PRAKTIKUM III

AKTIVITAS ENZIM AMILASE

A. TUJUAN PRAKTIKUM
Mengetahui pengaruh pH dan suhu terhadap aktivitas enzim amilase dari
saliva

B. TEORI
Enzim adalah suatu biokatalisator. Ia mampu meningkatkan kecepatan suatu
reaksi kimia yang terjadi dalam sel hidup. Tanpa enzim maka reaksi selular
berlangsung sangat lambat, bahkan mungkin tidak terjadi. Pada umumnya enzim
adalah protein (kecuali enzim-enzim ribozim yang merupakan molekul asam nukleat).
Untuk dapat aktif bekerja, seringkali enzim membutuhkan suatu komponen lain yang
bukan protein. Zat non-protein ini lazimnya disebut kofaktor, yang dapat merupakan
suatu molekul organik atau suatu ion. Selain memerlukan keberadaan molekul
substrat dan kofaktor, untuk memperoleh kerja yang optimal diperlukan pula faktor-
faktor lain, seperti suhu dan pH lingkungan yang optimal.
Amilase diklasifikasikan sebagai saccharidase (enzim yang memotong
polisakarida). Amilase merupakan enzim pencernaan, terutama dilakukan oleh
pankreas dan kelenjar ludah. Fungsi utama dari enzim amilase adalah untuk memecah
pati dalam makanan sehingga mereka dapat digunakan oleh tubuh. Amilase juga
disintesis dalam buah tanaman selama pematangan, menyebabkan buah menjadi lebih
manis.
Ada banyak faktor yang dapat mempengaruhi aktivitas kerja enzim. Pada
percobaan ini digunakan sebuah enzim hidrolisis yang banyak dijumpai dalam air liur,
yaitu enzim amylase (“salivary amylase”, nama lain : ptialin)
Ptialin atau amilase adalah suatu enzim kelas hidrolase yang menghidrolisis
karbohidrat (amilum) menjadi komponen-komponen yang lebih sederhana, yaitu
amilodekstrin, eritrodekstrin, akrodekstrin dan selanjutnya terbentuk maltosa. Enzim
ini berfungsi menghidrolisis amilum sewaktu berada dalam rongga mulut dan hanya
aktif bekerja pada pH 7,0 sehingga dalam lambung enzim ini menjadi tidak aktif.
Selain oleh kelenjar ludah, amylase juga diproduksi oleh sel-sel pancreas (“pancreatic
amylase”). Amilase ini berfungsi melanjutkan hidrolisis amilum yang belum sempat

MODUL PRAKTIKUM BIOKIMIA PRODI-S1 STIKES IKIFA

 dilakukan oleh salivary amylase. Activator enzim amilase antara lain adalah Ca 2+, Cl- ,
Br-dan HPO4 -.

C. ALAT DAN BAHAN

1. Alat
Rak dan tabung reaksi, plat tetes, pipet tetes, penjepit kayu, beaker glas, gelas
ukur
2. Bahan
Larutan amilum 1%, Na2CO3 1 %, HCl 1 N, larutan iodium, saliva, reagen
Benedict, es batu

D. PROSEDUR
1. Pengaruh pH
a. Siapkan tiga tabung reaksi
b. Pada tabung 1 isi dengan 2 ml HCl, tabung 2 isi dengan 2 ml aquades dan
tabung 3 isi dengan 2 ml Na2CO3
c. Tambahkan 2 ml larutan amilum pada masing-masing tabung reaksi diatas
d. Tambahkan 1 ml enzim amilase (cairan saliva) pada masing-masing tabung
reaksi diatas
e. Inkubasi ketiga tabung reaksi tersebut pada suhu 37-400C selama 15 menit
f. Masukkan kedalam plate tetes 3 tetes larutan dalam tabung reaksi tersebut
kemudian tambahkan 1 tetes larutan iodium.
g. Amati dan catat perubahan warna yang terjadi
h. Sisa larutan pada ketiga tabung tambahkan 2,5 ml pereaksi Benedict,
kemudian dipanaskan di atas api spiritus agar reaksi berjalan dengan cepat.
i. Amati dan catat perubahan warna yang terjadi
2. Pengaruh Suhu
a. Siapkan 4 tabung reaksi
b. Kemudian masing-masing tabung diisi dengan 2 ml larutan amilum
c. Tambahkan 1 ml enzim amilase (cairan saliva) pada tiap tabung
d. Tabung 1 disimpan dalam wadah es (150C) selama 10 menit
e. Tabung 2 disimpan dalam penangas air dengan suhu 800C selama 10 menit
f. Tabung 3 disimpan dalam inkubator dengan suhu 37-400C selama 10 menit
g. Tabung 4 disimpan dalam suhu ruang selama 10 menit

MODUL PRAKTIKUM BIOKIMIA PRODI-S1 STIKES IKIFA

 h. Setelah selesai dengan perlakuan suhu yang berbeda tambahkan pereaksi
benedict sebanyak 2,5 ml.
i. Amati dan catat perubahan warna yang terjadi

E. DAFTAR PUSTAKA
1. Anna Poedjiadi, 2012. Dasar-dasar Biokimia. UI. Jakarta.
2. Ariandi. Pengenalan Enzim Amilase (Alpha-Amylase) Dan Reaksi Enzimatisnya
Menghidrolisis Amilosa Pati Menjadi Glukosa. 2016
3. Fakultas Kedokteran Universitas Lampung. Buku Penuntun Praktikum Biokimia
Farmasi. Lampung. 2020
4. (57) Uji Enzim Amilase : Pengaruh Suhu dan pH terhadap Aktifitas Enzim - YouTube

MODUL PRAKTIKUM BIOKIMIA PRODI-S1 STIKES IKIFA

 LEMBAR KERJA PRAKTIKUM

Materi :
Hari/ Tanggal :
Sampel :

A. TEORI

B. PROSEDUR SINGKAT

C. HASIL PENGAMATAN

1. PENGARUH pH

NO Tabung Warna (ditambahkan larutan Warna (ditambahkan

Iodium) pereaksi Benedict)

2. PENGARUH SUHU
No Tabung Warna

MODUL PRAKTIKUM BIOKIMIA PRODI-S1 STIKES IKIFA

D. PEMBAHASAN

MODUL PRAKTIKUM BIOKIMIA PRODI-S1 STIKES IKIFA