112.215.66.79
Romadhon, Arif Hakim. 2009. Uji Potensi Antifungi Ekstrak Etanol Rimpang
Kecombrang (Nicolaia speciosa Horan). Terhadap Trichophiton
rubrum dan Trichophyton mentagrophytes.Skripsi. Jurusan Farmasi.
Fakultas Kesehatan dan Ilmu Kesehatan. UIN Syarif Hidayatullah.
Jakarta.
Saifudin, A., Rahayu, V., dan Teruna, H.Y. 2011. Standardisasi Bahan Obat
Alam.Jakarta: Graha Ilmu. Halaman 25.
Siregar, RS. 2005. Penyakit Kulit Fungi. Egc: Jakarta Hal 10-12
Solehidin, Fajar Salim. 2010. Efek Antifungi Ekstrak Etanol Daun Lidah Buaya
(Aloe vera L.) Terhadap Pertumbuhan Trichophyton rubrum Secara In
Vitro.Skripsi. Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret. Surakarta
Sukandar, Yulinah Elin., dkk. 2012. Iso Farmakoterapi. PT. ISFI: Jakarta. Hal:
714
Tiwari, Kumar, Kaur Mandeep, Kaur Gurpreet & Kaur Harleem. 2011.
Phytochemical Screening and Extraction: A Review. Internationale
Pharmaceutica Sciencia vol. 1: issue 1.
Tofazzal, I. Toshiaki, S. Mitsuyoshi, T. Satoshi. 2002. Zoosporicidal Activity of
Polyflavonoid Tannin Identified in Lannea coromandelica Stem Bark
against Phytopathogenic Oomycete Aphanomyces cochlioides. Journal of
Agricultural and Food Chemistry.
Utami, S.C. 2007. Uji Aktivitas Antifungi Ekstrak Etanoi Herba Jombang
(Taraxacum offianale, Webber et Wigger) terhadap Fungi Candida
albicans ATCC 10231 dan Tricophyton rubrum ATCC 28191. Skripsi.
Fakultas Farmasi. Universitas Setia Budi. Surakarta
Sampel
Determinasi
Sortasi basah
Sortasi kering
Sterilisasi alat
Pembuatan Media
Sterilisasi Media
Peremajaan Fungi
Simplisia kulit batang kayu Ekstrak kulit batang kayu jawa Vortex
jawa
Inkubator
Jangka sorong Magnetic Stirer
= 7,01 %
Bobot jenis =
Bobot jenis =
- Tidak terbentuk
(Dragendorf) (Mayer) endapan merah
(Dragendorf)
- Hasil (-) alkaloid
2 Flavonoid - Perubahan
intensitas warna
kuning menjadi
tidak berwarna
- Hasil (+)
flavonoid
3 Saponin - Tebentuk busa
setinggi 1 cm
yang stabil
- Hasil (+)saponin
(sebelum) (setelah)
Penambahan Fecl3 0,1%
Keterangan: Hasil
preparat
Trichophyton
rubrum pada
mikroskop dengan
perbesaran 40x.
Menggunakan
pewarna Metylene
Blue.
1. Pembuatan DMSO 5%
V1 N1 = V2 N2
V1 =
V1 = 2,5 ml
Jadi untuk membuat DMSO 5% dari DMSO 100%, yaitu dengan cara 2,5 ml
DMSO 100% ditambahkan Aquadest steril hingga volume 50 ml.
Dibuat larutan induk dengan cara 0,25 gram ekstrak dilarutkan dalam 50 ml
DMSO 5%
(1000 ppm) = V1 . N1 = V2 . N2
(750 ppm) = V1 . N1 = V2 . N2
(500ppm) = V1 . N1 = V2 . N2
(250 ppm) = V1 . N1 = V2 . N2
(125 ppm) = V1 . N1 = V2 . N2
(62,5ppm) = V1 . N1 = V2 . N2
Lampiran 12: Penentuan Zona Hambat (Konsentrasi: 1000, 750, 500 dan
250 ppm)
3. Aspergillus niger
1. Candida albicans
Penentuan diameter
Zona hambat Candida
albicans pada
konsentrasi 500 ppm
2. Trichophyton rubrum
Penentuan diameter
Zona hamba
Trichophyton rubrum
pada konsentrasi 500
ppm