NAMA KELOMPOK

1. LAELA MASFUFAH
2. DYAH AYU .W.
3. EKA NOVIYANA
4. FRISKA SOFRIYANI
5. ADE NUR SAPUTRA
6. MILLA AULIA
7. MAGHFIROH
8. SISKA OKTAVIANI MAHARANI
9. NANDA TOMY
10. DIKA CHAERUNNISA
11. INTAN SABILA
12. MOCH. KHOIRUL ANAM
13. NOER ISNAINI

INDEKS MASSA TUBUH SEUMUR HIDUP DAN RISIKO

ATEROSKLEROSIS PADA ORANG DEWASA MUDA: MEMERIKSA
HUBUNGAN KAUSAL DENGAN MENGGUNAKAN PENGACAKAN
MENDELIAN DALAM RISIKO KARDIOVASKULAR PADA
PENELITIAN YOUNG FINNS

TUJUAN
Pengacakan Mendel menggunakan varian genetik yang terkait dengan faktor
risiko yang dapat dimodifikasi lingkungan dalam upaya memperbaiki inferensi
kausal dari data pengamatan. Kami meneliti efek indeks massa tubuh seumur
hidup (BMI) terhadap ketebalan medium intima media karotis dewasa (CIMT)
dan berbagai faktor risiko aterosklerotik dengan menggunakan pengacakan
Mendelian dan analisis konvensional.

METODE DAN HASIL

Sebanyak 2230 individu (1218 wanita), berusia 3-18 tahun di induksi studi,
mengikuti ujian klinis pada tahun 1980, 1983, 1986, dan terakhir tahun 2001
ketika mereka berusia 24-39 tahun. Dalam analisis ini, kami menggunakan
hubungan yang diketahui antara polimorfisme FTO rs9939609 dan IMT.
Hubungan dosis-respons antara jumlah alel A di FTO dan IMT rata-rata yang
lebih tinggi dari masa kanak-kanak hingga dewasa telah dikonfirmasi, namun
tidak ada hubungan dengan faktor pembaur potensial yang diamati. Dalam model
regresi standar, BMI seumur hidup dikaitkan dengan CIMT dewasa, tekanan
darah sistolik seumur hidup, glukosa puasa dewasa, dan indeks HOMA dewasa.
Ketika variasi FTO digunakan sebagai instrumen untuk tingkat BMI yang tidak
terbaca, efek BMI seumur hidup yang serupa atau lebih besar pada semua fenotipe
ini ditemukan, walaupun dengan interval kepercayaan yang lebih luas.

KONKLUSI
Hasil yang saling mendukung dari pengacakan Mendel dan model regresi standar
memperkuat bukti efek BMI seumur hidup terhadap risiko aterosklerosis pada
orang dewasa muda.

STUDY POPULATION
Studi Young Finns adalah studi lanjutan tentang faktor risiko kardiovaskular pada
anak-anak dan remaja Finlandia. Sampel aslinya adalah 4320 anak-anak dan
remaja Kaukasia berusia 3, 6, 9, 12, 15, dan 18 tahun yang secara acak Sampel
dari lima wilayah Finlandia menggunakan daftar nasional. Pemeriksaan dasar
dilakukan pada tahun 1980, dengan respon 83% (3596 di antaranya diundang).
Tindak lanjut dilakukan pada tahun 1983, 1986, dan yang terakhir, 2001 ketika
para peserta telah mencapai usia 24-39 tahun. 2230 individu (1012 pria dan 1218
wanita) dengan data lengkap tentang polimorfisme FTO rs9939609 dan BMI di
masa kanak-kanak dan dewasa membentuk sampel analisis saat ini (Gambar 2).
Perbedaan pada karakteristik dasar peserta dan non peserta kecil namun mencapai
signifikansi statistik karena jumlah yang besar: BMI (17,9 vs 17,8 kg / m2, P =
0,22); usia (10,7 vs 10 tahun, P <0,0001); dan seks (55% vs 45% perempuan, P
<0,0001). Studi ini dilakukan sesuai dengan pedoman deklarasi Helsinki, dan
protokol penelitian tersebut disetujui oleh komite etika lokal. Semua peserta
memberikan informed consent.

FTO- Genotyping
DNA genomik diekstraksi dari leukosit darah perifer menggunakan kit yang
tersedia secara komersial dan Workstation BioBobody M86 Chemerbobot sesuai
instruksi pabrik pembuatnya (Qiagen Inc., Hilden, Jerman). Kami genotip FTO
polimorfisme nukleotida tunggal (SNP) rs9939609 dengan menggunakan uji
nuklease 5 'dan probe TaqMan MGB spesifik fluorogenik, menggunakan Sistem
Deteksi Seismometer ABI Prism 7900HT (Biosystem Terapan, Kota Foster, CA,
AS). Sampel pipetted menggunakan otomatis TECAN Freedom EVO-100
instrumen (Tecan Group Ltd, Männedorf, Swiss). Urutan nukleotida dari primer
dan probe yang digunakan dalam polymerase chain reaction (PCR) disimpulkan
dari urutan yang dipublikasikan yang disimpan dalam database GenBank dan
Celera dan disintesis oleh Applied Biosystems. PCR yang mengandung DNA
genomik, 1 × Universal PCR Master Mix, 900 nM masing-masing primer dan 200
nM masing-masing probe dilakukan pada 384 pelat sumur dengan menggunakan
protokol standar dalam volume total 5 μL. Endpoint fluorescence diukur pasca
PCR dan pemanggilan genotipe yang dilakukan oleh modul analisis diskriminasi
allelic (perangkat lunak ABI Prism SDS, ABI, Foster City, CA, USA). Acak
duplikat digunakan sebagai kontrol kualitas. Semua genotipe dianalisis di
Departemen Kimia Klinis di Tampere University Hospital dan University of
Tampere.

Body Mass Index And Other Life Course Atherosclerotic

Langkah hidup diukur berdasarkan penilaian berulang tahun 1980 (rentang usia
peserta 3-18 tahun), 1983 (6-21 tahun), 1986 (9-24 tahun), dan 2001 (24-39
tahun), kecuali protein C-reaktif , yang dinilai hanya pada tahun 1980 dan 2001
saja. Pengukuran berat (kg) dan tinggi (mm) diperoleh dengan menggunakan
protokol penelitian standar dan digunakan untuk menghitung BMI (berat dalam kg
/ tinggi2 dalam m) .15 Pengukuran tekanan darah dilakukan dengan peserta dalam
posisi duduk setelah 5 menit. Sisanya dengan sphygmomanometer merkuri (untuk
anak berusia 3 tahun dengan alat ultrasound, Arteriosonde 1020, Roche) pada
tahun 1980, 1983, dan 1986 dan dengan sphygmomanometer nol acak (Hawksley
& Sons Ltd, West Sussex, Inggris) pada tahun 2001.16,17 Bacaan untuk jumlah
milimeter genap paling sedikit yang dilakukan setidaknya tiga kali pada masing-
masing subjek; Rata-rata pengukuran tekanan darah sistolik digunakan dalam
analisis.

Pada tahun 1980, 1983, 1986, dan 2001, semua sampel darah diambil setelah
semalam cepat dan dianalisis dalam rangkap dua di laboratorium yang sama pada
setiap kesempatan. Metoda enzimatik standar digunakan untuk kolesterol total
serum, kolesterol HDL dan trigliserida, dan konsentrasi glukosa plasma
Konsentrasi kolesterol LDL dihitung dengan menggunakan formula Friedewald.

Carotid Intima Media Thickness And Adulthood Atherosclerotic Risk

Factors
Pada tahun 2001-2002, penelitian ultrasound dilakukan dengan menggunakan
sequoia 512 mainframe ultrasound (Acuson, Mountain View, CA, USA) untuk
mengukur CIMT. Pengukuran sebelumnya telah dijelaskan secara rinci.7,19
Singkatnya, gambar difokuskan pada dinding posterior (jauh) arteri karotis kiri.
Minimal empat pengukuran dinding karotid yang umum diambil kira-kira 10 mm
proksimal terhadap bifurkasi karotis untuk mendapatkan IMT karotid rata-rata.
Pemindaian yang disimpan secara digital dianalisis secara manual oleh satu
pembaca yang buta terhadap detail subyek (M.J.). Koefisien antar variasi variasi
pengukuran IMT adalah 6,4%.
Beberapa penilaian tambahan dilakukan pada tahun 2001. Lingkar pinggang (mm,
diukur dalam rangkap dua pada tingkat rusuk atau tingkat ke dua belas dengan
pusar pada subyek kurus) dan lingkar pinggul (mm) diperoleh untuk menghitung
rasio pinggang-pinggul. Metode enzimatik standar digunakan untuk konsentrasi
glukosa plasma. Serum insulin diukur dengan kit immunoassay enzim
mikropartikel (Abbott Laboratories, Diagnostic Division, Dainabot). Resistensi
insulin diperkirakan sesuai dengan model homeostasis karena produk glukosa
puasa dan insulin dibagi dengan konstan 22,5, yaitu indeks HOMA.21
Apolipoprotein Serum A-1 dan B dianalisis secara imunoturbidometri (Orion
Diagnostica, Espoo, Finlandia).

Parental factors and adult lifestyle factors

Posisi sosioekonomi orang dewasa peserta diukur pada tahun 2001 oleh status
pekerjaan dan dikategorikan sebagai posisi sosial ekonomi orang tua. Prestasi
pendidikan dikategorikan sebagai akademik; pendidikan menengah tapi tidak
akademik; dan sekolah komprehensif sebagai tingkat pendidikan tertinggi.
Informasi tentang merokok dewasa (status dan kemasan tahun merokok) dan
konsumsi alkohol (unit per minggu) diperoleh dengan kuesioner pada tahun 2001.

Test of genotype–phenotype associations

Kami membangun ukuran fenotip seumur hidup untuk BMI, tinggi badan, tekanan
darah sistolik, kolesterol total, HDL dan LDL-kolesterol, dan protein C-reaktif
dengan menghitung nilai z standar usia (mean = 0, standar deviasi = 1) untuk
setiap umur dan untuk pria dan wanita secara terpisah dan kemudian dirata-
ratakan sepanjang usia dalam setiap ukuran dan peserta. Kami menggunakan
logaritma protein C-reaktif untuk memperbaiki distribusi miring yang positif.
Tidak ada bukti yang kuat tentang polimorfisme FTO × interaksi seks pada salah
satu ukuran fenotip (semua P> 0,11), sehingga analisis utama dilakukan untuk
pria dan wanita dalam kombinasi. Kami menggunakan analisis regresi linier untuk
mempelajari asosiasi genotip FTO yang disesuaikan usia dan jenis kelamin (per
alel A) dengan ukuran fenotip.

HASIL
Karakteristik populasi penelitian ditunjukkan pada Tabel 1. Variasi FTO
(rs9939609) tidak terkait dengan faktor pembaur potensial, seperti usia, jenis
kelamin, keadaan sosial ekonomi, pendidikan, atau perilaku berisiko (Tabel 2)
yang mendukung asumsi bahwa variasi dalam genotipe FTO tidak bergantung
pada faktor perancu potensial (jalur b pada Gambar 1). Sebaliknya, posisi sosial
ekonomi orang tua yang lebih rendah dan pencapaian pendidikan peserta yang
lebih rendah dikaitkan dengan BMI seumur hidup (P <0,05), menunjukkan bahwa
IMT yang diamati dipengaruhi oleh faktor pembaur potensial.

Gene-phenotype associations
Dari hasil dewasa, sejumlah besar alel A dikaitkan dengan IMT yang lebih tinggi
(walaupun kurang kuat dibandingkan dengan BMI seumur hidup), lingkar
pinggang yang lebih besar, dan kadar glukosa puasa yang lebih tinggi.
Penyesuaian untuk BMI dan lingkar pinggang memiliki pengaruh yang kecil
terhadap hubungan antara polimorfisme FTO dan glukosa puasa (perubahan yang
disesuaikan per alel 0,05; 95% CI, 0,01, 0,10; P = 0,03). Sejumlah alel A lebih
lemah terkait dengan CIMT yang lebih besar dan resistensi insulin yang lebih
tinggi. Perkembangan aterosklerosis lebih cepat terjadi pada pria daripada pada
wanita pra-menopause. Dalam analisis khusus seks, setiap salinan tambahan alel
A dikaitkan dengan peningkatan CIMT 0,009 mm (95% CI, 0,000, 0,017; P =
0,049) pada pria. Angka ini adalah 0,000 mm (95% CI, -0.006, 0,007; P = 0,95)
pada wanita (P untuk interaksi seks = 0,11; untuk semua asosiasi genotip lainnya,
P untuk interaksi seks melebihi 0,2). Penyesuaian untuk lingkar BMI dan lingkar
pinggang sedikit mengurangi efek genotipe FTO pada CIMT pada pria (per alel
perubahan, 0,008; 95% CI, -0.001, 0,016; P = 0,08).

Standard regression analysis and instrumental variables regression analysis

Analisis regresi standar menunjukkan adanya hubungan positif dengan BMI
seumur hidup dengan CIMT dewasa, tekanan darah sistolik seumur hidup,
glukosa dewasa, dan resistensi insulin dewasa (Tabel 4, panel atas). Dalam
analisis regresi variabel instrumental dengan polimorfisme FTO sebagai
instrumen untuk tingkat BMI seumur hidup yang tidak terkekang (jalur a pada
Gambar 1), semua efek BMI pada CIMT dan fenotip lainnya berada pada arah
yang sama namun kurang tepat diperkirakan (nilai P berkisar antara 0,02 dan
0,15). Secara umum, efeknya tampak lebih besar dalam analisis instrumental
daripada analisis regresi standar, namun hanya untuk glukosa puasa dewasa,
perbedaan ukuran efek antara kedua analisis tersebut mencapai signifikansi
statistik konvensional. Interval kepercayaan yang luas dalam analisis regresi
variabel instrumental menunjukkan bahwa data kami, walaupun ukuran
sampelnya relatif besar, memiliki keterbatasan untuk analisis variabel
instrumental. Memang, nilai F pada uji regresi tahap pertama menguji kekuatan
instrumen adalah <10 (kisaran, 7,5-9,2). Menjalankan analisis ini dengan haplotip
FTO karena instrumen tidak menyelesaikan masalah ini karena kekuatan
instrumen tidak meningkat.
DISKUSI
Penelitian ini mengambil keuntungan dari hubungan yang kuat antara FTO
polymorphism rs9939609 dan BMI untuk melakukan analisis pengacakan Mendel
tentang pengaruh BMI seumur hidup pada CIMT dan berbagai faktor risiko
aterosklerotik pada kohort orang dewasa muda. Seperti yang diharapkan, analisis
regresi standar menunjukkan bahwa BMI seumur hidup dikaitkan dengan CIMT
dewasa yang lebih besar, tekanan darah sistolik seumur hidup yang lebih tinggi,
glukosa puasa dewasa yang lebih tinggi, dan indeks HOMA yang lebih tinggi.
Ketika polimorfisme FTO digunakan sebagai instrumen untuk tingkat BMI yang
tidak dikacaukan, efek BMI seumur hidup yang serupa atau yang lebih besar pada
semua fenotipe ini ditemukan, namun untuk temuan yang kuat secara statistik,
ukuran sampel kami perlu jauh lebih besar

Kegunaan pendekatan pengacakan Mendel.

Setidaknya ada tiga isu yang menunjukkan bahwa pendekatan pengacakan
Mendelian dapat menambah bukti dari studi kohort konvensional dalam menguji
kontribusi BMI seumur hidup terhadap risiko aterosklerosis.
Pertama, mengkonfirmasikan penelitian sebelumnya, polimorfisme FTO dikaitkan
dengan IMT (jalur a pada Gambar 1) .8-11 Hubungan ini lebih kuat untuk BMI
seumur hidup daripada BMI dewasa, yang, seperti yang diharapkan, mengingat
bahwa genotipe harus memiliki umur panjang pengaruh pada tingkat faktor
risiko.35 Analisis kami dengan menggunakan genotipe FTO sebagai instrumen
untuk tingkat BMI seumur hidup oleh karena itu cenderung kurang bias oleh
atenuasi karena kesalahan daripada yang diukur pada pengukuran tunggal BMI.
Sebagai tambahan, polimorfisme FTO dikaitkan dengan BMI orang tua, seperti
yang diharapkan, mengingat bahwa keturunan berbagi semua gen dengan orang
tua mereka (50% dengan setiap orang tua). Hubungan yang sedikit lebih kuat
dengan ibu dari BMI ayah mungkin mencerminkan pengaruh intrauterine terhadap
program obesitas ibu meningkatkan risiko obesitas seumur hidup pada keturunan,
non-ayah yang menghasilkan asosiasi paternal yang dilemahkan, atau variasi acak
dalam perkumpulan.36-38
Kedua, polimorfisme FTO tidak terkait dengan faktor-faktor seperti jenis kelamin,
usia, keadaan sosial ekonomi awal atau dewasa, pencapaian pendidikan, merokok,
atau konsumsi alkohol. Dengan demikian, faktor pembaur yang umum ini tidak
mungkin mendistorsi analisis variabel instrumental mengenai pengaruh BMI pada
risiko aterosklerosis (jalur b pada Gambar 1), seperti yang telah ditunjukkan
sebelumnya.39 Ketiga, karena genotipe FTO menentukan peningkatan risiko IMT
yang lebih tinggi. tingkat dari kehidupan awal dan seterusnya, reverse causality
dimana atheroma subklinis mempengaruhi tingkat faktor risiko sebagian besar
dihilangkan.
Pemahaman lengkap tentang fungsi gen FTO sedang menjalani eksplorasi lebih
lanjut. Namun, diabetes tipe 2 dan tipe 2 yang tinggi berkontribusi pada
perubahan vaskular aterosklerotik, 40-43 dan efek aditif varian FTO rs9939609
pada BMI telah direplikasi setidaknya pada 13 studi populasi independen yang
tidak dipilih dengan 38 759 partisipan.8 Di Avon Longitudinal Studi tentang
keturunan Orangtua dan Anak-anak (ALSPAC), variannya terbukti memiliki
hubungan spesifik dengan massa lemak.8 Dalam penelitian genom yang luas, gen
FTO telah diidentifikasi sebagai predisposisi diabetes tipe 2 melalui efek pada
BMI.8 Selanjutnya, telah ditunjukkan bahwa gen FTO dikaitkan dengan resistensi
insulin, hiperglikemia, dislipidaemia, dan hipertensi, seperti yang diprediksi
berdasarkan bukti observasi dari asosiasi BMI dengan hasil ini, 44 dan uji coba
acak tentang efek intervensi perubahan berat badan pada hasil ini.44 Temuan ini
menunjukkan bahwa adipositas yang lebih besar memang terkait secara kausal
dengan hasil ini dan bahwa studi pengamatan untuk asosiasi ini pro menunjukkan
perkiraan efek yang valid Selanjutnya, temuan ini memberikan beberapa
dukungan bahwa polimorfisme FTO adalah instrumen yang valid untuk
adipositas. Jika bukan instrumen adipositas yang valid, maka orang tidak akan
mengharapkan prediksi akurat tentang efek kausal dari adipositas pada hasil yang
umumnya diterima secara luas sebagai hubungan kausal dengan daya adipositas
yang lebih besar, 45 dan itu berubah sehubungan dengan perubahan BMI di uji
coba terkontrol secara acak untuk perawatan obat dan operasi yang mengurangi
BMI.

Keterbatasan belajar
Keterbatasan pengujian pengacakan Mendelian telah dibahas secara rinci
sebelumnya. Ada kemungkinan FTO memiliki efek fenotipik langsung selain IMI,
dan inilah yang mempengaruhi hasil. Selanjutnya, ekspresi FTO selama
pengembangan awal kehidupan dapat memicu respons penyamaran yang akan
mengurangi efek peningkatan adipositas. Studi yang memanfaatkan varian genetik
independen tambahan yang terkait dengan BMI, dan penyelidikan kapan, selama
pengembangan, varian mulai mempengaruhi adipositas, dapat membantu
menyelesaikan masalah ini. Dapat dikatakan bahwa, karena penyesuaian untuk
BMI tidak menghapuskan asosiasi hasil FTO, ini menunjukkan bahwa memang
ada jalur alternatif yang menghubungkan FTO dengan hasil. Namun, harus diingat
bahwa bahkan ukuran pengulangan IMT yang digunakan dalam skor BMI masa
hidup kita tidak akan menjadi indikator akurat dari adipositas seumur hidup sejati,
dan efek residu FTO setelah penyesuaian untuk ukuran BMI seumur hidup akan
diharapkan bahkan jika keseluruhan Efek FTO dimediasi melalui adipositas.
Interval kepercayaan yang lebih luas untuk estimasi efek dari analisis variabel
instrumental dibandingkan dengan yang diperoleh dari model regresi standar
menunjukkan kelemahan. Indeks massa tubuh adalah sifat yang kompleks, dan
sebagian kecil variasi dalam BMI yang dijelaskan oleh instrumen genetik
berdasarkan gen tunggal mengarah pada ketepatan yang jauh lebih rendah dari
perkiraan analisis variabel instrumental dibandingkan dengan perkiraan dari
model regresi standar. Dengan demikian, perkiraan variabel instrumental biasanya
kurang efisien daripada estimasi regresi standar jika tidak ada kesalahan pembaur,
reverse causality, atau pengukuran, namun tidak seperti estimator regresi standar
perkiraan variabel instrumental harus tetap konsisten saat ini. Selain mendukung
peran BMI sebagai faktor pendukung CIMT dan berbagai faktor risiko
aterosklerotik, temuan kami menunjukkan bahwa pengaruh BMI yang sebenarnya
terhadap faktor-faktor ini mungkin dianggap remeh dalam penelitian kohort.

KESIMPULAN
Pendekatan pengacakan Mendel memiliki kekuatan dan keterbatasan yang
berbeda dari pada analisis konvensional. Kami menemukan bukti bahwa varian
genetik gen FTO tidak terkait dengan faktor pembaur potensial; bahwa mereka
sangat terkait dengan tingkat BMI seumur hidup; dan bahwa temuan mengenai
efek BMI seumur hidup pada faktor risiko CIMT dan aterosklerosis seperti yang
diperoleh dari pengacakan Mendel dan model regresi standar konvergen. Hasil ini
menunjukkan bahwa pendekatan penggandaan Mendel dengan data genotip FTO
memang memiliki potensi untuk melengkapi bukti yang ada mengenai efek BMI
seumur hidup terhadap risiko aterosklerosis pada kohort besar orang dewasa
muda.