Mikroskop Fase

Kontras
Nama Anggota Kelompok :
 I Made Yogi Hardiyanta NIM: P07134220044
 I Gede Yudi Kristiawan NIM: P07134220045
 Sukmagita Utari NIM: P07134220060
 Ni Putu Intan Maha Ayu Diyanti NIM: P07134220067
 I Nyoman Widi Juniada Putra Sutha NIM: P07134220068
 I Made Krisna Paramartha NIM: P07134220075
Definisi
• Mikroskopi kontras fase, pertama kali
dijelaskan pada tahun 1934 oleh fisikawan
Belanda Frits Zernike, adalah teknik optik
peningkat kontras yang dapat digunakan
untuk menghasilkan gambar spesimen
transparan dengan kontras tinggi, seperti sel
hidup (biasanya dalam kultur),
mikroorganisme, irisan jaringan tipis , pola
litograf, serat, dispersi lateks, pecahan kaca,
dan partikel subseluler (termasuk inti dan
organel lainnya)
• Mikroskopi kontras fase adalah teknik
mikroskop optik yang mengubah pergeseran
fase dalam cahaya yang melewati spesimen
transparan menjadi perubahan kecerahan
pada gambar
Fungsi Mikroskop Kontras Fase
 Untuk memproduksi bayangan specimen yang
transparan dan berkontras tinggi,
 Untuk mempermudah identifikasi bagian yang
biasanya tidak terlihat pada mikroskop biasa
 Memberikan pengamatan terhadap specimen
dengan resolusi tinggi sehingga mempermudah
proses pengamatan
Prinsip Mikroskop Kontras Fase
 Ketika cahaya melewati sel, terjadi pergeseran fase kecil,
yang tidak terlihat oleh mata manusia. Dalam mikroskop
kontras fase, pergeseran fase ini diubah menjadi perubahan
amplitudo, yang dapat diamati sebagai perbedaan kontras
gambar.
 Dalam mikroskop fase kontras, kontras gambar ditingkatkan
dengan dua cara: dengan menghasilkan interferensi
konstruktif antara sinar cahaya latar dan tersebar di wilayah
bidang pandang yang berisi spesimen, dan dengan
mengurangi jumlah cahaya latar yang mencapai bidang
gambar.
Pertama, cahaya latar digeser-fasa sebesar −90 ° dengan
melewatkannya melalui cincin pergeseran fasa, yang
menghilangkan perbedaan fasa antara latar belakang dan
sinar cahaya yang tersebar.
Ketika cahaya kemudian difokuskan pada bidang gambar (di
mana kamera atau lensa mata ditempatkan), pergeseran fase ini
menyebabkan latar belakang dan sinar cahaya tersebar yang
berasal dari daerah bidang pandang yang berisi sampel (yaitu,
latar depan) mengganggu secara konstruktif , menghasilkan
peningkatan kecerahan area ini dibandingkan dengan wilayah
yang tidak memiliki sampel. 
 Dengan demikian, cahaya latar belakang akan
berada 180 ° di luar fase relatif terhadap cahaya
yang tersebar. Cahaya yang tersebar kemudian
akan dikurangi dari cahaya latar untuk membentuk
gambar dengan latar depan yang lebih gelap dan
latar belakang yang lebih terang, seperti yang
ditunjukkan pada gambar pertama. 
Bagaimana Dia Bekerja?
 Iluminasi koheren sebagian yang dihasilkan oleh lampu tungsten-
halogen diarahkan melalui lensa kolektor dan difokuskan pada anulus
khusus (anulus kondensor berlabel) yang ditempatkan di bidang fokus
depan kondensor substage.
 Muka gelombang melewati anulus menerangi spesimen dan melewati
undeviated atau difraksi dan terhambat dalam fase oleh struktur dan
gradien fase yang ada dalam spesimen.
 Cahaya yang tidak menyimpang dan terdifraksi yang dikumpulkan oleh
sasaran dipisahkan di bidang fokus belakang oleh pelat fase dan
difokuskan pada bidang gambar antara untuk membentuk gambar
kontras fase akhir yang diamati pada lensa mata.

 Tampilan obyek:
Menunjukkan perbedaan struktur internal dengan sangat jelas.
Demikian pula tepi selnya. Keunikan dari fase kontras adalah munculnya
pita cahaya mengelilingi sel yang dikenal dengan sebutan halo fase.
Bagian-Bagian Mikroskop Kontras Fase
Mikroskopi fase kontras pada dasarnya adalah mikroskop cahaya yang
dirancang khusus dengan semua bagian dasar sebagai tambahan yang
dilengkapi dengan pelat fase annular dan diafragma annular

Bagian-Bagian Umum (Mikroskop Cahaya)

 Bagian-Bagian Optik

 Lensa Okuler, yaitu lensa yang terdapat di bagian ujung atas

tabung pada gambar, pengamat melihat objek melalui lensa ini.

Lensa okuler berfungsi untuk memperbesar kembali bayangan
dari lensa objektif. Lensa okuler biasanya memiliki perbesaran 6,
10, atau 12 kali.
 Lensa Objektif, yaitu lensa yang dekat dengan objek. Biasanya
terdapat 3 lensa objektif pada mikroskop, yaitu dengan
perbesaran 10, 40, atau 100 kali. Saat menggunakan lensa
objektif pengamat harus mengoleskan minyak emersi ke bagian
objek, minyak emersi ini berfungsi sebagai pelumas dan untuk
memperjelas bayangan benda, karena saat perbesaran 100 kali,
letak lensa dengan objek yang diamati sangat dekat, bahkan
kadang bersentuhan.
 Kondensor, yaitu bagian yang dapat diputar naik turun yang
berfungsi untuk mengumpulkan cahaya yang dipantulkan oleh
cermin dan memusatkannya ke objek.
 Diafragma, yaitu bagian yang berfungsi untuk mengatur banyak
sedikitnya cahaya yang masuk dan mengenai preparat.
 Cermin, yaitu bagian yang berfungsi untuk menerima dan
mengarahkan cahaya yang diterima. Cermin mengarahkan cahaya
dengan cara memantulkan cahaya tersebut.
 Bagian-Bagian Mekanik (Non-Optik)
 Revolver, yaitu bagian yang berfungsi untuk mengatur perbesaran lensa objektif
yang diinginkan.
 Tabung Mikroskop, yaitu bagian yang berfungsi untuk menghubungkan lensa
objekti dan lensa okuler mikroskop.
 Lengan Mikroskop, yaitu bagian yang berfungsi untuk tempat pengamat
memegang mikroskop.
 Meja Benda, yaitu bagian yang berfungsi untuk tempat menempatkan objek
yang akan diamati, pada meja benda terdapat penjepit objek, yang menjaga
objek tetap ditempat yang diinginkan.
 Makrometer (pemutar kasar), yaitu bagian yang berfungsi untuk menaikkan
atau menurunkan tabung secara cepat untuk pengaturan mendapatkan
kejelasan dari gambaran objek yang diinginkan.
 Mikrometer (pemutar halus), yaitu bagian yang berfungsi untuk menaikkan atau
menurunkan tabung secara lambat untuk pengaturan mendapatkan kejelasan
dari gambaran objek yang diinginkan. 
 Kaki Mikroskop, yaitu bagian yang berfungsi sebagai penyagga yang menjaga
mikroskop tetap pada tempat yang diinginkan, dan juga untuk tempat
memegang mikroskop saat mikroskop hendak dipindahkan.
Bagian-Bagian Mikroskop Kontras Fase
 Diafragma annular

 Letaknya di bawah kondensor.

 terdiri dari cakram melingkar yang memiliki alur

melingkar
 Sinar cahaya dibiarkan melewati alur annular.

 Melalui alur annular dari diafragma annular, sinar

cahaya jatuh pada spesimen atau objek yang akan

dipelajari.
 Di bidang fokus belakang objek mengembangkan

gambar.
 Pelat fase annular ditempatkan pada bidang fokus

belakang ini.
 Pelat fase
 Ini adalah pelat fase negatif yang memiliki luas lingkaran tebal
atau pelat fase positif yang memiliki alur melingkar tipis.
 Area tebal atau tipis pada pelat fase ini disebut area konjugasi.
 Pelat fase adalah cakram transparan.
 Dengan bantuan diafragma annular dan pelat fase, kontras fase
diperoleh di mikroskop ini.
 Ini diperoleh dengan memisahkan sinar langsung dari sinar
yang terdifraksi.
 Sinar cahaya langsung melewati alur annular sedangkan sinar
cahaya yang terdifraksi melewati wilayah di luar alur.
 Bergantung pada indeks bias yang berbeda dari komponen sel
yang berbeda, objek yang akan dipelajari menunjukkan tingkat
kontras yang berbeda pada mikroskop ini.
Kelebihan Dan Kekurangan
Mikroskop Kontras Fase
 Kelebihan:
 Sel hidup dapat diamati dalam keadaan alaminya tanpa fiksasi atau
pelabelan sebelumnya.
 Itu membuat objek yang sangat transparan lebih terlihat.
 Tidak diperlukan persiapan khusus untuk fiksasi atau pewarnaan, dll.
Yang diperlukan untuk mempelajari objek di bawah mikroskop kontras
fase yang menghemat banyak waktu.
 Memeriksa komponen intraseluler sel hidup pada resolusi yang relatif
tinggi. misalnya: Motilitas dinamis mitokondria, kromosom mitosis &
vakuola.
 Ini memungkinkan para ahli biologi untuk mempelajari sel-sel hidup
dan bagaimana mereka berkembang biak melalui pembelahan sel.
 Komponen optik kontras fase dapat ditambahkan ke hampir semua
mikroskop medan terang, asalkan tujuan fase khusus sesuai dengan
parameter panjang tabung, dan kondensor akan menerima cincin fase
annular dengan ukuran yang benar.
 Kekurangan:
 Kondensor kontras fase dan lensa obyektif menambah
biaya yang cukup besar untuk sebuah mikroskop,
sehingga kontras fase sering tidak digunakan di
laboratorium pengajaran kecuali mungkin di kelas dalam
profesi kesehatan.
 Untuk menggunakan kontras fase, jalur cahaya harus
sejajar.
 Umumnya, lebih banyak cahaya diperlukan untuk
kontras fase daripada untuk tampilan bidang terang
yang sesuai, karena teknik ini didasarkan pada
pengurangan kecerahan sebagian besar objek.
 Prinsip kerja alat ini sangat rumit sehingga cukup susah
untuk digunakan.
Penggunaan Dan Perawatan
Mikroskop Kontras Fase
 Cara Penggunaan Mikroskop
a. Mencari Bidang Pengelihatan
1) Tabung dinaikkan menggunakan makrometer (pemutar
kasar), sehingga lensa objektif tidak membentur meja atau
panggung bila revolver diputar-putar.
2) Lensa objektif di tempatkan pembesaran lemah (4 X atau 10
X) dengan memutar revolver sampai berbunyi klik (posisinya
satu poros dengan lensa okuler).
3) Membuka diafragma sebesar-besarnya dengan menarik
tangkainya ke belakang.
4) Mengatur letak cermin sedemikian rupa ke arah cahaya,
sehingga terlihat lingkaran (lapangan pandang) yang sangat
terang di dalam lensa okuler. Mikroskop siap digunakan.
b. Mencari Bayangan Sediaan
1) Menaikkan tabung mikroskop menggunakan makrometer, sehingga
jarak antara lensa objektif dengan permukaan meja ± 3 cm.
2) Meletakkan sediaan yang akan diamati di tengan-tengah lubang
meja benda, menggunakan penjepit sediaan agar tidak tergeser.
3) Memutar makrometer ke belakang sampai penuh (hati-hati), sambil
menempatkan roda sediaan tepat di bawah lensa objektif, hingga
jarak antara ujung lensa objektif dengan permukaan atas kaca
penutup hanya ± 1 mm.
4) Membidik mata ke lensa okuler sambil memutar makrometer ke
depan searah jarum jam secara hati-hati sampai tampak bayangan
yang jelas.
5) Memutar revolver dan lensa objektif yang sesuai untuk
mendapatkan pembesaran yang kuat. Kemudian memainkan fungsi
mikrometer secara perlahan dan hati-hati. (Bila menggunakan lensa
objektif 100x, maka di atas sediaan perlu ditetesi minyak imersi
dahulu).
 Pemeliharaan Mikroskop
a. Mikroskop harus disimpan di tempat sejuk, kering, bebas debu dan
bebas dari uap asam dan basa.
b. Bagian mikroskop non optik, terbuat dari logam atau plastik, dapat
dibersihkan dengan menggunakan kain fanel. Untuk membersihkan
debu yang terselip di bagian mikroskop tersebut dapat digunakan kuas
kecil atau kuas lensa kamera.
c. Lensa-lensa mikroskop (okuler, objektif, dan kondensor) dibersihkan
dengan menggunakan tisue lensa yang diberi alkohol 70%. Jangan
sekali-kali membersihkan lensa menggunakan sapu tangan atau lap
kain.
d. Sebelum menyimpan mikroskop, bersihkan selalu mikroskop tersebut,
terutama hapus semua minyak imersi di permukaan lensa, sehingga
partikel yang halus tidak menempel dan menggumpal serta mengering.
Sisa minyak imersi pada lens objektif dapat dibersihkan dengan xilol
(xylene).
e. Sebelum menyimpan mikroskop, meja mikroskop diatur lagi dan lensa
objektif dijauhkan dari meja preparat dengan memutar alat
penggeraknya ke posisi semula, kondensor diturunkan kembali, lampu
dikecilkan intensitasnya lalu dimatikan (kalau mikroskop listrik).
Terima Kasih