BAB II

METODE KERJA

2.1 Alat dan bahan

Alat yang digunakan adalah lampu bunsen,tabung reaksi,autoclaf,rak tabung
reaksi,oven,inkubator,jarum oase
Bahan yang digunakan adalah alumunium foil,media nutrient agar,air
suling,kertas,kapas,kain kasa halus,agar-agar bubuk 7,5 gram

2.2 Cara kerja

1. Ambillah wadah media NA . bacalah petunjuk yang terdapat pada kemasan. anda
akan membaca jumlah media yang harus direhirdasi dala, 1 liter air (berat medium
yang ditimbang dapat berbeda-beda menurut merk bahan yang anda pakai). sering kali
anda hanya membutuhkan media kurang dari 1 liter. karenanya anda harus
menghitung jumlah yang sesuai untuk volume yang anda butuhkan.
2. timbanglah media NA sesuai kebutuhan anda. wadah untuk menimbang dapat berupa
kertas, alluminium foil atau kaca arloji bila menimbang jumlah sampai 10-15 gram.
media selanjutnya dimasukkan kedalam gelas piala.
3. selanjutnya air suling diukur sesuai jumlah yang dibutuhkan menggunakan gelas ukur.
ingatlah dasar miniskus harus sejajar dengan garis skala yang kehendaki pada gelas
ukur.
4. tuanglah air suling kedalam gelas piala. pilihlah gelas piala dengan kapasitas
sedikitnya dua kali jumlah cairan yang digunakan agar cairan tidak meluap dan juga
agar tersedia cukup ruang untuk mengaduk.
5. selanjutnya gelas piala yangt berisi media perlu didihkan agar larut menggunakan
pemanas listrik. medium harus diaduk untuk mencegah meluapnya media dan hangus.
pengadukan dapat dilakukan dengan menggunakan batang pengaduk.
6. untuk menggunakan media agar miring maka sebelum di sterilisasikan menggunakan
autoklaf pada suhu 121° c selama 15 menit terlebih dahulu media dituangkan kedalam
tabung reaksi sebanyak kurang lebih 4 ml dan kemudian ditutup menggunakan
sumbatan kapas. setelah di sterilkan tabung reaksi diletakkan pada posisi miring yang
dikehendaki dan dibiarkan menjadi dingin.
7. untuk membuat media agar cawan maka setelah disterilisasi menggunakan autoklaf
pada suhu 121°c selama 15 menit telah dapat dituangkan kedalam cawan-cawan petri
kira-kira setebal 4-5 mm dan di biarkan menjadi dingin. hindari penuangan media
agar saat suhui masih terlalu tinggi karena dapat menyebabkan kondensasi air yang
berlebihan pada tutup cawan. media yang telah siap dan tidak segera digunakan

1
 sebaiknya disimpan didalam lemari pendingin untuk mencegah kontaminasi. akan
tetapi tidak dianjurkan untuk membiarkan media agar menjadi padat lalu
mencairkannya kembali sampai lebih dari dua kali karen dapat memberikan hasil
yang kurang baik.

BAB III
DATA HASIL PENGAMATAN

3.1 Data hasil pengamatan

Tabel 3.1 tabel media agar,media agar tegak(1), media agar miring(2), dan media agar
cawan(3).
Nama media Gambar
1. media agar tegak

2. media agar miring

2
 3. media agar cawan

3.2 Pembahasan
Nutrien Agar (NA) merupakan salah satu media yang umum digunakan dalam
prosedur bakteriologi seperti uji produk pangan, untuk membawa stok kultur, untuk
pertumbuhan sampel pada uji bakteri, dan untuk mengisolasi organisme dalam kultur murni.
Untuk komposisi Nutrient Agar adalah eksrak beef 10 g, pepton 10 g, NaCl 5 g, air desitilat
1.000 ml dan 15 g agar/L. Agar dilarutkan dengan komposisi lain dan disterilisasi dengan
dandang (pemeram air) pada 121°C selama 15 menit. Kemudian siapkan wadah sesuai yang
dibutuhkan. Pada medium Nutrient Agar (NA) dari warna keruh menjadi warna kuning
kecoklatan, hal ini disebabkan karena mikroba yang ada didalam media tersebut telah tumbuh
sehingga menyebabkan pembusukan pada medium tersebut atau mikroba tersebut telah
mengurai zat-zat yang ada dalam media tersebut.

3
 BAB IV
PENUTUP

4.1 Kesimpulan.
Medium Nutrien Agar (NA) konsistensinya berbentuk padat dan berwarna kuning
kecoklatan yang berfungsi untuk pertumbuhan mikroba dari telur. Sterilisasi dengan
menggunakan dandang (pemeram air) hasilnya kurang baik karna sterilisasi dengan dandang
(pemeram air) belum membunuh spora dari bakteri. Kita dapat mengetahui cara pembuatan
media NA dengan media tegak dan miring. Sterilisasi dilakukan bertujuan untuk menghindari
kontaminasi, yaitu masuknya mikroorganisme yang tidak diinginkan.