Peralatan mengukur asam nuklead

Mspektofotometer dapat digunakan untuk megukur secara langsung kemurnian protein, DNA
atau RNA, dalam sampel

Dalam bekerja dengan DNA dan RNA penting untuk selalu menyimpan sampel di atas es,
dengan sarung tangan agar mencegah degradasi sampel

Untuk membuka sofware klik ikon ND1000 ambil opsi asam nuklead.

Nanodrop harus diseka dengan lembut dengan kimwipe dan sedikit air.

1. Menggunakan p2 atau p20, pipet 1 mikroliter air RNAse ke alas sensor dari
nanosensor sepenuhnya tanpa menimbulkan gelembung, kemudian tutup perlahan
2. Pilih ok pada aplikasi, dan komputer akan menginisiasi peralatan
3. Kemudian mengosongkan data, pipet 1 hingga 2 mikroliter larutan yang digunakan
untuk megelusi sampel DNA atau RNA ke alas sensor dengan lembut menurunkan
lengan naodrop
4. Kemudian klik bagian kosong, selelah pembacaaan selesai angkat nanodrop dan
bersihkan dengan kimwipe
5. Harap dictat bahwa nanodrop perlu dibersihkan ulang setelah setiap pembacaan 10
sampel
6. Membaca sampel. Pipet 1-2 mikroliter sampel DNA atau RNA ke alas sensor dan
perlahan turunkan lengan nanodrop
7. Buka menu drop-down dan pilih DNA atau RNA
8. Contoh menggunakan DNA kemudian klik read
9. Setelah selesai kemudian bersihkan dengan kimwip
10. Sampel diberi nama dalam kolom dengan mengetik ID kotak sampel kemudian klik
tampilan laporan dan ekspor ke excel atau salin ke buku catatan lab

Contoh bacaan sampel

Pembacaan 260 -280 dan 260 - 230 sangan penting untuk mentukan kontaminasi
 Pembacaan 260 hingga 260 digunakan untuk mentukan kontaminasi protein dari
sampel asam nuklead
 Pembacaan 260-280 digunakan untuk menentukkan kontaminan organik
  Untuk DNA dan RNA murni rasioo diats 260-280 : 1,8-2,1 harus berbeda dan
semakin mendekati 2.1 makin ideal karena menunjukkan tidak terkontaminasi
protein
 Sedangkan rasio 260- 230 semakin mendekati 2.1 makin ideal karena
menunjukkan tidak terkontaminasi protein, nilai yang lebih rendah dari 1,8 akan
menunjukkan kontaminasi yang signifikan

Seperti yang jelas di sebutkan, spektofotometer nanodrop juga dapat digunakan untuk
pengukuran konsentrasi protein

11. Setelah menggunakan peralatan bersihkan nanodrop dengan kimwipe dan sedkit air
12. Simpan nanodrop dengan memasukkan potongan kimwipe yang terlipat di antara alas
dan sensor

CATATAN

Dasar / konsep dari Nanodrop Spektrofotometri(NS)

 Pengertian Nanodrop spektrofotometri, gabungan dari spektometer yaitu alat yang

dihasikan dari sinar dari gelombang terntentu……
 Spektrofotometri memanfaatkan intensitas cahaya dan panjang gelombang
 Prinsip kerja NS, DNA murni yang suah diekstraksi mampu menyrap cahaya
ultraviolet atau tergantung dengan jenis spektrumfotometrinya
 Hasil uji NS, berupa nilai kemurnian DNA ada panjang gelombang pada lamda
260/lamda 280, rasio yang baik 1,8-2.
 Jenis – jenis Spektrumfotometri, Spektrumfotometri Vis (menggunakan sumber
cahaya, atau cahay tampak atau terlihat), panjang gelombang pada sinar tampak ini
berada diantara ……,,, Spektrumfotometri UV(menggunakan cahaya ultraviolet
dengan kisaran gelombang…., lampu yang digunakan jenis deuterium lamp, sinar ini
tidak terdeteksi oleh mata manusia). Spektrumfotometri UV-Vis (gabungan dari 2
cahaya), Spektrumfotometri IR atau inframerah (menggunakan sinframerah,
sinyal sinyal …).