PROTOKOL UJI

BIOEKIVALENSI SEDIAAN
ORAL LEPAS CEPAT
PIOGLITAZONE HCL
Praktikum Biofarmasi Farmakokinetika II

F-9:
FELITA SUSANTO/110117071
NICOLE GERALDINE C./110117074
REZA AZIZUL H./110117250
1. Latar Belakang

Pioglitazone 5-((4-(2-(5-ethyl-2-pyridinyl)ethoxy)phenyl)methyl)-2,4-
thiazolidinedione, mempunyai rumus empiris C19H20N2O3S, dan rumus strukturnya
digambarkan sebagai berikut :

Pioglitazone adalah obat antidiabetik golongan tiazolidindion peka insulin yang

diberikan secara oral yang telah dikembangkan untuk pengobatan diabetes mellitus
tipe 2. Studi menunjukkan bahwa pioglitazone merangsang pengambilan glukosa dan
asam lemak ke dalam sel dengan mempromosikan sintesis dan ekspresi transpoter
glukosa seluler dan asam lemak. Konsentrasi plasma puncak terjadi dalam 2 jam dan
bioavailabilitas melebihi 80%. Cmax rata-rata pioglitazone berkisar antara 1,01 μg /
mL dan 1,05 μg / mL, sedangkan rata-rata AUC0-~ dan AUC0-t berkisar antara 10,89
μg · jam / mL dan 10,98 μg · jam / mL serta antara 10,56 μg · jam / mL dan 10,62 µg
· jam / mL masing-masing untuk formulasi uji dan referensi. T ½ untuk tablet uji
adalah 3-7 jam. Tmax rata-rata untuk tablet uji adalah 1,50 jam dan untuk referensi
adalah 1,75 jam.

Menurut BPOM, salah satu kriteria obat oral yang perlu diuji bioekivalensi in
vivo adalah obat yang digunakan untuk kondisi yang serius yang memerlukan respons
terapi yang pasti (critical use drugs), yang salah satu contohnya adalah obat oral
hipoglikemik, yang mencakup golongan tiazolidindion. Dengan kata lain, uji
bioekivalensi in vivo ini perlu dilakukan terhadap obat pioglitazone. Oleh sebab itu,
perlu dirancang penelitian untuk mengevaluasi bioekivalensi dari formulasi
pioglitazone generik baru yang ingin diedarkan. Evaluasi bioekivalensi ini dilakukan
 dengan membandingkan biovailabilitas dari formulasi pioglitazone generik baru yang
ingin mendapat izin edar terhadap formulasi pioglitazone inovator.

2. Tujuan Penelitian

Penelitian ini dimaksudkan untuk menguji bioekivalensi tablet Pioglitazone HCl 30

mg yang diproduksi oleh pabrik Eczacıbas¸ı Pharmaceuticals di Istanbul, Turki
terhadap tablet pioglitazone HCl 30 mg inovator (Actos ®).

a. Tujuan umum : Untuk menjamin efikasi, keamanan dan mutu tablet Pioglitazone
HCl 30 mg yang diproduksi oleh pabrik Eczacıbas¸ı Pharmaceuticals di Istanbul,
Turki yang beredar.
b. Tujuan khusus : Untuk menjamin obat tablet Pioglitazone HCl 30 mg yang
diproduksi oleh pabrik Eczacıbas¸ı Pharmaceuticals di Istanbul, Turki bioekivalen
dengan obat inovator dan untuk menentukan bioavailabilitas relatif pioglitazone
pada formulasi obat uji untuk uji klinis produk yang akan diedarkan.

3. Rancangan Penelitian
3.1 Penelitian ini dirancang untuk mengevaluasi bioekivalensi tablet Pioglitazone
HCl 30 mg uji terhadap tablet pioglitazone HCl 30 mg inovator (Actos ®) sebagai
referensi.
3.2 Penelitian ini dilakukan sesuai dengan standar yang diterima secara internasional
dari Praktik Klinik yang Baik, Praktik Laboratorium yang Baik, persyaratan
peraturan lokal, dan prinsip-prinsip Deklarasi Helsinki (Edinburgh, Skotlandia,
2000).
3.3 Di dalam penelitian ini terdapat 26 subyek yang terdaftar menyelesaikan studi,
dimana 2 subyek merupakan subyek cadangan. Sesuai dengan protokol
penelitian, sampel plasma dari 24 subjek awal yang menyelesaikan penelitian
dianalisis dan digunakan untuk analisis farmakokinetik dan statistik.
3.4 Uji coba dilakukan sesuai dengan desain menyilang acak label terbuka di satu
pusat studi, saat masing-masing dua periode penelitian, dimana per periode
penelitian memerlukan waktu selama 5 hari (dipisahkan oleh periode wash out
selama 14 hari), dengan total waktu penelitian selama 24 hari.
 Subyek Produksi Obat
Waktu I Waktu II
1 A B
2 B A
3 A B
4 B A
5 A B
6 B A
7 A B
8 B A
9 A B
10 B A
11 A B
Periode Wash out 2
12 B A
minggu
13 A B
>5x t1/2= >5x 3 s/d
14 B A
>5x 7= >15-35 jam
15 A B
16 B A
17 A B
18 B A
19 A B
20 B A
21 A B
22 B A
23 A B
24 B A
25 A B
26 B A

A : Produk Uji (Pioglitazone HCL)

B : Produk Referensi

4. Kriteria Pemilihan Subyek

Berjenis kelamin pria, sehat, tidak merokok, berusia antara 18-55 tahun. Subyek
ditentukan memenuhi kriteria protokol melalui penilaian terhadap rekam medis, data
demografi, riwayat pengobatan, tanda vital dan uji laboratorium.

5. Prosedur
5.1 Perlakuan terhadap Subyek
5.1.1 Subyek diminta berkumpul pada pukul 06.00 untuk melaksanakan
prosedur uji. Sebelumnya subyek telah dipuasakan selama 10 jam, dengan
 kata lain tidak mengkonsumsi makanan atau minuman selain air putih
sejak pukul 22.00 sehari sebelumnya.
5.1.2 Sebelum diberikan obat, sampel darah subyek diambil terlebih dahulu
sebanyak 10,0 mL pada pukul 07.00 (t0). Lalu, pada pukul 07.15 subyek
diberi 1 tablet pioglitazone HCl uji (Perlakuan A)/referensi (Perlakuan B)
yang diminum bersama air putih. Sampel darah subyek lalu diambil
sebanyak 10,0 mL tiap jam ke 0.5, 1.0, 1.5, 1.75, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0,
4.5, 5.0, 6.0, 8.0, 10.0, 12.0, 16.0, 24.0, 36.0, 48.0, 72.0, 96.0, dan 120.0
setelah obat diminumkan.
5.1.3 Sampel darah tersebut diambil bagian plasma dengan mensentrifugasi
darah yang sudah diberi antikoagulan. Plasma yang didapat lalu disimpan
pada freezer dalam suhu -80° C (-65° C s/d -85° C) sampai dilakukan
analisis.
5.1.4 Setelah pemberian obat pertama, dilakukan prosedur yang sama dengan
memberikan obat pembanding setelah periode wash out.
5.1.5 Sarapan dan makan malam yang sudah distandarkan diberikan ke subyek
pada 4 dan 10 jam setelah obat dikonsumsi.
5.2 Detail Bahan Penelitian
5.2.1 Bahan Penelitian
Tablet pioglitazone HCl 30 mg generik diproduksi oleh pabrik Eczacıbas¸ı
Pharmaceuticals di Istanbul, Turki sebagai obat uji dan tablet pioglitazone
HCl 30 mg inovator (Actos ®) sebagai obat referensi.
5.2.2 Jadwal Pengamatan dan Pengumpulan Sampel
Sampel darah diambil 15 menit sebelum subyek meminum obat pada
pukul 07.00 (t0) dan pada jam ke 0.5, 1.0, 1.5, 1.75, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0,
4.5, 5.0, 6.0, 8.0, 10.0, 12.0, 16.0, 24.0, 36.0, 48.0, 72.0, 96.0, dan 120.0
setelah obat diminumkan.

Waktu
t (jam) (pukul Keterangan
)
0.0 07.00 Sampel sebelum obat diberikan (10,0 mL)
0.5 07.30
Sampel sebelum Cp max (10,0 mL)
1.0 08.00
1.5 08.30
1.75 08.45 Sampel sekitar Cp max (10,0 mL)
2.0 09.00
 2.5 09.30
3.0 10.00
3.5 10.30
4.0 11.00
4.5 11.30
5.0 12.00
6.0 13.00
8.0 15.00
10.0 17.00 Sampel setelah Cp max (10,0 mL)
12.0 19.00
16.0 23.00
24.0 07.00
36.0 19.00
48.0 07.00
72.0 07.00
96.0 07.00
120.0 07.00

5.3 Efek samping

Fraktur tulang, mati rasa/numbness, gangguan penglihatan, peningkatan berat
badan, edema makular, insomnia, kanker kandung kemih (tidak umum), disfungsi
liver (jarang).

6. Kriteria Pengeluaran Subyek

6.1 Subyek yang hipersensitif dengan pioglitazone
6.2 Subyek dengan riwayat gagal jantung
6.3 Subyek yang sedang/sebelumnya mengidap kanker kandung kemih
6.4 Subyek dengan hematuria tidak terinvestigasi makroskopik

7. Macam Cuplikan Biologik

7.1 Waktu-waktu pengambilan :
Darah: 15 menit sebelum minum obat, jam ke 0,5; 1,0; 1,5; 1,75; 2,0; 2,5; 3,0;
3,5; 4.0; 4.5; 5.0; 6.0; 8.0; 10.0; 12.0; 16.0; 24.0; 36.0; 48.0; 72.0; 96.0 dan 120
setelah obat diminum.
7.2 Gambaran cara penanganan cuplikan:
7.2.1 Pengambilan darah :
a. Disinfeksi dengan alcohol swab daerah kulit subyek yang akan
disuntik.
 b. Pasang ikatan (tourniquet) pada tangan bagian atas subyek.

c. Beri label identitas subjek pada tabung. Untuk preparasi plasma,

dinding dalam tabung diberi antikoagulan.

d. Tegangkan kulit di atas vena subyek dengan jari tangan kiri agar vena
tidak bergeser, kemudian tusuk vena dengan jarum IV canula.

e. Setelah darah terlihat mengalir dari pembuluh darah vena ke dalam

jarum, tarik jarum keluar, tinggalkan plastik IV canula di dalam
pembuluh darah dan masukkan pelan-pelan sampai batas yang
ditentukan.

f. Masukan syringe ke dalam hub canula kemudian ambil sampel darah

sesuai yang dibutuhkan

g. Tutup IV canula dengan instopper, lalu plester IV canula dengan

micropore.
h. Lepas ikatan tourniquet dari lengan subyek.
i. Catat waktu saat subyek minum obat pada catatan pengambilan darah.

j. Pengambilan berikutnya buka instopper, lalu ulangi poin f hingga h.

k. Beri tanda/paraf catatan pengambilan darah sesuai kolom waktunya

setiap selesai melakukan pengambilan darah.

7.2.2 Penanganan darah :

a. Sampel darah diambil bagian plasma dengan cara mensentrifugasi
darah yang sudah diberi antikoagulan.
b. Konsentrasi plasma pioglitazone dan hidroksi-pioglitazone diukur
dengan metode LC / MS / MS yang sensitif dan spesifik
7.2.3 Penyimpanan sampel :
Simpan pada suhu −80 °C (−65 °C to −85 °C) freezer

8. Kriteria Pemasukan Dan Pengeluaran Cuplikan

Data cuplikan dapat dikeluarkan dari studi jika:

a. Subyek muntah setelah minum obat Pioglitazone selama pengambilan sampel

darah
b. Subyek diare selama pengambilan sampel darah
 9. Pertimbangan Etik
9.1 Formulir Persetujuan Dari Subyek

FORMULIR PERNYATAAN PERSETUJUAN UJI KLINIK

(No: 001/04/Form/____/Subjek_Pioglitazone/I/2020)
Yang bertanda tangan di bawah ini:
Nama :
Alamat :
Tempat/Tanggal Lahir :
Pekerjaan :
No. KTP :

Menyatakan bahwa semua penjelasan di atas telah disampaikan kepada saya dan
semua pertanyaan saya telah dijawab oleh dokter, saya mengerti dan bila masih memerlukan
penjelasan, saya akan mendapat penjelasan dari dr.....................................

Demikian pernyataan ini saya buat dengan kesadaran penuh dan tanpa paksaan,
dengan menandatangani surat ini saya setuju untuk menjadi sukarelawan dalam penelitian
ini.
Tanggal:

Calon Sukarelawan,

(Nama Jelas)

Diketahui oleh:
Saksi I Saksi II
 (Nama Jelas) (Nama Jelas)

(LEMBAR PENJELASAN PROTOKOL UNTUK SUBYEK)

UJI BIOEKIVALENSI TABLET PIOGLITAZONE

Yth.,

Tim Peneliti laboratorium ...... sedang melakukan penelitian uji bioekivalensi sediaan
tablet Pioglitazone HCl. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah kualitas tablet
Pioglitazone HCl yang diproduksi oleh pabrik Eczacıbas¸ı Pharmaceuticals di Istanbul, Turki
sama baiknya dengan produk inovatornya (Actos®). Hal tersebut dilihat dari
bioavailabilitasnya, yaitu presentase dan kecepatan zat aktif dalam suatu produk obat yang
mencapai sistemik atau tersedianya dalam sirkulasi sistemik dalam bentuk utuh atau aktif
setelah pemberian produk obat, yang dilakukan dengan mengukur kadarnya dalam darah
terhadap waktu. Oleh karena penelitian ini harus dikerjakan pada sukarelawan sehat, maka
kami mengundang Anda untuk ikut serta dalam penelitian ini. Penelitian akan dilakukan
dalam jangka waktu 24 hari.

Bila anda berminat, pertama-tama kesehatan anda akan diperiksa terlebih dahulu.
Untuk itu, kami akan mengambil contoh darah dari pembuluh darah di lengan Anda untuk
memastikan bahwa anda memenuhi syarat. Pemeriksaan meliputi fungsi ginjal dan fungsi
hati. Anda akan diberikan hasil asli pemeriksaan kesehatan ini. Syarat lain yang harus
dipenuhi adalah tidak merokok, sehat, dewasa, berusia 18-55 tahun, tidak hipersensitif
dengan Pioglitazone, tidak punya riwayat gagal jantung, tidak sedang atau pernah mengidap
kanker kandung kemih, dan tidak mengidap hematuria tidak terinvestigasi makroskopik.

Bila Anda memenuhi syarat, pada suatu pagi (tanggal akan ditentukan) Anda akan
diminta datang ke Anapharm Inc, Kanada, setelah sebelumnya puasa semalam setidaknya 10
jam terlebih dahulu. Peneliti akan mengambil darah Anda 15 menit sebelum menelan obat,
lalu setelah minum obat pengambilan darah akan dilakukan pada jam ke 0,5; 1,0; 1,5; 1,75;
2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4.0; 4.5; 5.0; 6.0; 8.0; 10.0; 12.0; 16.0; 24.0; 36.0; 48.0; 72.0; 96.0 dan 120.
Setiap kali pengambilan darah sebanyak 10,0 ml. Anda boleh sarapan dan makan malam pada
4 dan 10 jam setelah obat dikonsumsi. Anda diperbolehkan untuk duduk santai di ruangan
yang sudah disediakan sambil menonton acara televisi atau membaca majalah. Prosedur ini
akan diulangi dua minggu kemudian dengan obat pembandingnya. Obat Pioglitazone ini
digunakan sebagai obat antidiabetik oral.

Adapun efek samping yang mungkin timbul berupa gejala mati rasa, gangguan
penglihatan, peningkatan berat badan, dan patah tulang.

Penelitian ini akan memberikan manfaat langsung kepada Anda, namun hasilnya akan
dimanfaatkan oleh masyarakat luas.

Anda bebas menolak ikut dalam penelitian ini, dan bila Anda sudah menyatakan
bersedia ikut, juga bebas mengundurkan diri setiap saat selama penelitian berlangsung.
Sebaliknya bila Anda tidak mematuhi instruksi yang diberikan peneliti atau Anda di tengah
penelitian menunjukkan kriteria pengeluaran subyek, Anda juga dapat dikeluarkan dari
penelitian ini setiap waktu.

Keikutsertaan Anda dalam penelitian ini bersifat sukarela dan rahasia. Peneliti akan
merahasiakan semua data identitas Anda. Pada akhir penelitian setiap subjek penelitian akan
diberi insentif sebesar Rp 5.000.000,- sebagai tanda terima kasih berpartisipasi dalam
penelitian.

Penelitian ini telah disetujui oleh Komisi Etik Fakultas Kedokteran ..... Bila Anda
membutuhkan penjelasan lebih lanjut dapat menghubungi penanggung jawab penelitian
........... dan penanggung jawab medis: dr. ............; Telp: ........

Atas perhatian dan partisipasinya kami mengucapkan terima kasih.

Penanggung Jawab Penelitian

 (LEMBAR EVALUASI EFEK SAMPING OBAT)

DATA SUBYEK
Nama Sukarelawan :
Jenis Kelamin : Laki-laki

Tingkat
Efek yang Mulai Selesai Keterkaitan Keparahan
tidak efek samping
(**)
diinginkan dengan obat
Tanggal Jam Tanggal Jam Ya Tidak

Catatan:
Hubungan sebab akibat dengan uji obat berdasarkan penilaian peneliti:
1 = tidak ada
2 = mungkin
3 = pasif

** Efek samping yang tidak diinginkan dianggap serius jika subyek mengalami:
- Mati rasa
- Gangguan penglihatan
- Patah tulang
- Pasien harus dirawat di rumah sakit.
9.2 Tindakan Darurat
Jika ada reaksi yang tidak diinginkan dari subjek terkait penggunaan obat
Pioglitazone, dapat menghubungi nomor peneliti ………… atau bagian UGD
Rumah Sakit ……. dengan nomor …….. untuk mendapat pertolongan segera.