Kit pemurnian sel uji coba plus RNA, didasarkan pada teknologi lisis reagen sel uji dan

teknologi pemurnian membran silika tautan murni. Kombinasi ini memberikan RNA yang sangat
murni bahkan dari sampel yang sulit seperti jaringan fibrosa, untuk perlindungan Anda selalu
kenakan sarung tangan jas lab dan kacamata pengaman, persiapkan area kerja Anda. Dan cuci
penyangga dan kumpulkan bahan Anda sebelum memulai prosedur, untuk mulai menyiapkan
renda Anda8,

1.Anda bisa mulai dengan 50 hingga 100 mikrogram jaringan atau sel segar atau beku. pada 1
mil reagen trysil dihomogenisasi secara menyeluruh menggunakan jaringan atau penghomogen
stator rotor biarkan sampel berdiri pada suhu kamar selama 5 menit.

2. Selanjutnya, tambahkan 2 mils kloroform dan kocok tabung dengan kuat selama sekitar 15
detik. Kemudian diamkan tabung selama dua hingga tiga menit pada suhu kamar. Sentrifugasi
sampel Anda pada 12.000g selama 15 menit pada 4 derajat Celcius. Anda akan melihat tiga
lapisan berbeda di dalam tabung, lapisan atas tak berwarna berisi RNA.

3. Pindahkan 24 mikroliter dari lapisan atas ke tabung bebas RNAse baru dan tambahkan
campuran etanol 70% dengan volume yang sama dengan baik dengan vortexing.

4. Selanjutnya, jalankan larutan RNA terisolasi Anda melalui kolom membran silika tautan
murni yang disediakan untuk anak-anak untuk membersihkan kontaminan.

5. Pindahkan 700 mikroliter sampel ke kolom, yang telah dimasukkan ke dalam tabung
pengumpul susu, sentrifugasi pada 12.000 g selama 15 detik. Buang aliran melalui wash RNA
terikat Anda dengan menambahkan 700 mikroliter buffer satu dan sentrifugasi 12000 g selama
15 detik, buang aliran melalui dan tabung pengumpul dengan kolom membran silika dalam
koleksi baru untuk menambahkan 500 mikroliter buffer pencuci yang telah disiapkan ke dan
sentrifugasi pada 12000g selama 15 detik buang aliran yang mengalir dan ulangi.

6. Keringkan membran silica menggunakan sentrifugasi kolom pada 12000 g selama 1 menit
buang tabung pengumpul tp elusi RNA Anda dari membran silika,

7. masukkan kolom ke dalam tabung pemulihan kemudian tambahkan volume penyangga elusi
yang sesuai berdasarkan jumlah awal Anda, inkubasi di kamar suhu selama satu menit.
Selanjutnya sentrifugasi kolom masukkan ke dalam tabung pemulihan pada 12000g selama 2
menit. Ultra Pure RNA Anda sedang dalam pemulihan untuk siap digunakan atau disimpan pada
-20 derajat celsius.