LIPID, JUMLAH DARAH DAN FUNGSI GINJAL PADA PENYAKIT ARTERI KORONER
KRONIS DAN PENINGKATAN zxxcdr32\’;mnb [/’//,’PROTEIN C-REAKTIF SENSITIVITAS
TINGGI
kl
Abstrak
Tujuan:
Peradangan memainkan peran penting dalam atherothrombosis. Colchicine merupakan anti-
inflamasi yang dapat melemahkan proses ini. Efek obat anti inflamasi yang memberikan
perlindungan kardiovaskular terbatas pada pasien dengan respon biokimia. Oleh karena itu kami
menyelidiki apakah paparan jangka pendek terhadap kolkisin mengurangi penanda inflamasi dan
apakah perubahan laboratorium tambahan terjadi pada pasien dengan CAD kronis.
Kesimpulan:
Pada pasien dengan CAD kronis dan peningkatan hs-CRP, paparan kolkisin 0,5 mg satu bulan
sekali sehari dikaitkan dengan penurunan penanda inflamasi. Efek kecil terlihat pada jumlah sel
darah putih dan jumlah trombosit, serta penurunan kecil dalam perkiraan laju filtrasi glomerulus.
PENDAHULUAN:
Peradangan memainkan peran penting dalam patofisiologi kompleks atherothrombosis.
Bagian dari respon inflamasi mengakibatkan terjadinya kristalisasi kolesterol di kumpulan lipid
ateroma. Selain itu, kristal kolesterol dapat menembus tutup plak yang menyebabkan gangguan
langsung pada tutup. Kemokin penting dalam proses ini adalah interleukin (IL) - 1 dan kompleks
protein multimerik sitosol yang disebut inflammasomes.
Meredam respon inflamasi pada aterosklerosis dengan obat anti inflamasi memberikan hasil
yang bertentangan. Pengobatan anti-inflamasi dengan canakinumab, antibodi monoklonal
terapeutik yang menargetkan interleukin-1β, menghasilkan respons biokimia anti-inflamasi yang
dapat dideteksi dan dikaitkan dengan efek menguntungkan pada hasil klinis pada penyakit
kardiovaskular. Pengobatan dengan metotreksat dosis rendah bagaimanapun, tidak menunjukkan
respon biokimia atau klinis. Colchicine adalah obat anti-inflamasi yang sangat efektif dalam
mengurangi peradangan akibat kristal pada gout. Saat ini sedang diselidiki sebagai obat anti-
inflamasi potensial di beberapa keadaan penyakit vaskular aterosklerotik. Meskipun ada beberapa
bukti tentang kemanjuran klinisnya pada penyakit kardiovaskular, efeknya pada penanda inflamasi
di bagian hilir dapat bervariasi, dan belum diteliti pada pasien dengan penyakit arteri koroner
kronis.
Colchicine memiliki indeks terapeutik yang sempit.
Pertama, persaingan dengan obat yang metabolisme Sitokrom P450 3A4 (CYP3A4)
atau P-glikoprotein dapat menyebabkan penurunan kolkisin atau mengubah
farmakodinamik substrat CYP3A4 seperti statin.
Kedua, kolkisin dalam dosis tinggi dapat memodulasi garis sel myeloid karena sifat
anti-proliferasinya.
Ketiga, kolikin relatif kontra-indikasi pada pasien dengan insufisiensi ginjal lanjut,
meskipun kemungkinan sifat reno-protektif obat semakin diteliti pada pasien dengan
penyakit ginjal.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki apakah paparan kolkisin 0,5 mg sekali sehari
selama 30 hari menyebabkan penurunan biomarker inflamasi pada pasien dengan penyakit arteri
koroner kronis dan untuk menyelidiki efek pengobatan pada fraksi lipid, indeks darah, dan fungsi
ginjal.
METODE
RANCANGAN DAN POPULASI
Kami melakukan studi klinis prospektif berlabel terbuka dengan tes darah sebelum dan
sesudah pajanan. Oleh karena itu, pasien dewasa dengan penyakit arteri koroner kronis dari tiga
rumah sakit Belanda. Rekrutmen berlangsung dari 1 Mei 2017 hingga 4 Desember 2018.
Kriteria inklusi adalah pasien memiliki CAD yang dibuktkan dengan angiografi coroner
invasive atau CT angiografi coroner dengan skor Agatston ≥ 400 unit , Hs-CRP ≥ 2mg/L dan
dianggap stabil. Kriteria eksklusi adalah GFR <30 ml/min/1,73m2 atau kreatinin serum >150 μmol /
L, menggunakan kolkisin dengan indikasi lain atau menggunakan obat CYP3A4 inhibitor
( verapamil, azitromisin, klaritromisin)
Pasien harus dirawat karena CAD kronis tanpa penyakit penyerta yang aktif, kelemahan
atau harapan hidup yang terbatas sesuai dengan kebijaksanaan dokter yang merawat mereka.
Pengobatan dengan obat anti inflamasi lain diizinkan. Obesitas didefinisikan sebagai indeks massa
tubuh 25 kg / m2 atau lebih. Diabetes didefinisikan dengan penggunaan obat antidiabetes oral atau
parenteral. Intensitas statin dikategorikan sesuai dengan pedoman American College of Cardiology
dan American Heart Association, dan statin dosis tinggi didefinisikan sebagai atorvastatin 40mg
atau setara dosis 80mg.
PENILAIAN LABORATORIUM
Sampel darah diambil sebelum dan setelah 30 hari terpapar colchicine.
Semua sampel disentrifugasi (1500xg pada 4̊C selama 15 menit) dan serum disimpan pada
-800C dalam wadah terpisah.
Kadar CRP dan IL-6 diukur di laboratorium inti pusat.
Hs-CRP diukur menggunakan kit penelitian hs-CRP Elisa (Hycult Biotech #
HK369, Uden, Belanda). Batas deteksi yang lebih rendah dari pengujian ini adalah
0.4ng / L dan koefisien variasi antar dan intra-assay masing-masing <6.9% dan
<6.3%.
Tingkat IL-6 diukur dengan immunoassay IL-6 manusia yang sangat sensitif (Sistem
R&D # D6050, Minneapolis, MN, USA) dimana koefisien variasi intra-assay dan
antar-assay berkisar dari 4,2% sampai 6,4%. Tes ini memiliki sensitivitas 0,7 pg /
mL.
Parameter hematologi ditentukan dengan XN9000 dari Sysmex (Sysmex, Kobe, Jepang).
Kolesterol LDL serum ditentukan dengan uji kolorimetri enzimatik homogen generasi
ketiga, kreatinin serum dengan uji enzimatik generasi kedua. Analisis ini dilakukan dalam
pengaturan rutin di bawah kepatuhan ISO15189.
ANALISIS STATISTIK
Kami memperkirakan bahwa menggunakan ukuran sampel 130 subjek akan memberikan kekuatan
80% untuk mendeteksi rata-rata perbedaan -1 mg / dl dalam konsentrasi hs-CRP, dengan deviasi
standar 4 mg / dl. Karena curiga data tidak berdistribusi normal maka jumlah peserta ditambah
15%.
Distribusi data ditampilkan menggunakan mean atau median dengan deviasi standar atau persentil
ke-25 dan ke-75 untuk masing-masing variabel terdistribusi normal dan tidak normal. Variabel
kategori disajikan sebagai proporsi. Perbedaan berpasangan dari parameter dievaluasi dan
disediakan dengan menggunakan mean atau median perbedaan dan confidence interval (CI) 95%
yang sesuai. Estimator Hodges-Lehmann digunakan untuk memberikan pseudo-median dan CI dari
perbedaan antara distribusi non-parametrik. Pengujian hipotesis formal dilakukan dengan
menggunakan uji-T sampel berpasangan untuk perbedaan terdistribusi normal dan Wilcoxon
Signed Rank Test dengan koreksi kontinuitas untuk perbedaan yang tidak terdistribusi normal.
Hubungan linier dari dua parameter kontinu dihitung menggunakan uji korelasi Spearman.
Untuk tujuan eksplorasi, interaksi perkiraan efek pengobatan dalam subkelompok yang dipilih diuji
menggunakan model efek campuran dengan intersep acak dan kemiringan dengan transformasi log
dari data hasil. Semua subkelompok dimasukkan dalam model akhir untuk menyesuaikan dengan
perancu.
Semua perhitungan dilakukan dengan R (The R Foundation for Statistics Computing, versi 3.6.0.
Menggunakan paket "LMER" dan "boot").
HASIL
Sampel darah tersedia pada 337 pasien. Alasan utama untuk eksklusi di mana hs-CRP <2 (n = 184)
atau intoleransi terhadap obat (n = 7), terutama dalam bentuk gangguan gastro-intestinal (Gambar
1). 138 pasien dilibatkan dalam analisis akhir.
Usia rata-rata adalah 65 tahun dan 82% adalah laki-laki (Tabel 1). Dari jumlah tersebut, 115 (83%)
memiliki sindrom koroner akut sebelumnya dengan kejadian terakhir terjadi rata-rata 23 bulan
sebelum inklusi (kisaran interkuartil [IQR] 9-76 bulan). Perokok aktif terdiri dari 14% dari
kelompok dan 20% menderita diabetes. Semua memiliki terapi antiplatelet tunggal atau ganda atau
antikoagulan, 88% diobati dengan statin dan 59% dengan statin dosis tinggi.
Biomarker inflamasi
Nilai dasar median hs-CRP adalah 4,40 mg / L (IQR 2,83-6,99 mg / L). Setelah satu bulan hs-CRP
adalah 2,33 mg / L (IQR 1,41–4,17, median perbedaan -1,66 mg / L, 95% CI -2,17 –-1,22 mg / L,
nilai p <0,01, Gambar 2) sesuai dengan perubahan median dari baseline -40% (Tabel 2, Gambar
3A). Pada 81% pasien hs-CRP menurun, dengan 36% pasien mencapai hs-CRP <2 (Gambar 3B).
Nilai dasar rata-rata IL-6 adalah 2,51 ng / L (IQR 1,59–4,32 ng / L) dan setelah satu bulan 2,22 ng /
L (median perbedaan -0,36 ng / L, 95% CI -0,70 –-0,01 ng / L, p-value 0,01), sesuai dengan
perubahan median dari baseline -16% (Gambar 3A).
Pada 57% pasien penurunan hs-CRP menunjukkan kesesuaian dengan penurunan IL-6. Secara
keseluruhan, perubahan hs-CRP menunjukkan korelasi sedang dengan perubahan IL-6 (R = 0,41, p
<0,001). Penurunan rata-rata hs-CRP dan IL6 konsisten di antara berbagai fenotipe pro-inflamasi
seperti diabetes, merokok, obesitas dan tidak tergantung pada penggunaan statin. Tidak ada
perbedaan yang signifikan dalam tingkat dasar hs-CRP atau IL-6 antara kelompok-kelompok ini.
(Tabel 3 dan Gambar 4).
Lemak
Pada awal, rata-rata kadar kolesterol LDL adalah 2,38 mmol / L. Tidak ada perubahan signifikan
yang diamati pada kadar kolesterol LDL, kolesterol total dan trigliserida (Tabel 2). Kolesterol HDL
menurun dari rata-rata 1,16 mmol / L menjadi 1,13 mmol / L (median perbedaan -0,03 mmol / L,
95% CI -0,05 hingga -0,01 mmol / L, nilai p <0,01), sesuai dengan perubahan median dari baseline
-3%.
Penanda hematologi
Tidak ada perubahan yang terlihat pada konsentrasi hemoglobin, hematokrit atau eritrosit (Tabel 4).
Volume sel rata-rata eritrosit berubah dari baseline 91,47 menjadi 91,17 femtoliter (rata-rata
perbedaan -0,35 femtoliter, 95% CI -0,68 menjadi -0,03, nilai-p 0,03).
Jumlah leukosit menurun dari median 6,99 menjadi 6,62 x 10 ^ 9 / l (rata-rata perbedaan -0,47 x 10
^ 9 / l, 95% CI –0,47 menjadi -0,74, nilai p <0,01), sesuai dengan perubahan median dari baseline
-7%. Jumlah trombosit menurun dari median 237,50 menjadi 231,00 x 10 ^ 9 / l (median perbedaan
-11,50 x 10 ^ 9 / l, 95% CI -16,50 menjadi -6,50, nilai p <0,01), sesuai dengan perubahan median
dari baseline -4%. Perubahan leukosit secara signifikan berkorelasi dengan perubahan hs-CRP (R =
0,23, p <0,001).
Fungsi ginjal
Kreatinin meningkat dari rata-rata 87,90 menjadi 89,53 μmol / L (rata-rata perbedaan 1,69 μmol /
L, 95% CI 0,10 menjadi 3,28 μmol / L, nilai-p 0,01), sesuai dengan perubahan rata-rata dari nilai
dasar 1% (Tabel 3). EGFR rata-rata yang diturunkan adalah 76,81 ml / menit / 1,73m2 pada awal
dan menurun menjadi 74,99 ml / menit / 1,73m2 setelah 30 hari (rata-rata perbedaan -1,94 ml /
menit / 1,73m2, 95% CI -3,28 hingga -0,42, p -nilai 0,01), sesuai dengan perubahan rata-rata dari
nilai dasar -2%. Gangguan ginjal ringan atau sedang (eGFR 30 sampai 60 ml / menit / 1,73m2)
terlihat pada 11% pasien pada awal dan 14% pasien pada tindak lanjut. Perubahan eGFR tidak
berkorelasi secara signifikan dengan perubahan hs-CRP (R 0,07, p = 0,435).
Diskusi
Studi ini menunjukkan bahwa pasien dengan penyakit arteri koroner kronis dan keadaan pro-
inflamasi yang ditentukan oleh hs-CRP � 2 mg / L, mengalami penurunan yang signifikan pada
hs-CRP dan IL-6 setelah satu bulan pajanan kolkisin. Tidak ada perubahan yang relevan secara
klinis dalam spektrum lipid yang diamati. Penurunan kecil dalam volume korpuskuler rata-rata
diamati, serta penurunan jumlah leukosit dan trombosit dan penurunan kecil dalam perkiraan laju
filtrasi glomerulus. Penelitian ini memperluas pengetahuan kita tentang efek antiinflamasi 0.5mg
colchi- cine sekali sehari pada pasien dengan penyakit arteri koroner kronis.
IL– 1 beta adalah biomarker upstream dari IL-6 dan ada data yang menunjukkan bahwa dosis tinggi
kolkisin dapat mengurangi pelepasan IL– 1 beta. Namun, efek tersebut belum dijelaskan pada
pasien dengan penyakit arteri koroner kronis [31]. Tidak adanya efek klinis pada kelompok
canakinumab dosis rendah dengan perubahan terkecil pada biomarker inflamasi mungkin
menunjukkan ambang batas biomarker tertentu untuk mencapai efek klinis. Hipotesis ini
selanjutnya dibuktikan dengan tidak adanya efek klinis pada pasien yang tidak mencapai tingkat
IL-6 di bawah median dalam percobaan CAN-TOS [32].
Efek ginjal
Peningkatan kecil pada kreatinin serum dan penurunan eGFR yang sesuai telah diamati. Ekskresi
kolkisin terjadi terutama melalui sirkulasi enterohepatik (80%) dan sebagian melalui ekskresi ginjal
(20%) [9,36]. Apakah pengamatan saat ini adalah efek obat langsung pada filtrasi global harus
diselidiki lebih lanjut. Analisis selanjutnya harus mencakup sejauh mana fungsi ginjal dipengaruhi
selama pemberian jangka panjang. Tidak adanya korelasi antara perubahan eGFR dan besarnya
pengurangan hs-CRP menunjukkan bahwa efek colchicine pada eGFR berbeda dari efek anti-
inflamasi colchicine dan mungkin karena efek hemodinamik langsung pada glomerulus [37,38] .
Efek lain bisa jadi efek Hawthorne, yaitu efek tidak langsung dari partisipasi percobaan. Apakah
pasien meningkatkan kepatuhan mereka dengan obat yang mempengaruhi hemodinamik
glomerulus seperti penghambat enzim pengubah angiotensin tidak dinilai dalam pengaturan
penelitian saat ini, tetapi merupakan efek yang diketahui pada peserta percobaan [39,40].
Batasan
Batasan metodologis dari penelitian kami adalah pengujian berpasangan dengan tidak adanya
kelompok kontrol paralel. Ini melekat pada desain penelitian karena merupakan bagian dari fase
run-in sebelum pengacakan tiga lokasi dalam uji klinis. Karena pemilihan hs-CRP �2, bagian dari
perubahan hs-CRP dapat dijelaskan dengan regresi ke mean atau jalur alami. Namun, perubahan
hs-CRP lebih menonjol daripada yang diamati pada kelompok plasebo dari populasi CANTOS
yang serupa (perubahan -40% pada kelompok ini versus -17% pada CANTOS), menunjukkan
penurunan CRP mungkin hanya sebagian dipengaruhi oleh pemilihan awal dan tentu saja alamiah.
Selain itu, tidak ada perubahan pada IL-6 yang terlihat pada kelompok plasebo CANTOS [7].
Akhirnya, analisis subkelompok memiliki tujuan eksplorasi saja. Karena penelitian ini tidak
dirancang untuk menilai perbedaan antara subkelompok, ukuran sampel yang terbatas
meningkatkan risiko kesalahan tipe 2 dalam pengamatan ini.
Kesimpulan
Paparan kolkisin dosis rendah selama satu bulan dikaitkan dengan penurunan penanda inflamasi hs-
CRP dan IL-6 pada pasien dengan penyakit arteri koroner kronis dan hs-CRP dasar �2 mg / L.
Sebuah efek terlihat pada perkiraan laju filtrasi glomerulus, jumlah sel leukosit dan trombosit, yang
menjamin terkontrolnya plasebo dan tindak lanjut yang lebih lama dari parameter ini. Apakah efek
anti-inflamasi dan efek lain yang diamati dalam penelitian ini hanya berkontribusi pada kolkisin
harus dikonfirmasi dalam penilaian terkontrol plasebo. Apakah efek ini diterjemahkan menjadi
manfaat klinis harus ditunggu. Pengamatan sejauh ini mendukung penelitian klinis yang sedang
berlangsung di colchicine sebagai obat anti-inflamasi pada aterosklerosis.