Pengawetan semen dengan pembekuan 

 Semen dapat dibekukan di dalam ampul, dalam straw atau dalam pelet. Pelet dibuat

dengan mendinginkan semen yang diencerkan dimasukkan kebagian 50-100µl ke

dalam solid dry ice,  kemudian disimpan dalam vial nylon yang berlubang pada

nitrogen cair.

  Straw polyvinylchloride (PVC) bervolume 0,25 atau 0, 50 ml dapat diisi dengan

semen yang telah diencerkan dan didinginkan, tutup pada ujung akhir dan tutup pada

bagian lain, diuapkan diatas uap nitrogen cair dan kemudian straw dimasukkan ke

dalam nitrogen cair.

Rata-rata pemebekuan semen anjing dan kucing yang optimal tergantung pada pengencer dan

krioprotektan yang digunakan dan volume dari sampel. Nilai rata-rata pembekuan dilaporkan

bervariasi dari 1, 89 ˚C ke 5 ˚C permenit sampai sampel mencapai - 5˚C, kemudian 10˚C ke

20 ˚C per menit sampai sampel mencapai - 100˚C, sesudahnya sampel dimasukkan ke dalam

nirogen cair.

Persentase spermatozoa motil yang progresif menurun setelah thawing, dengan nilai yang

dilaporkan adalah kurang lebih 50-60%.

Referensi : Rijsselaere, T (2011). Preservation and shipment of chilled or cryopreserved dog

semen. Vlaams Diergen Tijds. 80(3): 248-253.

Tahapan untuk memproduksi semen beku : 

 Evaluasi kesehatan reproduksi anjing jantan.

 Pisahkan fraksi yang kaya spermatozoa dengan mengganti tabung selama koleksi.

 Tambahkan pengencer I, pada suhu kamar, pada perbandingan 1:1. Tempatkan pada

suhu refrigerator selama 1 jam. Label 0, 5 ml straw dengan memberikan nomor

identitas, nomor hewan, ras, dan tanggal.

 Tambahkan 2 bagian pengencer II, pada suhu refrigerator , pada empet bagian 0,5 ml

selama periode 45 menit untuk konsentrasi final gliserol 4%.

 Isi straw 0,5 ml, masukkan gelembung udara untuk mencegah ledakan sumbat selama

pembekuan, tutup straw , dan tempatkan di suhu refrigerator selama paling tidak 1, 5

jam.

 Isi dasar dari kotak styrofoam dengan nitrogen cair.

 Tempatkan straw pada rak 5 cm di atas permukaan nitrogen cair selama 6 menit,

kemudian jatuhkan straw ke dalam nitrogen cair.

 Sesudah paling tidak 5 menit, pindahkan ke kontainer dan thawing satu straw (60

detik pada waterbath 37 C) untuk menilai kualitas semen post-thawing.

Note : Pengiriman sampel semen dalam kanister yang mengandung nitogen cair atau

uap nitrogen cair dalam dry shipper terakhir akan bertahan selama 1-3 minggu