RESUME

KI
MIAANALI
SIS

KROMATOGRAFI

Ol
eh:

MARNI
DELI
YATI
MESAH

1
9150045

PROGRAMSTUDI
PENDI
DIKANBI
OLOGI

FAKULTASKEGURUANDANI
LMUPENDI
DIKAN

UNI
VERSI
TASKRI
STENARTHAWACANA

KUPANG

2021
1
. Pengerti
ankromatografi

Defi
neskromatograf imenurutI UPACbahwakromatogarf iadalahmetodeyang
di
gunakanuntukmemi sahkankomponendal am sampel,di
amankomponentersebutdi
di
stribusi
kandiantaraduaf aseyai
tuf asediamdanf asegerak.
Fasediamdapatberupa
padatanataucairanyangdilapi
skanpadapadatanataugel .

Bi
laf asa di
am berupa zat padat altif,maka kromatograf
iinidikenaldengan
kromatograf
ipenyerapan.Bil
af asadiam berupazatcair,makateknikinidi
sebut
kromatograf
iparti
siataykromatograf
i pembagi
an.

2.Pri
nsi
pkerj
akromatogrfi

Kromatografibekerj adenganprinsi
pdasaryaitujumlahzatterlarutyangberbeda
untukmasi ng-masingkomponenpadawaktutertentusaatkeseti mbanganterj adi
antaraf asediam danf asegeraknya.Pemi
sahandenganmetodekromatograf idapat
terjadiapabila suatu molekulmaupun senyawa memi l
ikisi
fat yang berbeda,di
antaranyaadalah:

a. Memi
li
kikel
arutanyangberbedaterhadapsuatupel
arut

b. Memili
kisi
fatkelarutanatausi
fatuntukberi
katanyangberbedasatusama
l
aindenganfasediamnya.

c. Memi
li
kisi
fatmudahmenguap(
vol
ati
le)padatemperatureyangberbeda

Berikut inipenj el
asan singkat mengenaipemi sahan senyawa pada kromatograf i
.
Pemi sahansecarakromatograf i,
senyawa-senyawayangakandi pi
sahkandi tempatkan
padasystem tertentu(sepertikol om)di manadal am system tersebutterdapat
bagian yang di am atau stasioner ( biasanya berupa padatan atau cairan yang
dideposisikanpadapadatan)yangdi sebutsebagaif asadi
am dankemudi adibawaatau
mengal irmel al
uisuatubbagianmobi l
eatauyangdi ketahuisebagaifasegerak,dimana
selamaprosespengal i
rantersebutakanterj adii
nteraksiantarakomponensenyawa
denganf asediamnya.Selamaberi nteraksiakanterj adiprosespel arutan,adsorpsi
maupundari komponensenyawayangakandi pi
sahkan.

Si
fat-sifat darikomponenpenyusunsenyawatersebut akanmenentukanapakah
komponen-komponentersebut mampu bergerak bebas( berinteraksilemah)atau
beri
nterkasikuatdal amfasediamnya.Bi
lasemuakomponen-komponenyangadati dak
dapat bergerak dalam fase diam,maka proses pemisahan tidak mungkin dapat
berlangsung.Apabi
ladapatbergerak,pemisahanakanbergantungpadasej auhmana
kecepatan bergerak diantara komponen-komponen tersebut maupun perbedaan
kecepatannyadengankecepatanfasagerakyangdi
pakai
padasystemtersebut.

Olehkarenaitupadametodekromatograf
iperludil
akukanpemili
hanf asegerak
sedemi
kianrupasehi
nggasemuakomponendapatbergerakdengankecepatanyang
 berbeda-bedasehinggaprosespemisahandapatterjadi.
Secaraumumdapatdikatakan
bahwakromatograf iadal
ahprosesmi grasidi
ferensialdi
manakomponen-komponen
sampelditahansecaraselekti
folehfasediam.

Gambarberi
kutmerupakani
lustrasipemi
sahanmenggunakanmetodekromatograf
i
kol
om.

a. G
ambarberi
kutmerupakani
lustrasi
pemisahanmenggunakanmetodekromatograf
i
kol
om.

b. Pemi
sahankomponenAdanBpadakol
omkromatograf
i
 KromatogramPemi
sahanSenyawaAdanB

Padagambartersebut, sampelberadadalam fasagerak(eluen)di

masukkankedalam
kolom pemisahan.Komponendalam sampelakanmulaiterpisahsesaatsetelahberadadal
am
kolom.Setelahberinteraksi
denganfasediamkol
om,el uendankomponensenyawaakankeluar
darikolommel al
uidetektoruntukselanj
utnyadi
anali
sissecarakuanti
tati
f.

3.J
eni
s-j
eni
skromatografi

Jenis-jeni
skromatograf
i dapatdiklasi
fikasi
kanantaral
ainberdasarkanj
enisfase(bai
k
fasadiammaupunbergerak)yangdi gunakan,
sistemgeometridanprinsippemi
sahannya.
Perhatikantabeldi
bawahini
,tabelpenggolongankromatografi.

1
.Kromatografi
berdasarkanfasayangterl
ibat

Pemi
sahanti
pekromatograf
iberdasarkanf
aseyangterl
ibatdi
tunj
ukkanpadatabel
beri
kut:
2.Kromatografi
berdasarkansi
stemgeometri

Kl
asif
ikasijeni
skromatograf
iberdasarkansi
stemgeometri
nyadapatdi
bagi
menj
adi
kromatografikol
omdankromatografiplanar.

`à.
Kromatografi
kol
om

Kromatografikol
om,fasediamnyaterdeposi
sipadapipayangberbentukkol
om.Pada
kromatografikol
om,komponenyangakandi pi
sahkanbergerakbersamafasegerak
melal
uikolomtersebutdankemudi
ansetiapkomponenakanterpisahkan.

Kromatograf
igasmenggunakankol
omsebagai
pemi
sah
 Setiapkomponenyangkel uardarikolom akanmasukkedetektoruntukdi anal
isi
s.
Hasi
lnya di saj
ikan dal am bentuk puncak-puncak ( peaks) kromatogram yang
mengidentifi
kasikankonsentrasieluensebagaif
ungsiwaktu.
Luasanpuncaksebandi
ngdengan
konsentrasikomponensampel .

Kol
omKapi
lerKromatograf
i

1
. Kromatografi
planar

Kromatografipal
anar(kromatograf il
apistipi
s)merupakanj eni
skromatograf
i
dimanafasediamnyaberupafil
m tipi
sdenganpartikelpadatyangteri
katbersama
melalui
kekuatanmekani
kpadasenyawapengi
katsepertikal
siumsul
fat
 Kromatograf
ipl
anar–kromatograf
ilapi
sti
pis

Padakromatograf ilapi
stipi
sinikomponenyangakandi pi
sahkanbergerakbersamafase
gerakdal am sebuahbidangdatar.Senyawayangbergerakterl ihatsepertinodayang
dapatdikenal
i.Posi
sinodamenunjukanidenti
tassuatukomponenatausenyawasedangkan
besaratauintensitasnodamenunjukankonsentrasi
nya.

Padakromatografiplanarinibeberapabercakkomponenatausenyawadapatdi pi
sahkan
langsungsecarabersamaanmaupundi pisahkandenganbeberapalangkah,
dimanalangkah
yangsel anj
utnyategakl urusarahnyadenganl angkahyangpertama.Carai nidi
kenal
dengan metode kromatograf idua dimensi.Gambar dibawah i
nimenunj ukan proses
pemisahanmenggunakanmetodekromatograf i
planar.

c.Kromatografi
berdasarkanpri
nsi
ppemi
sahan

klasi
fikasijeni
skromatografiberdasarkanpri
nsi
ppemi sahannyadapatdibagimenjadi
kromatograf iadsorpsi
,kromatografiparti si
,kromatografipertukaran ion,exclusi
on
chromatographydanaf f
ini
tychromatography.

1
. Kromatografi
Adsorpsi

padajeniskromatograf iadsorpsi,pri
nsippemi sahanberdasarkanprosesadsorpsi
anal
itdalampermukaanpadatanf asediam. Padatanf asediamdapatberupasi l
icagel
ataualuminayangmemi li
kiluaspermukaanrel ativebesar.Kromatografiadsorpsi
merupakansalahsatumetodekromatograf iyangcukupl ama.Pemisahandidasarkan
padaperbedaansi
fatafinitasadsorpsidarikomponensampelpadapermukaanpadatan
akti
f.Kromatografiadsorpsimenggunakanf asegerakcai ranmaupunpadatanyang
 mamputeradsorppadapermukaanf asediamnya.Padagambardibawahiniditunj
ukan
i
nteraksi
adsorpsi
antaraanal
itpadaf asegerakdenganpermukaanf
asediamnya.

Metodekromatograf i
adsorpsimemili
kibeberapakelemahandiaantaranyayang
pertamaadal ahketerbatasanjumlahadsorbenyangdapatdi gunakanuntukmel akukan
pemisahan.Keduaadalahkoefisi
endistri
busiterhadapadsorpsiyangseringkal
i
tergantungpadakonsentrasi totalkomponenyangakandipisahkan,sehi
ngga
mengakibatkanpemi sahankurangsempurna.

2. Kromatografi
Parti
si

Kromatografipartisiadal ah kromatografidimana proses pemi sahannya berdasakan

kemampuanadsorpsianal itpadal api
santipiscairanyangdi l
apiskanpadaparti kelpadatan
inert fase diamnya.Prinsip utama pemisahan berdasarkan perbedaan kelarutan antara
komponensampelpadaf asedi amnya(gaschromatography) ,atauberdasarkanperbedaan
kelarutan komponen dal am f ase gerak dengan f ase di
amnya ( l
iqui
d chromatography).
Keuntunganmetodekromatograf iparti
siiniadal ahdistri
busi
nyati dakbergantungpada
konsentrasi,
sehinggapemi sahandapatterj
adilebi
hbai k.
3.Kromatografi
Pertukarani
on

Padakromatografipenukarion,i
onterpisahkanberdasarkangayaelektrostatiknya
membentukgrupf ungsionalyangbermuatanpadaf asediam.Kromatograf i
penukarion
menggunakanresinsebagaipadatanfasediamyangbergunauntukmengi katani
onataukati
on.
Larutanionbermuatanpadaf asegerakakanberikatandengaresinyangmemi li
kimuatan
berlawananmelaluigayaelektrostati
k.

4.
Excl
usi
onChromatography
 Exclusi
onChromatographymerupakanti pekromatografiyangti dakbanyakdipengaruhi
olehi nteraksiantarafasediamdenganzatterlarutnya.Prosespemi sahanberdasarkan
volumehi drodi
namikdarimolekulataupartikel
.Dalamteknikini
,gelnonionikdenganukuran
pori yangsamadi gunakanuntukmemi sahkancampuranberdasarkanperbedaanukuran
mol ekul nya(BM).

Molekul-mol ekulyangkecilakanmemasuki pori-poridari

gelsedangkanmol ekulbesarakan
melewati sela-selagellebihcepatbiladibandingkandenganmol ekulyangmel ewati pori
-
pori
nya. J
adiurutanel usimula-mul aadalahmol ekulyanglebihbesar,molekulsedang,dan
terakhirmolekulyangpal i
ngkecil.Apabil
af asadiamnyaadal ahgelyanghidrofilmakatekniki
ni
di
sebutgelf iltrati
onchromatographydanbi ladigunakangelyanghi drof
ob( polystyrene-
di
vinylbenzene)disebutgelpermeati onchromatography.

5.
Affi
nityChromatography

Kromatografi
afini
tasbekerjaberdasarkanpadai nteraksi spesi
fikantarasatuj enis
molekulzatterlarutdenganjenismol ekullai
nyangterimmobi l
isasidal
amf asediam. Sebagai
contoh,molekulyangterimmobil
isasidapatmenj adiantibodi untukbeberapaprotei nyang
spesi
fik.Saatzatterlarutyangmengandungcampuranprotei nmel ewatimolekulini,
hanya
proteintertentusajayangakanbereaksi denganantibodi yangteri mmobili
sasipadaf asediam.