PENGECATAN SEDERHANA

I. Landasan Teori :

Pengecatan mempunyai maksud supaya sel-sel dan struktur sel-sel dapat dilihat dengan
jelas. Untuk itu harus dilakukan pemilihan cat, bahan penguat dan bahan pelentur yang tepat.
Sejak tahun 1875 Weigert telah menggunakan cat aniline untuk pengecatan bakteri dan
sel-sel jaringan, kemudian menyusul Koch dan Ehrlich.
Menurut Ehrlich cat aniline dibedalan menjadi 4 macam yaitu cat anilne basa, asam, netral, dan
indifferent.
Pengecatan sederhana adalah pengecatan yang dilakukan dengan menggunakan satu
macam cat. Lamanya pengecatan antara 1-3 menit, tergantung dari jenis cat yang digunakan.

II. Tujuan Praktikum :

a. Terampil dalam pembuatan preparat
b. Melihat bentuk dan warna bakteri

III. Alat dan Bahan :

a. Alat : Ose, Lampu spiritus/ Lampu bunchen, Jembatan pengecatan,
b. Bahan - Cat :
1. Solutio Methyleen Blue
2. Loefler Methyleen Blue
3. Manson’s Methyleen Blue
Sebelum dipakai diencerkan terlebih dahulu 10x dan lamanya pengecatan 1 menit.
4. Carbol Gentian Violet ( Gram A )
5. Carbol Fuchin ( ZN A )
6. Minyak imersi / immersion oil
7. Air Garam fisiologis 0,85% ( NaCl 0,85% )/ Aquadest steril
8. Obyel Glass
9. Tisue
c. Bahan Pemeriksaan / sampel : Sputum ( dahak ), koloni bakteri, swab.

IV. Cara Kerja :

1
 a. Bersihkan obyek glass dengan tissue untuk menghilangkan lemak yang ada.
b. Fiksasi obyek glass dengan melidah apikan di atas lampu spiritus lebih kurang 3 kali dan
bolak-balik
c. Pada ujung obyek glass ( seperti bunga es ) diisi nomor/ tanda yang disepakati dengan
pensil glass
d. Ambil ose dan fiksasi di atas lampu spiritus sampai merah, kemudian dinginkan
e. Bila sampel cair, ambil dengan ose tersebut dan langsung dihapuskan pada obyek glass
secara merata dengan luas lbk 1 cm2
f. Bila sampel koloni, ambil NaCl dengan ose dan teteskan di atas obyek glass secukupnya.
g. Ambil koloni bakteri dengan cara menggoreskan ose di dasar koloni tanpa melukai media
tumbuhnya.
h. Campur koloni tersebut dengan memutar ujun ose tersebut, sehingga koloni bercampur
secara merata.
i. Fiksasi sebentar di atas lampu spiritus agar lebih cepat keringnya.
j. Teteskan cat yang digunakan dengan menutup seluruh permukaan hapusan
k. Tunggu 1 menit selanjutnya dicuci dengan air mengalir tidak langsung dengan posisi
preparat miring
l. Preparat dikeringkan di udara / diangin-anginkan

V. Pembacaan :
a. Teteskan minyak imersi 1-2 tetes pada preparat
b. Tempatkan preparat di atas meja benda mikroskop secara benar
c. Atur obyektif dari mikroskop 10x dan okuler 10x
d. Atur okuler agar sejajar dengan ke dua mata
e. Cari lapang pandang dengan menaikkan atau menurunkan meja benda sampai ketemu
bayangan kasar berwarna sesuai warna cat yang digunakan
f. Bila sudah ketemu lapang pandang, naikkan kondensor dan pasang obyektif 100x,
perhatikan lapang pandang tersebut.

VI. Hasil Pembacaan :

2
Bentuk bakteri : Batang ( Basil ) , Kokus, Spiral dengan warna dasar sesuai cat yang
digunakan