Jurnal Internasional Nanomedicine
akses terbuka ke penelitian ilmiah dan medis
Buka Akses Artikel Teks Lengkap
Efisiensi Laser Selektif dari Nanopartikel Perak
Sintesis Hijau oleh Arborescens lidah buaya dan
Aktivitas Penyembuhan Lukanya pada Sel
Fibroblast Luka Normal dan Luka Diabetik: Studi In
vitro
Sathish Sundar Dhilip
Kumar
Nicolette Nadene Houreld
Heidi Abrahamse
Pusat Penelitian Laser, Universitas
Johannesburg, Johannesburg, Afrika Selatan
Korespondensi: Sathish Sundar Dhilip
Kumar
Pusat Penelitian Laser, Fakultas Ilmu
Kesehatan, Universitas Johannesburg, PO
Box 17011, Doornfontein, Johannesburg
2028, Afrika Selatan
Fax +27 11559 6884 Email
sathishd@uj.ac.za
kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
Merpati tekan
http: //doi.org/10.2147/IJN.S257204
Merpati tekan
ATAU IGI NA LRESEAR CH
Artikel ini telah diterbitkan di jurnal Dove Press berikut ini:
Jurnal Internasional Nanomedicine
Pengantar: Nanopartikel perak (AgNPs) telah banyak digunakan dalam aplikasi
penyembuhan luka karena sifat fisikokimia dan biologisnya yang berharga. Tujuan utama
dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi efek gabungan dari nanopartikel perak
disintesis hijau (G-AgNPs) dan fotobiomodulasi (PBM; iradiasi laser pada 830 nm dengan 5
J / cm 2) pada sel fibroblast luka normal dan luka diabetik (WS1).
Metode: Efek gabungan G-AgNPs dan PBM dipelajari oleh berbagai kalangan in vitro
studi penyembuhan luka termasuk morfologi sel, tingkat migrasi sel dan persentase penutupan
luka, viabilitas sel, proliferasi sel, dan pewarnaan filamen (F) -aktin dan morfologi nuklir.
Hasil: Hasil viabilitas sel menunjukkan kompatibilitas seluler G-AgNPs yang baik terhadap sel
WS1. Terapi gabungan G-AgNPs dan PBM menunjukkan hasil yang menjanjikan untuk mencapai
migrasi progresif dan penutupan luka pada model sel luka normal dan luka diabetes. G-AgNPs
sendiri dan dalam kombinasi dengan PBM tidak berpengaruh negatif terhadap viabilitas dan
proliferasi sel, dan terjadi peningkatan migrasi sel.
Kesimpulan: Secara keseluruhan, temuan ini menunjukkan bahwa pengobatan gabungan G-AgNPs
dan PBM tidak menunjukkan efek merugikan pada proses penyembuhan luka baik pada model sel luka
normal maupun luka diabetes.
Kata kunci: sintesis hijau, nanopartikel perak, fotobiomodulasi, laser, penyembuhan luka,
migrasi sel
pengantar
Luka yang terinfeksi merupakan masalah kesehatan dan beban utama bagi pasien
diabetes, dan dalam beberapa kasus, tukak ini membutuhkan waktu lebih dari 20 minggu
untuk sembuh dan sering kali menyebabkan amputasi. 1 Bisul ini merupakan penyebab
utama kecacatan dan berdampak negatif pada kualitas hidup pasien. Perawatan dan
manajemen luka diabetes kronis seringkali multidisiplin. 2 Saat ini, balutan berbahan dasar
perak secara aktif digunakan untuk penyembuhan luka diabetes yang terinfeksi secara
efektif. 3 Penerapan nanopartikel (NP) dalam domain biologis merupakan bidang yang
muncul karena meningkatnya tingkat pemahaman sistem biologis dan interaksinya
dengan bahan nano. 4 Nanopartikel perak (AgNPs) adalah
Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15 6855-6870 6855
© 2020 Dhilip Kumar dkk. Karya ini diterbitkan dan dilisensikan oleh Dove Medical Press Limited. Persyaratan lengkap dari lisensi ini tersedia di https://www.dovepress.com/
terms.php dan menggabungkan Creative Commons Attribution - Non Commercial (unported, v3.0) License (http://creativecommons.org/licenses/ oleh-nc / 3.0 /). Dengan mengakses
pekerjaan yang dengan ini Anda terima Persyaratan. Penggunaan non-komersial dari karya tersebut diizinkan tanpa izin lebih lanjut dari Dove Medical Press Limited, asalkan karya tersebut dikaitkan
dengan benar. Untuk izin penggunaan komersial dari karya ini, silakan lihat paragraf 4.2 dan 5 dari Ketentuan kami (https://www.dovepress.com/terms.php).
Dhilip Kumar dkk
dikenal sebagai nanomaterial berbasis logam dan
telah banyak digunakan untuk aplikasi biologis yang
berbeda karena sifat fisikokimia dan biologisnya. 5
AgNPs memiliki efek antibakteri, antimikroba dan antiinflamasi yang
kuat, yang memainkan peran kunci dalam mempercepat penyembuhan
luka. 6 , 7 Penggunaan AgNPs dalam pengobatan luka kronis seperti ulkus
kaki vena kronis yang tertunda, 8 , 9 dan sisa luka pasca luka bakar 10 baik
didokumentasikan.
Arborescens lidah buaya ( family Asphodelaceae) secara
tradisional telah diaplikasikan untuk khasiat terapeutik dan
pengobatannya selama ribuan tahun, termasuk
antiinflamasi, antimikroba, antibakteri, analgesik, anti
alergi, dan antioksidan. 11 - 14 Ekstrak getah daun tidak
beracun (LSE) merupakan lendir yang dapat
mempengaruhi penyembuhan luka 13 dan bertindak sebagai
agen penstabil, pereduksi dan pembatasan untuk NP
melalui metode sintesis hijau. 11 , 15 Metode persiapan ini
cocok untuk sintesis skala besar dan menghindari
penggunaan bahan sintetik atau berbasis kimia. Metode
sintesis hijau memiliki tolerabilitas dan kemanjuran yang
baik dan tidak mahal dibandingkan dengan opsi saat ini. 16 , 17
Photobiomodulation (PBM) telah terbukti efektif dalam
pengobatan luka normal dan diabetes dengan menstimulasi
proses seluler. Ini melibatkan penggunaan cahaya bertenaga
rendah (biasanya dioda pemancar cahaya (LED) atau laser)
untuk mengobati dan menyembuhkan berbagai kondisi. Ini
telah digunakan dengan sukses dan terbukti mempengaruhi
penyembuhan luka yang berbeda secara ekstensif. 18 - 20 Ayuk et
al (2012) melaporkan bahwa iradiasi laser pada sel fibroblast
kulit manusia yang terluka akibat diabetes mengakibatkan
peningkatan migrasi sel, viabilitas, proliferasi, dan produksi
kolagen dibandingkan dengan sel non-iradiasi. 21 Telah
didokumentasikan dengan baik bahwa PBM menstimulasi
proses seluler normal dalam penyembuhan luka, dan AgNP
telah menunjukkan efek positif dengan mengurangi tingkat
bakteri dan mendorong mekanisme penyembuhan luka.
Namun, efek gabungan AgNP dan PBM tidak
didokumentasikan dengan baik. Oleh karena itu, tujuan utama
dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi efek gabungan
G-AgNPs dan PBM (iradiasi laser pada 830 nm dengan 5 J / cm 2)
pada sel fibroblast luka normal dan luka diabetik (WS1). Kami
menggunakan uji goresan sentral untuk merangsang luka di
sel fibroblast kulit manusia WS1. Uji goresan pusat telah
banyak digunakan untuk membuat luka atau celah di lapisan
sel tunggal yang bertumpuk untuk meniru luka. in vitro. 22 , 23 Panjang
studi proliferasi, 6 x 10 5 sel diunggulkan ke dalam pelat kultur
gelombang 830 nm dan fluensi 5 J / cm 2 dipilih karena
parameter ini sebelumnya telah terbukti merangsang WS1
6856 kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
Merpati tekan
Merpati tekan
sel dan menginduksi efek positif pada sel fibroblast luka
diabetes. 24 Juga telah dilaporkan bahwa panjang
gelombang dan kelancaran yang sama meningkatkan
kekuatan tarik luka kulit dalam model tikus diabetes. 25
Bahan dan metode
Kultur Sel (2D)
Sel fibroblast kulit manusia WS1 digunakan untuk percobaan.
Semua prosedur eksperimental garis sel yang dilakukan dalam
penelitian ini telah disetujui oleh Komite Etik Penelitian Fakultas
Ilmu Kesehatan Universitas Johannesburg (REC-01-27-2017). Semua
metode dan prosedur dilakukan sesuai dengan pedoman dan
peraturan terkait. Semua bahan kimia dan reagen yang digunakan
dalam penelitian ini adalah kelas analitik. Air deionisasi (elemen
MilliQ, 18 Mohm / cm) digunakan untuk semua percobaan. Sel
fibroblast kulit manusia (WS1, ATCC ®, CRL-1502 ™) ditumbuhkan
dalam media esensial minimum (MEM, M7278, Sigma – Aldrich,
Afrika Selatan) ditambah dengan 10% (v / v) serum janin sapi (FBS,
F9665, Sigma – Aldrich, Afrika Selatan), 2 mM Larutan L-glutamin
(G7513, Sigma – Aldrich, Afrika Selatan), 100 U Penicillin dan 100 μg
/ mL Streptomycin (P4333, Sigma – Aldrich, Afrika Selatan), 2.5 μg /
mL AmphotericinB (A2942, Sigma – Aldrich, Afrika Selatan) , 1 mM
natrium piruvat (S8636, Sigma- Aldrich, Afrika Selatan), dan 0,1 mM
asam amino non-esensial (NEAA, M7145, Sigma- Aldrich, Afrika
Selatan).
Dua model yaitu luka normal (NW) dan luka diabetik
(DW), dan delapan kelompok digunakan, yaitu luka
normal non iradiasi (NW 0J), luka normal tidak diradiasi
G-AgNP dirawat luka normal (NW 0J NP), luka normal
teriradiasi luka (NW 5J), G-AgNP iradiasi mengobati luka
normal (NW 5J NP), luka diabetes non iradiasi (DW 0J),
luka diabetes non iradiasi G-AgNP diobati (DW 0J NP),
luka diabetes iradiasi (DW 5J ), dan luka diabetes yang
diobati dengan G-AgNP iradiasi (DW 5J NP). Model
diabetes dicapai dengan terus menumbuhkan sel dalam
MEM (konsentrasi glukosa basal 5,6 mMol / L) yang
mengandung tambahan glukosa 17 mMol / L. 23 Untuk
mengetahui efek sel PBM dipisahkan dengan
menambahkan TrypLE TM ekspresikan (1 mL / 25 cm 2,
Gibco 12563–029, Life Technologies, Afrika Selatan) dan diinkubasi
selama 3 menit pada suhu 37 ° C. Untuk percobaan, tidak termasuk
jaringan berdiameter 3,4 cm seperti yang ditentukan oleh uji
eksklusi Trypan blue, dan pelat diinkubasi semalaman di
Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15
Merpati tekan Dhilip Kumar dkk

37 ° C dalam 5% CO 2 untuk memungkinkan sel menempel. Untuk studi 48 jam Sel yang tidak dirawat disimpan sebagai kontrol.
proliferasi, 10 6 sel diunggulkan. Setelah perawatan dan inkubasi, volume yang sama dari
reagen
Sebuah luka disimulasikan dimana lapisan tunggal sel digores di bagian dan suspensi
tengah sel (50
dengan pipet μL)
1 mL ditambahkan
sekali pakai yangdan dicampur
steril. 26 Kelompok

terpilih diperlakukan dengan 12 µg / mL G-AgNPs, diinkubasi selama 30selama 2 menit

menit dan untukdiiradiasi.
kemudian menginduksiTidak lisis sel.dan
diobati Pelat dibiarkan
tidak diradiasi (0
J / cm 2) sel berfungsi sebagai kontrol. Telah dilaporkan dalam penelitiandiinkubasi
kami sebelumnya bahwa
pada suhu konsentrasi
kamar selama yang dipilih
10 menit (12 µg / mL
untuk
G-AgNPs) menunjukkan tingkat aktivitas bakterisidal yang memuaskan menstabilkan sinyalMorfologi
terhadap keduanya. Seluler, Tingkat
berpendar. Luminescence dibaca dalam
Migrasi dan Relative Light Units (RLU) pada penghitung multilabel (Perkin
Elmer, VICTOR3 ™, 1420).

Bakteri patogen gram positif dan gram negatif Persentase Penutupan Luka
sel 11 dan karenanya, kami menggunakan konsentrasi 12 μg / mL di Morfologi seluler untuk semua kelompok ditangkap menggunakan

semua tes. mikroskop pencitraan sel hidup, Carl Zeiss Axio Observer Z1. Gambar diambil

di tempat yang sama pada interval waktu yang berbeda (0, 24, dan 48 jam).

Iradiasi Laser Visi Axio LE (SE64 Rel.

Laser dipasok oleh Dewan Riset Ilmiah dan Industri (CSIR), 3.9.1 SP1) perangkat lunak digunakan untuk mengukur
Pusat Laser Nasional (NLC) Afrika Selatan. Dalam studi ini, penutupan luka (diameter dalam μm). Tingkat migrasi sel dan
laser dioda yang dipancarkan pada panjang gelombang persentase penutupan luka dihitung sesuai prosedur yang
dilaporkan oleh Fox et al, 2017. 28
830 nm digunakan. Parameter laser dirangkum dalam Tabel
1 . Sel diiradiasi dalam pelat kultur jaringan berdiameter 3,4 Tingkat migrasi sel menuju pusat goresan diamati
cm dalam 1 mL media kultur dalam gelap, dari atas, pada sel luka normal dan luka diabetes pada 24 dan
dengan penutup cawan kultur terbuka. Iradiasi dilakukan 48 jam. Tingkat migrasi dinyatakan dalam µm / jam
pada jarak 7 cm, yang menghasilkan ukuran spot 9,1 cm 2 yang dan dihitung menggunakan persamaan (A):
secara langsung berhubungan dengan area plat kultur ð Pra migrasi Þ panjangnya ð Migrasi Þ panjangnya
Migrasi
jaringan. Setelah waktu inkubasi yang diinginkan (24 dan ¼
menilai ð μ m = h Þ Waktu ð h Þ
48 jam), respon seluler dievaluasi dengan metode yang
(SEBUAH)
berbeda.
dimana (pra-migrasi) panjangnya adalah panjang luka awal
Viabilitas Sel (µm) pada 0 jam dan (migrasi) panjangnya adalah panjang luka pada

Sel Titer-Glo ® uji viabilitas sel luminescent (Promega waktu tertentu (h).

G7573, Anatech Analytical Technology, Afrika Selatan) Persentase penutupan luka dinyatakan dalam
didasarkan pada kuantifikasi adenosine triphosphate persentase dan dihitung menggunakan persamaan (B):
" #
(ATP) intraseluler yang menunjukkan adanya sel yang Luka ð Pra migrasi Þ panjangnya ð Migrasi Þ panjangnya
aktif secara metabolik. 27 Pengujian ini mengukur sinyal ¼
penutupan ð% Þ ð Pra migrasi Þ panjangnya
bercahaya yang dihasilkan oleh konversi ATP menjadi
100
adenosin monofosfat (AMP) oleh enzim luciferase. Sel
diperlakukan dengan kisaran konsentrasi G-AgNPs (4, 8, (B)
dan 16 μg / mL) dan diinkubasi untuk dimana (pra-migrasi) panjangnya adalah panjang luka awal
(µm) pada 0 jam dan (migrasi) panjangnya adalah panjang luka pada
Tabel 1 Parameter Laser waktu tertentu.

Apoptosis Sel
Sumber cahaya Laser Dioda
Panjang gelombang (nm) 830
Emisi Gelombang kontinyu
Pengujian menggunakan Annexin V – fluorescein isothiocyanate (FITC)

Output daya (mW) 104 dan propidium iodide (PI) (BD Biosciences,
Densitas daya (mW / cm 2) 11.4547 556547, The Scientific Group, South Africa) untuk mengidentifikasi
Ukuran bintik (cm 2) 9.1 situs fosfatidil serin pada membran sel apoptosis, serta situs
Kepadatan fluensi / energi (J / cm 2) 5
kerusakan membran pada sel nekrotik, masing-masing. Pengujian
Waktu iradiasi 7 menit 16 dtk
dilakukan sesuai dengan

Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15

kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
6857
Merpati tekan
Dhilip Kumar dkk
petunjuk pabrik dan dianalisis pada flow cytometer BD
Accuri ™ C6. Lampiran V – FITC dideteksi sebagai
fluoresensi hijau dan PI sebagai merah. Setelah perlakuan
dan inkubasi, sel-sel dari semua kelompok dipisahkan dan
dicuci dengan Hanks Balanced Salt Solution (H9394,
Sigma-Aldrich, Afrika Selatan). Sel diresuspensi dalam
buffer pengikat 1X pada konsentrasi 10 6 sel / mL, dan 100
µL suspensi sel dipindahkan ke dalam tabung aliran
sitometri. Lima mikroliter masing-masing reagen Annexin
V-FITC dan PI ditambahkan dan dicampur dan diinkubasi
selama 10 menit pada suhu kamar dalam gelap. Analisis
aliran sitometri dilakukan dalam waktu satu jam dengan
kecepatan 400 kejadian per detik dengan batas 350 μL.
Proliferasi Sel
BD Pharmingen ™ BrdU FITC Flow Kit (BD Biosciences,
559619/557891, The Scientific Group, Afrika Selatan) digunakan
untuk mengukur proliferasi sel. BrdU dimasukkan ke dalam
DNA yang baru disintesis selama fase S dari siklus sel.
Pengujian dilakukan sesuai dengan instruksi pabrikan dan
dianalisis pada BD Accuri TM C6. Setelah perawatan dan inkubasi
yang diinginkan (24 dan 48 jam), 10 6 sel / mL diberi label
dengan 10 μL dari 1 mM BrdU dan diinkubasi selama 1 jam
pada 37 ° C. Sel dibilas dengan 1 mL buffer pewarnaan dan
supernatan dibuang setelah sentrifugasi selama 5 menit pada
300 g. Pelet disuspensi kembali dalam buffer BD Cytofix /
Cytoperm ™ dan diinkubasi selama 10 menit di atas es. Sel
dibilas dan disentrifugasi seperti yang disebutkan sebelumnya
dan pelet disuspensi kembali dalam BD Cytoperm ™
Permeabilization Buffer Plus dan diinkubasi selama 10 menit.
Sel dicuci dan disentrifugasi seperti yang disebutkan
sebelumnya dan pelet disuspensi kembali dan diinkubasi
selama 1 jam pada 37 ° C dalam 300 μg / mL DNase dalam
larutan garam buffer fosfat (DPBS) Dulbecco. Sel dibilas dan
disuspensi kembali dalam Penyangga BD Perm / Wash ™ yang
mengandung antiBrdU dan diinkubasi selama 20 menit pada
suhu kamar.
Filamentous Actin (F-Actin) dan Analisis
Morfologi Nuklir
Morfologi aktin berfilamen dan inti ditentukan dengan pewarnaan
masing-masing dengan Rhodamine Phalloidin (RP) dan Hoechst.
Phalloidin adalah tujuh racun peptida asam amino dari jamur Amanita
phalloides,
6858 kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
Merpati tekan
Merpati tekan
yang mengikat secara khusus dengan bentuk terpolimerisasi aktin
(F-aktin) dan tereksitasi pada 535–585 nm. Hoechst adalah senyawa
turunan bis-benzimidazole yang mengikat alur minor DNA dan
sering digunakan untuk pewarnaan fluoresen tetap dan sel hidup
pada DNA dan inti dalam teknik pencitraan seluler. Hoechst adalah
pewarnaan DNA permeabel sel yang dieksitasi oleh sinar UV dan
memancarkan fluoresensi biru pada 460–490 nm. Setelah
pengobatan dan inkubasi yang diinginkan (24 dan 48 jam), sel
diinkubasi dengan 200 μL 100 nM RP (# PHDR1, Cytoskeleton, Inc.
Biocom Africa (Pty) Ltd, Afrika Selatan) selama 30 menit pada 37 ° C
dalam wadah yang dilembabkan. suasana dalam gelap. Setelah tiga
kali pencucian dengan PBS, nukleus diwarnai dengan 1 μg / mL
Hoechst 33258 (861405, Sigma-Aldrich, Afrika Selatan) selama 10
menit pada suhu 37 ° C dalam suasana lembab dalam gelap, dan
dicuci tiga kali dengan PBS.
Analisis statistik
Semua grafik dibuat dengan GraphPad Prism (Version
5.01). Semua percobaan dilakukan dalam rangkap tiga
untuk memantau reproduktifitas hasil, dan data
dinyatakan sebagai mean ± standar deviasi. Analisis
statistik dilakukan dengan menggunakan SigmaPlot
versi 13.0. Perbedaan antara kelompok ditentukan
dengan menggunakan siswa satu sisi t- tes dan Analisis
Varian Satu Arah (ANOVA). Perbedaan tersebut
bermakna secara statistik bila P ≤ 0,05.
Hasil dan Diskusi
AgNPs dipelajari secara ekstensif untuk aplikasi biologis
multifungsi mereka yang meliputi non-toksik,
biokompatibel,antimikroba dan antiinflamasi
kegiatan. 29 Sifat anti-inflamasi dari AgNPs memainkan peran utama
dalam penyembuhan luka dimana ia menekan kejadian inflamasi
selama fase awal penyembuhan luka pada keduanya. in vivo dan in vitro
model. 30 , 31 Terapi berbasis PBM bersifat non-invasif dan menstimulasi
jalur seluler dalam perbaikan dan regenerasi luka. 32 , 33 Dalam
penyelidikan baru-baru ini, terapi kombinasi nanopartikel berbasis
logam dengan PBM telah dipelajari dalam pengobatan luka ( in vivo). Efek
sinergis dari terapi kombinasi ini telah menunjukkan aktivitas
antibakteri terhadap bakteri patogen serta meningkatkan
penyembuhan luka. Lau et al (2016) baru-baru ini melaporkan tentang
penggunaan gabungan GNP dan PBM (laser dioda 808 nm dengan
fluensi total 5 J / cm 2) dalam sebuah in vivo model luka kulit. Itu
Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15
Merpati tekan Dhilip Kumar dkk

Hasil histologis menunjukkan bahwa pengobatan kombinasi
memiliki efek optimal pada penyembuhan luka dengan
meningkatkan produksi angiogenesis dan kolagen. 34 Dalam
studi lain, Khan et al (2016) menggunakan nanoroda emas dan
laser Nd-YAG (1064 nm) dan mengevaluasi potensi terapi
gabungan pada patogen yang terinfeksi. in vivo model luka.
Hasil pengobatan menunjukkan berkurangnya jumlah bakteri
dan mempercepat penyembuhan luka. 35
Dalam penelitian kami sebelumnya, kami melaporkan
bahwa LSE diekstraksi dari A. arborescence memiliki sifat
fundamental untuk bertindak sebagai agen pereduksi,
capping, dan stabilisasi untuk menghasilkan G-AgNP
melalui pendekatan sintesis hijau, dan G-AgNP memiliki
sifat fisikokimia dan antibakteri yang sangat baik. G-AgNPs
yang disintesis menunjukkan tingkat aktivitas bakterisidal
yang memuaskan terhadap bakteri patogen manusia ( Staphylococcus
mL G-AgNPs diperlukan untuk mencapai konsentrasi penghambatan
aureus dan Pseudomonas aeruginosa). 11 Mengingat
pengamatan ini dan sebagai kelanjutan dari pekerjaan
studi penutupan, apoptosis, dan aktin F serta morfologi
inti.
Viabilitas Seluler
Dalam penelitian ini, biokompatibilitas berbagai konsentrasi G-AgNPs
yang disintesis (4, 8, dan 16 μg / mL) dievaluasi. in vitro menggunakan
Cell Titer-Glo ® uji viabilitas sel bercahaya ( Gambar 1 ). Konsentrasi
G-AgNP yang berbeda dibandingkan dengan kontrol, dan tidak ada
perbedaan yang signifikan pada 4 μg / mL ( p = 0,437), 8 μg / mL ( p =
0,446) dan 16 μg / mL ( p = 0,457). Hasil penelitian menunjukkan bahwa tidak
ada kematian sel yang menonjol terjadi selama pengobatan dengan G-AgNPs,
dan viabilitas seluler sel yang diobati dengan G-AgNP sebanding dengan yang
ada pada kontrol. Jadi, ada kompatibilitas seluler yang baik dari G-AgNPs
terhadap sel WS1. Menurut laporan kami sebelumnya, 8 μg / mL dan 12 μg /
minimum (MIC) dalam sel bakteri Gram-positif dan Gram-negatif,
masing-masing. 11 dan karenanya, kami menggunakan konsentrasi maksimum

kami sebelumnya dalam penyembuhan luka, kami menguji 12 μg / mL di sisa pengujian. Galandakova et al (2015) mengevaluasi toksisitas

efek gabungan G-AgNPs dan PBM pada model sel WS1 luka seluler AgNPs dalam sel fibroblast dan melaporkan bahwa konsentrasi

normal dan luka diabetes melalui metode yang berbeda, hingga 25 μg / mL tidak beracun dan merupakan

termasuk morfologi seluler, viabilitas dan proliferasi,

migrasi seluler tingkat dan persentase luka

Gambar 1 Viabilitas seluler sebagaimana dinilai oleh CellTiter-Glo ® uji viabilitas sel bercahaya. Viabilitas seluler ditentukan dalam sel WS1 yang diberi perlakuan dengan konsentrasi G-AgNPs
yang berbeda (4, 8 dan 16 μ g / mL). Sel yang tidak diobati digunakan sebagai kontrol dan dianalisis 48 jam pasca pengobatan.
Singkatan: μ g / mL, mikrogram per mikroliter; RLU, unit cahaya relatif; G-AgNPs, nanopartikel perak hasil sintesis hijau.

Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15

kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
6859
Merpati tekan
Dhilip Kumar dkk Merpati tekan

kandidat yang paling cocok sebagai agen topikal untuk aplikasi
penyembuhan luka. 36
Morfologi Seluler, Tingkat Migrasi, dan yang sesuai dengan temuan yang baru-baru ini dilaporkan. 21 , 37
Persentase Penutupan Luka
Morfologi seluler, tingkat migrasi, dan persentase
penutupan luka diperiksa. Jarak antara margin luka
diukur pada interval waktu yang berbeda (0, 24, dan 48
jam), dan gambar selang waktu yang sesuai untuk
model sel luka normal dan luka diabetes diberikan di
Angka 2 dan 3 , masing-masing. Kami mengamati bahwa morfologi
sel WS1 tampak datar dan berbentuk spindel (proyeksi bi atau
multipolar) di semua kelompok yang diteliti pada 24 dan 48 jam
baik pada model luka normal maupun model luka diabetes,
Migrasi sel dianggap sebagai langkah penting dalam
penyembuhan luka, dan ini secara langsung menunjukkan
seberapa cepat pengobatan mendorong penutupan luka
secara menyeluruh. 28 Tingkat migrasi (μm / jam) diperoleh dari
percobaan pencitraan sel hidup untuk model luka normal dan
luka diabetes dan digambarkan dalam Gambar 4A dan

Gambar 2 Mikrograf selang waktu dari sel luka normal non-iradiasi (NW 0J); non-iradiasi, G-AgNP merawat sel luka normal (NW 0J NP); iradiasi, sel luka normal (NW 5J); dan diiradiasi,
G-AgNP merawat sel luka normal (NW 5J NP), dianalisis pada 0, 24 dan 48 jam.
Singkatan: μ m, mikrometer; G-AgNP, nanopartikel perak hasil sintesis hijau.

6860 kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15

Merpati tekan
Merpati tekan
Gambar 3 Mikrograf selang waktu dari sel luka diabetes non-iradiasi (DW 0J); sel luka diabetes yang diobati dengan G-AgNP tanpa iradiasi (DW 0J NP); iradiasi, sel luka diabetik (DW 5J); dan
iradiasi, G-AgNP mengobati sel luka diabetes (DW 5J NP), dianalisis pada 0, 24 dan 48 jam.
Singkatan: μ m, mikrometer; G-AgNP, nanopartikel perak hasil sintesis hijau.
5A , masing-masing. Dalam model luka normal pada 24 jam
( Gambar 4A ), baik G-AgNP non-iradiasi merawat sel luka
normal (p <0,05) dan sel luka normal yang dirawat G-AgNP
yang diiradiasi (p <0,01) menunjukkan penurunan yang
signifikan dalam tingkat migrasi dibandingkan dengan
baseline, sel luka normal non-iradiasi ( NW 0J). Peningkatan
yang signifikan diamati pada sel luka normal yang diradiasi
dibandingkan dengan sel luka normal yang dirawat G-AgNP
yang diiradiasi ( p < 0,01). Pada 48 jam terjadi penutupan
luka total sehingga tidak ada pengukuran yang bisa
dilakukan.
Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15
Dhilip Kumar dkk
Dalam model luka diabetes pada 24 jam ( Gambar 5A ),
tingkat migrasi meningkat secara signifikan pada sel luka
diabetes yang diradiasi dibandingkan dengan sel luka
diabetes yang tidak diradiasi ( p < 0,01), dan iradiasi G-AgNP
merawat sel luka diabetes ( p < 0,01). Tingkat migrasi
menurun secara signifikan pada sel luka diabetes yang
diobati dengan G-AgNP yang tidak diradiasi ( p <
0,01) dan iradiasi G-AgNP merawat sel luka diabetes ( p < 0,05)
dibandingkan dengan sel luka diabetes non-iradiasi. Tidak
ada perbedaan yang signifikan secara statistik antara
diabetes yang diobati dengan G-AgNP yang diradiasi
kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
6861
Merpati tekan
Dhilip Kumar dkk Merpati tekan

Gambar 4 Tingkat migrasi ( μ m / h = mikrometer per jam) - ( SEBUAH) Luka normal non iradiasi (NW 0J); non-iradiasi, G-AgNP mengobati luka normal (NW 0J NP); luka normal iradiasi (NW 5J);
dan diiradiasi, G-AgNP mengobati luka normal (NW 5J NP) sel WS1 dianalisis pada 24 dan 48 jam (jam). ( B) Penutupan luka (%)
- Luka normal non iradiasi (NW 0J); non-iradiasi, G-AgNP mengobati luka normal (NW 0J NP); luka normal iradiasi (NW 5J); dan diiradiasi, G-AgNP merawat luka normal (NW 5J NP) sel WS1
dianalisis pada 24 dan 48 jam. Signifikansi ditampilkan sebagai * p <0,05, ** p <0,01 dan *** p <0,001. G-AgNP = Nanopartikel perak hasil sintesis hijau.

Singkatan: G-AgNP, nanopartikel perak hasil sintesis hijau.

6862 kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15

Merpati tekan
Merpati tekan Dhilip Kumar dkk

Gambar 5 Tingkat migrasi ( μ m / h = mikrometer per jam) - ( SEBUAH) Luka diabetes non-iradiasi (DW 0J); luka diabetik yang diobati dengan G-AgNP tanpa iradiasi (DW 0J NP); luka diabetes
iradiasi (DW 5J); dan diiradiasi, G-AgNP mengobati luka diabetes (DW 5J NP) WS1 sel dianalisis pada 24 dan 48 jam (jam). ( B) Penutupan Luka (%) - Luka diabetik non-iradiasi (DW 0J); luka
diabetik yang diobati dengan G-AgNP tanpa iradiasi (DW 0J NP); luka diabetes iradiasi (DW 5J); iradiasi G-AgNP mengobati luka diabetes (DW 5J NP) WS1 sel dianalisis pada 24 dan 48 jam.
Signifikansi ditampilkan sebagai * p <0,05, ** p <0,01 dan *** p <0,001.
Singkatan: G-AgNP, nanopartikel perak hasil sintesis hijau.

Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15

kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
6863
Merpati tekan
Dhilip Kumar dkk
sel luka dan sel luka diabetes yang diobati G-AgNP non-iradiasi
( p = 0,079). Pada 48 jam, tingkat migrasi meningkat secara
signifikan pada sel luka diabetes yang diradiasi ( p < 0,01) dan
penurunan pada sel luka diabetes yang diobati dengan G-AgNP
yang tidak diiradiasi ( p < 0,05) dibandingkan dengan sel luka
diabetes yang tidak disinari.
Persentase penutupan luka diperoleh dari percobaan
pencitraan sel hidup untuk model luka normal dan luka
diabetes dan digambarkan dalam Angka 4B dan 5B ,
( p = 0,017). Tidak ada perbedaan yang signifikan secara
masing-masing. Dalam model luka normal pada 24 jam ( Gambar
4B ), penutupan luka (%) meningkat secara signifikan pada
sel luka normal yang diradiasi dibandingkan dengan sel
luka normal yang dirawat G-AgNP yang diiradiasi ( p < 0,001)
dan sel luka normal non-iradiasi ( p < 0,05). Penutupan luka
secara signifikan menurun pada sel luka normal yang
diobati dengan G-AgNP yang tidak diiradiasi ( p <
0,01) dan iradiasi G-AgNP merawat sel luka normal ( p < 0,01)
dibandingkan dengan sel luka normal yang tidak diradiasi.
Tidak ada perbedaan yang signifikan secara statistik antara sel
luka normal yang diobati dengan G-AgNP yang diiradiasi dan
sel luka normal yang diobati dengan G-AgNP yang tidak
diiradiasi ( p = 0,068). Pada 48 jam, semua kelompok luka
normal menunjukkan penutupan luka total.
Pada model luka diabetik pada 24 jam, terdapat peningkatan
yang signifikan dalam persentase penutupan luka ( Gambar 5B )
pada sel luka diabetes yang diradiasi dibandingkan dengan sel luka
diabetik yang tidak disinari ( p < 0,05), sementara tidak ada
perbedaan yang signifikan antara sel luka diabetes yang diobati
dengan G-AgNP yang diiradiasi dan sel luka diabetes yang diobati
dengan G-AgNP yang tidak diiradiasi ( p = 0,140) diamati. Ada
penurunan yang signifikan dalam persentase penutupan luka pada
sel luka diabetes yang diobati dengan G-AgNP yang tidak diiradiasi
dibandingkan dengan sel luka diabetes yang tidak diiradiasi. Tidak
ada perbedaan signifikan yang diamati antara sel luka diabetes
yang diiradiasi dan sel luka diabetes yang diobati dengan G-AgNP
yang diiradiasi ( p = 0,087). Penutupan luka lengkap dicapai selama
48 jam pada sel luka diabetes yang diobati dengan G-AgNP yang
diiradiasi (100%), sementara hanya 77% penutupan luka yang
dicapai pada sel luka diabetes yang tidak diiradiasi, 91% pada luka
diabetes yang diobati dengan G-AgNP yang tidak diiradiasi sel dan
95% dalam sel luka diabetes yang diradiasi. Pada 48 jam,
penutupan luka (%) meningkat secara signifikan pada sel luka
diabetes yang diobati dengan G-AgNP yang tidak diiradiasi (p
<0,01), sel luka diabetes yang diiradiasi ( p < 0,01), dan iradiasi
G-AgNP merawat sel luka diabetes ( p < 0,001) dibandingkan
dengan sel luka diabetes non-iradiasi.
Perbandingan antara model sel luka normal dan luka
diabetes dilakukan pada 24 jam untuk keduanya
6864 kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
Merpati tekan
Merpati tekan
studi migrasi seluler dan penutupan luka. Pada studi
migrasi didapatkan hasil bahwa terdapat peningkatan yang
signifikan pada sel luka normal dibandingkan dengan sel
luka diabetik (non iradiasi). p = 0,006; G-AgNP noniradiasi
diobati p = 0,006; diradiasi p = 0,007; dan G-AgNP iradiasi
yang dirawat p = 0,025). Dalam studi penutupan luka, hasil
menunjukkan peningkatan yang signifikan dalam
persentase penutupan luka pada sel luka normal non
iradiasi dibandingkan dengan sel luka diabetik non iradiasi
statistik yang diamati pada sel luka normal dibandingkan
dengan sel luka diabetik (G-AgNP non-iradiasi).
p = 0,259; diradiasi p = 0,291; dan G-AgNP iradiasi yang dirawat p
= 0,359).
Secara keseluruhan, kami menemukan tingkat migrasi
progresif dan persentase penutupan luka pada model sel luka
normal dan luka diabetes. Pada 48 jam, semua kelompok dalam
model sel luka normal menunjukkan penutupan luka lengkap. Oleh
karena itu, tidak ada panjang luka yang dapat diukur pada 48 jam.
Pada model luka diabetik, kami mencapai penutupan luka total
pada 48 jam dengan kelompok yang dirawat dengan kombinasi
iradiasi laser dan perawatan G-AgNP. Telah didokumentasikan
dengan baik bahwa iradiasi laser pada 830 nm memiliki efek positif
pada penyembuhan luka diabetes 24 dan penelitian sebelumnya
telah mengkonfirmasi bahwa pengobatan AgNP yang dimodifikasi
dengan asam tanat dapat meningkatkan migrasi sel dalam sel
HaCaT (garis keratinosit manusia yang diabadikan) in vitro. 38 Dengan
demikian, penelitian ini menemukan bahwa penambahan G-AgNPs
pada konsentrasi 12 μg / mL dengan iradiasi laser (pada 830 nm
dengan fluensi 5 J / cm3). 2 ) menunjukkan tidak ada respon toksisitas
terhadap sel dan tingkat migrasi dan penutupan luka sangat mirip
dengan baseline (NW 0J dan DW 0J) pada model sel luka normal
dan luka diabetes, dengan efek menguntungkan pada sel luka
diabetes.
Apoptosis Sel
Persentase jenis populasi sel yang berbeda (viable, early
apoptosis (EA), late apoptosis (LA) dan dead) dipelajari
pada 24 dan 48 jam menggunakan uji apoptosis FITC
Annexin V / PI dengan flow cytometry. Persentase
tahapan sel yang berbeda dari model luka normal dan
luka diabetes ditunjukkan dalam informasi tambahan
(lihat Supplementary Gambar S1 dan Gambar S2 ).
Persentase jumlah sel yang layak dari model luka
normal dan luka diabetes ditunjukkan di Gambar 6A dan
6B.
Dalam model luka normal ( Gambar 6A ), garis dasar
Hasil (NW 0J) dibandingkan dengan semua kelompok lain dan itu
Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15
Merpati tekan Dhilip Kumar dkk

Gambar 6 Penentuan jumlah sel yang layak (%) diukur dengan aliran sitometri. ( SEBUAH) Luka normal non iradiasi (NW 0J); G-AgNP non-iradiasi merawat luka normal (NW 0J NP); luka
normal iradiasi (NW 5J); dan iradiasi G-AgNP merawat luka normal (NW 5J NP) sel WS1 dianalisis pada 24 dan 48 jam (jam). Signifikansi ditampilkan sebagai * p <0,05. ( B) Luka diabetes
non-iradiasi (DW 0J); luka diabetes yang diobati dengan G-AgNP non-iradiasi (DW 0J NP); luka diabetes iradiasi (DW 5J); dan iradiasi G-AgNP mengobati luka diabetes (DW 5J NP) WS1 sel
dianalisis pada 24 dan 48 jam. Signifikansi ditampilkan sebagai * p <0,05 dan ** p <0,01.
Singkatan: G-AgNP, nanopartikel perak hasil sintesis hijau.

Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15

kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
6865
Merpati tekan
Dhilip Kumar dkk
menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan pada 24
dan 48 jam, kecuali untuk penurunan yang signifikan pada sel luka
normal yang dirawat G-AgNP yang diiradiasi pada 48 jam ( p < 0,05).
Pada model luka diabetes ( Gambar 6B ), hasil baseline (DW 0J)
dibandingkan dengan semua kelompok lain dan itu menunjukkan
bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan pada 24 dan 48 jam,
kecuali untuk penurunan yang signifikan pada sel luka diabetik
yang diobati dengan G-AgNP yang tidak diradiasi (DW 0J NP) pada
48 jam ( p < 0,01). Dalam konteks ini, kami mengamati bahwa sel
mencapai kepadatan yang lebih tinggi pada 48 jam, yang dapat
mendorong penghambatan kontak proliferasi (CIP), suatu proses
yang menghentikan semua proliferasi sel dan pembelahan sel
setelah mencapai pertemuan. 39
Perbandingan antara model sel luka normal dan luka
diabetes dilakukan pada 24 dan 48 jam. Pada 24
h, hasil penelitian menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan
yang signifikan antara model sel luka normal dan model sel
luka diabetes (non iradiasi p = 0,398; diradiasi p = 0,289; G-AgNP
noniradiasi diobati p = 0,916 dan G-AgNP iradiasi dirawat p = 0,960).
Pada 48 jam, peningkatan yang signifikan diamati pada sel luka
diabetes non-iradiasi ( p <
0,001) dibandingkan dengan sel luka normal; sementara tidak ada
perbedaan yang signifikan antara iradiasi ( p = 0,219); G-AgNP
non-iradiasi yang dirawat ( p = 0,069) dan G-AgNP iradiasi yang
dirawat ( p = 0,108). Dengan demikian, melalui penelitian ini, kami
mengamati bahwa kombinasi pengobatan G-AgNPs dan PBM tidak
menunjukkan efek merugikan pada viabilitas seluler baik pada
model sel luka normal dan diabetes pada 24 dan 48 jam.
Proliferasi Sel
Proliferasi sel diperiksa dengan penggabungan BrdU.
Persentase nilai populasi sel fase-S diplotkan untuk
model sel luka normal dan luka diabetes dan
ditunjukkan pada Gambar 7A dan 7B.
Dalam model luka normal ( Gambar 7A ), garis dasar
Hasil (NW 0J) dibandingkan dengan semua kelompok lain dan
itu menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan
pada 24 dan 48 jam dalam persentase populasi sel fase-S,
kecuali untuk peningkatan yang signifikan pada sel luka
normal yang dirawat G-AgNP yang diiradiasi. pada 24 jam ( p < 0,05).
perbaikan luka. 41 , 42
Tidak ada perbedaan signifikan yang terlihat pada 24 dan 48
jam pada model luka diabetes ( Gambar 7B ). Perbandingan
antara model sel luka normal dan luka diabetes dilakukan pada
24 dan 48 jam untuk persentase populasi sel fase S. Pada 24
jam, hasil menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang
signifikan antara model sel luka normal dan model sel luka
diabetes (non-iradiasi p = 0,405; diradiasi p = 0,107; G-AgNP
non-iradiasi diobati p = 0,037; dan diradiasi
6866 kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
Merpati tekan
Merpati tekan
G-AgNP dirawat p = 0,034). Demikian pula, pada 48 jam, tidak ada
perbedaan yang signifikan (tidak disinari p = 0,295; diradiasi
p = 0,385, G-AgNP non-iradiasi dirawat p = 0,978; dan G-AgNP
iradiasi yang dirawat p = 0,257).
Hasil ini menunjukkan bahwa pengobatan kombinasi
menggunakan G-AgNPs dan PBM tidak mengubah mekanisme
proliferasi sel dalam fase S selama in vitro Proses
penyembuhan luka pada model luka normal dan model sel
luka diabetik, yang didukung oleh hasil yang terlihat pada
tingkat migrasi sel, persentase penutupan luka dan jumlah sel
yang layak. Dilaporkan bahwa proses perbaikan sel terutama
melibatkan migrasi sel dan proliferasi sel dalam penyembuhan
luka. 40 Seperti yang kita bahas sebelumnya dalam studi
apoptosis sel, fenomena serupa, seperti CIP, terlibat selama 48
jam dan dapat menghentikan proliferasi sel dan pembelahan
sel begitu kultur mencapai pertemuan. 39
Analisis Aktin dan Morfologi
Nuklir Filamentous
F-aktin dan morfologi nuklir pada luka normal ( Gambar 8A )
dan sel luka diabetes ( Gambar 8B ) ditentukan pada 24 dan
48 jam menggunakan mikroskop fluoresensi. Sel yang
diwarnai Hoechst (biru) tidak menunjukkan perubahan
bentuk inti, dan akumulasi Hoechst memastikan
kekakuannya di semua kelompok yang diteliti baik pada
model sel luka normal dan luka diabetes. Sel yang diwarnai
Rhodamine-Phalloidin (merah) menunjukkan adanya serat
stres F-aktin padat dalam sel WS1. Ketebalan dan
kepadatan serat F-aktin secara substansial meningkat pada
48 jam dibandingkan dengan 24 jam pada model sel luka
normal dan luka diabetes, yang mungkin terjadi karena
reorganisasi serat F-aktin sitoskeletal. Singkatnya, hasil ini
menunjukkan bahwa G-AgNP dan PBM tidak menyebabkan
efek buruk pada struktur normal F-aktin dan morfologi inti
selama in vitro proses penyembuhan luka. Dalam
penyembuhan luka, restorasi atau penataan ulang
sitoskeleton dianggap sebagai proses yang penting, dan
perubahan dinamis ekspresi F-aktin dalam sitoskeleton
sangat terkait dengan motilitas sel dan mekanisme
Kesimpulan
Kami menggunakan konsentrasi 12 μg / mL G-AgNPs selama
penelitian ini dan menunjukkan kompatibilitas seluler yang
baik terhadap sel WS1. Kami menemukan bahwa G-AgNP
sendiri dan dalam kombinasi dengan PBM tidak menunjukkan
efek merugikan pada jumlah viabilitas seluler dan tidak
Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15
Merpati tekan Dhilip Kumar dkk

Gambar 7 Penentuan proliferasi sel dengan penggabungan BrdU dalam DNA yang baru disintesis yang diukur dengan flow cytometry (% sel dalam proliferatif, fase S). ( SEBUAH)
Luka normal non iradiasi (NW 0J), luka normal tanpa iradiasi G-AgNP diobati (NW 0J NP); luka normal iradiasi (NW 5J); dan iradiasi G-AgNP merawat luka normal (NW 5J NP) sel WS1 dianalisis
pada 24 dan 48 jam (jam). ( B) Luka diabetes non-iradiasi (DW 0J); luka diabetes yang diobati dengan G-AgNP non-iradiasi (DW 0J NP); luka diabetes iradiasi (DW 5J); dan iradiasi G-AgNP yang
diobati dengan luka diabetes (DW 5J NP) WS1 dianalisis pada 24 dan 48
h. Signifikansi ditampilkan sebagai * p <0,05.

Singkatan: G-AgNP, nanopartikel perak hasil sintesis hijau.

Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15

kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
6867
Merpati tekan
Dhilip Kumar dkk Merpati tekan

Angka 8 Analisis aktin berfilamen (Rhodamine Phalloidin, merah) dan morfologi inti (pewarnaan Hoechst, biru) pada 24 dan 48 jam. ( SEBUAH) Model sel luka normal (NW): noniradiasi (NW
0J); G-AgNP non-iradiasi yang dirawat (NW 0J NP); iradiasi (NW 5J); dan G-AgNP iradiasi yang dirawat (NW 5J NP). ( B) Model sel luka diabetes (DW): non-iradiasi (DW 0J); G-AgNP non-iradiasi
yang dirawat (DW 0J NP); iradiasi (DW 5J); dan G-AgNP iradiasi yang dirawat (DW 5J NP).
Singkatan: G-AgNP, nanopartikel perak hasil sintesis hijau.

mengubah mekanisme proliferasi sel dalam fase-S selama h. Secara keseluruhan, temuan ini menunjukkan bahwa kombinasi G-AgNP

in vitro proses penyembuhan luka pada model sel luka dan PBM dapat digunakan dalam aplikasi penyembuhan luka, termasuk

normal dan luka diabetes. Ini menunjukkan tingkat penyembuhan luka diabetik. Namun,

migrasi progresif, penutupan luka lengkap, dan in vivo uji coba pada terapi kombinasi ini diperlukan, serta patogen
peningkatan ketebalan dan kepadatan F-aktin pada 48 lebih lanjut yang terinfeksi in vitro model untuk membuka kunci

6868 kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15

Merpati tekan
Merpati tekan
mekanisme molekuler dan tanggapannya dalam
penyembuhan luka.
Singkatan
A. arborescens, Aloe arborescens; AgNPs,
nanopartikel perak; AMP, adenosin monofosfat;
ANOVA, analisis varian; ATCC, koleksi budaya tipe
Amerika; ATP, adenosin trifosfat; DNA, asam
deoksiribonukleat; DW, luka diabetes; DW 0J, luka
diabetik non-iradiasi; DW 0J NP, G-AgNP mengobati
luka diabetes non-iradiasi; DW 5J NP, G-AgNP
mengobati luka diabetes yang diiradiasi; DW 5J, luka
diabetes diiradiasi; FBS, serum sapi janin; FITC,
fluorescein isothiocyanate; G-AgNPs, nanopartikel
perak hasil sintesis hijau; GNP, nanopartikel emas;
LSE, ekstrak getah daun; MEM, media esensial
minimum; MIC, konsentrasi hambat minimum; NEAA,
asam amino nonesensial; Nd-YAG, laser garnet
aluminium yttrium yang didoping neodymium; NIR,
laser inframerah-dekat; NP, nanopartikel; NW 0J, luka
normal tidak terkena radiasi; NW 0J NP, G-AgNP
merawat luka normal non-iradiasi; NW 5J NP, G-AgNP
merawat luka normal yang diiradiasi; NW 5J, luka
iradiasi normal; NW, luka normal; PBM,
fotobiomodulasi; PBS, garam dengan buffer fosfat;
PI, propidium iodida; RLU, unit cahaya relatif; RP,
rhodamine phalloidin; UV, ultraviolet.
Ucapan Terima Kasih
Sathish Sundar Dhilip Kumar didukung oleh dana
dari Claude Leon Foundation, Afrika Selatan.
Pekerjaan ini didasarkan pada penelitian yang
didukung oleh South African Research Chairs
Initiative dari Department of Science and Technology
dan National Research Foundation of South Africa
(Grant No 98337), serta hibah yang diterima dari
University of Johannesburg (URC), National Research
Foundation (NRF), dan CSIR (Council for Scientific and
Industrial Research) - Program Kolam Penyewaan
Laser NLC (National Laser Center).
Kontribusi Penulis
SSDK membuat konsep ide dan menyiapkan artikel. NNH
terlibat dalam penyusunan naskah, merevisinya secara kritis
untuk konten intelektual, memberikan bimbingan profesional
dan merupakan pengawas dari penulis utama. HA mengatur
penelitian ini dan memberikan masukan editorial. Semua
penulis membaca dan menyetujui naskah akhir. Semua penulis
Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15
Dhilip Kumar dkk
berkontribusi pada analisis data, menyusun, atau merevisi artikel,
memberikan persetujuan akhir dari versi yang akan diterbitkan, dan
setuju untuk bertanggung jawab atas semua aspek pekerjaan.
Penyingkapan
Penulis mengonfirmasi bahwa konten artikel ini tidak memiliki konflik
kepentingan
Referensi
1. Katsilambros N, Dounis E, Makrilakis K, Tentolouris N, Tsapogas P.
Atlas Kaki Diabetes. Edisi ke-2. Oxford: Wiley-Blackwell; 2010 .
2. Frykberg RG, Banks J. Manajemen ulkus kaki diabetik: tinjauan.
Praktik Makan. 2016 ; 33: 16–23.
3. El-Naggar MY, Gohar YM, Sorour MA, Waheeb MG. Hydrogel dres- sing
dengan nano-formula melawan methicillin-resistant staphylococcus
aureus dan bakteri pseudomonas aeruginosa diabetic foot. J Microbiol
Biotechnol. 2016 ; 26 (2): 408–420. doi: 10.4014 / jmb.1506.06048
4. Zhang XQ, Xu X, Bertrand N, dkk. Interaksi nanomaterial dan sistem
biologis: implikasi untuk nanomedicine yang dipersonalisasi. Adv Drug
Deliv Rev. 2012 ; 64: 1363–1384. doi: 10.1016 / j.addr.2012.08.005
5. Dhilip Kumar SS, Rajendran NK, Houreld NN, Abrahamse H. Kemajuan
terbaru pada nanopartikel perak dan bahan hayati berbasis biopolimer
untuk aplikasi penyembuhan luka. Int J berbagai Macromol.
2018 ; 115: 165–175. doi: 10.1016 / j.ijbiomac.2018.04.003
6. Chaloupka K, Malam Y, Seifalian AM. Nanosilver sebagai generasi baru
produk nano dalam aplikasi biomedis. Tren Biotechnol.
2010 ; 28: 580–588. doi: 10.1016 / j.tibtech.2010.07.006
7. Tian J, dkk. Pengiriman topikal nanopartikel perak meningkatkan penyembuhan
luka. Chem Med Chem. 2006 ; 2: 129–136. doi: 10.1002 / cmdc.200 600171
8. Rigo C, Ferroni L, Tocco I, dkk. Nanopartikel perak aktif untuk
penyembuhan luka. Int J Mol Sci. 2013 ; 14: 4817–4840. doi: 10.3390 /
ijms14034817
9. Sibbald RG, Contreras-Ruiz J, Coutts P, dkk. Bakteriologi, inflamasi, dan
penyembuhan: studi tentang balutan nanokristalin perak pada ulkus kaki
vena kronis. Perawatan Luka Kulit Adv. 2007 ; 20: 549–558. doi: 10.1097 /
01.ASW.0000294757.05049.85
10. Huang Y, Li X, Liao Z, dkk. Percobaan komparatif acak antara Acticoat dan
SD-Ag dalam pengobatan sisa luka bakar, termasuk analisis keamanan. Luka
bakar. 2007 ; 33: 161–166.
doi: 10.1016 / j.burns.2006.06.020
11. Dhilip Kumar SS, Houreld NN, Kroukamp EM, Abrahamse H. Pencitraan
seluler dan mekanisme bakterisidal dari nanopartikel perak yang
disintesis hijau melawan bakteri patogen manusia. J Photochem
Photobiol B. 2018 ; 178: 259–269. doi: 10.1016 / j.jphotobiol. 2017.11. 001
12. Mbanga J, Mangoma N, Saidi B. Evaluasi aktivitas antimikroba ekstrak
daun A. barbadensis, A. chabaudii dan A. arborescens yang digunakan
dalam cerita rakyat kedokteran hewan di Zimbabwe. J Anim Vet Adv. 2010 ;
9: 2918–2923.
13. Jia Y, Zhao G, Jia J. Evaluasi awal: efek Aloe ferox Miller dan Aloe
arborescens Miller pada penyembuhan luka.
J Ethnopharmacol. 2008 ; 120: 181–189. doi: 10.1016 / j.jep.2008.08.008
14. Amoo SO, Aremu AO, Van Staden J. Regenerasi tanaman in vitro, produksi metabolit
sekunder dan aktivitas antioksidan dari Pabrik Aloe arborescens hasil perbanyakan
mikro. Kultus Organ Jaringan Sel Tumbuhan.
2012 ; 111: 345–358. doi: 10.1007 / s11240-012-0200-3
15. Altaf M, Jaganyi D. Karakterisasi nanopartikel emas segitiga
menggunakan ekstrak daun Aloe arborescens: pendekatan sintesis hijau.
Synth React Inorg Met-Org Nano-Metal Chem. 2016 ; 46: 1332–1335. doi:
10.1080 / 15533174.2015.1068810
kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
6869
Merpati tekan
Dhilip Kumar dkk
16. Duan H, Wang D, Li Y. Kimia hijau untuk sintesis partikel nano.
Chem Soc Rev. 2015 ; 44: 5778–57792. doi: 10.1039 / C4CS00363B
17. Makarov VV, Love AJ, Sinitsyna OV, dkk. Nanoteknologi “Hijau”: sintesis
nanopartikel logam menggunakan tumbuhan. Acta Naturae.
2014 ; 6 (1): 35–44. doi: 10.32607 / 20758251-2014-6-1-35-44
18. Houreld NN. Menjelaskan pengobatan baru untuk penyembuhan luka
diabetik: tinjauan tentang fototerapi. Sci World J. 2014 ; 2014: 1–13. doi:
10.1155 / 2014/398412
19. Kuffler DP. Fotobiomodulasi dalam mempromosikan penyembuhan luka:
tinjauan. Regen Med. 2016 ; 11: 107–122. doi: 10.2217 / rme.15.82
20. Obradovic R. Laser tingkat rendah sebagai tambahan dalam terapi periodontal
pada pasien dengan Diabetes mellitus. Ada Technol Diabetes. 2012 ; 14:
799–803. doi: 10.1089 / dia.2012.0027
21. Ayuk SM, Houreld NN, Abrahamse H. Produksi kolagen pada fibroblas
luka diabetika dalam menanggapi iradiasi laser intensitas rendah pada
660 nm. Ada Technol Diabetes. 2012 ; 14: 1110–1117. doi: 10.1089 /
dia.2012.0125
22. Jonkman JEM, Cathcart JA, Xu F, dkk. Pengantar uji penyembuhan luka
menggunakan mikroskop sel hidup. Sel Adh Migr.
2014 ; 8: 440–451. doi: 10.4161 / cam.36224
23. Houreld N, Abrahamse H. Iradiasi laser intensitas rendah merangsang
penyembuhan luka pada sel fibroblast luka diabetik (WS1). Ada Technol
Diabetes. 2010 ; 12: 971–978. doi: 10.1089 / dia.2010.0039
24. Houreld NN, Sekhejane PR, Abrahamse H. Iradiasi pada 830 nm merangsang produksi
oksida nitrat dan menghambat sitokin pro-inflamasi pada sel fibroblast yang terluka
akibat diabetes. Laser Surg Med.
2010 ; 42: 494–502. doi: 10.1002 / lsm.20812
25. Stadler I, Lanzafame RJ, Evans R, dkk. Iradiasi 830 nm meningkatkan
kekuatan tarik luka dalam model tikus diabetes. Laser Sur Med. 2001 ; 28:
220–226. doi: 10.1002 / lsm.1042
26. Houreld N, Abrahamse H. Sinar laser mempengaruhi viabilitas seluler dan
proliferasi sel fibroblast yang terluka akibat diabetes dengan cara yang
bergantung pada dosis dan panjang gelombang. Laser Med Sci. 2008 ; 23:
11–18. doi: 10.1007 / s10103-007-0445-y
27. Hawkins D, Abrahamse H. Metode laboratorium untuk mengevaluasi efek
terapi laser tingkat rendah (LLLT) dalam penyembuhan luka. Afr J Biomed
Res. 2005 ; 8: 1–14.
28. Fox LT, Mazumder A, Dwivedi A, dkk. Penyembuhan luka in vitro dan
aktivitas sitotoksik gel dan bahan daun utuh dari spesies lidah buaya
terpilih. J Ethnopharmacol. 2017 ; 200: 1–7. doi: 10.1016 / j.
jep. 2017.02.017
29. Zhang XF, Liu ZG, Shen W, Gurunathan S. Nanopartikel perak: sintesis,
karakterisasi, properti, aplikasi dan pendekatan terapeutik. Int J Mol Sci. 2016 42. Muller S, Djudjaj S, Lange J, dkk. Stabilisasi HIF menghambat migrasi sel
. doi: 10.3390 / ijms17091534.
30. Wright JB, Lam K, Buret AG, Olson ME, Burrell RE. Peristiwa penyembuhan
awal dalam model babi dari luka yang terkontaminasi: efek nano-kristal
perak pada metaloproteinase matriks, apoptosis sel, dan penyembuhan. Perbaikan
Luka Regen. 2002 ; 10: 141–151. doi: 10.1046 / j.1524- 475X.2002.10308.x
Jurnal Internasional Nanomedicine
Publikasikan pekerjaan Anda di jurnal ini
International Journal of Nanomedicine adalah jurnal internasional
peer-review yang berfokus pada penerapan nanoteknologi dalam
diagnostik, terapeutik, dan sistem pengiriman obat di seluruh bidang
biomedis. Jurnal ini diindeks di PubMed Central, MedLine, CAS, SciSearch ®,
Isi Saat Ini ® / Obat klinis,
Kirimkan naskah Anda di sini: https://www.dovepress.com/international-journal-of-nanomedicine-journal
6870 kirimkan naskah Anda | www.dovepress.com
Merpati tekan
Merpati tekan
31. Frankova J, Pivodova V, Vagnerova H, Juranova J, Ulrichova J. Pengaruh
nanopartikel perak pada kultur sel primer fibroblas dan keratinosit dalam
model penyembuhan luka. J Appl Biomater Func.
2016 ; 14: e137– e142.
32. Yadav A, Verma S, Keshri GK, Gupta A. Kombinasi madu obat dan
fotobiomodulasi bermediasi laser superpulsi 904 nm meningkatkan
penyembuhan dan menghambat peradangan, nyeri pada luka bakar
ketebalan penuh. J Photochem Photobiol B. 2018 ; 186: 152–159. doi:
10.1016 / j. jphotobiol. 2018.07.008
33. Ayuk SM, Abrahamse H, Houreld NN. Peran fotobiomodulasi pada
ekspresi gen molekul adhesi sel pada fibroblas luka diabetik in vitro. J
Photochem Photobiol B.
2016 ; 161: 368–374. doi: 10.1016 / j.jphotobiol. 2016.05.027
34. Lau P, Bidin N, Islam S, dkk. Pengaruh nanopartikel emas pada pengobatan
penyembuhan luka pada model tikus: terapi fotobiomodulasi.
Laser Surg Med. 2016 ; 49: 380–386. doi: 10.1002 / lsm.22614
35. Khan MS, Bhaisare ML, Gopal J, Wu HF. Fototerapi laser berbantuan emas
nanorods yang sangat efisien untuk pengobatan cepat pada luka tikus
yang terinfeksi oleh bakteri patogen. J Ind Eng Chem.
2016 ; 36: 49–58. doi: 10.1016 / j.jiec.2015.12.011
36. Galandakova A, Franková J, Ambrožová N, dkk. Pengaruh nanopartikel
perak pada fibroblas kulit manusia dan keratinosit epidermal. Hum Exp
Toxicol. 2015 ; 35: 946–957. doi: 10.1177 / 0960327115611969
37. Jere SW, Houreld NN, Abrahamse H. Photobiomodulation pada 660 nm
merangsang proliferasi dan migrasi sel luka diabetes melalui ekspresi
faktor pertumbuhan epidermal dan jalur JAK / STAT. J Photochem
Photobiol B. 2018 ; 179: 74–83. doi: 10.1016 / j. jphotobiol. 2017.12.026
38. Orlowski P, Zmigrodzka M, Tomaszewska E, dkk. Nanopartikel perak yang
dimodifikasi dengan asam tanat untuk penyembuhan luka: pentingnya
ukuran. Int J Nanomed. 2018 ; 13: 991–1007. doi: 10.2147 / IJN.S154797
39. Pavel M, dkk. Penghambatan kontak mengontrol kelangsungan hidup dan
proliferasi sel melalui sumbu autofagi YAP / TAZ. Nat Commun. 2018 : 9. doi:
10.10 38 / s41467-018-05388-x.
40. Zahm JM, Kaplan H, Hérard AL, dkk. Migrasi dan proliferasi sel selama
perbaikan luka in vitro pada epitel pernapasan.
Sitoskeleton Motil Sel. 1997 ; 37: 33–43. doi: 10.1002 / (SICI) 1097- 0169
(1997) 37: 1 <33 :: AID-CM4> 3.0.CO; 2-I
41. Abreu-Blanco MT, Watts JJ, Verboon JM, Parkhurst SM. Respon sitoskeleton
dalam perbaikan luka. Cell Mol Life Sci.
2012 ; 69: 2469–2483. doi: 10.1007 / s00018-012-0928-2
epitel ginjal dan berhubungan dengan perubahan sitoskeletal. Rep. Sci 2018
; 8. doi: 10.1038 / s41598-018-27918-9.
Merpati tekan
Laporan Kutipan Jurnal / Edisi Sains, EMBase, Scopus dan database Bibliografi
Elsevier. Sistem manajemen naskah sepenuhnya online dan mencakup sistem
tinjauan sejawat yang sangat cepat dan adil, yang semuanya mudah
digunakan. Kunjungi http://www.dovepress.com/ testimonials.php untuk
membaca kutipan nyata dari penulis yang diterbitkan.
Jurnal Internasional Nanomedicine 2020: 15