Prinsip dari metode refluks adalah penarikan komponen kimia yang dilakukan dengan
cara bubuk kunyit dimasukkan kedalam labu alas bulat bersama sama dengan larutan penyari
yaitu etanol lalu dipanaskan , Penggunaan pelarut ini adalah untuk menarik senyawa dari sampel
sehingga zat yang diinginkan dapat tertarik kembali keluar. Ethanol digunakan karena sifatnya
yang semi polar sehingga dapat menarik berbagai senyawa baik polar maupun nonpolar. uap –
uap cairan penyari terkondensasi pada bola-bola menjadi molekul-molekul cairan penyari yang
akan turun kembali menuju labu alas bulat, demikian seterusnya berlangsung secara
berkesinambungan sampai penyari sempurna, disini kami membutuhkan waktu 60 menit.
Filtrate yang diperoleh didinginkan kemudian disaring menggunakan kertas saring dan disimpan
dalam wadah penampung dalam waktu kurang lebih 24 jam.
Uji Alkaloid, Ekstrak di masukan dalam tabung reaksi sebanyak 1-2 ml kemudian
ditambahkan Hcl encer dan pereaksi (uji mayer, uji dragendorf dan uji bouchardat) amati
endapan yang terjadi. Disini mendapatkan hasil yang negatif karena tidak adanya perubahan
warna, jadi menunjukkan bahwa kunyit tidak mengandung alkaloid.
Uji Tannin dan Polifenol, Ekstrak dimasukan dalam tabung reaksi 1-2 ml lalu
ditambahkan dengan larutan gelatin sebanyak yang dibutuhkan kemudian ditambahkan larutan
feriklorida Fecl3 1 % diamati perubahan yang terjadi. Apa bila terbentuk warna hijau sampai
biru kehitaman berarti positif fenolik. Disini menunjukkan hasil yang positif karena terjadi
perubahan warna biru kehitaman, jadi menunjukkan bahwa kunyit mengandung tannin dan
polifenol.
Uji Saponin, Ekstrak ditambahkan Hcl encer kemudian dikocok beberapa menit amati
perubahan yang terjadi apabila ada buih setinggi 1cm dalam beberapa menit tidak hilang maka
berarti positif adanya saponin karena terjadinya perubahban warna kejingga, jadi menunjukkan
bahwa kunyit positif mengandung saponin.
Uji Steroid, Ekstrak ditambah kloroform lalu ditambah 3 tetes asam asetat dan 1 tetes
H2SO4 pekat lalu kocok perlahan dan amati perubahan yang terjadi. Menunjukkan hasil yang
negatif karena tidak adanya perubahan warna pada sample.