AIRLANGGA MEDICAL SCIENTIFIC WEEK 2017

AKTIVITAS ANTIBIOFILM BEBERAPA TANAMAN HERBAL

SEBAGAI ALTERNATIF SOLUSI RESISTENSI ANTIBIOTIK PADA
TUBERKULOSIS
Ziana Alawiyah1, Layalia Azka Fatharani2, Nabilah Hanna P3, Dwi Utami Anjarwati4
1
Kedokteran Umum, Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman, ziana.alawiyah@gmail.com
2
Kedokteran Umum, Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman, layazkafatha@gmail.com
3
Kedokteran Umum, Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman,hanna.madeslan.malik@gmail.com
4
Departemen Mikrobiologi, Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman-RS Margono Soekarjo,
dzikrarana@gmail.com

ABSTRAK

Latar belakang: Tuberkulosis merupakan penyakit menular yang masih menjadi

masalah global hingga abad ke-21. Tantangan manajemen TB semakin kompleks
sejak munculnya resistensi antibiotik. Diperkirakan insidensi multidrug-resistant
tuberculosis (MDR-TB) pada tahun 2015 sebesar 480.000 kasus. Hingga kini,
keberhasilan penanganan resistensi antibiotik dinilai belum memuaskan sehingga
kehadiran obat baru yang efektif masih diperlukan. Patofisiologi resistensi antibiotik
melibatkan pembentukan biofilm sebagai pertahanan utama 99% patogen di dunia,
termasuk Mycobacterium tuberculosis. Tujuan: Mengulas mekanisme inhibisi
pembentukan biofilm oleh lima tanaman herbal, yakni Vanilla planifolia, Sesamum
indicum, Parinari curatellifolia, Allium sativum, dan Curcuma longa sebagai solusi
manajemen resistensi antibiotik pada tuberkulosis. Metode Penulisan: Studi ini
mengkaji lima tanaman herbal dari beberapa penelitian in vitro terkait aktivitas
antibiofilm pada Mycobacterium tuberculosis atau Mycobacterium smegmatis
berdasarkan senyawa alami yang dimiliki. Hasil: Mekanisme antibiofilm dari
senyawa natural tanaman herbal meliputi tiga proses: menghambat sintesis bahan
baku biofilm, menurunkan daya adesi komponen biofilm, dan menghancurkan biofilm
yang telah terbentuk. Kesimpulan: Senyawa alami dari Vanilla planifolia, Sesamum
indicum, Parinari curatellifolia, Allium sativum, dan Curcuma longa memiliki
pengaruh signifikan dalam patofisiologi resistensi antibiotik pada tuberkulosis.

Kata kunci:Biofilm, Resistensi Antibiotik,Tanaman Herbal, Tuberkulosis

1
PENDAHULUAN
Tuberkulosis (TB) merupakan
penyakit menular akibat infeksi
Mycobacterium tuberculosis (Mtb) yang
masih menjadi masalah global hingga abad
ke-21. Berdasarkan data statistik WHO,
10.4 juta orang menderita tuberkulosis dan
1.8 juta diantaranya meninggal pada tahun
2015. Angka morbiditas dan mortalitas
yang tinggi menyebabkan WHO
menempatkan tuberkulosis sebagai satu
dari 10 kasus paling mematikan di dunia.
Penderita tuberkulosis mampu
menyebarkan infeksi setidaknya pada 10-
15 orang di sekitarnya per tahun[1].
Penyebaran penyakit TB terjadi
melalui droplet berisi M.tuberculosis yang
dikeluarkan penderita saat bersin, batuk,
berbicara, atau meludah. Mtb dalam
droplet mampu bertahan dalam hitungan
menit atau jam setelah pegeluaran. Jumlah
Mtb dalam droplet, virulensi, paparan
terhadap sinar UV, kerentanan host,
derajat kontak dengan penderita, dan
ventilasi yang buruk mempengaruhi
transmisi Mtb. Individu di sekitar
penderita akan tertular apabila menghirup
udara yang terkontaminasi. Masuknya Mtb
ke dalam paru menyebabkan infeksi pada
sistem respirasi. Bagaimanapun, Mtb dapat
bermetastasis ke area tubuh yang lain,
seperti sistem limfatik, pleura, tulang,
sendi, atau meninges dan menyebabkan
TB ekstrapulmonal[2,3].
Pasien dengan TB paru akan
mengeluhkan batuk, demam, dan
penurunan berat badan yang berlangsung
kurang lebih 3 minggu. Batuk bersifat
kering dengan sputum purulen, terkadang
disertai batuk darah dan nyeri dada. Jika
kondisi memburuk tak jarang pasien
mengalami sesak napas, penurunan
produktivitas, atau gejala lain sesuai lokasi
tubuh yang terserang[4]. Hasil radiografi
pasien TB aktif memberikan gambaran
infiltrat dengan rongga di lobus superior
dan medial. Namun, penampakan
radiografi abnormal demikian tidak
spesifik menegakkan diagnosis TB.
Diagnosis definitif TB adalah apabila
menjumpai Mtb pada kultur spesimen
(sputum) yang diperiksa. Jika hasil
pemeriksaan positif, maka pasien wajib
minum obat setiap hari selama 6 bulan[2].
Tantangan manajemen TB semakin
kompleks sejak munculnya resistensi
antibiotik. Kompleksitas itu dibuktikan
dengan evolusi resistensi obat TB yang
terus berlanjut mulai dari mono drug
resistant menjadi multidrug resistant
(MDR), extensively drug resistant (XDR),
bahkan total drug resistant (TDR)[5,6].
Diperkirakan insidensi multidrug-resistant
tuberculosis (MDR-TB) pada tahun 2015
sebesar 480.000 kasus dan setengah dari
jumlah tersebut meninggal dunia[1]. Selain
itu, suatu studi menilai keberhasilan
penanganan XDR-TB dan TDR-TB belum
memuaskan, sehingga kehadiran obat baru
yang efektif masih sangat diharapkan[5].
Hingga kini, mekanisme resistensi
antibotik oleh Mtb masih menjadi
perhatian para ilmuan. Walaupun sebagian
besar patomekanisme spesifiknya belum
terjawab tuntas, beberapa studi mencoba
menjelaskan keterkaitan formasi biofilm
terhadap kronisitas dan persistensi
penyakit tuberkulosis[7]. Hampir 80%
mikroba mampu membentuk biofilm,
yakni komunitas sel bakteri yang
dilindungi matrix. Strukturnya yang
kompleks memberikan perlindungan pada
bakteri patogen sehingga mencegah
penetrasi antibiotik[8]. Mtb mempunyai
beberapa karakteristik layaknya organisme
penghasil biofilm, meliputi persistensi
infeksi yang tinggi, fenotip resistensi
antibiotik, memodulasi imun host, dan
mampu membentuk clump atau gumpalan
dalam granuloma. Karakteristik tersebut
telah terbukti pada studi in vivo
menggunakan zebrafish[9,10].
Strategi pembentukan biofilm oleh
Mtb diawali dengan menginvasi makrofag.
Faktor stres seperti rendahnya oksigen
maupun nutrisi memicu mycobacteria
berada pada fase dorman dan membentuk
biofilm di dalam makrofag [11]. Sebuah
penelitian in vitro membuktikan bahwa
2
intracellular thiol reductive stress (TRS) terbukti menghambat pembentukan
menginduksi formasi biofilm pada Mtb biofilm oleh mycobacteria. Maka dari itu,
melalui peningkatan produksi selulosa literature review ini membahas
sebagai komponen utama biofilm[12]. mekanisme inhibisi formasi biofilm oleh
Selain selulosa, kondisi lingkungan yang masing-masing senyawa herbal yang
sesuai dan ketersediaan bahan baku dimiliki kelima spesies tersebut sebagai
lainnya seperti Fe, Zn, asam mikolat, serta prospek terapi resistensi antibiotik pada
CO2 juga mendukung pembentukan tuberkulosis.
biofilm Mtb[13]. Oleh karena itu, substansi
yang memiliki kemampuan menghambat METODE PENULISAN
proses pembentukan biofilm berpotensi
menjadi alternatif dalam mengatasi Literatur yang menunjang informasi
resistensi antibiotik pada tuberkulosis. merupakan hasil penelusuran online jurnal
Kesadaran akan bahaya dan efek berbahasa Inggris di PubMed Database
samping obat sintetis sedikit demi sedikit dari tahun 2007 hingga 2017. Literature
menggeser perhatian kepada tanaman review ini mengkaji lima tanaman herbal
herbal sebagai terapi alternatif. Beragam dari beberapa penelitian in vitro terkait
fitokimia pun telah diuji dan dimanfaatkan mekanisme antibiofilm pada
sebagai medikamentosa. Beberapa Mycobacterium tuberculosis atau
senyawa herbal seperti Vanilla planifolia, Mycobacterium smegmatis berdasarkan
Sesamum indicum, Parinari curatellifolia, senyawa alami yang dimiliki.
Allium sativum, dan Curcuma longa telah

Tabel 1. Hasil penelitian efek antibiofilm oleh senyawa tanaman herbal

Tanaman Herbal Senyawa Mekanisme Referensi

Vanilla planifolia Vanillin (Van) Menghambat adesi sel Sharma et al. [14]
Sesamum indicum Sesamol (Ses) Menghambat adesi sel Hans et al. [15]
Parinari curatellifolia Saponin, Menghambat adesi sel dan Bhunu et al. [16]
steroid, tannin, transportasi protein
dan falvonoid
Allium sativum Allicin, Ajoene Menghambat adesi sel, Hannan et al. [17]
sintesis polisakarida dan asam
mikolat, serta pematangan
biofilm
Curcuma longa Curcumin Merangsang autofagi dan Bai et al. [18]
apoptosis

HASIL DAN DISKUSI dominan pada patomekanisme resistensi

antibiotik karena tersusun atas kompleks
Senyawa dari beberapa tanaman matrix berupa polisakarida, DNA, RNA,
herbal telah menunjukkan efek lipid, dan protein yang membangun
menguntungkan pada patofisiologi pertahanan baik fisik maupun fisiologis
resistensi antibiotik, terutama pada bagi Mtb[7,8]. Masing-masing senyawa
penyakit Tuberkulosis. Salah satu herbal menghadirkan ciri khasnya dalam
mekanisme resistensi antibiotik yang menghambat pembentukan biofilm.
menjadi target senyawa tersebut adalah Penelitian Sharma, Rahul, Saif, dan
pembentukan biofilm oleh bakteri patogen Zeeshan (2016) membuktikan bahwa
Mycobacterium tuberculosis (Mtb). vanillin (Van), senyawa aktif fenol aldehid
Biofilm bertindak sebagai faktor virulensi dari biji polong Vanilla planifolia
3
berkemampuan menghambat pembentukan
biofilm oleh Mycobacterium sebesar
64.96%. Metode biofilm-formation assay
dengan crystal violet dye dilakukan untuk
uji kualitatif dan kuantitatif. Derajat
perlekatan antar sel sebagai kontributor
dominan dalam pembentukan biofilm juga
dievaluasi dengan bantuan polystyrene dan
sel epitel manusia sebagai media
perlekatan. Efek antimikobakteria Van
lainnya turut mendukung inibisi biofilm
seperti meningkatkan permeabilitas sel
melalui hidrolisis nitrocefin sehingga
memudahkan administrasi obat serta
menurunkan aktivitas ferroxidase sehingga
mengurangi kadar Fe bebas yang
diperlukan untuk metabolisme bakteri[14].
Mekanisme serupa terlihat pada riset
yang dilakukan Hans, Sharda, Saif, dan
Zeeshan pada tahun 2017 mengenai
sesamol (Ses), senyawa fenol alami dari
minyak wijen (Sesamum indicum). Riset
ini menjelaskan pengaruh signifikan Ses
dalam menghambat adesi antar sel yang
dibuktikan dengan adanya penurunan
aktivitas metabolik (70%) dan berat kering
biomassa biofilm (58%). Sama seperti
penelitian sebelumnya, sejumlah
kemampuan antimikobakteria berhasil
dievaluasi. Perubahan permukaan sel pasca
administrasi Ses menyebabkan
abnormalitas morfologi koloni, motilitas,
serta kecepatan sedimentasi bakteri.
Penurunan integritas membran sel turut
meningkatkan sensitivitas sel dan aktivitas
lipase sehingga mempercepat destruksi
dinding sel bakteri. Efek lain Ses seperti
meningkatkan produksi ROS dan
mengganggu homeostasis Fe secara tidak
langsung juga menghambat formasi
biofilm[15].
Studi in vitro lain dilakukan oleh
Bhunu, Ruvimbo dan Stanley (2017) yang
memanfaatkan ekstrak daun Parinari
curatellifolia, terutama etanol. Ekstrak
tersebut terbukti menghambat biofilm
dengan menurunkan kemampuan adesi
bakteri, enzim, dan selubung sel serta
menghambat transport protein. Senyawa
yang terkandung pada Parinari
curatellifolia meliputi steroid, tannin,
falvonoid, dan saponin. Kandungan
Parinari curatellifolia yang dominan
berperan dalam menghambat formasi
biofilm oleh mycobacteria belum
ditentukan sehingga diperlukan studi lebih
lanjut[16].
Ketiga studi terkait Van, Ses, dan
ekstrak etanol P.curatellifolia tidak
menggunakan Mycobacterium tuberculosis
sebagai objek penelitian, melainkan
menggunakan Mycobacterium smegmatis
karena mirip dengan M. tuberculosis dan
lebih aman. Penelitian Allium sativum oleh
Kannan et al. tahun 2016 lebih memilih
menggunakan M.bacterium karena hendak
menilai secara langsung aktivitas A.
sativum dalam isolat MDR dan non MDR
TB. Hasil eksperimen menyatakan bahwa
ethanol garlic extract (EGE) mampu
belawan MDR maupun non MDR TB
dengan minimum inhibitory concentration
(MIC) 1.0-3.0 mg/ml. Efek EGE terhadap
kedua isolat tidak jauh berbeda karena A.
sativum memiliki multifaktor yang mampu
bekerja sekaligus dibandingkan dengan
obat standar yang memiliki faktor tunggal.
Beberapa komponen A. sativum yang
dominan adalah Allicin dan Ajoene.
Allicin menghambat enzim grup SH (sulf-
hydryl) dan enzim-enzim yang bergantung
pada Thiol. Enzim tersebut diperlukan
untuk meningkatkan perlekatan sel, sintesa
polisakarida, dan pematangan biofilm.
Ajoene bekerja dengan menghambat Inha,
sebuah protein penyusun Fatty acid
synthase system (baik FAS-1 maupun
FAS-2) yang diperlukan untuk sintesis
asam mikolat, yakni salah satu komponen
biofilm[17,19].
Curcuma longa memberikan
mekanisme antibiofilm berbeda dari
keempat spesies sebelumnya. Riset yang
dilakukan Bai et al. pada 2016 berfokus
pada mekanisme kontrol oleh curcumin
terhadap makrofag yang terinfeksi Mtb.
Curcumin merupakan salah satu senyawa
curcuminoid yang didapatkan dari ekstrak
akar Curcuma longa. Mekanisme
inhibisinya adalah menginduksi autofagi
4
dan apoptosis. Penghambatan aktivasi
Nuclear factor-kappa B (NFkB) oleh
curcumin menginduksi caspase-3-
dependent apoptosis dan autofagi. NFkB
merupakan aktivator traskripsional yang
digunakan sel kanker untuk bertahan hidup
dan proliferasi. Autofagi juga terjadi
setelah curcumin meningkatkan
konsentrasi LC3-II, yakni protein yang
penting untuk autofagi membran bakteri
sekaligus petanda autophagosome
[18]
formation .
PEMBAHASAN
Sejarah telah mengajarkan bahwa
ketika obat baru gencar digunakan dan
diikuti dengan kesalahan dalam
pemakaian, saat itulah masalah resistensi
antibioik terbentuk. Maka, diperlukan
pengkajian yang semakin memperkaya
alternatif terapi resistensi antibiotik,
terutama medikamentosa alami yang
memiliki interfensi pada patofisiologi
resistensi antibiotik, yakni pembentukan
biofilm[10,13,20].
Kebaruan literature review ini terletak
pada topik yang dipilih. Studi secara
khusus mengkaji komponen fitokimia
tanaman herbal yang telah melewati uji in
vitro dan memberikan efek antibiofilm
dalam patomekanisme resistensi obat
tuberkulosis. Objek penelitian yang
digunakan pada jurnal referensi hanya
Mycobacterium tuberculosis atau
Mycobacterium smegmatis. Antibiofilm
menjadi fokus utama target terapi karena
berkontribusi dalam proses toleransi obat
secara persisten dan kronik pada
kebanyakan bakteri patogen dan bakteri
oportunistik[7].
Berdasarkan penelusuran literatur
yang telah dilakukan, ditemukan lima
tanaman yang telah teruji secara in vitro
dan memiliki efek antibiofilm dengan
beberapa mekanisme berbeda. Vanilla
planifolia, Sesamum indicum, Parinari
curatellifolia menunjukkan aktivitas
antibiofilm melalui pengambatan adesi sel
atau saat berlangsungnya formasi biofilm.
Curcuma longa berperan setelah biofilm
terbentuk, yakni dengan merangsang
penghancuran biofilm. Allium sativum
memberikan efek sebelum dan saat
pembentukan biofilm, yakni dengan
mengambat pembentukan bahan baku
biofilm (terutama polisakarida),
menurunkan adesi sel, dan menghambat
pematangan biofilm[14–18].
Walaupun begitu, tidak semua peneliti
yang bersangkutan menjelaskan
mekanisme antibiofilm senyawa fitokimia
yang diuji. Ada kalanya tambahan literatur
diperlukan untuk melengkapi infomasi
mengenai mekanisme antibiofilm oleh
tanaman herbal terkait. Spesifisitas
senyawa yang berperan juga belum
sepenuhnya ditetapkan. Selain itu, satu
dari lima spesies dalam literature review
ini belum menjelaskan senyawa spesifik
yang berperan karena belum melaksanakan
uji lebih lanjut.
KESIMPULAN DAN SARAN
Telah terbukti bahwa Vanilla
planifolia, Sesamum indicum, Parinari
curatellifolia, Allium sativum, dan
Curcuma longa memiliki efek antibiofilm
yang memegang kunci patofisiologi
resistensi antibiotik pada tuberkulosis
melalui jalur inhibisi penyediaan bahan
baku dan pembentukan biofilm serta jalur
penghancuran. Studi lebih lanjut perlu
mengkaji efek antibiofilm dari senyawa
spesifik spesies herbal secara in vivo dan
membandingkan efektivitas masing-
masing senyawa untuk menentukan agen
dengan efek antibiofilm terbaik.
REFERENSI
1. States M, Nations U, States M,
United J, Programme N, Tb H, et al.
Chapter 1 :: Introduction Chapter
2 :: A new era of global TB
monitoring. 2016. 5-130 p.
2. Article C. Tuberculosis:
Pathophysiology, Clinical Features,
and Diagnosis. 2009;29(2).
5
3. Lewinsohn DM, Leonard MK, Russell DG. Intracellular
Lobue PA, Cohn DL, Daley CL, Mycobacterium tuberculosis
Desmond E, et al. Official Exploits Host-derived Fatty Acids
American Thoracic Society / to Limit Metabolic Stress * □.
Infectious Diseases Society of 2013;288(10):6788–800.
America / Centers for Disease 12. Trivedi A, Mavi PS, Bhatt D,
Control and Prevention Clinical Kumar A. Thiol reductive stress
Practice Guidelines : Diagnosis of induces cellulose-anchored biofilm
Tuberculosis in Adults and formation in Mycobacterium
Children. 2017;64:1–33. tuberculosis. 2016;
4. Barker RD. Clinical tuberculosis 13. Ojha AK, Baughn AD, Sambandan
Key points. Medicine (Baltimore) D, Hsu T, Trivelli X, Guerardel Y,
[Internet]. 2016;1–6. Available et al. Growth of Mycobacterium
from: tuberculosis biofilms containing
http://dx.doi.org/10.1016/j.mpmed.2 free mycolic acids and harbouring
016.03.002 drug-tolerant bacteria.
5. Remuiñán MJ, Richards C, Rullas J, 2008;69(May):164–74.
Vázquez-muñiz MJ, Woldu E. 14. Sharma S, Pal R, Hameed S, Fatima
Mycobacterium tuberculosis Gyrase Z. Antimycobacterial mechanism of
Inhibitors as a New Class of vanillin involves disruption of cell-
Antitubercular Drugs. surface integrity, virulence
2015;59(4):1868–75. attributes, and iron homeostasis. Int
6. Velayati AA, Masjedi MR, Farnia J Mycobacteriology [Internet].
P, Tabarsi P, Ghanavi J, Ziazarifi 2016;5(4):460–8. Available from:
AH, et al. Emergence of New http://dx.doi.org/10.1016/j.ijmyco.2
Forms of Totally Drug-Resistant 016.06.010
Tuberculosis Bacilli. Chest 15. Hans S, Sharma S, Hameed S,
[Internet]. 2009;136(2):420–5. Fatima Z. Sesamol exhibits potent
Available from: antimycobacterial activity:
http://dx.doi.org/10.1378/chest.08- Underlying mechanisms and impact
2427 on virulence traits. J Glob
7. Russell DG, Russell DG, Barry CE, Antimicrob Resist [Internet].
Flynn JL. Tuberculosis : What We 2017;10:228–37. Available from:
Don ’ t Know. 2013;852(2010). http://linkinghub.elsevier.com/retrie
8. Hett EC, Rubin EJ. Bacterial ve/pii/S2213716517301212
Growth and Cell Division : a 16. Bhunu B, Mautsa R,
Mycobacterial Perspective. Mukanganyama S. Inhibition of
2008;72(1):126–56. biofilm formation in
9. Clay H, Volkman HE, Mycobacterium smegmatis by
Ramakrishnan L. Tumor necrosis Parinari curatellifolia leaf extracts.
factor signaling mediates resistance BMC Complement Altern Med
to mycobacteria by inhibiting [Internet]. 2017;17(1):285.
bacterial growth and macrophage Available from:
death. Immunity. 2008 http://bmccomplementalternmed.bio
Aug;29(2):283–94. medcentral.com/articles/10.1186/s1
10. Connolly LE, Edelstein PH, 2906-017-1801-5
Ramakrishnan L. Why Is Long- 17. Hannan A, Ikram Ullah M, Usman
Term Therapy Required to Cure M, Hussain S, Absar M, Javed K.
Tuberculosis ? 2007;4(3). Anti-mycobacterial activity of garlic
11. Lee W, Vanderven BC, Fahey RJ, (Allium sativum) against multi-drug

6
 resistant and non-multi-drug Kadaikunnan S, Rajaram SK.
resistant mycobacterium Insilico Analysis of
tuberculosis. Pak J Pharm Sci. 2011 Phytoconstituents from Allium
Jan;24(1):81–5. sativum as Potential Inhibitors of
18. Bai X, Oberley-Deegan RE, Bai A, Inha in Mycobacterium
Ovrutsky AR, Kinney WH, Weaver tuberculosis.
M, et al. Curcumin enhances human 2016;59(December):1–8.
macrophage control of 20. Ojha AK, Hatfull GF. Biofilms of
Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium tuberculosis : New
infection. Respirology. Perspectives of an Old Pathogen.
2016;21(5):951–7. 2006;
19. Kannan R, Alharbi NS,